前列腺癌组织中RECK的表达及其与MMP-9的关系

目的:观察前列腺癌组织RECK基因及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨前列腺癌发生中RECK基因的可能作用机制.方法:取20例前列腺癌及12例正常前列腺组织,RT-PCR及real-time RT-PCR检测RECK基因表达,RT-PCR法检测MMP-9的表达,Western印迹法检测RECK蛋白表达.结果:RT-PCR及real-time RT-PCR检测发现前列腺癌组织RECK基因表达明显低于正常组织(P＜0.01),而MMP-9 mRNA表达明显高于正常组织(P＜0.01).Western印迹分析见前列腺癌组织中RECK蛋白的表达明显低于正常组织(P＜0.01).结论:前列腺癌组织中RECK基因表达较低,RECK基因可能通过抑制前列腺组织MMP-9表达发挥抑癌作用.     

p16蛋白在前列腺癌和前列腺非典型增生中的相关性研究

目的 :研究抑癌基因p16蛋白在前列腺癌及前列腺非典型增生中的表达。方法 :采用免疫组化 (S P法 )对70例前列腺癌、10例前列腺正常组织、2 0例前列腺增生症、40例前列腺非典型增生及 30例前列腺癌旁前列腺非典型增生组织进行p16蛋白的免疫组化检测。结果 :70例前列腺癌中有 31例为阳性反应 ( 45 % ) ,10例正常前列腺组织及 2 0例前列腺增生症均表达 ,40例前列腺非典型增生中 2 8例呈阳性反应 ( 70 % ) ,30例前列腺癌旁前列腺非典型增生组织中有 2 1例呈阳性反应 ( 70 % )。p16蛋白在前列腺癌中的表达明显低于前列腺非典型增生和前列腺癌旁的非典型增生。结论 :抑癌基因p16蛋白在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用。     

有丝分裂调节因子STK15在前列腺癌组织中的表达

目的 探讨有丝分裂调节因子STK15在前列腺癌组织中的表达以及其与前列腺癌生物学行为间的关系.方法 对63例前列腺癌、16例正常前列腺组织用免疫组织化学方法 检测其中STK15的蛋白表达情况;同时对前列腺癌、前列腺增生以及正常前列腺组织(各14例)用RT-PCR法检测STK15 mRNA的表达.结果 63例前列腺癌中62例(98%)STK15蛋白阳性表达,而16例正常前列腺组织中只有3例(19%)阳性表达,二者间差异有显著性(P<0.001).前列腺癌、前列腺增生以及正常前列腺组织中STK15 mRNA的阳性率分别为93%(13/14)、21%(3/14)和14%(2/14),前者的阳性率与后二者比较均有显著性差异(P<0.001),后二者比较差异无显著性(P>0.05).结论 STK15在前列腺癌组织中表达明显增高,可能与前列腺癌的发生有一定的关系.     

胰岛素样生长因子1在前列腺癌及良性前列腺增生症组织中的表达及其临床意义

目的 探讨IGF-1在前列腺癌及良性前列腺增生症组织中的表达及其与临床的意义.方法 运用实时荧光定量PCR方法 检测40例前列腺癌病理组织以及45例良性前列腺增生症组织的IGF-1的基因表达水平.结果 IGF-1在前列腺癌组织中表达值为(9.23±0.55),在45例良性前列腺增生症组织中表达值为(1.23±0.04),前列腺癌中IGF-1表达值高于良性前列腺增生症组织,差异有显著性(P<0.01).结论 前列腺癌组织中IGF-1基因高表达值有助于前列腺癌的诊断.     

SOX9基因判断前列腺癌恶性程度及生化复发的预测

目的：探讨SOX9基因在判断前列腺癌恶性程度及预测前列腺癌去势后生化复发的作用。方法：通过Oncomine公共数据库查询SOX9基因在前列腺癌中的表达情况;RT—QPCR法检测SOX9基因在前列腺癌细胞株DU145、LNCap、PC3和正常前列腺细胞株RWPE-1中的表达;免疫组织化学法检测106例前列腺癌癌组织与癌旁组织中的SOX9基因表达情况,并结合前列腺癌患者临床病理参数进行分析;建立SD大鼠手术去势模型,检测SOX9基因在去势后大鼠前列腺组织中的表达情况。结果：SOX9基因在前列腺癌组织中呈高表达;SOX9基因在PC3细胞株中的表达水平显著高于RWPE-1细胞株（P：0．004）;106例前列腺癌癌组织中62例呈SOX9阳性表达,癌旁组织中26例呈SOX9阳性表达;SOX9基因在前列腺癌组织中的表达水平明显强于癌旁组织,两者比较,差异有统计学意义（P=0．000）;SOX9高表达与前列腺癌患者血清PSA水平（P=0．007）、Gleasonscore（P=0．034）和肿瘤TNM分期（P=0．013）呈正相关,而与年龄（P=0．179）无明显相关性;对照组和模型组分别有2只、9只SD大鼠前列腺组织sox9染色阳性,两组比较,差异有统计学意义（P=0．005）。结论：SOX9基因的高表达与肿瘤的恶性程度相关,可结合血清PSA水平对前列腺癌疑似患者进行早期诊断并判断前列腺癌的恶性程度,还可用来预测生化复发速度。     

