三羟异黄酮对人乳腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察三羟异黄酮对体外培养的人乳腺癌细胞MDA—MB—435S细胞存活率、细胞周期和凋亡的影响。方法 用噻唑蓝(MTT)法观察三羟异黄酮对MDA—MB—435S细胞生长的影响；流式细胞仪观察三羟异黄酮处理人乳腺癌细胞后细胞周期改变的剂量效应和时间效应；吖啶橙／溴乙锭染色法在荧光显微镜下观察三羟异黄酮对MDA—MB—435S细胞的凋亡作用。结果 随剂量增大和作用时间延长，三羟异黄酮对细胞增殖的抑制作用逐渐增强。同时可以阻滞细胞周期于G2—M期，而且随剂量的增大，作用时间的延长，阻滞作用也增强。经吖啶橙染色法于荧光显微镜下可见，随三羟异黄酮剂量增大，细胞凋亡也逐渐明显。结论 三羟异黄酮可抑制人乳腺癌细胞的增殖，其作用机制可能包括诱导细胞凋亡和G2—M期阻滞。     

紫杉醇体外诱导人胃癌细胞凋亡对端粒酶活性影响的研究

目的：研究紫杉醇对人胃癌细胞诱导凋亡作用及端粒酶活性变化。方法：0.001-1μm的紫杉醇处理SGC7901细胞后,用MTT法测定胃癌细胞的生长抑制率。通过形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量TRAP－银染法测定端粒酶活性变化。结果 不同浓度的紫杉醇对胃细胞均有明显抑制作用,且呈时间依赖性及剂量依赖性,光镜及流式细胞术分析表明,0.01μm的紫杉醇处理后24小时,细胞即出现明显的凋亡形态特征及凋亡峰,对端粒酶活性的同步检测结果显示,紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,且随紫杉醇浓度增大,抑制作用逐渐增强,24小时酶活性即显著受抑制,72小时变为阴性。结论：紫杉醇对胃癌细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是其发挥抗癌作用的机制之一,端粒酶可作为肿瘤化疗的敏感性指标。     

大豆异黄酮诱导胃癌细胞凋亡作用研究

目的：体外实验探讨大豆异黄酮诱导胃癌细胞发生凋亡的可能性，揭示该凋亡发生与bcl-2和bax之间的关系。方法：采用MTT比色法测定大豆异黄酮对胃癌细胞的生长抑制率；以透射电镜和TUNEL染色法，定性、定量地研究大豆异黄酮与胃癌细胞凋亡的关系；通过免疫组织化学法和RT－PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果：大豆异黄酮对胃癌细胞有明显抑制作用，随大豆异黄酮浓度增加和培养时间的延长而增强；透射电镜可见胃癌细胞出现典型的凋亡细胞形态，如细胞核染色质致密浓缩，或聚集于核膜呈新月形小体；TUNEL染色法可染色阳性的胃癌细胞出现细胞核碎裂，核质固缩，细胞膜突出形成质膜小泡等凋亡细胞形态学变化。免疫组织化学和RT－PCR法发现大豆异黄酮下调bcl-2的表达，上调bax的表达。结论：诱导胃癌细胞发生凋亡是大豆异黄酮抗胃癌作用的机制之一，大豆异黄酮可能通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导胃癌细胞发生凋亡。     

SIRT1对胃癌细胞增殖及迁移的影响

目的研究沉默信息调节因子1(SIRT1)在胃癌细胞增殖和凋亡中的作用。方法构建包装针对SIRT1的shRNA慢病毒载体,感染胃癌细胞及胃黏膜上皮细胞;应用荧光显微镜观察并应用免疫印迹方法证实转染的可靠性;应用CCK-8法检测shRNA-SIRT1对胃癌细胞及胃黏膜上皮细胞增殖的影响;APC-Annexin V标记法,流式细胞仪检测shRNA-SIRT1对胃癌细胞及胃黏膜上皮细胞凋亡的影响。结果成功进行了携带以SIRT1为靶向的shRNA的慢病毒包装,并成功转染到人胃癌细胞中。通过对比研究转染shRNA-SIRT1和空转对照组的胃癌细胞,发现shRNA可以通过沉寂胃癌细胞中的SIRT1从而抑制了胃癌细胞的增殖,促进其凋亡,而对胃黏膜上皮细胞的增殖凋亡影响较小。结论通过靶向应用于SIRT1的shRNA技术抑制了胃癌细胞的增殖,促进其凋亡,进一步明确SIRT1在胃癌细胞增殖和发展的作用,而且为生物基因治疗胃癌提供了实验基础。     

