SOCS3诱导反复自然流产患者蜕膜及绒毛组织Th1/Th2转换的作用

[目的]探讨细胞因子信号转导负调控因子(SOCS3)诱导反复自然流产(RSA)患者蜕膜及绒毛组织Th1/Th2转换的作用.[方法]采用ELISA方法检测27例RSA患者蜕膜及绒毛组织Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2细胞因子(IL-4、IL-10)的表达水平,采用流式细胞仪检测蜕膜及绒毛组织中Th1和Th2细胞水平及其比率,采用western-blot方法检测蜕膜及绒毛组织SOCS3蛋白表达水平,同时与30例正常妊娠行人工流产者比较.[结果]RSA组患者蜕膜及绒毛组织中IL-2、IFN-γ表达水平明显高于对照组(P＜0.05),而RSA组患者蜕膜及绒毛组织中IL-4、IL-10表达水平明显低于正常对照组(P＜ 0.05);RSA组患者蜕膜及绒毛组织中Th1细胞水平及Th1/Th2比率明显高于对照组(P＜0.05),而Th2细胞水平明显低于对照组(P＜ 0.05);RSA组患者蜕膜及绒毛组织中SOCS3蛋白表达水平明显低于对照组(P＜0.05).[结论]RSA患者蜕膜及绒毛组织中SOCS3蛋白表达过低可诱导Th1/Th2失衡,使得Th1细胞介导的免疫损伤作用占主导地位,最终导致RSA发生.     

Th17、Treg细胞及其相关细胞因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 探讨Th17、CD4+CD25+调节性T（Treg）细胞及其相关细胞因子在子痫前期中的表达及在其发病过程中的作用。方法 选取子痫前期患者胎盘组织30例及正常妊娠胎盘组织（对照组）25例,采用实时荧光定量PCR法检测胎盘组织中Treg细胞转录因子Foxp3和与Th17表达相关的细胞因子孤儿核受体RORc、IL-17及与调节Th17、Treg细胞发育和功能相关的IL-23、IL-27及 IL-27受体mRNA的表达量。结果 子痫前期组胎盘组织中Treg细胞转录因子Foxp3表达较对照组明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;子痫前期组胎盘组织中与Th17表达相关的细胞因子RORc、IL 17表达与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;而与对照组相比,子痫前期组胎盘组织中IL-23、IL-27、IL-27受体表达也明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 Th17、Treg细胞及其相关细胞因子的表达在子痫前期中均有明显变化,可能参与了子痫前期的发病过程。     

凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠血清免疫因子水平以及免疫细胞增殖、活性的影响

目的 探讨凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠血清免疫因子水平以及免疫细胞增殖、活性的影响.方法 取对数生长期大肠癌CT26细胞制备凋亡、坏死肿瘤细胞.取Balb/c小鼠20只,分离T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞、获取巨噬细胞,并制备细胞毒性T淋巴细胞(CTL).将小鼠CTL、NK细胞、巨噬细胞分别经相应肿瘤细胞处理后,均分为凋亡肿瘤细胞组、坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组,应用51 Cr释放实验测定各组CTL、NK细胞、巨噬细胞的活性,细胞计数(CCK-8)法检测各组CTL、NK细胞和巨噬细胞的增殖情况.另选取Balb/c小鼠分为凋亡肿瘤细胞组、坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组各10只,分别将凋亡、坏死、对数生长期CT26细胞按通过皮下及静脉输注小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清可溶性Fas(sFas)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)4、IL-10、IL-12、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平.结果 与坏死肿瘤细胞组及肿瘤细胞对照组比较,凋亡肿瘤细胞组中不同效靶比的CTL、NK细胞及巨噬细胞活性均降低(P＜0.05).CCK-8法检测结果显示,凋亡肿瘤细胞组的CTL、NK细胞及巨噬细胞的A450值均低于坏死肿瘤细胞组、肿瘤细胞对照组(P＜0.05).ELISA检测显示凋亡肿瘤细胞组sFas相对表达量低于坏死肿瘤细胞组和肿瘤细胞对照组(P＜0.05).凋亡肿瘤细胞组IL-4表达水平高于肿瘤细胞对照组(P＜0.05),IL-10、TGF-β表达水平则高于其他两组(P＜0.05),IL-12表达水平低于其他两组(P＜0.05).结论 凋亡大肠癌CT26细胞能够抑制小鼠特异性CTL、NK细胞、巨噬细胞增殖及其活性,影响大肠癌小鼠正常免疫功能.     

