睾丸精子行ICSI改善严重畸形精子症患者治疗结局5例报告

目的:探讨利用睾丸精子行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗严重畸形精子症患者(精液或附睾液精子畸形率≥99%)的可行性,改善辅助生殖技术治疗结局。方法:回顾性分析5例严重畸形症精子患者(附睾液精子,n=4;精液精子,n=1)利用不同来源精子行ICSI治疗的临床资料,并比较睾丸精子组与非睾丸精子组(附睾液精子和精液精子)之间受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率以及种植率的差异。结果:5例严重畸形精子症患者取精液精子或附睾液精子行ICSI治疗后无1例妊娠,而改用睾丸精子行ICSI治疗后4例成功妊娠。睾丸精子组与非睾丸精子组之间受精率、卵裂率及优质胚胎率均无显著差异(P>0.05),而睾丸精子组妊娠率和种植率均显著高于非睾丸精子组(P<0.01)。结论:对应用附睾精子或精液精子行ICSI治疗失败的严重畸形精子症患者改用睾丸精子治疗可有效改善其治疗结局。     

体外受精后6h应对受精失败的补救措施探讨

目的比较分析体外受精(IVF)后6 h补救卵胞浆内单精子注射(ICSI)和half ICSI应对受精失败的优劣。方法16例IVF完全受精失败周期采卵当日选取4个卵母细胞行ICSI,其余卵行常规IVF(half ICSI组);39例IVF完全受精失败周期在常规IVF后6 h补救ICSI(6 h补救ICSI组),比较两组的实验室指标。结果6 h补救ICSI组的受精率和冷冻胚胎比率显著高于half ICSI组,(分别为P0.01、P0.05);两组的卵裂率和优质胚胎比率无显著差异,妊娠率、种植率和累积妊娠率也无显著差异。结论IVF后6 h补救ICSI可应用在所有IVF周期,ICSI指征明确;half ICSI只能应用于不明原因不孕患者。工作中经患者知情同意后,在优先选择IVF后6 h补救ICSI的前提下,结合应用half ICSI,可提高受精失败患者的临床结局。     

不同受精方式对选择性囊胚培养结局的影响

目的:探讨不同受精方式对选择性囊胚培养结局的影响。方法:回顾性分析2009年1月至2012年12月在我中心接受囊胚培养的IVF组1 153个周期和ICSI组205个周期的囊胚培养结局。结果:IVF组和ICSI组分别有14 748和2 655枚胚胎进行序贯囊胚培养,两组均无因无囊胚可移植而取消周期。IVF组共形成7 871枚囊胚,ICSI组形成1 210枚囊胚;IVF组的优胚率、囊胚形成率和胚胎利用率均显著高于ICSI组(64.77%vs 58.72%,53.37%vs 45.57%,60.06%vs 52.17%,P均0.05);但IVF组与ICSI组种植率(48.94%vs51.43%)、临床妊娠率(49.03%vs 52.02%)和流产率(11.69%vs 15.56)均无显著差异(P均0.05)。结论:在同样的选择性囊胚培养纳入标准下,IVF相比于ICSI行囊胚培养的囊胚形成率和胚胎利用率更高,因无囊胚移植取消周期的风险相对更小。针对不同的受精方式可能需要制定相应的选择性囊胚培养纳入标准。     

部分卵子卵胞浆内单精子注射避免体外受精失败的价值探讨

目的 探讨部分卵子卵浆内单精子注射(ICSI)的必要性.方法 对2007年1月至2008年12月98个治疗周期患者的同胞卵分别实施常规体外受精(IVF)和卵浆内单精子注射,对两组受精率、卵裂率比较,分析.结果 (1)IVF组受精率47.08%,ICSI组受精率86.61%,两组比较,ICSI组高于IVF组,差异有统计学意义(P<0.01).98周斯妊娠率41.05%,种植率26.07%;(2)IVF组全部受精失败19例,占19.39%,低受精(受精率≤25%)7例,占7.14%,不受精和低受精总和占26.53%,ICSI组没有不受精患者;(3)IVF不受精组由于移植了ICSI组胚胎妊娠率31.58%,而IVF/ICSI均受精组妊娠率43.42%,IVF组不受精组妊娠率低于IVF/ICSI均受精组,但两组差异无统计学意义(P>0.05);(4)98周期IVF组可利用胚胎203枚,胚胎利用率57.18%,而ICSI组可利用胚胎519枚,胚胎利用率75%,两组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 对于不明原因的不孕人工授精3次以上未孕、疑有IVF受精障碍患者和男性精液临界值的患者应及时行同胞卵IVF和ICSI,避免全卵受精失败和受精率低下.     

