热灭活隐球菌对小鼠隐球菌脑炎的作用及其机制

目的：研究脑内接种热灭活的隐球菌(heat—inactived Cryptococcus neoformans,H-CN)在中枢神经系统隐球菌感染中的作用及对小鼠脑和脾IL—2、IL—6基因表达的影响。方法：实验动物随机分为实验组(先给予两次脑内接种H—CN)和对照组(先给予两次脑内接种生理盐水)，然后分别取两组中部分小鼠的脑和脾用RT—PCR方法检测IL—6mRNA和IL—2mRNA基因表达，同时给予两组剩余小鼠脑内接种致死量的隐球菌，观察小鼠脑组织病理改变。结果：小鼠脑组织总RNA以IL—6和IL—2引物进行RT—PCR，实验组IL—6表达阳性，IL—2表达阴性，对照组IL—6、IL—2均表达阴性。小鼠脾组织总RNA以IL—6和IL—2两种引物进行RT—PCR，两组IL—6、IL—2均表达阴性。实验组小鼠脑组织病理与对照组相比可见侧脑室的隐球菌周围有大量的炎性细胞浸润。结论：脑内接种H—CN可引起中枢神经系统特异性免疫反应，中枢神经系统抗隐球菌机制很可能与H—CN引起局部细胞因子IL—6的分泌有关。     

海洛因依赖大鼠部分脑区超微结构变化研究

目的探讨海洛因依赖大鼠中枢神经系统毒理病理损伤机制。方法海洛因依赖组（实验组）按逐日递增原则皮下注射海洛因建立海洛因依赖模型,对照组注射等量生理盐水。透射电镜观察海洛因依赖组及对照组部分脑区：兰斑（LC）、中脑导水管周围灰质（PAG）、杏仁核、黑质和海马区超微结构变化。结果海洛因依赖大鼠部分脑区神经细胞胞体固缩,神经纤维水肿,有髓神经纤维髓鞘松解,胞内线粒体肿胀、嵴断裂消失,线粒体畸形,内质网扩张、脱颗粒,多聚核糖体解聚,轴突内可见微囊形成,部分轴突内细胞器稀疏。结论海洛因依赖对中枢神经系统具有损害,相关脑区神经细胞和神经纤维超微结构皆发生不同程度改变。     

海洛因成瘾大白鼠脑内神经元凋亡的超微结构观察

目的：研究海洛因成瘾大白鼠脑内神经元凋亡的超微结构变化。方法：采用递增法人为建立海洛因成瘾动物模型．设对照组和模型组，取两组动物多部位脑组织电镜下观察超微结构改变。结果：电镜下清晰观察到海洛因成瘾大白鼠脑内多部位神经元凋亡各期的超微结构变化。正常对照组电镜超微影像正常。结论：海洛因成瘾大白鼠脑组织广泛出现神经元凋亡．这是海洛因成瘾致脑神经元死亡的主要形式．神经元凋亡的超微结构改变既具有细胞凋亡的一般形态特征也呈现一定的特异性。     

海洛因成瘾大白鼠脑组织超微结构变化的研究

目的：模仿人类吸毒成瘾方式建立海洛因成瘾动物模型，研究其脑组织超微结构改变，为深入研究海洛因成瘾神经生物学、行为学、神经药理学、成瘾戒断治疗等奠定基础。方法：采用递增法人为建立海洛因成瘾动物模型，设对照组和实验组，取两组动物多部位脑组织于电镜下观察超微结构改变。结果：海洛因成瘾大白鼠脑内多部位神经元胞体、轴突、树突都出现变性、坏死、凋亡等超微病理结构改变。对照组电镜超微影像正常。结论：海洛因成瘾大鼠脑组织出现广泛性损害，以变性为主，神经元凋亡是海洛因成瘾致脑神经元死亡的主要形式。     

盐酸丁丙诺啡合并氯硝西泮治疗海洛因依赖30例临床疗效比较分析

目的：探索盐酸丁丙诺啡合并氯硝西泮治疗海洛因依赖的疗效及可行性。方法：根据入院先后将海洛因依赖分为实验组及对照组，实验组采用小剂量盐酸丁丙诺啡与氯硝西泮联合治疗（30例），对照组采用单一的丁丙诺啡治疗，两组的丁丙诺啡均采用按递减法，8天一疗程。结果：实验组戒断26例，好转4例，脱毒率86.67%，与对照组相比，具有戒断症状轻（P＜0.05），起效快，停药后无反跳现象，效果确切。结论：盐酸丁丙诺啡合并氯硝西泮，是一种较为理想，值得推广的脱毒疗法。     

嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠睾丸和附睾组织中腺苷脱氨酶活性及基因表达的影响

目的：研究嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠睾丸、附睾腺苷脱氨酶(ADA)活性及基因表达的影响,阐明海洛因对男性生殖系统嘌呤核苷酸代谢的损害及嘌呤核苷酸补偿的对抗作用。方法：建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,80只建模成功的雄性Wistar大鼠随机分为对照组（生理盐水）、海洛因组、海洛因戒断3 d组、海洛因戒断9 d组、核苷酸组（不给海洛因）、海洛因+核苷酸组（同时给药）、核苷酸3 d组及核苷酸9 d组（每组10只）,检测睾丸和附睾组织内ADA活性及基因表达的情况。结果：睾丸和附睾组织中ADA活性,海洛因组和海洛因戒断3 d组均明显高于对照组（P<0.05）,其他各组与对照组比较,差异均无显著性（P>0.05）;睾丸组织中ADA mRNA水平,海洛因组明显高于对照组（P<0.05）,附睾组织中ADA mRNA水平,海洛因组、海洛因戒断3 d组和海洛因戒断9 d组均明显高于对照组（P<0.05）,其他各组与对照组比较,差异均无显著性（P>0.05）。结论：海洛因对大鼠睾丸和附睾组织中ADA活性和基因表达有持续增强作用,补偿嘌呤核苷酸可以对抗海洛因的作用。     

43例海洛因依赖者的脑电图分析

为探索海洛因依赖者在戒毒过程中的脑电图变化，对海洛因依赖者在戒断后７２ｈ内、１０ｄ、３０ｄ分别描记脑电图。结果：在撤除海洛因后７２ｈ内，α节律变慢，快波和慢波均增多，与停用毒品后１０ｄ、３０ｄ及正常对照组比较，各项均有显著差异。海洛因依赖者的脑电图表现与戒断规律密切相关。     

复方丹参注射液在戒毒治疗中的应用

用国产复方丹参注射液对２００例海洛因依赖患者进行戒毒治疗的辅助治疗，并设置２００例本采用复方丹参注射液辅助治疗的海洛因依赖戒毒治疗者对照组。结果：实验组在心慌、心悸、胸闷疼痛、四肢疼痛、四肢厥冷、失眠等症状的减轻或消除方面明显优于对照组（Ｐ〈０．０１）。     

心理干预对海洛因依赖者戒毒康复期焦虑状态的影响

目的 分析海洛因依赖者戒毒康复期的焦虑症状，提高脱毒治疗的依从性。方法 将100例海洛因依赖者随机分两组（实验组和对照组），每组50例，对照组进行戒断治疗及一般护理；实验组采用戒断治疗、系统的抗焦虑治疗护理基础上，由主管护士对其进行情绪、认知、睡眠等心理干预。运用焦虑自评量表（SAS），于干预前后评价所有入选的海洛因依赖者。结果 干预前两组对比焦虑状况差异无显著性（P〉0．05），而干预后两组对比焦虑状况差异有显著性（P〈0．05）；实验组干预前后焦虑状况差异有显著性（P〈0．05）；对照组干预前后焦虑的发生差异无显著性。结论 心理干预可减轻海洛因依赖者戒毒康复期的焦虑症状，提高脱毒治疗依从性。     

硫化氢对海洛因依赖大鼠一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢（H2S）对海洛因依赖大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）体系的影响。方法实验大鼠随机分成3组：正常对照组、海洛因依赖组（herion组）、海洛因依赖＋NaHS组（heroin＋NaHS组）。采用比色法测定大鼠血浆及海马组织NO含量,Real time PCR测定海马组织nNOS mRNA表达量。结果血浆及海马NO含量比较,herion组与heroin＋NaHS组均高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）;海马组织nNOS mRNA表达量比较,herion组高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组与对照组无显著差异（〉0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）。结论海洛因依赖可导致大鼠体内NO水平升高,H2S供体NaHS可抑制NO的产生,下调nNOS mRNA表达。     

