原发性干燥综合征患者唇腺组织中白细胞介素7的表达及临床意义

目的探讨原发性干燥综合征（pSS）患者唇腺组织中IL-7的表达及其与临床血清学参数间的关联。 方法收集2015年1月至2017年12月汕头市中心医院pSS患者135例,以及同期唇外伤正常对照个体12例。免疫组织化学法检测两组个体唇腺组织中IL-7的表达,分别评估腺上皮细胞与浸润淋巴细胞IL-7的表达情况。Pearson相关分析唇腺组织IL-7的表达与抗核抗体（ANA）、C3、C4、C反应蛋白（CRP）、IgG等血清学指标间的关联性。 结果IL-7在唇腺组织内淋巴细胞、腺泡导管及上皮细胞均可表达。浸润的淋巴细胞IL-7表达阳性率在pSS患者（88.14%,119/135）显著高于正常对照个体（8.3%,1/12）,差异有统计学意义（χ² = 46.82,P<0.001）。pSS患者唇腺组织中腺泡与导管上皮细胞与浸润淋巴细胞IL-7的表达相关（r = 0.27,P = 0.0012）,未发现有浸润淋巴细胞IL-7表达与血清指标间的相关性。 结论pSS患者唇腺组织中腺体上皮细胞、淋巴细胞IL-7异常高表达,且两者表达情况紧密相关,提示IL-7的表达可能参与了pSS腺体与淋巴细胞的相互作用,可作为pSS唇腺干预一个新的治疗靶点。     

Caspase-8在原发性干燥综合征唇腺组织中的表达

目的探讨Caspase-8在原发性干燥综合征唇腺组织中的表达及意义,并分析它的表达与临床特征的相关性。方法采用免疫组化和Western blotting的方法检测55例原发性干燥综合征患者和15例健康者唇腺组织中Caspase-8蛋白的表达,测量吸光度值,采用SPSS 14.0软件包对两组结果进行统计学分析。结果原发性干燥综合征唇腺组织中Caspase-8在蛋白水平上有表达,与健康对照组相比明显升高(P<0.05),并与疾病的病程呈正相关,但与其他临床特征之间不存在明显相关性。结论 Caspase-8在原发性干燥综合征患者唇腺组织中高表达,且与疾病的病程相关,Caspase-8介导的细胞凋亡途径可能参与了原发性干燥综合征的发病过程。     

干扰素调节因子1、3、7在原发性舍格伦综合征中的表达

目的：检测原发性舍格伦综合征（primary Sjgren＇s syndrome,pSS）患者血细胞中干扰素调节因子（IRF）1、3、7的表达水平,并检测IRF1在pSS患者腮腺组织中的表达。方法：采用实时定量PCR,对37例pSS患者和24例对照组患者血细胞中IRF1、3、7的水平进行检测,比较分析其在两组之间的差异。采用免疫组化和免疫荧光法检测IRF1在pSS患者腮腺组织中的表达。应用SAS6.12软件包对数据进行t检验。结果：实时定量PCR法检测结果发现,pSS组的IRF1mRNA表达量显著高于对照组,两组之间有显著差异（P=0.00001）,pSS组的IRF1是对照组的2.17倍,而IRF3和IRF7在两组之间无显著差异（P=0.3813,0.4501）。免疫组化和免疫荧光发现,pSS组患者腮腺组织中的导管上皮细胞、淋巴细胞和上皮岛均为IRF1阳性;而对照组腮腺组织中仅导管上皮细胞为IRF1阳性。结论：IRF1在原发性舍格伦综合征患者中存在异常表达。     

IFN-α在原发性合格伦综合征患者唇腺组织中的表达

目的：检测原发性合格伦综合征患者唇腺组织中IFN-α的表达水平，探讨IFN-α在原发性SS发病中的作用。方法：对37例原发性SS患者和24例非SS患者的唇腺组织进行IFN-α免疫组化染色，比较分析其在两组之间的差异。使用SAS 6．12统计软件包对数据进行t检验。结果：37例原发性SS患者中，22例（59．46％）表达阳性，15例（40．54％）表达阴性；24例非SS组患者中3例（12．5％）表达阳性，其余21例（87．5％）均表达阴性。2组之间有显著差异。结论：IFN-α在原发性合格伦综合征患者唇腺组织中存在表达异常。     

DNMT1基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

采用 Real-Time PCR 检测 DNA 甲基转移酶-1（DNMT1）mRNA 在20例口腔正常黏膜组织及43例口腔鳞状细胞癌（OS-CC）组织中的表达,用免疫组织化学法和 Western blot 分别检测 DNMTl 蛋白在组织样本中的表达。结果显示 DNMTl mRNA 在 OS-CC 中高表达（Z ＝－2．028,P ＜0．05）,43例 OSCC 组织中,DNMTl 蛋白阳性表达率为81％,而在20例口腔正常黏膜组织中的阳性表达率为25％（P ＜0．05）。DNMTl 有可能参与 OSCC 的发生发展。     