睾丸冷冻精子对卵胞浆内单精子注射胚胎质量的影响

目的探讨对无精子症患者行卵胞浆内单精子注射(ICSI)时,使用诊断性睾丸取精时的冷冻精子对胚胎质量的影响。方法回顾性分析2014年1月至2018年4月281例无精子患者的临床资料,其中行诊断性睾丸取精时冷冻保存精子,复苏后行ICSI患者165例(冷冻组),取卵日新鲜睾丸取精行ICSI患者116例(新鲜组)。比较两组正常受精率、优质胚胎数、优质胚胎率、D3可利用胚胎数、囊胚形成率、临床妊娠率及活产率、早产率、低出生体重周期率。结果两组相比,冷冻组正常受精率低于新鲜组(64.3%vs.67.6%),差异有统计学意义(P<0.05),而组间优质胚胎数、优质胚胎率、D3可利用胚胎数、囊胚形成率、临床妊娠率及活产率、早产率及低出生体重周期率均无统计学差异(P>0.05)。结论对于无精子症患者,行诊断性睾丸取精时冷冻睾丸精子,复苏行ICSI时会降低正常受精率,但一旦正常受精,对胚胎质量及胎儿在母体发育存活没有明显影响;对于后代远期影响尚需长期随访观察。     

获单卵或双卵周期体外受精方式对治疗结局的影响

目的比较常规体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)两种授精方式对周期获卵数仅为1～2个患者的治疗结局的影响。方法回顾性分析胚胎移植(ET)168个周期获卵数仅为1～2个的卵巢低反应患者的资料,比较常规IVF组和ICSI组的受精率、卵裂率、优质胚胎率和临床妊娠率等情况。结果ICSI组受精率高于IVF组(分别为83.7%和63.8%,P0.05);IVF组有24.5%周期的卵子全部不受精,高于ICSI组的9.7%(P0.05);而卵裂率、优质胚胎率、取消移植周期率和临床妊娠率两组间差异无统计学意义(P0.05)。≥35岁、精液参数不正常时,ICSI组受精率高于IVF组(分别为83.9%和55.6%,P0.05);IVF组有34.8%周期的卵子全部不受精,高于ICSI组的14.3%(P0.05);而卵裂率、优质胚胎率、取消移植周期率和临床妊娠率,两组间差异无统计学意义(P0.05)。≥35岁、精液参数正常时及35岁、精液参数正常或不正常时受精率、卵裂率、优质胚胎率、取消移植周期率和临床妊娠率,两组间的差异均无统计学意义(P0.05)。结论鉴于获卵数为1～2个的周期采用ICSI治疗并不能提高其优质胚胎率、临床妊娠率。因此我们不建议全部行ICSI治疗,男方精液参数正常或处于临界状态建议行IVF治疗。     

不育男性精子形态与体外受精妊娠结局的相关性研究

目的 探讨不育男性精子形态与体外受精妊娠结局的关系.方法 按照WHO《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》要求对573例接受辅助生殖技术治疗的男性不育患者的精子形态进行分析,根据患者正常精子形态百分比分为2组(＜1 5％:≥1 5％),分别采用体外受精(IVF)或卵泡浆内单精子注射(ICSI)的受精方式,观察精子形态对IVF及ICSI的受精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率和流产率等的影响.结果采用IVF(327例)受精方式下,两形态组精子的受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率差异均有统计学意义(P＜0.05),但流产率差异无统计学意义(P＞0.05);而采用ICSI(246例)受精方式下,两形态组精子的上述指标比较差异均无统计学意义(P＞ 0.05).结论不育男性精子形态异常影响IVF治疗结局,但对ICSI治疗结局无影响,对于精子形态异常的患者应采用ICSI的受精方式.     