甲基化干预对小鼠大肠癌生长及p16/CDKN2基因表达的影响

目的 探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对小鼠大肠癌发生发展的影响及其与细胞周期依赖性激酶抑制因子p16/CDKN2 mRNA表达的关系.方法 40只雄性KM小鼠按随机数字表法随机分为2组:1,2-二甲肼(DMH)诱癌组和甲基化干预组,每组20只.小鼠皮下注射DMH 25 mg/kg,每周1次,连续22周,以诱发小鼠大肠癌,甲基化干预组于12周开始皮下注射5-Aza-CdR.另选同来源雄性KM小鼠作为未诱癌对照组(阴性对照组)10只,于皮下按25mg/kg注射生理盐水,每周1次,连续22周."席卷法"收集肿瘤组织,HE染色观察肿瘤发生的数目、类型及浸润程度;免疫组织化学染色观察细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白表达情况;原位杂交技术检测肠癌组织抑癌基因p16/CDKN2 mRNA的表达.结果 (1)DMH诱癌组肿瘤数达(7.6±3.1)个/只,而甲基化干预组诱癌数为(3.4±1.8)个/只,且以重度异性增生为主,浸润癌的发生率明显低于DMH诱癌组(P＜0.05).(2)DMH诱癌组19只小鼠中PCNA阳性表达16只,明显多于甲基化干预组(19只中11只阳性表达)及未诱癌对照组(0只,均P＜0.05).(3)DMH诱癌组有明显p16/CDKN2 mRNA杂交信号(蓝紫色),主要位于胞质,但甲基化干预组染色显然较DMH诱癌组强,尤其以瘤灶部位明显.结论 早期5-Aza-CdR的干预能显著抑制小鼠大肠癌的发生发展,其抑制肿瘤机制可能是通过激活抑制因子p16/CDKN2的表达.

Abstract：

Objective To explore the effects and relationship of specific demethylation agent 5-Aza-2'-deoxycytidine (5-Aza-CdR) on colorectal cancer ( CRC ) induced by 1,2-dimethylhydrazine ( DMH ) in mouse and the in vivo expression of cyclin-dependent kinases inhibitor p16/CDKN, mRNA. Methods A total of 40 male KM mice were randomized into 2 groups and CRC was induced by a 22-week injection of DMH. One group was interfered by specific DNA methyltransferase inhibitor 5-Aza-CdR. Another 10 the same source male KM mice were induced by a 22-week injection of saline as none induced cancer control group (negative control group ). All mice were sacrificed to examine for colorectal neoplasm.Immunohistochemical staining was used to assess the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA). The expression of p16/CDKN2 mRNA was detected by in situ hybridization. Results The average numbers of neoplasm was higher in the DMH group (7. 6 ±3. 1 ) than that of the group DMH +5-Aza-CdR (3.4 ± 1.8, P ＜0. 05). Immunohistochemical staining showed there was a significant elevation of PCNA in the group DMH(16/19) as compared with that in the group DMH +5-Aza-CdR ( 11/19, P ＜0. 05 ). In situ hybridization revealed that the level of tumor suppressor gene p16/CDKN2 mRNA was significantly lower in the group DMH than that in the group DMH +5-Aza-CdR. Conclusion The specific demethylation agent 5-Aza-2'-deoxycytidine may inhibit the carcinogenesis of CRC. Its mechanism may be related with a high expression of p16/CDKN2 mRNA.     

原位杂交研究GPRC6A mRNA在小鼠组织中的分布规律

目的：探讨G蛋白偶联受体C组6A（G protein-coupled receptor family C, group 6, subtype A, GPRC6A） mRNA在小鼠体内的分布规律。方法：比较传统和TSA信号放大系统分析石蜡包埋的小鼠组织中GPRC6A mRNA的分布情况。为了确保信号特异性,将GPRC6A基因剔除小鼠组织放在同一张切片上作阴性对照。结果：建立了一种用非同位素标记的互补RNA探针原位杂交检测石蜡包埋的小鼠组织中低表达GPRC6A mRNA 的方法。TSA信号放大系统明显提高原位杂交检测该受体的敏感性。GPRC6A基因剔除小鼠组织中没有可测信号。GPRC6A mRNA至少在消化腺、副消化腺中表达,同时也在肾、睾丸、子宫、脑、肌肉脂肪中有表达。结论：GPRC6A mRNA 的分布模式与GPRC6A基因剔除小鼠的基因表型基本一致。     