黄连素对人卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄连素对人卵巢癌细胞株OVCAR3增殖和凋亡的影响,为卵巢瘤的治疗提供实验依据。方法采用不同浓度的黄连素处理人卵巢癌细胞株OVCAR3,等体积培养基培养正常对照组细胞。CCK-8法观察黄连素对卵巢癌细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测黄连素处理后细胞凋亡情况;RT-PCR、Western Blot分别检测卵巢癌细胞中Caspase-3、Caspase-8mRNA及蛋白表达情况。结果黄连素抑制人卵巢癌细胞株OVCAR3的增殖且呈时间剂量依赖性,并促进细胞凋亡。RT-PCR、Western Blot结果显示:黄连素作用于OVCAR3细胞株后,细胞Caspase-3、Caspase-8 mRNA及蛋白表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论黄连素能够通过抑制人卵巢癌细胞株OVCAR3增殖、促进凋亡发挥抗肿瘤作用,可为临床卵巢癌治疗策略提供新的思路。     

ω-3多不饱和脂肪酸对人胃癌BGC-823细胞周期及凋亡的影响

目的 利用人胃癌BGC-823细胞体外培养实验，观察不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸（EPA、DHA）对肿瘤细胞周期及凋亡的影响。方法 采用MTT法、凋亡形态学检查和流式细胞检测肿瘤细胞周期及凋亡情况。结果 30和45μg／ml的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率（P〈0．001）；Hoechst33258染色和透射电镜可见细胞凋亡现象；流式细胞检测bcl-2基因蛋白表达明显下降（P〈0．05），G0／G1细胞明显增加，G2／M和S期细胞明显减少（P〈0．05）。结论 ω-3多不饱和脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡和阻滞细胞在G0／G1期，细胞增殖受到抑制。     

洛伐他汀对人粒系白血病细胞生长的影响

目的观察洛伐他汀(Lovastatin)对体外培养的人粒系白血病细胞株HL-60生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测、流式细胞仪分析等技术。结果洛伐他汀可显著抑制HL-60细胞的增殖．且呈剂量一效应关系。流式细胞仪分析结果显示：洛伐他汀不仅能影响该细胞周期进程而且可诱导该细胞凋亡。结论洛伐他汀可能通过影响细胞的生长周期和诱导细胞凋亡来抑制HL-60细胞的增殖。     

锌缺乏和锌过量对培养长骨细胞周期和细胞凋亡的影响

目的　探讨锌缺乏和锌过量对培养长骨细胞周期和细胞凋亡的影响 ,为阐明锌对骨骼的生长发育影响的机制提供科学依据。方法　用小鼠胚胎长骨体外培养 ,采用流式细胞仪研究细胞周期各个时相所占比例和凋亡细胞百分比 ,进行电镜分析 ,观察细胞的超微结构。结果　缺锌可使细胞周期停滞在 G0 /G1期 ,培养 2 d,缺锌组 G0 /G1期细胞所占百分比 (82 .3% )高于对照组(76.9% ) ,G2 /M期细胞所占百分比 (3.4% )低于对照组 (8.9% ) ;培养 4d,缺锌组 G0 /G1期细胞所占百分比 (88.6% )明显高于对照组 (78.4% ) ,S期细胞所占百分比 (4.3% )明显低于对照组 (1 1 .0 % ) ;缺锌可使凋亡细胞数目增加。电镜观察 ,缺锌组可见大量的凋亡细胞 ,而高锌组则有大量的坏死细胞。结论　锌缺乏可改变培养长骨的细胞周期 ,诱导细胞凋亡 ,但锌过量对细胞周期和细胞凋亡没有影响。     

