活性维生素D3下调核因子κB炎症通路对2型糖尿病大鼠肝脏保护作用的研究

目的探讨活性维生素D3(Vit D_3)对T2DM大鼠肝脏的保护作用及作用机制。方法SD雄性大鼠分为正常对照(NC)组、T2DM组和活性Vit D_3干预组(Vit D_3组),Vit D_3组予骨化三醇灌胃,NC、T2DM组予花生油灌胃,8周后处死各组大鼠,测量血清血糖、TC、TG、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;HE染色观察肝脏组织的形态学改变;免疫组织化学法、荧光定量RT-PCR检测肝脏核因子κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、细胞间黏附因子1(ICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白及mRNA表达水平。结果 Vit D_3组血清TG、ALT、AST水平低于T2DM组(P0.05)。Vit D_3组肝脏病理组织形态学,尤其是组织结构完整性优于T2DM组。Vit D_3组NF-κB、MCP-1、ICAM-1、TGF-β1的蛋白和mRNA表达水平低于T2DM组(P0.05)。NF-κB的mRNA表达水平与MCP-1、ICAM-1、TGF-β1 mRNA表达水平呈正相关(r=0.711、0.734、0.698,P0.01)。结论活性Vit D_3可能通过NF-κB介导的炎症途径对T2DM大鼠肝脏发挥保护作用。     

解毒通络调肝方对2型糖尿病大鼠肝脏组织IRE1相关蛋白表达的影响

目的探讨解毒通络调肝方对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏组织中肌醇依赖酶(IRE)1及其磷酸化蛋白表达的影响。方法选择88只9周龄健康、雄性ZDF大鼠为研究对象,用Purina#5008高脂饲料饲养建立糖尿病大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,西药组,中药低、中、高剂量组,各给药组分别给予相应的药物灌胃;10只9周龄雄性ZL大鼠以普通饲料饲养作为空白对照组,空白对照组及模型组用等体积蒸馏水灌胃。灌胃饲养至第17周处死大鼠,无菌取肝脏组织,用于Western印迹检测内质网应激(ERS)相关蛋白IRE1α及磷酸化(p)-IRE1α的表达。结果与空白对照组比较,其余各组肝脏IRE1α、pIRE1α蛋白表达显著增多(P0.01);与模型组比较,中药高剂量组IRE1α蛋白的表达水平减少最为显著(P0.01),西药组IRE1α蛋白的表达水平虽有减少,但与模型组相比无明显意义(P0.05);中药高剂量组p-IRE1α蛋白的表达与其他治疗组比较减少明显(P0.01),西药组下降水平与中药中剂量组相当(P0.05)。结论解毒通络调肝方防治T2DM的机制之一可能是通过下调IRE1α、p-IRE1α蛋白表达抑制ERS相关通路,从而改善胰岛素抵抗及减少细胞凋亡。     

清肝解毒活血颗粒对酒精性肝病大鼠核转录因子-κB及肝脏脂质过氧化水平的影响

目的观察清肝解毒活血颗粒对酒精性肝病大鼠核转录因子-κB(NF-κB)的表达及肝脏脂质过氧化水平的影响。方法采用酒精灌胃法诱发大鼠酒精性肝病模型,同时以清肝解毒活血颗粒进行干预,造模12w后,采用逆转录酶PCR(RT-PCR)法检测大鼠肝组织NF-κB mRNA表达水平,采用化学比色法检测大鼠肝组织中SOD、MDA和GSH-PX的变化。结果清肝解毒活血颗粒能明显减弱肝组织中NF-κB mRNA的表达。经治疗后,用药组SOD和GSH-PX与模型组相比活性明显上升(P0.01);MDA与模型组相比含量明显降低(P0.01)。结论清肝解毒活血颗粒能有效地防治酒精性肝病,其作用机制可能与抑制NF-κB mRNA的表达及抗脂质过氧化反应有关。     

已酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏核因子-κB信号通路及胰岛素抵抗的干预作用

目的观察己酮可可碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏核因子-κB(NF-κB)信号通路及胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2和葡萄糖转运子2(GLUT2)表达的影响。方法24只SD大鼠高脂饮食饲养4周后,随机分为模型组和干预组,于实验第24周处死,并设普通饮食饲养大鼠6只作对照组。电泳迁移率分析检测肝脏NF-κB活性,Western blot检测肿瘤坏死因子(TNF)α和κB抑制蛋白α(1κBα)表达,逆转录聚合酶链反应检测肝脏IRS-1、IRS-2和GLUT2 mRNA表达。结果与对照组相比,模型组肝脏NF-κB和TNFα显著增加,IκBα显著降低,伴IRS-2表达显著增加；与模型组相比,干预组NF-κB和TNFα显著降低,IκBα有所增高,而IRS-2表达显著减少；肝脏IRS- 1和GLUT2表达在3组之间差异均无统计学意义。结论己酮可可碱可能通过影响肝脏NF-κB信号通路和增加肝细胞IRS 2表达,从而有助于改善非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏胰岛素抵抗。     

辛伐他汀对胰岛素抵抗大鼠肝脏NF-κB p65表达的影响

目的探讨辛伐他汀（SV）对胰岛素抵抗（IR）大鼠肝脏NF-κB p65表达的影响。方法采用高脂饲料喂养建立IR大鼠模型，并用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估，IR大鼠给予SV治疗。应用Western blot方法检测大鼠肝脏中NF-κB p65蛋白的表达。结果（1）高脂饲料组的葡萄糖输注率明显低于基础饲料组（P〈0．01）。（2）SV治疗组肝脏NF-κB p65蛋白的表达明显低于高脂未治疗组（P〈0．05），但与基础饲料组无明显差别。（3）与基础饲料组相比，SV治疗组和高脂未治疗组的胰岛素敏感性指数（ISI）明显降低（P〈0．05）；SV治疗组与高脂未治疗组的ISI无明显差别。结论SV能使高脂诱导的IR大鼠肝脏升高的NF-κB p65蛋白表达水平恢复正常，但不能明显改善全身胰岛素抵抗。     

血管紧张素（1-7）对糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响及机制研究

目的探讨血管紧张素(1-7)[Ang-(1-7)]对DM大鼠IR的影响及可能机制。方法随机选取Wistar大鼠10只为正常对照组(NC),另取24只予高脂饮食喂养联合STZ注射构建DM模型,造模成功的20只大鼠随机分为糖尿病组(DM)、Ang-(1-7)组[Ang-(1-7)300μg/(kg.d)皮下注射],每组各10只。干预8周后检测FPG、FIns及血管紧张素II(Ang II)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及敏感指数(HOMA-ISI),观察肝脏病理改变,检测肝脏炎症通路及Ins信号转导通路相关因子的mRNA及蛋白表达。结果与NC组比较,DM、Ang-(1-7)组体重、FIns、HOMA-ISI、IRS-2 mRNA、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)mRNA和蛋白、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2(Akt-2)mRNA和蛋白表达降低(P0.05),FPG、Ang II、HOMA-IR、肝脏指数、IκB激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白、核因子κB(NF-κB)mRNA和蛋白、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、糖原合成酶激酶3α(GSK-3α)mRNA和蛋白表达升高(P0.05)。与DM组比较,Ang-(1-7)组FPG、Ang II、HOMA-IR、肝脏指数、IKKβmRNA和蛋白、NF-κB mRNA和蛋白、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、GSK-3αmRNA和蛋白表达降低,FIns、HOMA-ISI、IRS-2 mRNA、PI3K m RNA和蛋白、Akt-2 mRNA和蛋白表达升高(P0.05)。结论 Ang-(1-7)可能通过抑制肝脏IKKβ/NF-κB炎症通路及上调IRS-2/PI3K/Akt-2胰岛素信号通路,改善IR。     