MMP1、TIMP1和TIMP3在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨口腔鳞状细胞癌组织及配对正常口腔黏膜组织中基质金属蛋白酶1（MMP1）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP1）及基质金属蛋白酶抑制剂3（TIMP3）蛋白和mRNA表达及临床意义。方法研究对象为2005年6月～2008年11月在河北医科大学第四医院口腔科首诊的51例口腔鳞状细胞癌患者。应用免疫组化及RT-PCR法检测癌组织和配对正常口腔黏膜组织MMP1、TIMP1和TIMP3的蛋白和mRNA表达。结果在口腔鳞状细胞癌组织和癌旁正常口腔黏膜组织中MMP1蛋白的阳性表达率分别为82.4%（42/51）和17.6%（9/51）,两者比较有统计学意义（P〈0.05）,mRNA的相对表达量为高于正常口腔黏膜组织的相对表达量（P〈0.05）;TIMP1蛋白的阳性表达率分别为72.5%（37/51）和94.1%（48/51）,差异有统计学意义（P〈0.05）,mRNA的相对表达量差异有统计学意义（P〈0.05）;TIMP3蛋白的阳性表达率分别为78.4%（40/51）和100%（51/51）,差异有统计学意义（P〈0.05）,mRNA的相对表达量差异有统计学意义（P〈0.05）。在肿瘤组织中MMP1/TIMP1/TIMP3蛋白的表达率和mRNA的相对表达量与组织病理学分级﹑有无淋巴结转移差异有统计学意义（P〈0.05）,而与患者的年龄无关（P〉0.05）。结论 MMP1的高表达与TIMP1、TIMP3低表达与口腔鳞状细胞癌的发生、组织病理学分级﹑淋巴结转移有关,可用于判断预后及评估转移风险。     

pSS患者唇腺细胞中Bcl-2的表达及其与细胞色素C的关系

目的：探讨原发性干燥综合征（pSS）患者唇腺细胞凋亡的发生机制。方法：收集临床患者，将其分为pSS组和非干燥综合征组。采用免疫组化的方法检测两组患者唇腺细胞Bcl一2蛋白的表达及含量；制备唇腺组织匀浆及提取线粒体，检测CytC的含量。使用SPSSl4．0软件对两组数据进行统计学分析。结果：pSS患者唇腺细胞中Bc1-2蛋白的表达和线粒体CytC的含量显著低于非干燥综合征组；pSS患者唇腺细胞胞浆CytC含量显著高于非干燥综合征组。结论：pSS的发病机制与Bcl-2蛋白及CytC诱导的细胞凋亡有关。     

兜甲蛋白和细胞色素P4503A5在口腔黏膜下纤维化中的表达及意义

目的探讨兜甲蛋白（LOR）和细胞色素P450 3A5（CYP 3A5）在口腔黏膜下纤维化颊黏膜（OSF）和正常颊黏膜中的表达以及在上皮防御作用中的意义。方法首先采用免疫组化染色检测66例OSF颊黏膜和14例正常颊黏膜中LOR和CYP 3A5这2种蛋白的表达和定位,然后采用Western blot和RT-PCR方法分别在OSF患者颊黏膜和正常人颊黏膜中检测LOR和CYP 3A5的蛋白和mRNA表达。结果42例（63.6%）OSF呈LOR阳性表达,其在早、中期之间差异有统计学意义（P<0.05）,而中、晚期之间差异无统计学意义（P＞0.05）;正常颊黏膜中CYP 3A5均呈阳性表达,5例（7.6%）OSF出现棘细胞弱阳性表达,33例（50%）出现内皮细胞弱阳性表达,与病理分期呈负相关（P<0.05）。RTPCR显示LOR和CYP 3A5 mRNA在OSF与正常黏膜中表达的差异均有统计学意义（P<0.05）;而Western blot检测显示,只有CYP 3A5蛋白表达在两者间差异有统计学意义（P<0.05）。结论LOR和CYP 3A5的异常表达是OSF黏膜上皮防御能力改变的表现,它们在OSF发生发展和癌变过程中可能发挥了重要作用。     