叶黄素对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨叶黄素对体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法选择对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞为研究对象,采用随机数字表法,将其随机分为6组:20,40,80,160,320μmol/L叶黄素组及对照组,叶黄素组分别加入200μL含20,40,80,160,320μmol/L叶黄素终浓度的RPMI1640培养基及HeLa细胞,对照组仅加入200μL RPMI1640培养基及HeLa细胞。采用噻唑蓝(MTT)法检测人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率,并采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率。采用统计学方法分析相同时间不同浓度叶黄素培养及相同浓度叶黄素培养不同时间的HeLa细胞增殖抑制率及凋亡率差异。结果 HeLa细胞在培养时间相同(为24h或48h或72h)时,随着叶黄素浓度依次增加(分别为20,40,80,160,320μmol/L)均较前一低浓度组的增殖抑制率及凋亡率显著升高,且差异均有统计学意义(P<0.01);HeLa细胞在叶黄素浓度相同(为20μmol/L或40μmol/L或80μmol/L或160μmol/L或320μmol/L)培养时,随着培养时间增加(分别为24,48,72h)均较前一时间点的增殖抑制率及凋亡率显著升高,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论叶黄素可抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导其凋亡,并且HeLa细胞体外培养的增殖抑制率及凋亡率分别随着叶黄素浓度增加及作用时间延长而升高。     

白藜芦醇对胃癌MGC-803细胞增殖抑制作用

目的 探讨白藜芦醇对人胃癌MGC-803细胞株细胞周期影响及其机制.方法 采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法和集落形成试验检测白藜芦醇对胃癌细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期的改变,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞凋亡抑制基因-2(bcl-2)、增殖基因c-myc的mRNA表达水平.结果 白藜芦醇可抑制胃癌细胞增殖和集落形成能力,低、高剂量组的抑制率分别为6.9%,17.6%和27.98%,63.39%,差异均有统计学意义(P<0.05);白藜芦醇能使胃癌细胞周期阻滞于G0/G1期,明显下调胃癌细胞bcl-2、c-myc基因mRNA表达水平(P<0.05);用药24 h后,白藜芦醇高剂量组bcl-2和c-myc基因相对表达量分别为(0.54±0.04),(0.58±0.05),与空白对照组(0.91±0.05),(0.85±0.03)比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 白藜芦醇可抑制胃癌MGC-803细胞增殖并使其细胞周期阻滞于G0/G1期,可能与下调bcl-2、c-myc基因表达有关.     

亚硒酸钠抑制人胃癌BGC823细胞的作用及其机制探讨

目的观察亚硒酸钠对体外培养的人胃癌BGC823细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法用不同浓度(0、4.0、8.0、10.0μmol/L)的亚硒酸钠处理BGC823细胞24h后,采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT法)检测亚硒酸钠对细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪PI染色检测细胞周期,AnnexinV/PI双染法定量检测BGC823细胞凋亡率,FAS蛋白染色流式细胞仪定量检测各实验组细胞间FAS蛋白表达,荧光显微镜观察DAPI染色细胞形态。结果亚硒酸钠可明显抑制BGC823胃癌细胞的增殖,呈剂量依赖性;亚硒酸钠可阻滞细胞于S期和增加BGC823胃癌细胞凋亡率并随剂量增大作用增强;DAPI染色观察到亚硒酸钠给药组出现细胞核浓缩、边缘化以及凋亡小体等细胞凋亡的形态特征;亚硒酸钠可呈剂量依赖地增强FAS蛋白表达。结论亚硒酸钠可显著抑制人BGC823胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于S期,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与上调FAS蛋白有关。     