早期补救ICSI对首次IVF助孕周期临床结局的影响

目的探讨早期补救ICSI对首次IVF周期临床结局的影响。方法回顾性分析2008年1月至2012年12月于本中心行首次IVF治疗的5 029个取卵周期,IVF受精4~6h后根据第二极体的排出情况判断受精与否,对半数以上卵母细胞未受精的患者实施补救ICSI,其余患者继续行常规IVF,比较补救ICSI组(n=413)及常规IVF组(n=4 616)患者的基本情况及临床结局,并计算早期补救ICSI对首次IVF周期临床结局的贡献值。结果早期补救ICSI组原发性不孕患者的比例及不育年限显著高于常规IVF组,输卵管及盆腔因素患者的比例显著低于常规IVF组,基础FSH显著低于常规IVF组,窦卵泡数显著高于常规IVF组(P均0.01);补救ICSI组获得了较多的卵母细胞数[(9.65±5.20)vs.(8.89±5.48)个]及成熟卵数[(8.36±4.56)vs.(7.88±5.01)个](P0.01),但受精数[(6.22±3.70)个]与优质胚胎数[(2.94±2.76)个]均显著低于常规IVF组[分别为(7.05±4.74)个、(3.40±3.03)个](P0.05),同时多原核(≥3PN)胚胎率(5.85%)也显著低于常规IVF组(8.26%)(P0.01);两组患者的种植率、临床妊娠率及流产率比较无统计学差异(P0.05);早期补救ICSI对首次IVF周期双原核(2PN)受精率的贡献值为4.25%,对优质胚胎率的贡献值为3.67%,对临床妊娠率的净贡献值为2.72%,总贡献值为3.49%。结论早期补救ICSI取得了和常规IVF相似的临床结局,有效提高了首次IVF周期的临床妊娠率,是针对IVF周期受精完全失败或低受精的有效治疗手段。     

不同方式获取精子对ICSI治疗后妊娠结局分析

目的 分析和比较3种不同获取精子方式行ICSI后的妊娠结局.方法 回顾性分析本中心2009年2月至12月进行ICSI治疗的207 例患者,其中严重少弱精子患者108例、当天受精失败81例和经皮附睾穿刺术(PESA) 18例,比较3组的受精率、卵裂率、优质胚胎率和妊娠率.结果 3组的受精率、卵裂率、优质胚胎率无明显差异,其中受精失败组行补救ICSI妊娠率较高,但与其他两组比较没有统计学意义.结论严重少弱精子症、附睾穿刺和补救ICSI获得的精子,受精率和优质胚胎率,妊娠率相似,不同来源和生理功能的精子不影响ICSI的治疗效果.     

不同来源精子对卵胞浆内单精子注射治疗结局的影响

目的分析不同来源精子对卵胞浆内单精子注射术(ICSI)治疗后的胚胎发育及治疗结局的影响。方法回顾性分析来我院行ICSI助孕治疗的144对不育夫妇(共154个周期),其中96个周期(A组,89对夫妇)的精子来源为严重少、弱精子症患者的射出精子,32个周期(B组,30对夫妇)为附睾精子,26个周期(C组,25对夫妇)为睾丸精子。比较三组经ICSI治疗后的2PN率、2PN卵裂率、优质胚胎率、种植率、妊娠率。结果 B组的2PN率、2PN卵裂率、优质胚胎率、妊娠率和种植率与A组相比,均无统计学差异(P0.05);C组2PN率、优质胚胎率低于A组、B组(P0.01),而妊娠率、种植率3组间无统计学差异(P0.05)。结论尽管睾丸精子行ICSI可能影响受精及早期胚胎发育,但与严重少弱精患者的射出精子及附睾来源的精子行ICSI的妊娠结局没有显著差异。     