巢式RT-PCR检测外周血中前列腺特异膜抗原mRNA

目的：应用巢式逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测外周血中前列腺特异膜抗原mRNA（PSM－mRNA)并探讨其临床意义。方法：取40例不同分期前列腺癌患者及对照组30例（15例良性前列腺增生患者，15例健康青年男性）周围静脉血各10ml，用巢式RT－PCR检测PSM－mRNA，并培养LNCaP细胞进行阳性对照。结果：共有24例前列腺癌血标本检测出PSM－mRNA(60.0%)，前列腺增生及健康对照组中无1例阳性，19例伴有远处骨转移的前列腺癌患者中16例检测到PSM-mRNA(84.2%)，未发现远处转移的21例中8例阳性（38．1％）。在10ml正常血液中加入10个LNCaP细胞，可检出PSM－mRNA。结论：PSM－mRNA可作为前列腺癌的辅助诊断指标，PSM－mRNA的检出率与前列腺癌分期（ABCD）、转移与否、血清PSA水平有相关性。     

p53、nm23在前列腺癌中的表达和意义

目的　探讨p53、nm2 3基因在前列腺癌中的表达水平及肿瘤生物学行为和预后关系。方法　应用免疫组化S -P法对 33例前列腺癌和 1 8例前列腺增生症进行p53蛋白、nm2 3蛋白检测。结果　 1 5例 (45 .5 % )前列腺癌呈p53蛋白阳性表达 ,前列腺增生症中p53蛋白无阳性表达。 2 4例 (72 .7% )前列腺癌和 1 6例 (88.9% )前列腺增生症呈nm2 3蛋白阳性表达。p53蛋白表达与前列腺癌的分化程度、肿瘤转移及 5年生存率密切相关 ,而与临床分期和复发无关。nm2 3蛋白阳性表达与前列腺癌临床分期、分化程度、肿瘤转移、复发及 5年生存率有关。结论　p53蛋白、nm2 3蛋白表达可作为临床判断前列腺癌预后的重要参考指标。     

前列腺癌中FasL的表达及意义

目的：检测细胞凋亡基因FasL在前列腺癌组织中的表达,并探讨其意义。方法：应用免疫组织化学方法检测9例正常前列腺组织和24例前列腺癌标本中FasL蛋白的表达。结果：前列腺癌组织中FasL的表达显著高于正常前列腺组织中的表达（P＜0．01）。结论：FasL表达异常可能在前列腺癌的发生发展过程中起重要作用。     

Smad4蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

目的:研究前列腺癌组织中Smad4蛋白表达情况及意义.方法:应用免疫组化的方法对49例前列腺癌组织和12例正常前列腺组织中Smad4蛋白的表达进行检测.结果:Smad4蛋白在正常前列腺组织中的阳性表达为83.3%(10/12),在T1～T2期前列腺癌中的阳性表达为52.4%(11/21),在T3～T4期的阳性表达为42.8%(12/28),后两者与正常前列腺组织相比差异具有统计学意义,P＜0.05.在高分化腺癌中阳性表达为56.5%(13/23),中分化腺癌中阳性表达为44.4%(8/18),低分化腺癌中阳性表达为25%(2/8),低分化和中分化的前列腺癌与正常前列腺组织相比均有显著性差异(P＜0.01).结论:Smad4在低分化,高分期中表达减少可能与前列腺癌的发生、发展和预后有关.     