姜黄素对肝纤维化大鼠CTGF及TIMP-1和NF-κB表达的影响

目的观察姜黄素预防肝纤维化过程中肝脏组织中结缔组织生长因子(CTGF)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、核因子-κB(NF-κB)表达的变化,探讨姜黄素预防肝纤维化的作用机制。方法四氯化碳腹腔注射8周以建立大鼠肝纤维化模型,同时每只大鼠按每100g体重分别给予20mg、10mg、5mg姜黄素灌胃处理,3次/周,共8周;所有大鼠随机分为6组(正常组、肝纤维化模型组、高剂量姜黄素组、中剂量姜黄素组、低剂量姜黄素组和阳性对照组。8周后处死大鼠,留取肝脏组织,免疫组织化学方法检测肝组织中CTGF、TIMP-1、NF-κB的表达水平,进行图像分析并统计各组阳性表达率差别。结果模型组大鼠肝组织中CTGF、TIMP-1、NF-κB大量表达,姜黄素可明显抑制上述因子的表达(P<0.01)。结论姜黄素预防肝纤维化作用可能与其抑制CTGF、TIMP-1、NF-κB的表达有关。     

2型糖尿病大鼠胸主动脉磷酸化p38丝裂素活化蛋白激酶蛋白表达及利拉鲁肽对其干预作用的研究

目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)与糖尿病大血管病变的关系及利拉鲁肽对其的干预作用。方法 24只Wistar大鼠分为正常对照组(NC)和实验组(EXP)。EXP组予高糖高脂饮食联合小剂量STZ腹腔注射建立T2DM大鼠模型。将成模大鼠随机分为糖尿病组(DM)和利拉鲁肽组(LIR),每组各7只。LIR组予利拉鲁肽(100μg/kg,2次/d)皮下注射,共8周;DM组和NC组予等量生理盐水皮下注射。实验结束后,测定各组相关指标;HE染色观察胸主动脉形态,免疫组织化学法检测胸主动脉磷酸化p38MAPK、核因子-κB(NF-κB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白表达水平。结果 HE染色可见DM组胸主动脉呈动脉粥样硬化表现。DM组胸主动脉磷酸化p38MAPK、NF-κB和MCP-1蛋白表达水平较NC组升高(P=0.000),LIR组较DM组降低(P=0.017)。Spearman相关分析显示,胸主动脉磷酸化p38 MAPK与NF-κB、MCP-1蛋白表达呈正相关。DM组血糖、TG、TC、LDL-C、血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)、NF-κB水平较NC组升高(P=0.000),较LIR组降低(P0.01)。结论在大鼠实验中,p38MAPK信号通路参与了糖尿病大血管病变的发生;利拉鲁肽可能通过下调血管p38MAPK磷酸化水平、抑制炎症反应、调脂等发挥了对糖尿病大血管病变的保护作用。     

赖诺普利对糖尿病大鼠肾组织中NF—κB、MCP-1表达的影响

将30只Wistar大鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）和赖诺普利治疗组（DT组）各10只。DM、DT组制备糖尿病大鼠模型。造模后DT组予0．1％赖诺普利水溶液10mg／（ks·d）灌胃,余组予等量饮用水灌胃;8周后采用免疫比色法测定24h尿蛋白排泄率,取出肾脏,应用免疫组化法检测肾组织中核因子-κB（NF-κB）、RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNA水平。结果与NC组比较,DM组24h尿蛋白排泄率及肾组织中NF-κB阳性细胞数和MCP-1 mRNA水平显著升高（P〈0．01）;与DM组比较,DT组上述指标水平明显降低（P〈0．01）。认为赖诺普利可能通过抑制NF-κB、MCP-1表达发挥肾脏保护作用。     