卡泊三醇对白癜风患者细胞因子分泌的影响

目的探讨卡泊三醇对白癜风患者黑素细胞(MC)及皮损周边CD8~+CTL增殖及其细胞因子分泌的影响。方法随机选取2014年3月至2016年3月白癜风专病门诊科确诊的白癜风患者300例,其中男97例,女203例,平均病程为(5.7±3.9)年,其中进展期126例,稳定期174例。对患部皮肤进行0.005%的卡泊三醇配合0.05%的倍他米松软膏每天涂抹3次,治疗10疗程,观察记录患者复色情况。体外培养患者皮损周围的CD8~+CTL细胞和正常腹部皮肤的MC细胞。研究组为分别添加卡泊三醇的MC组、CD8~+CTL组、CD8~+CTL与MC细胞共同培养组;空白对照组为不添加卡泊三醇的MC组、CD8~+CTL组、CD8~+CTL与MC细胞共同培养组。用细胞计数法验证卡泊三醇对三组细胞数的影响,抗IL-6抗体对经卡泊三醇处理过的CD8~+CTL与MC组细胞的影响,并用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-6和TNF-α分泌的影响。结果研究组与空白对照组相比,MC细胞数量无明显变化,而CD8~+CTL与MC细胞共同培养研究组在浓度为10~(-8)、10~(-9)mol/L的卡泊三醇培养液中MC细胞数量和CD8~+CTL明显多于空白对照组,添加卡泊三醇的CD8~+CTL研究组的CD8~+CTL细胞数量明显高于空白对照组,且差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,研究组在2 d后,三组细胞中IFN-γ、IL-6和TNF-α总的细胞因子分泌数量差异无统计学意义(P0.05);设定其共培养后MC与CD8~+CTL细胞数相同的两种细胞单独培养中所分泌细胞因子量为其合量,与两组合量相比,在其未添加相关药物中CD8~+CTL与MC共同培养组细胞因子分泌总量IL-6明显少于两组合量,经药物处理后IL-6分泌量明显减少,与添加药物相比,差异有统计学意义(P0.05)。与两组合量相比,共同培养组分泌IFN-γ和TNF-α减少明显,且差异具有统计学意义(P0.05),经药物处理后,其分泌减少率与未添加药物相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论卡泊三醇治疗白癜风的机制可能是通过抑制细胞因子IL-6的分泌来减少CD8~+CTL对MC细胞的损伤,最终起到对黑素细胞的保护作用。     

凋亡细胞调控巨噬细胞表达IL-12家族细胞因子的水平

［摘要］ 目的观察凋亡细胞对巨噬细胞中白细胞介素12 （interleukin-12,IL-12）家族细胞因子表达的影响。 方法将小鼠巨噬细胞系RAW264.7（RAW 细胞）和小鼠腹腔巨噬细胞分别分为空白对照组、脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）刺激组（LPS组）、凋亡细胞刺激组（apo组）、脂多糖+凋亡细胞刺激组（LPS+apo组）,实时定量PCR检测各组细胞刺激前后mIL-12p35、mIL-12p40、mIL-23p19水平。采用酶联免疫吸附测定方法检测各组激活的RAW细胞培养液中IL-10、前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）和转化生长因子β（transforming growth factor-β,TGF-β）的含量。 结果RAW细胞和小鼠腹腔巨噬细胞LPS组IL-12p35、IL-12p40、IL-23p19 mRNA表达量高于空白对照组和apo组,LPS+apo组IL-12p35、IL-12p40、IL-23p19 mRNA表达量高于空白对照组和apo组,低于LPS组（P＜0.05）。LPS组和LPS+apo组IL-10、PGE2、TGF-β浓度均高于对照组,LPS+apo组TGF-β浓度高于对照组和LPS组（P＜0.05）;LPS组和LPS+apo组IL-10、PGE2浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论凋亡细胞抑制活化巨噬细胞IL-12p35、IL-12p40、IL-23p19 mRNA的表达。凋亡细胞对IL-10和PGE2分泌无影响,但促进TGF-β的分泌。     

反复自然流产患者外周血中Th1/Th2型细胞因子的表达及其意义

目的:分析反复自然流产(RSA)患者血清中Th1/Th2型细胞因子水平的变化,探讨其在RSA发病中的意义.方法:采用酶联免疫吸附法检测56例RSA患者血清中Th1(IL-2、TNF-α、IFN-γ)/Th2(IL-10)型细胞因子水平,同时以正常健康早孕组64例作为对照.结果:RSA组血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平显著高于对照组(均P＜0.05),而IL-10水平显著低于对照组(P＜0.05).结论:RSA患者血清中Th1与Th2间平衡的改变可能是导致RSA的重要原因之一.     