ICSI中不同来源精子对临床结局的影响

目的:分析不同来源精子在卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)后的临床结局。方法:将682个ICSI治疗周期分为:射出精子组(598例)、经皮附睾精子抽吸术(PESA)得到精子组(58例)、睾丸精子获取术(TSE)得到精子组(26例),比较三组的受精率、临床妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率以及分娩率之间的差别。结果:TSE组受精率明显低于射出精子组和PESA组(81.06%vs87.95%,87.82%,P<0.05);射出精子组、PESA组和TSE组的妊娠率(39.46%,48.28%,34.62%)、种植率(19.80%,23.80%,18.34%)、流产率(13.13%,17.86%,11.11%)、异位妊娠率(5.51%,7.14%,11.11%)、分娩率(32.11%,36.21%,26.92%),均没有显著差异(P>0.05)。结论:虽然TSE来源精子对ICSI受精率有所影响,但射出精子和手术(TSE和PESA)来源精子对妊娠结局没有影响。     

Influence of motility and vitality in intracytoplasmic sperm injection with ejaculated and testicular sperm

The vitality of spermatozoa used for intracytoplasmic sperm injection (ICSI) is a crucial factor for fertilization, establishment and outcome of a pregnancy in assisted reproductive technique cycles. The sperm origin may also be a limiting factor, although little is known about this issue. It is known that the motility of injected spermatozoa and their origin from ejaculate or testicular biopsies are important predictors in terms of fertilization, pregnancy and birth rates. Oocytes of patients in 2593 cycles were retrieved in our in vitro fertilization programme and inseminated via ICSI. We used motile (group 1, n = 2317) or immotile ejaculated spermatozoa (group 2, n = 79), motile sperm retrieved from testicular biopsies (group 3, n = 62) and immotile spermatozoa from testicular biopsies (group 4, n = 135). Female age and number of oocytes retrieved did not differ significantly among the groups. The fertilization rates were as follows: 67.1% in group 1, 49.8% in group 2, 68.3% in group 3 and 47.8% in group 4. The pregnancy rates in cases where three embryos had been transferred amounted to 35.7% in group 1, 17.3% in group 2, 38.3% in group 3 and 20.5% in group 4. The embryo quality showed no differences between groups 1 and 3 (14.5), and between groups 2 (11.8) and 4 (10.8). The abortion rate was similar in groups 1-3, but increased in group 4 (26.6%, 27.3%, 31.6% and 55.5%). Irrespective of their origin, the fertilization potential of injected spermatozoa was found to be influenced by motility. The resulting pregnancy and birth rates, i.e. the potential of the resulting embryos to implant and to achieve viable pregnancies, seem to be additionally dependent on the sperm origin. This was well shown by declining rates when spermatozoa in a relatively early stage of maturity had been used. We see increasing evidence that the degree of sperm maturity has an important impact on the outcome of ICSI. In obstructive azoospermia, spermatozoa retrieved from the epididymis should be used rather than testicular biopsy spermatozoa, or testicular sperm should be preincubated in culture medium before ICSI.     

精液质量对ICSI卵子受精与胚胎发育的影响

目的 探讨不同精液质量的ICSI(卵泡浆内单精子显微注射)周期中卵子受精与胚胎发育潜能间的差异.方法 采用回顾性资料分析的方法,比较了中心71例ICSI治疗周期.女方正常者根据精液质量分为严重少弱畸精子组(A组,n=31)与非严重少弱畸精子组(B组,n=24),非严重少弱畸精子组合并女方异常为C组(n=16).从形态学方面评估三组中受精率、(two pronuclear,2PN)率、异常受精率、未受精率、卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、不可用胚胎率等实验室指标间的差异.结果 三组在卵子受精率、2PN率、异常受精率、未受精率、卵裂率、可用胚率、优质胚胎率和不可用胚胎率等方面比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).但B组的受精率(72.29±23.1 2)低于C组(85.49±1 8.59),两组差异有统计学意义(P＜0.05);未受精率B组(22.81±22.83)高于C组(14.51±18.59),两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 从形态学上看,ICSI前的精液质量对卵子受精及胚胎发育没有明显影响.     