Pax-8基因抑制后心肌细胞中UCP2的表达

目的 建立Pax-8基因敲除模型及Pax -8基因的体外干扰实验,探索心肌细胞中Pax-8基因抑制后解偶联蛋白2(uncouplingprotein 2,UCP2)基因表达的变化.方法 Pax-8基因敲除纯合子小鼠(Pax-8 KO-/-)为实验组,Pax-8基因敲除小鼠杂合子(Pax -8 KO+/-)和野生型(Pax-8KO+/+)为对照组;同时在体外实验的大鼠心肌细胞株中,加入Pax -8基因的小干扰RNA(Pax-8siRNA)为实验组,非特异性siRNA(NC siRNA)组和空白组为对照组.采用RT-PCR和Westernblotting技术测定UCP2的mRNA和蛋白质表达.结果 在Pax-8基因敲除动物模型中,与Pax-8基因敲除小鼠杂合子组和野生型组相比,实验组Pax-8基因敲除小鼠纯合子心脏组织UCP2的mRNA和蛋白表达均上调( P<0.05),而对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);在体外干扰实验中的结果显示,与NC siRNA组和空白对照组比较,Pax-8siRNA组UCP2的mRNA表达和蛋白表达均上调(P<0.05),而NC siRNA组与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 Pax-8基因被抑制后,心肌细胞凋亡增加,UCP2基因表达上调,提示UCP2参与了心肌细胞凋亡的调控.     

低氧浓度改变对神经干细胞增殖分化及HIF-1α表达的影响

目的:探讨不同的低氧浓度下离体培养胎鼠脑皮质神经干细胞(NSCs)的增殖分化及HIF-1α的表达情况,以此分析HIF-1α对神经干细胞的增殖分化作用。方法:体外低氧条件下(3%O2和10%O2)培养扩增胚鼠皮质来源的神经干细胞,实验组分为3%O2低氧1、3、5d组;10%O2低氧1、3、5d组,常氧为对照组。免疫细胞化学染色法鉴定神经干细胞及其子代细胞。RT-PCR检测实验组细胞HIF-1αmRNA的表达。结果:各低氧组NSCs内HIF-1αmRNA的表达量均明显高于对照组,且10%O2组与3%O2组相比,低氧5dHIF-1αmRNA的表达量显著增加;实验组NSE阳性神经元的比率均明显高于对照组,10%O2组与3%O2组相比,低氧5d10%O2组中NSE阳性神经元的比率明显增高。结论:低氧可促进NSCs增殖分化及HIF-1αmRNA的表达,且HIF-1αmRNA的表达量与低氧浓度及时间有关。     

亚慢性染砷对小鼠脑组织性基因Jarid1d表达的影响

[目的]观察亚慢性染砷对小鼠脑组织性基因Jarid1d表达的影响.[方法]SPF级小鼠30只,按体重将小鼠随机分为1 mg/L As2O3染砷组、4 mg/Ls2O3染砷组和对照组,每组10只.自然饮用含不同浓度As2O3饮用水方式使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑.利用基因芯片技术检测小鼠脑组织性基因Jarid1d的...     

小鼠睾丸巨细胞病毒感染对精子顶体反应与膜功能的影响

目的探讨小鼠睾丸巨细胞病毒(MCMV)感染对附睾尾部精子顶体反应与膜功能的影响。方法随机选择无MCMV感染史的BALB/c雄性小鼠48只作为实验组,睾丸直接接种MCMV,分别于感染后第1、2、4、6、9、14天处死小鼠,用地高辛标记的MCMVM83mRNA寡核苷酸探针对睾丸组织进行原位杂交,检测睾丸MCMV感染情况,同时取附睾尾部成熟精子进行精子顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测。另设平行对照组雄性小鼠30只(同法随机选择),睾丸接种不含MCMV的细胞培养液,其他处理方法同实验组。结果实验组48只雄性小鼠睾丸组织间质及(或)生精细胞中均出现原位杂交阳性信号。实验组精子顶体反应与膜功能在接种病毒后的第2天、第4天,精子顶体反应率(58%±9%、56%±9%)低于平行对照组(71%±6%、70%±7%)(P均<0.05),精子膜尾部低渗肿胀率(48%±9%、38%±8%)低于平行对照组(60%±7%、50%±4%)(P均<0.05)。结论小鼠睾丸MCMV感染模型成功建立。小鼠睾丸MCMV急性感染可导致精子顶体反应与膜功能的显著下降。     