解毒通络调肝方对2型糖尿病大鼠肝组织中肌醇依赖酶1/c-Jun氨基末端激酶通路相关蛋白表达的影响

目的研究解毒通络调肝方对2型糖尿病大鼠肝组织中肌醇依赖酶(IRE)1/c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路相关蛋白表达的影响。方法选取9周龄雄性ZDF大鼠88只,饲以Purina#5008颗粒料;9周龄雄性ZL鼠10只,饲以普通颗粒饲料。喂养过程中注意观察大鼠的一般状态、体重变化,至第13周建立糖尿病大鼠模型,将已成模的ZDF大鼠随机分为模型组,西药组(盐酸二甲双胍0.5 g·kg~(-1)·d~(-1)),解毒通络调肝方大剂量组(5 g·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(3 g·kg~(-1)·d~(-1))、小剂量组(1 g·kg~(-1)·d~(-1));ZL大鼠作为空白组,继续饲养第17周处死大鼠,无菌取材肝脏组织,应用免疫组化技术观察内质网应激相关蛋白IRE1α及P-IRE1、JNK、P-JNK蛋白的表达。结果免疫组织化学实验显示,与空白对照组比较,模型组、西药组、解毒通络调肝方大、中、小剂量组肝细胞质中IRE1、P-IRE1、JNK、P-JNK蛋白表达增多(P0.05,P0.01);与模型组比较,西药组、解毒通络调肝方大、中、小剂量组肝细胞质中IRE1、P-IRE1、JNK,P-JNK蛋白表达减少(P0.05,P0.01);与解毒通络调肝方中剂量组比较,大、小剂量组肝细胞质中IRE1、P-IRE1、JNK、P-JNK蛋白表达增加(P0.05)。结论解毒通络调肝方通过减少IRE1、P-IRE1、JNK及P-JNK蛋白的表达,抑制IRE1-JNK信号通路,起到改善胰岛素抵抗、减少细胞凋亡的作用;解毒通络调肝方中剂量组较其他给药组有更好地改善抵抗、减少凋亡的作用。     

电针对胰岛素抵抗模型大鼠血管内皮NF-κB通路的影响

目的观察电针对高脂诱导的胰岛素抵抗(IR)模型大鼠血管内皮炎症反应的分子生物学机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分配至空白组,模型组及电针组,每组8只。空白组SD大鼠喂以12 w的普通饲料,模型组、电针组SD大鼠喂以12 w的D12492高脂饲料。电针组针刺双侧内关、三阴交、足三里及肾俞,1次/d,20 min/次,持续4 w。模型组及空白组不给予电针处理。治疗结束后,禁食12 h,检测葡萄糖输注率(GIR),眼眶静脉窦采血检测各组大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6等指标含量,使用Western印迹分析血管内皮中核因子(NF)-κB p65表达水平,并于电镜下观察血管内皮超微结构变化。结果治疗后,与空白组比较,模型组大鼠血清FPG、FINS、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),GIR水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠血清FPG、FINS、TNF-α、IL-6水平显著降低,GIR水平明显升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠血管内皮的NF-κB p65磷酸化水平及蛋白表达显著升高(P<0.01);电针组大鼠血管内皮NF-κB p65磷酸化水平及蛋白表达较模型组显著降低(P<0.01)。电针组中大鼠的内皮细胞与壁间隙稍增宽,部分线粒体形态改变,嵴部局部消失。结论电针可通过改善炎症反应而发挥防治IR的作用,其机制可能与调节NF-κB信号转导通路有关。     

益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织中NF-κB、MMP-2表达的影响

目的观察益肾通络方对膜性肾病(MN)大鼠肾组织中核因子(NF)-κB、基质金属蛋白酶(MMP)-2的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、中药组,各组按相应剂量灌胃,于第9周末观察24h尿蛋白定量、血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB);免疫荧光、电镜及免疫组化法检测各组大鼠NF-κB、MMP-2在肾组织的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠出现大量蛋白尿,血清TP、ALB均明显降低,血清TC、TG均明显升高,肾脏病理出现损害,肾小球内NF-κB、MMP-2表达显著增强(P0.05);与模型组相比较,各治疗组24h尿蛋白定量,总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)均明显降低,血清TP、ALB均明显升高,肾脏病理损害较轻,肾小球内NF-κB、MMP-2表达减少(P0.05)。中药组与贝那普利组比较无明显差异(P0.05)。结论益肾通络方可显著降低MN大鼠尿蛋白、提高血浆蛋白,改善血脂代谢,能够抑制NF-κB、MMP-2在肾组织中的表达,减轻足细胞融合,促进受损的肾小球基底膜(GBM)修复,从而减轻肾脏损伤,延缓肾脏慢性病理进展。     