血管抑制因子在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达及意义

 【目的】探讨前列腺增生（BPH）和前列腺癌（PCa）组织中血管增生抑制因子，如视网膜色素上皮细胞源因子（PEDF）、血管抑素（angiostatin）、内皮抑素endostatin的表达情况及其血管依赖性生长的分子机制。【方法】收集正常前列腺、前列腺增生和前列腺癌组织标本，RT—PCR技术检测样品中PEDF、angiostatin、endostatin的mRNA表达量，Western blot技术检测样品中PEDF蛋白的表达量。【结果】和正常前列腺组织相比，PEDF表达量在BPH中无明显变化（P〉0．05），在前列腺癌中普遍显著下降（P〈0．05）；良性前列腺增生组织中endostatin表达量较正常前列腺组织显著升高（P〈0．05），前列腺癌比正常前列腺显著升高（P〈0．05），而且前列腺癌组织较良性前列腺增生进一步显著增高（P〈0．05）；三种组织中均未检测到angiostatin的表达。【结论】良性前列腺增生及前列腺癌组织抑制因子表达变化可能和其血管依赖性生长相关；PEDF可能是前列腺组织最主要的血管增生内源性抑制因子。     

前列腺癌与增生组织中MnSOD基因片段的克隆分析

目的:探讨前列腺癌(Pca)及良性前列腺增生(BPH)组织中MnSOD基因的突变情况。方法:用RT-PCR的方法分别检测30例Pca组织中和20例BPH组织中SOD2基因片段的突变情况。结果:在6例前列腺癌组织标本和4例良性前列腺增生(BPH)组织中发现SOD2基因的点突变位点,其中前列腺癌组织标本(P3)中发现了SOD2基因的两个相连的点突变位点:372nt G---T颠换和373nt T---G颠换。结论:MnSOD基因的突变在前列腺癌的发生和发展过程中可能具有重要意义。     

短发卡状PTI-1(PC-3)基因特异性RNA干扰表达载体对PC-3细胞的体外效应

目的:通过基因克隆技术构建人前列腺癌PC-3细胞系PTI-1(PC-3)基因[prostate carcinoma tumor-inducing gene 1(PC-3)]的特异性短发卡shRNA(short-hairpin RNA)真核表达载体,采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,体外观察对PC-3细胞系PTI-1(PC-3)基因的沉默作用以及干扰后对PC-3细胞的体外效应. 方法:采用基因克隆技术,将合成的短发卡样特异性PTI-1(PC-3) RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体pEGFP/U6,构建PTI-1(PC-3)shRNA的真核表达载体,体外转染人前列腺癌PC-3细胞,48 h后观察细胞生物学变化;提取转染细胞总RNA及总蛋白,行RT-PCR以及Western blot观测胞内PTI-1(PC-3)mRNA及蛋白水平. 结果:①成功构建短发卡样PTI-1(PC-3) shRNA真核表达载体pEGFP/U6-mPs;②转染(脂质体法)PC-3细胞,48 h后细胞大部分死亡;③转染48 h后细胞内PTI-1(PC-3)mRNA水平下降;④转染48 h后下调胞内PTI-1(PC-3)蛋白水平. 结论:本实验成功构建的shRNA真核表达载体通过RNA干扰,能够干扰人前列腺癌PC-3细胞内PTI-1(PC-3)基因的表达,抑制PTI-1(PC-3)蛋白的表达,降低了由PTI-1蛋白可能发挥的"翻译失真性"作用,促进癌细胞的死亡,进一步揭示了PTI-1在前列腺癌发生、发展过程中的显性癌基因作用. 由于RNA干扰的特异性从而为临床上前列腺癌的基因治疗提供了新的可能的方法.     

Clusterin、bcl-2及p53在前列腺上皮组织中的表达及相关性研究

目的通过检测新的凋亡抑制因子Clusterin在前列腺癌组织中的表达,探讨其与前列腺癌发生发展的关系及其与bcl-2和p53表达的关系.方法采用免疫组织化学染色法检测Clusterin、bcl-2、p53在10例正常前列腺组织、15例良性前列腺增生组织(BPH)、49例前列腺癌组织标本中的表达.结果Clusterin在前列腺正常、增生、癌组织中的阳性及弱阳性表达率分别为10%(1/10)、66.6%(10/15)、91.8%(45/49).前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺正常组织(P＜0.005)及增生组织(P＜0.005),且在癌组织中与肿瘤临床分期(P＜0.001)、病理分级(P＜0.001)呈正相关.前列腺癌Clusterin表达与bcl-2(P＜0.05)及p53(P＜0.001)表达呈正相关关系.结论Clusterin基因可能通过抑制凋亡在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用,且其表达与bcl-2、p53的异常表达密切相关.     

