人参皂苷免疫调节作用的研究进展

<正>传统中医学认为人参具有大补元气、生津止渴、扶正固本等功效,人参皂苷作为从人参中提取的主要有效活性成分,以其多方面的药理学作用,成为近年来医学界研究的热点。人参皂苷按其化学性质可分为:人参皂苷二醇型(A型),包括Rb1、Rb2、RC、Rd、Rh2等;人参皂苷三醇型(B型),包括Re、Rf、Rg1、Rg2、Rhr等;齐墩果酸型(C型),如Ro、Rh3、Ri、F4等。现代药理研究表明,人参皂苷具有双相免疫调节作用,能改善实验动物的非特异性免疫和特异性免疫功能[1],用于治疗免疫系统紊乱疾病[2-3]。免     

HPLC法测定人参皂苷Rg3、Rh1的含量

目的：建立人参发酵品中人参皂苷Rh1、Rg3的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定,色谱条件：ODS色谱柱（4.6 mm ×250 mm,5μm）;检测波长203 nm;流动相（Rh1）：乙腈-水（26.5：73.5）,流动相（Rg3）：乙腈-0.05％磷酸（37：63）;柱温30℃,流速1.0 mL/min。结果人参皂苷Rh1的含量测定线性范围0.1~1.1μm,相关系数r＝0.9998,平均加样回收率96.90％,RSD 2.67％。人参皂苷Rg3的含量测定线性范围0.4~3.0μm,相关系数为r＝0.9997,平均加样回收率98.56％,RSD 2.51％。结论本方法检测灵敏度高,检测结果可靠。     

人参皂苷Rg_1和Rh_1抗肿瘤作用的研究

目的 :研究人参皂苷 Rh1及其前体 Rg1的整体及离体抗肿瘤作用。方法 :整体实验 4种小鼠移植性肿瘤 :小鼠宫颈癌 - 1 4( U14 )、艾氏腹水癌 ( EAC)、肉瘤 - 1 80 ( S180 )和肝癌腹水型 ( Hep A)腋部皮下接种 ,于接种 1 0 d内 ,每天给药 1次 ,计算各给药组肿瘤抑制率。离体抗肿瘤实验用 3种瘤株 :A375 - S2、T98G 和 He La。结果 :人参皂苷 Rg1( 2 0 0 mg·kg-1,灌胃 )和 Rh1( 4 0和2 0 mg· kg-1,腹腔注射 )对 U14 均具有明显的抑制作用 ( P<0 .0 1 ) ;人参皂苷 Rh1在较高剂量( 4 0 mg·kg-1)时 ,对 EAC也有明显抑制作用 ( P<0 .0 1 )。但人参皂苷 Rg1和 Rh1对 S180 和 Hep A无抗肿瘤作用。离体实验证明 ,Rg1对 He La细胞的增殖有明显的抑制作用 ,Rh1高剂量组( 1 0 0 mg· L-1)对 3种肿瘤细胞均有明显抑制作用。结论 :人参皂苷 Rh1较其前体 Rg1具有更强的整体和离体抗肿瘤作用     

人参皂苷Rh1诱导卵巢癌细胞凋亡及对piwi基因的表达影响

目的 探索Rh1药物对SKOV3细胞生长的影响,评价Rh1药物对细胞piwi基因家族的表达调控进行研究.方法 MTT分析Rh1对细胞生长的作用,realtime PCR和western blotting检测Rh1对piwi基因的表达影响.结果 Rh1能够明显抑制SKOV3细胞的增殖,10-6,10-8,10-10和10-12M的Rh1处理组均能够明显抑制SKOV3细胞活力.piwil-1,piwil-2,piwil-3和piwil-4的mRNA和蛋白在Rh1处理后均有不同程度的表达下调.结论 Rh1可抑制人卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖并使piwi基因家族表达降低.     