萝卜硫烷对乳腺癌细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响及作用机制研究

目的:研究萝卜硫烷(sulforaphane,SUL)对不同类型乳腺癌细胞增殖和细胞周期细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法、流式细胞术和Western印迹法,研究不同浓度受试物对F3Ⅱ、MCF-7、MDA-MB-231和ZR-75-1细胞增殖抑制、细胞周期阻滞、F3Ⅱ细胞凋亡和p34cdc2及Cdc25C表达的影响。结果:(1)SUL对所选的四个细胞系均有很强的增殖抑制作用,其中雌激素正响应型(ERP)细胞对SUL的敏感性明显强于雌激素负响应型(ERN)细胞和扩散性较强的F3Ⅱ细胞;(2)SUL对F3Ⅱ细胞和两种ERP细胞均呈现G2/M期阻滞作用,而对ERN细胞周期则无影响;(3)SUL阻滞F3Ⅱ细胞从G2期向M期转化的作用机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达,从而抑制细胞周期素B1-Cdc2复合物激酶的去磷酸化作用;(4)在实验条件下,SUL不引起F3Ⅱ细胞凋亡。结论:SUL对四个乳腺癌细胞系细胞增殖抑制活性和细胞周期影响存在明显的差异,不引起F3Ⅱ细胞凋亡。对F3Ⅱ细胞周期G2/M阻滞作用的机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达。     

新疆天然植物黑加仑对食管癌细胞增殖、凋亡的影响

目的:观察新疆天然植物黑加仑水提物对食管癌细胞的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度(10-1、10-2、10-3g/ml)黑加仑水提物作用不同时间(12、24、36h)对人食管癌细胞株Eca109的细胞存活量的影响,以大鼠正常肝细胞(BRL)为正常对照细胞株;用Bradford法测定肿瘤细胞蛋白质合成的变化;采用流式细胞技术(FCM)观察黑加仑作用后肿瘤细胞周期变化及凋亡情况;通过倒置显微镜观察细胞的形态变化。结果:黑加仑水提物10-1g/ml组对人食管癌细胞株Eca109作用24h后,癌细胞的生长和蛋白合成均有明显抑制作用(P<0.05),对正常肝细胞的存活量及蛋白合成均无影响;流式细胞仪检测二倍体峰前出现凋亡峰,细胞凋亡率为49.6%;并且癌细胞呈现典型的凋亡细胞形态。结论:黑加仑水提物可通过诱导细胞凋亡而抑制人食管癌细胞株Eca109细胞的生长。     

茶氨酸体外对人胃癌细胞MGC803增殖的作用及与阿霉素的联合作用

目的研究茶氨酸(theanine)对人胃腺癌细胞株MGC803增殖的影响及其与阿霉素(doxorubicin,DOX)的联合作用。方法采用MTT法结合形态学观察,研究茶氨酸单独或与DOX联合作用对MGC803增殖活性的影响;采用荧光分光光度法检测茶氨酸对MGC803细胞内DOX药物浓度的影响,探讨茶氨酸对DOX化疗敏感性的影响。结果2.0、4.0μmol/L茶氨酸单独作用于MGC803后其吸光度值与空白对照组相比有统计学差异(P0.01);茶氨酸与DOX联合作用后对MGC803增殖的抑制率明显提高,并观察到典型的凋亡细胞形态学特征;DOX联合茶氨酸作用后,使MGC803细胞内DOX浓度升高1.35倍。结论茶氨酸可能有直接抑制MGC803细胞增殖的作用,并使肿瘤细胞内DOX滞留,提高了肿瘤细胞对DOX的化疗敏感性。     

硒、维生素A、E对人类乳腺癌细胞增殖的影响

本文研究了Se、VA和VE及其联合作用对人类乳腺癌细胞BCaP-37增殖的影响,结果提示Se对该细胞的增殖有双向作用,浓度高于5μM抑制细胞生长,低于该浓度则刺激细胞生长。醋酸维生素A酯浓度在1.0—10.0mg/L范围内对该细胞生长有明显的抑制。维生素A酸对该细胞的生长仅有很弱的抑制作用。VE对细胞也有弱抑制生长的作用。在稍高于生理浓度的水平下,Se(5μm)与VA(2mg/L)和VE(20mg/L)三者联合处理细胞,细胞核酸含量明显降低,提示Se、VA和VE能协同抑制BCaP-37细胞的增殖,而且这种抑制有可逆的趋势。联合使用Se和VA或VE未观察到二者间对细胞生长有协同抑制。上述结果表明联合使用Se、VA和VE对乳腺癌的防治可能是有益的。     