Livin���˳���ϸ�����еı�Ｐ�������о�

目的检测凋亡抑制蛋白Livin在人成釉细胞瘤（ameloblastomas，ABs）中的表达，探讨ABs发生发展中Livi。的作用及其与ABs临床生物学行为的关系。方法2007--2012年中国医科大学口腔病理科的存档蜡块选取80例ABs标本和10例口腔鳞状细胞癌（oscc）标本，以及同期口腔颌面外科门诊术中取材的30例ABs标本和智齿拔除术中的10例正常黏膜（NOM），应用免疫组化法、Western—blot方法和RT—PCR法分别检测Livin蛋白和mRNA的表达情况，并进行统计学分析。结果（1）免疫组化：Livin在NOM中的表达呈阴性；在OSCC中Livin阳性表达；ABs中的阳性率为88．75％（71／80），以中度阳性和强阳性表达为主，定位于牙源性上皮的外周柱状或立方状细胞及中心星网状层胞质中。（2）Western—blot：Livin在ABs中的表达高于NOM（P〈0．05），而在ABs和OSCC组织中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）RT—PCR：在ABs和OSCC中Livin的表达高于NOM，差异有统计学意义（尸〈0．05）。结论ABs中Livin在mRNA水平和蛋白质水平上表达都上调，并且Livin有胞浆的表达，提示Livin在ABs的发生和发展中发挥重要的功能。     

舍格伦综合征患者唇腺组织中骨桥蛋白的表达

目的：研究原发性舍格伦综合征（Primary SS）和继发性舍格伦综合征（Secondary SS）患者唇腺组织中骨桥蛋白（OPN）的表达。方法：经病理学检查确诊的SS患者40例,其中原发性SS患者15例,继发性SS患者25例,应用免疫组织化学方法检测患者唇腺组织中的OPN表达量,20例健康志愿者作为正常对照。结果：舍格伦综合征（SS）患者唇腺组织中OPN表达较正常健康人增强。SS患者唇腺组织中,OPN染色阳性率为65.38%,其中,原发性SS阳性率为73.3%,继发性SS阳性率为60.0%,与正常对照的10%比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但SS二类型之间比较无统计学意义（P〉0.05）。结论：OPN表达在SS患者唇腺组织中均明显增加,提示OPN可能参与了SS疾病的发生和发展过程。     

骨髓基质细胞抗原2在原发性舍格伦综合征中的表达及意义

目的: 检测骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal antigen-2,BST-2)在原发性舍格伦综合征（primary Sjögren's syndrome,pSS）患者唇腺及外周血淋巴细胞中的表达,探讨BST-2对淋巴细胞增殖的作用,以期为原发性舍格伦综合征的发病机制研究及药物治疗靶点的开发提供理论基础。方法: 应用实时定量PCR技术检测30例pSS患者及30例对照患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）和唇腺组织中BST-2的表达水平,并与临床指标进行相关性分析。采用免疫组织化学对唇腺组织中的BST-2进行定位及半定量分析。通过分选外周血中的淋巴细胞,实时定量 PCR明确BST-2异常表达的淋巴细胞亚群,唇腺免疫组织化学连续切片染色验证。慢病毒转染人B淋巴细胞系以过表达BST-2,CCK8检测BST-2对细胞增殖活性的影响,流式细胞术分析其对细胞凋亡的影响。采用SPSS 16.0软件包对数据进行统计学分析。结果: 与对照患者相比,pSS患者唇腺组织中BST-2表达升高,阳性细胞主要是浸润腺体的B淋巴细胞。同时,pSS患者外周血CD19⁺ B细胞BST-2与对照组相比表达升高。过表达B细胞中的BST-2可以促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论: BST-2在pSS患者外周血及唇腺组织中表达升高,BST-2主要定位于B淋巴细胞。推测BST-2通过促进B细胞在腺体中的增殖和浸润,从而参与pSS的发生与发展。     

IFN-α在原发性舍格伦综合征患者唇腺组织中的表达

目的:检测原发性舍格伦综合征患者唇腺组织中IFN-α的表达水平,探讨IFN-α在原发性SS发病中的作用。方法:对37例原发性SS患者和24例非SS患者的唇腺组织进行IFN-α免疫组化染色,比较分析其在两组之间的差异。使用SAS6.12统计软件包对数据进行t检验。结果:37例原发性SS患者中,22例(59.46%)表达阳性,15例(40.54%)表达阴性;24例非SS组患者中3例(12.5%)表达阳性,其余21例(87.5%)均表达阴性。2组之间有显著差异。结论:IFN-α在原发性舍格伦综合征患者唇腺组织中存在表达异常。     

Smac在干燥综合征患者唇腺组织中的表达

目的:检测干燥综合征患者唇腺组织中Smac的表达水平,探讨Smac在干燥综合征发病中的作用。方法:分别采用免疫组化和Western-blot方法对40例干燥综合征患者和22例非干燥综合征患者的唇腺组织中Smac蛋白进行检测,比较分析其在2组之间的差异。使用SPSS 12.0软件对数据进行t检验。结果:干燥综合征患者唇腺组织中Smac蛋白的表达明显高于非干燥综合征患者,2组之间差异具有显著性(P<0.05)。结论:Smac在干燥综合征患者唇腺组织中表达明显增高,提示其可能参与了发病过程。     