人参皂苷单体Rh2对小鼠前胃癌MFC细胞的增殖抑制作用

目的： 探讨Ginseng Rh₂（G-Rh₂）对小鼠前胃癌MFC细胞的增殖抑制作用及其机制。方法： MFC细胞（密度为1.0×10⁹•L^-1）分为空白组、G-Rh₂组（3、10、30 mg•L^-1）组,MTT法检测MFC细胞活性;流式细胞仪检测细胞周期;流式细胞仪和免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白cyclin D₁、细胞周期依赖激酶（CDK）抑制蛋白p27^kip1在MFC细胞中的定性和定量表达。结果：与相应空白组比较,G-Rh₂（3、10、30 mg•L^-1）组在1、2和4 h细胞增殖活性随着剂量和时间增加而逐渐下降(P<0.05或P<0.01);与空白组比较,各药物处理组G₀/G₁期细胞比率随着剂量增加而上升(P<0.05或P<0.01),同时细胞周期蛋白cyclin D₁含量逐渐降低(P<0.05或P<0.01),细胞周期抑制蛋白p27^kip1含量逐渐升高(P<0.05或P<0.01)。结论：人参皂苷单体G-Rh₂可抑制MFC细胞增殖,可使MFC细胞周期阻滞在G₀/G₁期而抑制细胞活性,这一过程可能与p27^kip1升高、细胞周期蛋白cyclin D₁含量降低有关。     

人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用

目的：探讨人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导的雄性生殖功能损伤模型小鼠生殖功能的改善作用,阐明人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3对生殖功能保护作用的相关机制,为其深入开发提供实验依据。方法：28只清洁级雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组（400 mg·kg^-1 DBP）、人参皂苷Rg1+DBP组（20 mg·kg^-1人参皂苷Rg1,400 mg·kg^-1 DBP）、人参皂苷Rg3+DBP组（20 mg·kg^-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg^-1 DBP）和联合组（20 mg·kg^-1人参皂苷Rg1,20 mg·kg^-1人参皂苷Rg3,400 mg·kg^-1DBP）,每组7只。DBP溶于玉米油于每天上午灌胃给药,人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3溶于生理盐水于每天下午皮下注射给药,每天各给药1次,连续给药35 d。采用WLJY-9000型精子质量检测系统检测各组小鼠的精子密度、精子活力和总畸形率,HE染色观察小鼠睾丸组织病理形态表现,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠血清中睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）水平,采用免疫荧光法检测睾丸组织缝隙连接蛋白43（Cx43）蛋白表达水平。结果：与模型组比较,联合组小鼠睾丸脏器系数明显升高（P<0.05）,人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠精子密度和精子活力明显升高（P<0.01）;与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组、人参皂苷Rg3+DBP组和联合组小鼠血清中T和LH水平明显升高（P<0.01）,FSH水平明显降低（P<0.01）,小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。HE染色,模型组小鼠睾丸组织生精上皮较薄,管腔中生精细胞严重脱落;与模型组比较,人参皂苷Rg1+DBP组和人参皂苷Rg3+DBP组小鼠睾丸组织生精上皮变厚,管腔中脱落细胞较少;联合组小鼠睾丸组织生精上皮结构完整,各级生精细胞排列规则,腔内精子丰富。析因分析,人参皂苷Rg1联合人参皂苷Rg3可致小鼠精子活力（F=6.704,P=0.016）、血清中T水平（F=4.912,P=0.036）和睾丸组织中Cx43蛋白表达水平（F=6.937,P=0.018）升高。结论：人参皂苷Rg1和人参皂苷Rg3单独使用及人参皂苷Rg1与人参皂苷Rg3联合使用,可提高精子密度和精子活力,使小鼠血清中T和LH水平升高,FSH水平降低,减轻小鼠生殖功能损伤,其作用机制可能与上调Cx43表达水平发挥生精保护作用有关,可抑制DBP所致的生殖功能损伤,且人参皂苷Rg1与Rg3联合使用表现为协同作用。     

人参皂苷Rg3与Rh2的研究进展

人参是我国传统的名贵中草药材,人参皂苷是人参的主要有效成分。人参皂苷Rg3,Rh2具有抗疲劳、舒张血管、提高免疫力、抗肿瘤等药理作用。综述了人参皂苷Rg3,Rh2的药理作用及制备方法。     