天然红心蛋中类胡萝卜素提纯物对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨天然红心蛋中类胡萝卜素提纯物(carotenoidsextractsfromnaturalredyolk,CENRY)对人肝癌细胞QGY-7703细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用体外培养,细胞增殖实验,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态及钙离子浓度变化,采用流式细胞术检测细胞周期等。结果:CENRY1.0、0.5、0.25μmol/L三个剂量能显著抑制人肝癌QGY-7703细胞增殖,细胞凋亡指数随剂量增加及时间延长而上升;CENRY对QGY-7703细胞存在G2/M期阻滞作用;处理组细胞内Ca2+浓度极显著地升高。结论:CENRY能抑制QGY-7703增殖、诱导凋亡。     

植酸对人胃癌细胞增殖抑制作用的体外实验

目的:研究植酸对人胃癌细胞的生长抑制作用及机制。方法:采用MTT实验、Hoechst33342荧光染色法观察不同剂量植酸对SGC-7901细胞增殖的影响,免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达。结果:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用,且存在剂量-效应关系。荧光染色可见,植酸作用组细胞出现典型的细胞核浓缩、边集、裂解的凋亡特征。植酸处理组细胞中Bcl-2蛋白表达较对照组降低。结论:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用和诱导凋亡作用。     

大蒜预防胃癌的细胞学机制研究

目的：探讨大蒜预防胃癌的细胞学机制,为大蒜预防胃癌提供理论依据。方法：以低分化胃癌细胞系ＭＧＣ－８０３为靶细胞,用ＭＴＴ法检测大蒜汁（ＧＪ）对肿瘤细胞活性的影响,透射电镜、ＤＮＡ凝胶糖电泳和原位缺口标记法（ＴＵＮＥＬ）分析细胞凋亡。结果：ＧＪ能有效抑制ＭＧＣ－８０３细胞的活性,并诱导其凋亡。形态学变化表现为细胞皱缩,染色质凝集、碎裂,沿核膜内缘分布,凋亡小体形成等;基因组ＤＮＡ沿核小体之间断裂,电     

八种蔬菜粉脂溶性粗提物对人胃腺癌细胞增殖的影响

本实验以体外培养的人胃腺癌细胞株SGC－7901为材料，研究了八种蔬菜粉脂溶性粗提物（VPFE）对人胃癌细胞体外增殖的影响。VPEE的剂量（以培养液中卜胡萝卜素浓度计）为2×10~(－8)、2×10~(-7)、2×10~(-6)mol／L。结果：（1）生长曲线实验中，八种菜粉VPFE对胃癌细胞的增殖均有抑制作用。在VPFE高剂量组，各种菜粉的抑制作用均有显著性意义（P＜0.05），而中剂量组的作用在不同菜粉有一些差异；（2）集落形成实验中，冬寒菜、菠菜和紫油菜粉VPFE各剂量组均抑制了胃癌细胞的集落形成（P＜0．01），抑制作用呈剂量一反应关系。本次研究的结果为蔬菜防癌抗癌的实际运用积累资料。     

染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究

目的 :　探讨染料木黄酮对体外培养的人胃癌 SGC- 790 1细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法 :　用 MTT法、集落形成实验、透射电镜及流式细胞仪的方法 ,观察染料木黄酮处理 SGC- 790 1后细胞生长和细胞凋亡。结果 :　 (1 ) MTT法和集落形成实验证实染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞生长有抑制作用 ,抑制作用呈剂量 -效应关系 ;　 (2 )透射电镜可见 SGC- 790 1细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩、碎裂等凋亡细胞的形态学改变 ;　 (3)流式细胞仪检测到凋亡峰。结论 :　染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞有抑制作用 ,而这一作用的机制之一是通过诱导人胃癌细胞发生凋亡 ,即诱导肿瘤细胞发生凋亡是染料木黄酮抑制肿瘤细胞生长的重要机制之一