Individual assessment of sperm morphology of single spermatozoa used for intracytoplasmic sperm injection

Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) is an integral part of assisted reproduction. Although many papers have shown that global sperm count, sperm motility and sperm morphology of the ejaculate play no role in the fertilization rate after ICSI, embryologists who carry out ICSI, try to use the 'best looking' spermatozoa. The aim of the study was to investigate whether those spermatozoa with the best morphology really achieve the highest fertilization rate. In the present study, a total of 798 spermatozoa used for ICSI were documented by high-resolution photo. After ICSI the oocytes were cultured in single droplets and the formation of pronuclei was assessed 16 h later. The spermatozoa (all normal according to WHO criteria) were classified into four groups of different morphology. Group 1: normal head shape (approximately 5 microm diameter), group 2: like group 1, but with 15-20% smaller diameter, group 3: like group 1, but with 15-20% larger diameter, and group 4: like group 1, but with slight mid-piece cytoplasmic irregularities. Using the Pearson chi-square test, no significant difference in terms of fertilization was found among the different groups, showing that marginal sperm differences do not alter the fertilization process in ICSI.     

常规IVF完全/部分受精失败后行早期补救ICSI的应用

目的探讨常规短时受精联合早期补救卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)在常规体外受精(IVF)失败和低受精率周期中的临床应用效果。方法回顾性分析2012年1月至2017年12月在河北省生殖医学中心接受IVF/ICSI-ET助孕治疗的2811个周期的临床资料,根据受精方式不同分为3组:R-ICSI组(210个周期):实施早期R-ICSI;IVF组(2062个周期):行常规IVF助孕;ICSI组(539个周期):直接行ICSI助孕。比较3组患者的一般情况、实验室指标和妊娠结局。结果R-ICSI组的原发不育比例显著高于IVF组(P<0.05),但与ICSI组比较无显著性差异(P>0.05)。3组患者的平均获卵数、移植胚胎数及MⅡ率比较均无显著性差异(P>0.05);R-ICSI组患者的受精率显著高于IVF组和ICSI组(P<0.05);R-ICSI组患者的2PN率显著低于ICSI组(P<0.05),但与IVF组比较无显著性差异(P>0.05);R-ICSI组的多PN率显著高于ICSI组,但显著低于IVF组(P<0.05);R-ICSI组患者的优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率均显著低于IVF组和ICSI组(P<0.05);R-ICSI组患者的着床率显著低于IVF组(P<0.05),但与ICSI组比较无显著性差异(P>0.05)。结论常规IVF受精失败及低受精的患者行早期R-ICSI可有效克服受精障碍,提高受精率,获得较好的妊娠结局。     

卵细胞胞质内单精子注射对体外受精能力缺陷的改善

目的:评价前一周期行体外受精(IVF)失败和受精率低后,改行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的受精效果。方法:行ICSI治疗的113例患者136周期分为两组:因严重少弱精子症而行ICSI的106个周期(组1);因前次常规IVF受精失败或受精率低于20%而改行ICSI的30个周期(组2)。比较两组间卵母细胞的正常受精率、优质胚胎率和妊娠率的差异,并对第2组受精率的分布进行分析,以了解改行ICSI后受精效果的改善情况。结果:改行ICSI后,两组的正常受精率和优质胚胎率差异均无显著性(70.49%vs72.02%;38.28%vs38.81%)(P>0.05)。两组的临床妊娠率分别为40.57%和40.00%,差异也无显著性(P>0.05)。改行ICSI后,大部分周期(70.00%,21/30)的受精率都在50%以上,平均受精率为79.79%,受精效果得到明显改善。结论:IVF受精失败和受精率低可以通过行ICSI而获得较好结局。     