人参单体皂苷Rh2诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡

目的：探讨人参单体皂苷Rh₂抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测不同浓度Rh₂与RM-1细胞株存活率的关系；吖啶橙染色观察Rh₂诱导细胞凋亡情况；流式细胞仪分析细胞凋亡周期，计算细胞平均凋亡指数。结果：RM-1细胞经Rh₂处理后，细胞生长明显受抑制，当Rh₂浓度为5、15、25和30 mg•L-1时，其生长抑制率分别为12.0％、36.1％、51.2％和69.3％,呈明显的浓度依赖性；吖啶橙荧光染色可见经药物处理的细胞呈现明显的凋亡形态；细胞周期G₁期前出现凋亡峰，Rh₂浓度为15和25 mg•L^-1时，细胞凋亡率分别为41.9% 和48.9％。结论：5～30 mg•L^-1　Rh₂可诱导RM-1细胞凋亡，其具有明显的抗肿瘤作用。     

人胎盘免疫活性肽对小鼠移植性肿瘤的抑制研究

目的：观察胎盘免疫调节肽的抑癌效果，阐明其抑癌的机理。方法：采用生化分离技术，将胎盘免疫调节肽进行分离纯化，用荷瘤小鼠抑癌实验进行活性检测。结果：胎盘提取物对荷瘤实验抑瘤率约为31％～42％。结论：胎盘免疫调节肽对肿瘤生长具有抑制作用。     

药膳保健面条对免疫低下小鼠胸腺和脾脏系数的影响

目的:观察药膳保健面条对环磷酰胺免疫低下模型小鼠免疫器官指数的影响。方法:60只昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为3组:正常对照组、模型组、药膳保健面条组。采用腹腔注射环磷酰胺法制作免疫功能低下小鼠模型,药膳保健面条组给予药膳保健面糊25 g(/kg.d),其余两组代以等体积的温开水,连续10 d后,测定胸腺、脾脏系数。结果:模型组小鼠的胸腺系数、睥脏系数显著低于正常对照组,药膳保健面条组小鼠胸腺、脾脏系数较模型组显著升高。结论:药膳保健面条可升高免疫低下小鼠的胸腺和脾脏系数,从而增强机体免疫功能。     

无花果多糖对氢化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:观察无花果多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的作用特点.方法:以氢化可的松所致免疫抑制小鼠为实验对象,连续7 d灌服无花果多糖,观察对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、溶血素及溶血空斑形成的影响.结果:无花果多糖可显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数,显著促进溶血素形成、明显促进溶血空斑形成.结论:无花果多糖对氢化可的松致免疫抑制小鼠免疫功能有好的免疫促进作用.     

人参皂苷Rg1对NAFLD动物模型中同型半胱氨酸的调控机制

目的 建立非酒精性脂肪性肝病 (NAFLD) 的动物模型, 探讨人参皂苷Rg1调控同型半胱氨酸的分子机制.方法 建立NAFLD动物模型, 测定正常对照组和模型对照组空腹状态下的血清甘油三酯 (TG) 和总胆固醇 (TC) , HE染色检测肝脏的形态学改变, 油红"O"染色检测肝脏的脂质沉积。各组取血清检测同型半胱氨酸 (Hcy) 含量, 免疫组化和Western blot检测肝脏组织内亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR) 和胱硫醚合成酶 (CBS) 蛋白表达的变化.结果 与正常对照组比较, 模型对照组空腹TG和TC浓度增加 (P<0.05) ;HE染色显示肝细胞排列紊乱, 出现脂肪变性;油红“O”染色显示肝脏组织的脂质沉积增加.与正常对照组比较, 模型对照组的Hcy的浓度增加 (P<0.05) , 人参皂苷Rg1治疗后降低 (P<0.05) , 存在剂量依赖性;与正常对照组比较, 模型对照组的MTHFR和CBS的蛋白质在肝脏组织中表达降低 (P<0.05) .人参皂苷Rg1治疗后, MTHFR和CBS的蛋白质表达升高 (P<0.05) , 存在剂量依赖性.结论 在NAFLD模型中, 人参皂苷Rg1可能通过增加肝脏组织的MTHFR和CBS表达, 降低同型半胱氨酸的含量, 从而对非酒精性脂肪肝病发挥保护作用.     