树突状细胞在儿童变应性哮喘中的表达及意义

目的 研究树突状细胞（DCs）在儿童变应性哮喘中的异常表达及其意义。方法 选取健康儿童和变应性哮喘患儿为对照组和观察组，收集健康儿和患儿发病时和治疗缓解后气管黏膜相关淋巴结资料，采用免疫组织化学法检测DCs 协同刺激分子CD80、CD86 的表达，酶联免疫吸附法检测细胞上清白细胞介素4（IL-4）、IL-10、IL-12 含量的变化。结果 观察组患儿CD80 值与对照组比较，差异有统计学意义（P <0.05）；观察组患儿细胞因子IL-4、IL-10、IL-12 水平与对照组比较，差异有统计学意义（P <0.05）。治疗缓解后，患儿气道黏膜相关淋巴结DCs 表型及细胞因子情况与对照组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。结论 在儿童变应性哮喘中，DCs 表型表达及其分泌细胞因子影响疾病的发生、发展，可以通过干预DCs 的表达来治疗及预防儿童变应性哮喘。     

系统性红斑狼疮患者树突状细胞对Th1/Th2细胞分化的影响

目的探讨系统性红斑狼狼疮（SLE）患者树突状细胞对Th1/Th2细胞亚群分化的影响。方法淋巴细胞分离液分离获得SLE患者外周血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD14细胞,联合应用rhGM- CSF、rhIL-4和rhTNF-α诱导分化树突状细胞成熟。在培养的第9天,流式细胞术检测表型,细胞增殖/毒性剂盒分析树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。ELISA法检测培养上清液中IL-12和IL-10的表达。诱导的成熟树突状细胞与健康对照组淋巴细胞共培养5d后,佛波酯+离子霉素+莫能霉素刺激培养4h,进行T淋巴细胞表面抗原及胞质内细胞因子染色,流式细胞仪检测Th1、Th2的比例。结果 SLE患者诱导培养的树突状细胞其CD1a的表达降低（P＜0.05）,HLA- DR、CD80、CD86的表达均明显升高（P＜0.05）。活动组与非活动组的树突状细胞HLA- DR、CD80、CD86的表达有统计学差异（P＜0.05）。SLE患者诱导培养的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强（P＜0.05）。活动组与非活动组的树突状细胞刺激同种异体淋巴细胞也有所差异（P＜0.05）。SLE患者诱导培养的树突状细胞分泌IL-12的水平均明显降低（P＜0.05）;分泌IL-10的水平明显升高（P＜0.01）,活动组与非活动组的树突状细胞分泌IL-12和IL-10的水平差异无统计学意义（P＞0.05）。活动组的树突状细胞与对照组淋巴细胞共培养后Th1的比例明显降低（P＜0.01）,Th2的比例差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 SLE患者诱导的树突状细胞表型增加,刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力增强,分泌IL-12降低,IL-10升高。SLE患者树突状细胞功能的异常可能导致了Th1细胞分化不足,在SLE发生、发展过程中起重要作用。     

敲减ATF3对结直肠癌肿瘤干细胞自我更新与上皮间质转化及免疫抑制因子分泌的影响

目的 研究敲减活化转录因子3（ATF3）对结直肠癌肿瘤干细胞（CRC-CSCs）自我更新能力与上皮间质转化的影响,并检测免疫抑制因子分泌的变化。方法 培养人结直肠癌细胞系HCT116,通过流式细胞术分选CD133+表达的CRC-CSCs细胞,转染sh-ATF3慢病毒载体至CRC-CSCs细胞作为实验组（sh-ATF3组）,以转染sh-NC慢病毒载体作为阴性对照组（sh-NC组）, 正常培养的CRC-CSCs细胞作为对照组。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测ATF3相对表达量,CCK-8法检测细胞活性变化,成球实验检测细胞生长更新能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹（Western Blot）法检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表达,酶联免疫吸附法（ELISA法）检测细胞分泌免疫抑制因子TGF-β1、VEGF、IL-6、IL-10的含量变化,Western Blot检测自杀相关因子（Fas）、Fas配体（FasL）蛋白表达水平。结果 对照组比较,sh-ATF3组CRC-CSCs细胞中ATF3 mRNA相对表达量下降（P＜0.05）,转染后48 h和72 h细胞活性降低（P＜0.05）,细胞成球能力与克隆形成能力均下降（P＜0.01）,细胞中E-cadherin蛋白表达较高而Vimentin蛋白表达较低（P＜0.05）,同时,细胞上清液中TGF-β1、VEGF、IL-10的含量均明显下降（P＜0.01）,Fas蛋白表达升高,FasL蛋白表达下降（P＜0.05）。结论 敲减ATF3可抑制结直肠癌肿瘤干细胞自我更新与上皮间质转化,下调免疫抑制因子TGF-β1、VEGF、IL-10表达,并且上调Fas蛋白,下调FasL蛋白的表达。     