冻存睾丸精子用于男性生殖力储备的探讨

目的:通过研究对无精子症患者实施睾丸活检或其他手术时冷冻睾丸精子经复苏后行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)助孕的临床效果,探讨冻存睾丸精子作为男性生殖力储备的有效性。方法:回顾性分析了在本院实施睾丸活检或其他手术时冷冻睾丸精子的患者96例,其中的55例已在本中心复苏冷冻精子行ICSI助孕共60个周期,评估其冷冻精子复苏、卵子受精、卵裂、可移植胚胎、优质胚胎、临床妊娠及其分娩情况。结果:复苏冻存睾丸精子60个周期均获成功,复苏后行ICSI技术助孕,受精率77.6%(513/661),2PN受精率69.4%(459/661),卵裂率99.4%(510/513),可利用胚胎率84.5%(431/510),优质胚胎率40.8%(208/510);所有周期均有可移植胚胎;新鲜胚胎移植52个周期,临床妊娠30例(临床妊娠率57.7%),双胎妊娠11例(其中1例双胎自然减为单胎),单胎妊娠19例,种植率为38.7%(41/106),流产率为3.33%(1/30)。目前,已经出生了20例健康婴儿(12个男婴,8个女婴),未发现先天缺陷儿;另外13例(7例单胎和6例双胎)继续妊娠中。结论:睾丸精子冷冻复苏后行ICSI助孕可以得到较好的临床结局。冻存睾丸精子是无精子症男性生殖力储备的有效方式。     

短期应用左卡尼汀在卵细胞胞质内单精子注射治疗少弱精子症中的作用

目的:观察左卡尼汀短期治疗男性少弱精子症后精液质量的变化及行卵细胞胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)助孕治疗后的临床结果。方法:研究对象为根据WHO标准检测精液分析结果为少弱精子症者129例,治疗组42例服用左卡尼汀2周后应用ICSI,对照组87例单纯应用ICSI助孕技术。对比治疗组患者用药前后精液精子浓度、活动率、(a+b)级精子百分率、畸形率指标,治疗组与对照组对比ICSI后受精率、卵裂率、有效胚胎率、临床妊娠率。结果:治疗组患者治疗后(a+b)级精子百分率(13.5±10.7)%,较治疗前(9.6±7.2)%提高(P<0.05),治疗组ICSI操作后有效胚胎率77.50%,明显高于对照组69.04%(P<0.05)。结论:左卡尼汀短期治疗能够改善精子质量,并有助于少弱精子症患者提高ICSI治疗的成功率。     

Outcome of repeated micro-surgical testicular sperm extraction in patients with non-obstructive azoospermia

Aim： To evaluate the outcome of repetitive micro-surgical testicular sperm extraction （mTESE） attempts in non-obstructive azoospermia （NOA） cases, in relation to patients＇ initial testicular histology results. Methods： A total of 68 patients with NOA in whom mTESE had been performed in previous intracytoplasmic sperm injection （ICSI） attempts were reviewed. Results： Among the 68 patients with NOA, the first mTESE yielded mature sperm for ICSI in 44 （64%） （Sp^＋）, and failed in the remaining 24 （36%） （Sp^-）. Following their first trial, 24 patients decided to undergo a second mTESE. Of these 24 patients, no spermatozoa were obtained in 5 patients, and Sp^＋ but no fertilization/pregnancy were achieved in 19. In these 24 cases, mTESE was successively repeated for two （n = 24）, three （n = 4） and four （n = 1） times. The second attempt yielded mature sperm in 3/5 patients from the Sp group and 16/19 patients from the Sp^＋ group. At the third and fourth trials, 4/4 and 1/1 of the original Sp^＋ patients were Sp^＋ again, respectively. Distribution of main testicular histology included Sertoli cell-only syndrome （16%）, maturation arrest （22%）, hypospermatogenesis （21%） and focal spermatogenesis （41%）. Overall, in repetitive mTESE, 24/29 （82%） of the attempts were finally Sp^＋. Conclusion： Repeated mTESE in patients with NOA is a feasible option, yielding considerably high sperm recovery rate. In patients with NOA, mTESE may safely be repeated one or more times to increase sperm retrieval rate, as well as to increase the chance of retrieving fresh spermatozoa to enable ICSI.