无花果多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:探讨无花果多糖对免疫抑制小鼠机体免疫功能的影响.方法:以环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)致免疫抑制小鼠为研究对象,观察无花果多糖对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、溶血素及溶血空斑形成和外周血淋巴细胞转化的影响.结果:腹腔注射CY可成功建立小鼠免疫抑制模型,大、小剂量无花果多糖组可显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数,可显著促进免疫抑制小鼠溶血素形成、明显促进溶血空斑形成,可显著提高免疫抑制小鼠外周血淋巴细胞转化百分率.结论:无花果多糖对CY所致小鼠免疫抑制有对抗作用.     

麦冬多糖MDG-1对糖尿病小鼠模型的降糖作用

目的:观察麦冬多糖MDG-1对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠的降糖作用。方法:①将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组,MDG-1高、中、低剂量给药组,二甲双胍组,考察药物对正常雄性C57BL/6小鼠空腹血糖的影响。②将雄性C57BL/6小鼠随机分为模型对照组,MDG-1高、中、低剂量给药组,二甲双胍组,采用腹腔注射STZ联合高脂饲料诱导复制2型糖尿病小鼠模型,药物干预后测定随机和空腹血糖、口服糖耐量和血清胰岛素水平。结果:各剂量组MDG-1对正常小鼠空腹血糖无影响,对糖尿病小鼠体质量有轻微降低作用;300 mg/kgMDG-1对糖尿病小鼠的随机血糖和空腹血糖均有显著降低效果,并可改善小鼠口服糖耐量和血清胰岛素水平。结论:MDG-1可降低由STZ诱导得到的糖尿病小鼠血糖,并对改善其胰岛素抵抗有一定作用。     

人参皂苷Rb1对阿尔茨海默病模型细胞大电导钙激活钾通道变化机制的影响

【目的】观察阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型细胞的大电导钙激活钾通道BKCa的变化及人参皂苷Rb1对AD模型细胞上BKCa通道的影响。【方法】实验分为Aβ25-35模型组(终浓度为5、10、20、40μmol/L)、人参皂苷Rb1预处理组(终浓度为0.5、1、2、4μmol/L)、治疗组(Aβ25-35+人参皂苷Rb1)和空白对照组。采用膜片钳技术观察各组BKCa通道的平均开放时间、平均开放概率和电流幅度,选择Aβ25-35模型组及人参皂苷Rb1预处理组的最佳浓度,并观察人参皂苷Rb1对AD细胞的作用。【结果】20μmol/L Aβ25-35可显著降低BKCa通道的平均开放时间(P0.05),抑制BKCa通道开放;4μmol/L人参皂苷Rb1组BKCa通道平均开放概率和开放时间较空白对照组均显著升高(P0.05),与模型组比较均显著升高(P0.05或P0.01)。【结论】人参皂苷Rb1治疗AD的机制可能与其能激活BKCa通道、对抗Aβ25-35的毒性作用并保护神经细胞有关。     

雷公藤内酯酮对小鼠变应性接触性皮炎的抑制作用及其机制探讨

研究了雷公藤内酯酮对小鼠变应性接触性皮大、T和B淋巴细胞增殖反应及脾细胞分泌白细胞介素2(IL-2)活性的影响。发现雷公藤内酯酮1、2、5mg/kg腹腔注射(ip,qd×5d)能显着抑制二硝基氟苯(DNFB)诱导的变应性接触性皮炎,而对脾细胞IL-2分泌活性无显着影响。体外试验表明,0.02、0.10、0.50mg/L浓度的雷公藤内酯酮能显着抑制刀豆素A(ConA)及脂多糖(LPS)诱导的T、B淋巴细胞增殖反应。