端粒酶活性与前列腺增生关系的研究

目的 探讨端粒酶活性与前列腺增生的关系.方法 应用端粒重复片段扩增法(TRAP法)检测30例前列腺增生(BPH)组织、10例正常前列腺组织及30例增生结节和包膜组织中的端粒酶活性表达情况,并比较端粒酶活性水平与BPH的关系.结果 BPH组织中端粒酶阳性14例(46.7%),正常前列腺组织中端粒酶阳性1例(10%),增生结节组织中端粒酶阳性14例(46.7%),包膜组织中阳性1例(3.3%);BPH组织端粒酶阳性表达率高于正常前列腺组织(P＜0.05),增生结节阳性率明显高于包膜组织(P＜0.01).结论 前列腺增生可能与端粒酶的活性表达增加有关.     

Detection of pim-1 mRNA in prostate cancer diagnosis

Background Pim-1 plays an important role in the apoptosis, proliferation, differentiation of cancer cells and progression of cancer. In this study we detected the expression of pim-1 mRNA in normal prostate, benign prostatic hyperplasia (BPH), and prostate cancer (PCa) and explored its diagnostic value for PCa.Methods The prostate tissues were collected from 23 patients with PCa, 37 patients with BPH, and 3 healthy volunteers. Pim-1 mRNA expression levels in these samples were determined by the quantitative real-time PCR (QRT-PCR). The differences of expression were calculated based on a standard curve.Results The ratio of pim-1 mRNA to β-actin in the normal prostate, BPH, and PCa were 1.05±0.04, 2.57±0.74 and 4.45±0.63, respectively. The differences among PCa, BPH and NT were significant (P&lt;0.05, respectively).Conclusion Detecting pim-1 mRNA expression by QRT-PCR provides a reliable metric for the diagnosis of PCa.     

前列腺癌组织中的端粒酶活性表达

目的 探讨前列腺癌组织中端粒酶活性表达与前列腺癌某些生物学行为的着急。方法 采用端粒扩增文件－酶（ＴＲＡＰ＿ＥＬＩＳＡ）测定前列腺癌组织中端粒酶活性。结果 １０例正常前腺组织无端粒酶活性。１５例前腺腺癌组织中１３你检出端粒酶活性,阳性率８６％。端粒酶活性与肿瘤分化程度相关。１５例良性前列腺增生组织中４例检出端粒酶活性,阳性率为２６％,其水平显著低于肿瘤组织。结论 端粒酶活性与前列腺癌的生物学行为有     

VEGF在前列腺腺癌和前列腺增生组织中的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子在前列腺癌和前列腺增生发生与发展过程中的潜在生物学作用及其与肿瘤细胞分化程度的关系。方法：采用免疫组织细胞化学SABC技术，对31例前列腺有和17例前列腺增生组织中血管内皮生长因子的表达与分布状况及其与肿瘤细胞分级的关系进行了检测与分析，结果：血管内皮生长因子在前列腺痛和前列腺增生中均有表达；在前列腺上皮细胞浆，基质细胞和间质中呈弥散分布，血管上皮细胞及其周围基质细胞呈强阳性表达。半定量分析结果显示，前列腺癌组织中表达强度高于前列腺增生组织；未发现其表达强度与前列腺癌细胞分级（或分化程度）有统计学关联，结论：该研究提示，血管内皮生长因子在前列腺癌和前列腺增生组织中分布广泛，并对前列腺癌的发生具有一定作用。     

类固醇受体辅活化子-1和核受体辅阻遏子在人前列腺不同生长方式表达变化

目的探讨类固醇受体辅活化子-1（SRC-1）、核受体辅阻遏子（NCoR）在人前列腺不同生长方式的表达。方法采用免疫组化两步法检测10例胎儿前列腺（EP）、10例正常前列腺（NP）、20例前列腺增生（BPH）、20例激素依赖性前列腺癌（ADPC）、15例激素非依赖性前列腺癌（AIPC）组织SRC-1、NCoR的表达。结果在AIPC、AD-PC、BPH和EP均检测到SRC-1表达,而NP组织,却无SRC-1的明显表达。SRC-1在AIPC的阳性率较ADPC、BPH和NP明显升高（P〈0.01）,而与EP差异无统计学意义（P〉0.05）。NCoR在AIPC、ADPC、BPH、NP和EP均有表达,但在AIPC的表达则出现明显的降低（P〈0.01）。结论 SRC-1和NCoR表达可能与前列腺的生长发育以及前列腺癌的进展密切相关。