AU结合因子1对肝细胞癌患者磷脂酰肌醇蛋白聚糖3水平的影响

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者中AU结合因子1(AUF1)对磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)表达的影响及其机制。方法LCI-HCC基因表达数据下载自GSE14520,最终纳入214例有随访信息的乙型肝炎相关HCC患者。35例HCC及配对癌旁样本选取自2009年—2013年在河南省肿瘤医院接受常规根治性手术的HCC患者。采用免疫组化检测GPC3和AUF1蛋白在HCC中的表达及相关性;在HCC细胞系中敲减或者过表达AUF1后,采用Western Blot和实时荧光定量PCR检测GPC3表达;利用RNA结合蛋白免疫沉淀实验和RNA稳定性检测研究AUF1调控GPC3表达的机制。计量资料两组间比较采用t检验,计数资料两组间比较采库中,肝癌组织GPC3的表达均显著高于癌旁组织(P值均0.05);TCGA数据库中,GPC3高表达与肝癌患者的不良预后有关(P0.05)。免疫组化结果显示,GPC3和AUF1蛋白均在肝癌组织中呈高表达,阳性表达率分别为77.1%(27/35)和74.3%(26/35)。体外实验结果表明,在肝癌细胞系HepG2和Huh-7中敲减AUF1明显降低了GPC3表达(P值均0.05),而过表达AUF1则上调GPC3表达(P0.05)。AUF1蛋白可与GPC3 mRNA结合,敲减AUF1导致GPC3 mRNA稳定性降低。结论 AUF1是调控GPC3基因转录后修饰的重要调节因子,AUF1和GPC3蛋白的异常高表达可能参与肝癌的发生和发展。     

DC-SIGN在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨树突细胞特异性细胞间黏附分子3结合的非整合素(DC-SIGN)在原发性肝癌组织中的表达及意义。方法选择原发性肝癌患者手术切除的肝癌组织标本30例及对应的距离肝癌组织2 cm以上的癌旁肝组织标本30例。采用免疫组化法检测肝癌组织和癌旁组织DC-SIGN蛋白表达,采用RT-PCR检测肝癌组织和癌旁组织DC-SIGN mRNA表达。结果肝癌组织DC-SIGN光密度值高于明显癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织DC-SIGN mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(P0.05)。肝癌组织DC-SIGN蛋白表达与肝癌包膜、TNM分期、血清甲胎蛋白(AFP)水平有关(P0.05),与肝癌患者年龄、性别、组织分化、肿瘤大小、肝外转移、静脉侵犯无关(P0.05)。肝癌组织DC-SIGN mRNA水平与肝癌包膜、肝癌TNM分期、血清甲胎蛋白水平有关(P0.05),与肝癌患者的年龄、性别、组织分化、肿瘤大小、静脉侵犯无关(P0.05)。结论原发性肝癌组织中DCSIGN表达量升高,DC-SIGN表达量和肝癌的包膜是否完整及肝癌TNM分期有关。     

蛋白翻译起始因子C_2在原发性肝细胞肝癌中表达的意义

目的研究C_2mRNA及其蛋白在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义。方法用原位杂交检测C_2mRNA住21例HCC及其癌旁组织中的表达,ABC免疫组化法检测C_2蛋白在60例HCC及其42例癌旁组织中的表达,Western blot法检测C_2蛋白在HCC及其癌旁组织中的表达。结果 21例HCC及其癌旁组织中,C_2mRNA阳性率分别占23.8％(5/21)和85.7％(18/21),60例HCC及42例癌旁组织中,C_2蛋白阳性分别占27.3％(17/60)和83.3％(35/42),27例肝硬变中,C_2蛋白阳性率为77.8％(21/27)。χ~2检验:C_2mRNA及其蛋白在HCC癌旁组织中表达明显高于癌组织(P<0.001);C_2蛋白在肝硬变中的表达明显高于HCC癌组织(P<0.01);C_2的表达与患者年龄、HBsAg及AFP有明显关系(P<0.05);而与癌组织的分化程度、肿瘤大小、淋巴转移无关;Western blot与免疫组化结果一致。结论 C_2基因表达下调可能与HCC的发生、发展及早期诊断有关。     

肝癌组织甲胎蛋白表达特点及其基因片段的扩增分析

目的探讨肝癌组织甲胎蛋白(AFP)表达的病理学特点及其基因分析的临床价值。方法以免疫组织化学法研究AFP在肝癌及癌周组织中的胞内分布及其表达;并从肝癌的癌灶、癌旁组织中制备总RNA,以巢式聚合酶链反应(nested_PCR)扩增不同癌组织AFP_mRNA片段,以探讨AFP表达的临床病理学特征及其AFP_mRNA分析的应用价值。结果肝癌细胞及癌旁肝细胞的胞浆中,均可见AFP阳性的棕黄色颗粒,癌组织中AFP阳性表达率为73.3%,癌旁组织中为40.0%,中、低分化组肝癌中AFP的表达阳性率明显高于高分化组肝癌(P<0.05),且癌旁组织中AFP的表达强度明显低于肝癌的癌灶组织。肝癌组织、癌周组织的总RNA表达水平存在差别,癌组织中AFP_mRNA片段扩增全数阳性(100%),显著高于癌周组织(P<0.01)。结论肝癌不同组织中AFP表达存在差异,AFP_mRNA分析有助于肝癌的早期发现和诊断。     