蒙药德都红花-7味散及优化方对酒精性脂肪肝大鼠肝组织Toll样受体、核因子-κB、转化生长因子-β1蛋白表达的影响

目的探讨蒙药德都红花-7味散及优化方对酒精性脂肪肝大鼠肝组织Toll样受体(TLR)4、核因子(NF)-κB、转化生长因子(TGF)-β1蛋白表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为4组,即空白组、模型组、德都红花-7味散原药组、德都红花-7味散优化方组,空白组灌胃蒸馏水,其他组每天灌胃40°白酒15 ml/kg,连续灌胃16 w。空白组普通饲料,其他组给予高脂饲料。德都红花-7味散组、德都红花-7味散优化方组均按0.6 g/kg灌胃给药,1次/d,连续给药16 w,大鼠禁食12 h,腹腔静脉取血处死。免疫组织化学法检测肝组织TLR4、NF-κB、TGF-β1蛋白表达,结果采用Motic Images Advanced3.2图像分析仪分析灰度值。结果模型组TLR4、NF-κB、TGF-β1灰度值较空白组显著降低,德都红花-7味散原药组和德都红花-7味散优化方组TLR4、NF-κB、TGF-β1灰度值与模型组比较显著升高,德都红花-7味散优化方组TLR4、NF-κB灰度值与德都红花-7味散原药组比较显著升高(P<0.05)。结论德都红花-7味散及其优化方可能是通过调节TLR4/NF-κB信号通路和TGF-β1分泌起到防治酒精性脂肪肝的作用。     

大鼠抑郁障碍与心血管组织炎性标记物的相关性研究

目的探讨强迫游泳抑郁模型大鼠抑郁障碍与炎性标记物的相关性。方法健康SD大鼠随机抽签分为对照组和模型组,应用21 d强迫游泳试验建立大鼠抑郁模型,模型组大鼠包括SS组(9只,应激+生理盐水腹腔注射)、SF组(8只,应激+氟西汀腹腔注射)和SI组(8只,应激+丙咪嗪腹腔注射)。对照组大鼠包括CS组(10只,生理盐水腹腔注射),CI组(7只,丙咪嗪腹腔注射)。应用透射免疫比浊法和酶联免疫法检测外周血炎性标记物高敏C反应蛋白(hsCRP)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)水平,应用免疫组织化学染色法和蛋白印迹法检测血管组织核因子-κB(NF-κB)p65、抑制蛋白κB(IκB)-α、MCP-1表达水平。结果应激后模型组外周血hsCRP和MCP-1含量明显高于CS、CI组,SS组与CS组hsCRP水平分别为(0.26±0.07)mg/L和(0.15±0.06)mg/L(P<0.01),SS组与CS组MCP-1水平分别为(52.02±18.83)ng/L和(22.52±8.45)ng/L(P<0.01)。血管组织中MCP-1、NF-κB p65表达显著增强,SS组与CS组MCP-1水平分别为(1.78±0.36)mg/L和(0.85±0.15)mg/L,SS组与CS组NF-κB p65水平分别为(0.88±0.16)和(0.12±0.04)(P<0.01),胞浆中IκB-α表达显著减少,SS组与CS组IκB-α水平分别为(0.48±0.07)和(2.07±0.48)(P<0.01)。结论抑郁障碍通过NF-κB表达增强来启动炎症反应。     

利拉鲁肽对糖尿病模型大鼠肾脏组织核因子-κB、单核细胞趋化蛋白-1和血管细胞间黏附分子-1表达的影响

目的探讨利拉鲁肽对糖尿病(DM)大鼠肾脏组织核因子(NF)-κB、单核细胞趋化蛋白(MCP)~(-1)和血管细胞间黏附分子(VCAM)~(-1)表达的影响。方法选用8周龄雄性SD大鼠54只,随机分为正常对照组、模型组、胰岛素对照组和利拉鲁肽低、中、高剂量组(100、200和300μg·kg~(-1)·d~(-1)),采用高脂高糖饲料喂养大鼠4 w后,再给予链脲佐菌素(STZ)35 mg/kg腹腔注射建立动物模型。药物干预8 w后测定血糖、血肌酐和尿素氮等生化指标改变。采用免疫组织化学SP方法和病理图像定量分析技术检测大鼠肾组织NF-κB、MCP~(-1)和VCAM~(-1)的表达水平。结果与模型组相比,胰岛素对照组及利拉鲁肽各剂量组大鼠血肌酐、血尿素氮、尿白蛋白/肌酐均明显降低(P<0.01);与模型组相比,利拉鲁肽各剂量组肾组织NF-κB、MCP~(-1)和VCAM~(-1)的表达降低(P<0.05)。结论利拉鲁肽通过下调DM大鼠肾脏组织NF-κB、MCP~(-1)和VCAM~(-1)表达,发挥对肾小球毛细血管内皮细胞的保护作用,从而改善DM大鼠肾损伤。     