氯化甲基汞对不同发育阶段小鼠脑组织神经元c-fos基因表达的影响

目的:探讨氯化甲基汞(Methylmercury chloride,MMC)对不同发育阶段小鼠大、小脑组织神经元c-fos表达的影响.方法:选用1、4、8、16、28天龄和成年(P1、P4、P8、P16、P28、AD)雄性昆明系小鼠,实验组腹腔注射10 mg*kg-1 MMC,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,染毒后各天龄组小鼠按下述时间点在麻醉状态下取脑组织, P8组小鼠在30、45、60、120和180 min时间点及其余各组在45 min时间点迅速取脑组织,常规石蜡包埋,采用原位杂交法观察MMC对大、小脑神经元c-fos基因表达的影响.结果:P8小鼠大脑和小脑c-fos mRNA阳性细胞率在第30分钟时开始增加,45 min时间点最高,随着时间的延长逐渐减少;P8实验组45 min阳性表达率小脑高于大脑(P<0.05);45 min时间点实验组大脑和小脑c-fos mRNA阳性细胞率随小鼠天龄的增加而减少;P1、P4、P8天龄组大脑阳性细胞率高于对照组高(P<0.05);P1、P4、P8、P16、P28天龄组小脑阳性细胞率高于对照组 (P<0.05).结论: MMC可诱导小鼠大、小脑神经元c-fos基因表达,这可能是MMC神经损伤的机理之一.     

8-氯-环腺苷酸对人膀胱癌细胞中野生型p53、突变型p53 mRNA表达的影响

目的探讨cAMP类似物8-氯-环腺苷酸（8-Cl-cAMP）对人原代培养的膀胱癌细胞中野生型p53（wtp53）、突变型p53（mtp53）mRNA表达的影响。方法原代培养膀胱癌细胞,运用免疫组化及原位杂交方法检测膀胱癌细胞中wtp53、mtp53 mRNA的表达。结果8-Cl-cAMP处理后的膀胱癌细胞中mtp53 mRNA表达水平明显低于未处理组,而经8-Cl-cAMP处理后的膀胱癌细胞中wtp53 mRNA表达水平则明显高于未处理组,两组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论8-Cl-cAMP可抑制膀胱癌细胞中mtp53 mRNA,上调wtp53mRNA表达水平,进而抑制肿瘤细胞的分裂和增殖。     

抑郁症大鼠海马和顶叶皮质神经元NGF含量及其mRNA的表达

目的：观察实验性抑郁症大鼠脑内神经生长因了含量及其mRNA表达的变化。方法：采用长期不可预见性中等强度应激造成大鼠抑郁症模型，运用openfield法观察大鼠行为学变化，运用免疫组化和原位杂交法观察神经元NGF含量及其mRNA表达的变化。结果：与对照组相比，抑郁组大鼠海马和顶叶皮质神经元NGF免疫阳性颗粒数目减少，着色浅谈，NGF mRNA杂交阳性信号减少，结论：实验性抑郁症大鼠海马和顶叶皮质神经元NGF含量下降，NGFmRNA表达水平降低。     

EXPRESSION OF PERFORIN AND FAS LIGAND IN INFILTRATING CELLS OF MURINE MYOCARDIUM INFECTED WITH COXSACKIEVIRUS B3

INTRODUCTIONViralmyocarditisnotonlycancausecongestiveheartfailure,buthasalsobeenstronglyimplicatedinpathogenesisofidiopathicdilatedcardiomyopathy.Manystudieshaveshownthatcellmediatedcytotoxicity(CMC)playsanimportantroleinpathogenesisofmyocardialdamageinviralmyocarditis(1).CMCdamagestargetsbytwoprimarymechanisms:performmediatedpathwayandFas/Fasligand(L)--mediatedpathway(2).Inthepresentstudy,tofurtherclarifytheeffectofCMConthedevelopmentofviralmyocarditis,wehavedetectedtheexpressionofpe…