凉血解毒汤对寻常型银屑病血热证患者外周血Th17细胞相关细胞因子的影响

目的：探讨凉血解毒汤治疗寻常型银屑病血热证的作用机制.方法：30例寻常型银屑病血热证患者和18例健康人为受试对象,其中给予10例中重度患者凉血解毒汤治疗6周,所有受试者分别于治疗前（W0）采集外周血,10例患者治疗6周（W6）再次采集外周血,分离所有治疗前后外周血单个核细胞,提取总RNA进行实时定量PCR检测,分析外周血单一核细胞（PBMC）中Thl7细胞相关因子IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA的相对表达量.结果：患者组PBMC中Thl7细胞因子IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA相对表达量均显著高于对照组（均P＜0.05）;凉血解毒汤治疗6周后,患者PBMC中Thl7细胞因子IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-22mRNA相对表达量较治疗前均显著降低（均P＜0.05）.结论：凉血解毒汤可能通过抑制Th17细胞的活化及其效应细胞因子的分泌,下调17A、IL-17F、IL-21、IL-22 mRNA水平,从而有效治疗血热证银屑病.     

干细胞与肿瘤干细胞

目的了解干细胞、肿瘤干细胞和恶性肿瘤关系的研究进展。方法复习国内外相关文献,综述肿瘤干细胞与干细胞的关系、肿瘤干细胞与恶性肿瘤发生发展的关系、研究现状、前景及存在的问题。结果正常干细胞和肿瘤干细胞之间存在很强的相似性,其中淋巴造血系统恶性肿瘤和少数实体瘤干细胞分离鉴定的成功有力支持了肿瘤干细胞理论。结论肿瘤干细胞理论可解释很多恶性肿瘤的生物学行为,但目前仍迫切需要相关分离、纯化、鉴定实体瘤干细胞的思路和方法。     

ACAT-1在单核细胞向泡沫细胞分化过程中的表达变化

目的研究单核细胞向泡沫细胞诱导分化过程中脂酰CoA胆固醇酯酰转移酶-1(ACAT-1)表达及活性的变化。方法复苏、培养人单核细胞株THP-1细胞,与乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)、PMA+氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育1～4 d,RT-PCR方法检测单核细胞分化过程中ACAT-1 mRNA表达,Westernblotting检测ACAT-1蛋白表达的变化。结果(1)单核细胞复苏后加入PMA诱导48 h后,分化为巨噬细胞。经PMA+ox-LDL诱导24 h后分化为泡沫细胞。(2)与无血清培养单核细胞对照组比较,在PMA诱导单核细胞株THP-1向巨噬细胞分化过程中,ACAT-1 mRNA、蛋白表达及酶活性水平明显增高(P<0.05),呈时间依赖效应。(3)巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中,ACAT-1 mRNA、蛋白表达及酶活性水平增高,呈时间依赖效应。但和无血清培养巨噬细胞比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论单核细胞株THP-1经PMA,PMA/ox-LDL诱导后,可分化为巨噬细胞、泡沫细胞。ACAT-1的表达及活性增高在单核细胞向泡沫细胞诱导分化过程中起着重要作用。     

miR-622抑制肺癌细胞的生长

目的探讨miR-622对H460肺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法利用脂质体瞬时转染方法将miR-622模拟物及其对照核苷酸转染至肺癌细胞内。miRNA定量试剂盒检测miR-622的表达。CCK-8试剂盒检测细胞增殖。生物信息学分析miR-622的靶点。蛋白印迹方法检测K-Ras蛋白的表达。构建含K-Ras mRNA的3'非翻译区的报告基因载体,检测萤火虫/Renilla荧光素酶活性。结果转染miR-622模拟物可提高miR-622的表达,并使H460和16HBE-T的细胞增殖率分别降至(58.60±4.27)%和(65.17±4.67)%,P均<0.01。生物信息学分析K-Ras为miR-622的一潜在靶点。转染miR-622模拟物可明显抑制K-Ras蛋白的表达。共转染miR-622模拟物和K-Ras-3'UTR报告基因,可使萤火虫/Renilla荧光素酶的活性降低至(60.22±2.50)%。结论 miR-622可通过负性调控靶点K-Ras抑制肺癌细胞的增殖。     

肝星状细胞和胰腺星状细胞的比较

肝星状细胞和胰腺星状细胞在各自纤维化疾病中都发挥着重要作用,两者在诸多方面存在相似之处.文章就两者的生物学特性、凋亡、信号转导通路方面进行总结和比较,以探讨它们之间的关系.     