英夫利昔单抗对高脂饲养大鼠肠黏膜屏障及胰岛素抵抗的影响

目的探讨英夫利昔单抗对高脂饲养大鼠肠黏膜功能及胰岛素抵抗(IR)的影响。方法 30只大鼠随机分为3组:正常组,模型组,英夫利昔单抗组。通过高脂饲料喂养大鼠造模,6 w后IR大鼠造模成功。模型组继续高脂饲料喂养6 w,治疗组在高脂饲料喂养基础上分别于0,2,4 w给予英夫利昔单抗肌注(3 mg/kg)1次。于6 w处死大鼠,颈总动脉取血并取小肠标本。全自动生化分析仪检测血清空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)并计算胰岛素敏感指数;ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-10含量;比色法检测血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸含量;HE染色检测大鼠肠黏膜形态;Western印迹检测大鼠小肠组织核因子(NF)-κB p65、pp65、IκBα、p-IκBα、闭合蛋白(ZO-1)、咬合蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组IR大鼠血清中FPG、FINS水平显著上升,胰岛素敏感指数(ISI)下降,大鼠小肠黏膜损害程度较深,炎症细胞浸润较多,血清中DAO、D-乳酸及TNF-α含量上升,IL-10含量下降,NF-κB p65及IκBα磷酸化水平升高,ZO-1及咬合蛋白表达量下降;英夫利昔单抗可显著抑制此变化。结论英夫利昔单抗可以通过NF-κB信号通路来调节TNF-α等相关炎症因子含量,并间接影响TNF-α诱导的紧密连接蛋白的表达,从而改善大鼠肠黏膜功能,治疗大鼠IR。     

IKKε在糖尿病大鼠肝脏的表达及利拉鲁肽对其干预作用的研究

目的观察糖尿病大鼠肝脏组织IKKε、核因子κB(NF-κB)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达及利拉鲁肽对其干预的作用。方法采用高脂饮食联合STZ诱导建立T2DM大鼠模型,将成模大鼠随机分为糖尿病组(T2DM)、低剂量利拉鲁肽组(LL)、高剂量利拉鲁肽组(HL),另设正常对照组(NC),每组各10只。Western blot检测肝脏组织IKKε、NF-κB、p-Akt的蛋白表达,RT-PCR检测IKKε、NF-κB的mRNA表达。结果 T2DM组FPG、FIns、HOMA-IR、TG、白介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)较NC组、LL组、HL组高(P0.05或P0.01),HL组FPG、FIns、IL-6、MDA、HOMA-IR较LL组低(P0.05)。与NC组比较,HL组、LL组、T2DM组IKKε、NF-κB的蛋白表达依次升高(P0.05或P0.01),p-Akt的蛋白表达依次降低[(0.762±0.112)vs(0.598±0.085)vs(0.476±0.112)vs(0.342±0.097),P0.05或P0.01]。结论肝脏组织IKKε表达升高可能参与了糖尿病的发生,利拉鲁肽呈浓度依赖下调肝脏组织IKKε的表达,可能是其改善IR、糖代谢的部分机制。     

NF-κB导致高脂饲养大鼠大血管病变

目的探讨核因子-κB（NF-κB）在高脂诱发的胰岛素抵抗中大鼠血管内皮细胞损伤的可能机制。方法45只Wistar雄性大鼠随机分为对照（NC）、高脂饲养（HF）和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸干预（HF＋NAc）3组，饲养11周测定血糖、胰岛素、血脂以及体重的变化，处死大鼠，测定内脏脂肪含量、主动脉组织形态学改变，并用免疫组织化学法测定主动脉血管内皮细胞的细胞黏附分子1（ICAM-1）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和核因子-κB（NF-κB）／IκBα的蛋白表达。结果（1）HF组大鼠11周后体重明显增加，血糖、胰岛素、TG、TC、LDL-C、FFA水平以及内脏脂肪占体重百分比均较NC组明显升高。NAC干预组则与NC组无明显差异；（2）HF组与NC和NAC组相比，表现为主动脉内膜不完整、断裂、内皮细胞脱落、内膜下泡沫细胞增多、炎细胞浸润、中层平滑肌增生、排列紊乱等；（3）HF组大鼠的主动脉内膜NF-κB为阳性表达、IκBα几乎不表达、ICAM-1和MCP-1呈强阳性表达，而NC组和NAC组NF-κB为弱阳性表达、IκBα为阳性表达、MCP-1和ICAM-1均为阴性或弱阳性表达。结论高脂饲养大鼠可能通过激活NF-κB导致大血管病变，抗氧化剂NAC能有效阻断高脂饲养大鼠的大血管病变。     