晚期糖基化终产物受体在肝细胞癌患者中的表达

目的 研究晚期糖基化终产物受体(RAGE)在原发性肝细胞癌(PHC)中的表达.方法 收集10例PHC患者的肝癌组织、癌旁组织、血清及正常人的血清;用RT-PCR及Western blot分别检测组织中RAGE基因及蛋白的表达;用ELISA检测血清RAGE表达,同时用化学发光法检测血清中甲胎蛋白(AFP)表达.结果 RA...     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3和甲胎蛋白联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的通过联合检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC3）、甲胎蛋白（AFP）在原发性肝癌患者血清及组织中的表达情况,探讨对原发性肝癌的诊断价值。方法分别采用ELISA和免疫组织化学法检测57例肝癌、74例肝炎后肝硬化患者和47例正常血清和肝组织GPC3、AFP表达水平,根据不同临床病理指标进行分组比较。结果 （1）肝癌患者、肝炎后肝硬化及正常对照者血清中GPC3水平分别为（212.6±137.5）、（60.9±27.8）、（39.5±18.7）ng/ml;肝癌患者血清GPC3浓度显著高于正常及肝炎后肝硬化患者（t=4.503,P〈0.05;t=6.045,P〈0.05）;血清GPC3、AFP联合检测原发性肝癌的敏感性和特异性为84.2%和95.7%,均显著高于任一单项检测（t=4.132,P〈0.05;t=6.514,P〈0.05）;（2）GPC3在肝癌组织表达高于癌旁和正常肝组织（t=3.724,P〈0.05;t=15.799,P〈0.05）;GPC3与肿瘤大小、肿瘤数目、HBsAg及AFP水平无明显相关,而与病理分级和临床分期有关;（3）AFP阳性肝癌血清GPC3阳性率为91.4%,而在AFP阴性肝癌中GPC3阳性率为59.1%。结论 GPC3联合AFP检测有助于提高原发性肝癌的确诊率,检测GPC3有助于提高AFP阴性患者肝癌的确诊率。     

STAT3基因在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨STAT3基因在肝癌发生发展中的作用及意义。方法应用RT-PCR检测STAT3基因及相关基因c-myc、p53、survivin、VEGF的mRNA水平的表达,应用Western Blot法及免疫组化法检测STAT3基因的蛋白水平及定位表达。结果肝癌组织及癌旁组织中STAT3基因mRNA的表达均明显高于正常肝组织(P<0.05),肝癌及癌旁组织中c-myc、survivin、VEGF基因mRNA的表达上调,p53基因mRNA的表达下调,肝癌组织及癌旁组织中STAT3基因蛋白水平的表达均高于正常肝组织(P<0.05)。结论STAT3基因的持续激活在肝癌的发生发展中起重要作用,可作为早期诊断的指标及治疗的新靶点。     

肝癌组织中RUNX3表达及其与临床病理因素的相关性

目的 探讨肝癌组织及其癌旁组织中RUNX3 mRNA和蛋白表达情况,并分析其与临床病理因素的相关性.方法 采用反转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学分别检测肝癌组织及其癌旁组织中RUNX3 mRNA和蛋白表达水平,并分析与临床病理因素的相关性.结果 在51例肝癌组织中RUNX3 mRNA表达量相对值为:0...     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝穿刺活检标本中鉴别诊断的意义

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在肝细胞癌(HCC)等不同肝病组织中的表达情况及其对肝癌早期诊断的意义.方法:采用免疫组织化学方法检测126例肝穿刺活检标本(包括13例极早期HCC、44例早期HCC、16例不典型增生、29例肝硬化和24例肝炎)及57例中晚期HCC手术标本中GPC3和甲胎蛋白(AFP)的表达,...     

mTOR/P70S6K信号通路在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的:研究mTOR/P70S6K信号通路在肝细胞肝癌(HCC)中的表达,探讨其在HCC发生发展中的作用及意义.方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测120例HCC患者癌组织、癌旁肝组织以及10例正常肝组织中mTOR及P70S6K mRNA表达情况;并分析mTOR及P70S6K mRNA的表达与相关临床参数的关系.结果:mTOR及P70S6K mRNA在HCC组织中的表达水平显著高于在癌旁肝组织和正常肝组织中的表达水平(mTOR mRNA:0.594±0.218 vs 0.437±0.156.0.594±0.218 vs 0.383±0.081,均P＜0.05;P70S6K mRNA:0.610±0.147 vs 0.486±0.162.0.610±0.147 vs 0.440±0.141,均P＜0.05).mTOR mRNA和P70S6KmRNA在HCC组织中的表达呈正相关(r=0.548,P=0.012),且两者在癌旁肝组织及正常肝组织中的表达亦正相关性(r=0.607,0.737,P=0.005,0.015).mTOR及P70S6K mRNA在HCC组织中的表达水平与病理分期、门静脉癌栓等明显相关,而与肿瘤直径、血清AFP水平、性别等无明显关系.结论:mTOR/P70S6K信号通路在HCC中特异性激活.mTOR/P70S6K信号通路可能在肝细胞肝癌的发生、发展中起重要作用.