Lingual squamous cell carcinoma surrounded by granular cell tumor

The granular cell tumor (GCT) is an uncommon, benign lesion with a preference for subcutaneous sites. In the head and neck, the tongue is the most common site, followed by the larynx. We experienced a case of a 27-year-old woman with lingual squamous cell carcinoma (SCC) surrounded by GCT. The pathological findings established that the lesion was SCC covered by GCT in the midline of the tongue. The size of the mass was very small, however, so we excised it in a diamond shape. There is an interesting association between GCTs and other malignant neoplasms. However, no causal relationship between GCT and these other carcinomas has been established. Here we report on an SCC coexisting with GCT at the same site as a median tongue lesion and review the literature.     

Huge clear cell squamous cell carcinoma of the head

To the editor:An 85-year-old woman,presented with a macula in the front region of parietal bone one year ago,which was slightly protruding from the epidermis without pain and pruritus.After scratching,ulceration and the scope was increasing gradually.A month ago,the tumor was about walnut size,and now about egg size,accompanied with bleeding when knocked,without special feeling.Apart from this,the patient has been suffering from hypertension,diabetes for many years.The size of the tumor was 6 cm × 7 cm × 8 cm,dark red,hard shell,endoplasmic soft.The surface was contaminated,oozy,scabing,poor activity,the boundary was not clear,and pressing with no feeling.The pathological examination showed squamous cell carcinoma (SCC),as shown in Figure 1.Immunohistostaining revealed positive staining for PAS and ABPAS in the tumor tissue.We also performed immunohistostaining analysis,such as keratins AE1/AE3,EMA,cytokeratin 7,cytokeratin 18,cytokeratin 20,vimentin,S-100,HMB45,CD68,CKH and CD34.Of which,keratins AE 1/AE3,cytokeratin 18,CKH,CD34 and EMA were positive,others were negative.The tumor was diagnosed as huge clear cell SCC.After expansion excision,skin grafting,abdominal skin surgery,postoperative recovery was uneventful,and flakiness has survived well.     

肝星状细胞和胰腺星状细胞的比较

肝星状细胞和胰腺星状细胞在各自纤维化疾病中都发挥着重要作用,两者在诸多方面存在相似之处。文章就两者的生物学特性、凋亡、信号转导通路方面进行总结和比较,以探讨它们之间的关系。     

透明细胞乳头状肾细胞癌的研究进展

2016年WHO正式将透明细胞乳头状肾细胞癌作为一种肾细胞癌新类型。该肿瘤可以为散发性也可以发生于终末期肾病或Von Hippel?Lindau综合征（VHL综合征）,具有相对特征性的病理组织学形态、免疫表型和分子遗传学特点,诊断时应与透明细胞肾细胞癌、乳头状肾细胞癌以及Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌相鉴别。鉴于透明细胞乳头状肾细胞癌生物学行为相对惰性或低度恶性,因此准确诊断对指导临床治疗和判断预后具有十分重要的意义。     

多发肾透明细胞癌11例磁共振影像分析

目的 描述多发肾透明细胞癌的MR影像表现.方法 回顾性分析2008年1月至2010年12月解放军总医院共11例经病理证实的多发肾透明细胞癌的MR影像资料及临床资料,重点分析病灶的分布、大小、外形、信号,增强特点.结果 11例多发肾细胞癌患者,其中6例女性,5例男性,年龄36 ～ 69岁,平均50.6岁,共发现24个病灶.9例患者为双肾多发病变,单侧肾多发病变为2例.T2加权图像高信号的有16个病灶(16/24),所有病变均可见假包膜,出血的有4例(4/24),含有脂质的为12例(12/24),囊变的有18例(18/24),动态增强扫描各期持续强化的有22例(22/24),快进快出的有2例(2/24).所有病变呈现中度至明显强化.5例患者的多发病变MR表现一致,6例患者的多发病变MR表现并不一致.结论 多发肾细胞癌通常为两肾多发.同一患者的多发病变即使病理类型一致,MR表现可能不同.