白藜芦醇调控TLR4/NF-κB信号通路对溃疡性结肠炎大鼠炎症反应的影响

目的 探讨白藜芦醇调控Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路对溃疡性结肠炎大鼠炎症反应的影响。方法 选取50只SD大鼠，随机分为对照组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组。观察大鼠结肠组织病理学变化；观察大鼠结肠黏膜大体评分和病理组织学；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-10表达；采用Western印迹和PCR检测大鼠结肠组织TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白及基因表达，并利用分子对接技术对白藜芦醇与TLR4/NF-κB信号通路的结合进行验证。结果 与空白组相比，模型组病理评分、TNF-α、IL-6、IL-1β水平、TLR4和NF-κB蛋白及mRNA水平较高，IL-10水平较低，差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比，白藜芦醇各剂量组TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4和NF-κB蛋白及mRNA水平较低，IL-10水平较高，差异有统计学意义(P<0.05);分子对接验证白藜芦醇与TLR4、NF-κB分子的结合能分别为-6.37、-5.31。结论 白藜芦醇可以...     

枸杞多糖联合有氧运动对非酒精性脂肪肝炎大鼠模型的改善作用及其机制研究

目的基于p38 MAPK/NF-κB途径探讨枸杞多糖联合有氧运动对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝炎(NASH)大鼠肝脏的保护作用。方法 8周龄SD大鼠共45只,适应性饲养1周后随机选取10只作为对照组给予普通饲料,剩余大鼠为高脂组(35只),食用高脂饲料。28周时将高脂组大鼠随机分为4组进行干预(每组8只),分别为模型组、枸杞多糖组、有氧运动组、联合组(枸杞多糖+有氧运动),干预周期为10周。实验结束时,测定所有大鼠空腹血糖,收集血清样本,取肝组织和内脏脂肪。生化试剂盒检测血清TG、TC、ALT、AST水平。ELISA试剂盒测定大鼠血清胰岛素(FINS)、TNFα、IL-6和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平。实时定量PCR和Western Blot测定肝组织Toll样受体4(TLR4)、p38 MAPK和NF-κB的表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组相比,模型组大鼠TG、TC、AST、ALT、FINS和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均显著升高(P值均0.05),血清炎症因子MCP-1、TNFα和IL-6水平均呈现增高趋势(P值均0.05),肝组织TLR4、p38 MAPK和NF-κB mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P值均0.05)。与模型组相比,各干预组大鼠TC、AST、ALT、FINS和HOMA-IR水平均显著降低(P值均0.05),血清炎症因子MCP-1、TNFα和IL-6水平均呈现降低趋势(P值均0.05);肝组织TLR4、p38 MAPK、NF-κB相关mRMA和蛋白水平均显著降低(P值均0.05)。与枸杞多糖组相比,联合组TG、ALT、FINS、HOMA-IR水平均显著降低(P值均0.05),血清MCP-1水平呈现降低趋势(P 0.05),TLR4 mRNA相对表达水平显著降低(P 0.05),p38 MAPK、NF-κB蛋白水平均显著降低(P值均0.05)。与有氧运动组相比,联合组FINS、HOMA-IR水平均显著降低(P值均0.05),IL-6、MCP-1水平均显著降低(P值均0.05),TLR4 mRNA相对表达水平显著降低(P值均0.05)。结论枸杞多糖联合有氧运动可能通过调节p38 MAPK/NF-κB途径改善NASH大鼠炎症水平。