Ki-67在腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织中差异表达的研究

目的：通过检测Ki-67在腮腺多形性腺瘤及瘤旁组织（肿瘤外1.0cm）中的差异表达,探讨其作为界定多形性腺瘤安全切除边界指标的可行性。方法：采用Real-time PCR、RT-PCR和Western blot检测Ki-67在原发多形性腺瘤与瘤旁组织中mRNA和蛋白水平的表达情况;采用免疫组化检测原发腮腺多形性腺瘤石蜡组织标本中Ki-67蛋白的表达情况。结果：RT-PCR和Real-time PCR结果显示：Ki-67在瘤旁组织中的表达显著低于肿瘤组织中的表达;免疫组化和Western blot结果显示Ki-67在瘤旁组织中未见明显表达。结论：多形性腺瘤瘤旁组织中Ki-67的表达明显低于肿瘤组织,提示肿瘤外1.0cm为安全切除边界。     

原发性舍格伦综合征患者唇腺Bax蛋白的表达及与细胞色素C的相关性

目的探讨原发性舍格伦综合征患者唇腺细胞凋亡的发生机制。方法依照唇腺活检结果,将病理分级阳性40例设为实验组,阴性的30例设为对照组。采用免疫组化方法检测2组患者唇腺Bax蛋白的表达及含量;制备唇腺组织匀浆及提取线粒体,检测细胞色素C(CytC)的含量。使用SPSS14.0软件对两组数据进行统计学分析。结果实验组中Bax蛋白主要表达在腺上皮、导管上皮细胞,积分吸光度值为51.20±0.57,对照组中Bax蛋白仅表达在间质细胞,积分吸光度值为22.03±0.25,两组表达有显著差异(P<0.05);实验组中胞浆CytC含量为(5.98±0.24)mg/mL,线粒体CytC含量为(0.44±0.14)mg/mL,对照组中胞浆CytC含量为(2.19±0.29)mg/mL,线粒体CytC含量(0.87±0.09)mg/mL,两组表达有显著差异(P<0.05)。结论原发性舍格伦综合征的发病机制与Bax蛋白及CytC诱导的细胞凋亡有关。     

基质金属蛋白酶-3在舍格伦综合征患者唾液和唇腺中的表达

［摘要］ 目的 研究基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3,MMP 3）在舍格伦综合征患者唇腺和唾液中的表达水平,以及明确其表达水平与病理分级的关系。方法 采集35例舍格伦综合征患者（实验组）和20例黏液腺囊肿患者（对照组）的唇腺和唾液,应用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测唾液中MMP-3的表达水平,应用免疫组化方法观察唇腺中MMP-3的表达,使用图像分析软件（IPP 6.0）定量分析两组唇腺中MMP 3的表达强度,并将舍格伦综合征患者按照其病理分级分为低的1、2级和高的3、4级两组。结果 MMP-3在实验组唾液和唇腺中的表达高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;MMP-3在病理分级高的患者唾液和唇腺中表达水平高于病理分级低的患者,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 舍格伦综合征患者唇腺中的MMP-3可能参与了腺泡以及腺体基质的破坏,导致疾病的发生;唾液以及唇腺中MMP-3的表达水平可能成为舍格伦综合征的一项检测指标, 并为临床诊治提供参考依据。     

人唇腺中CCL28表达的组织学研究

目的研究CCL28mRNA和蛋白质在人唇腺中的表达及分布，探讨CCL28在口腔免疫保护中的作用。方法应用寡核苷酸探针原位杂交（SABC法免疫组化染色）和免疫组化SP法分别检测13例唇腺标本中CCL28mRNA和蛋白质的表达。结果在原位杂交中．所有唇腺标本均呈CCL28mRNA阳性染色。在免疫组化中，所有唇腺标本也均可见阳性染色。染色部位为唇腺腺泡上皮细胞、腺管上皮细胞和腺泡内黏液，但染色深度不同。结论唇腺组织中确实表达CCL28．且该CCL28可以随唾液进入口腔中．     

细胞色素C在原发性干燥综合征患者唇腺组织中表达的研究

目的检测原发性干燥综合征患者唇腺组织中细胞色素C(CytC)的表达水平,探讨CytC在原发性干燥综合征发病中的作用。方法分别采用免疫组化和逆转录-聚合酶链式方法对40例原发性干燥综合征患者和22例非干燥综合征患者的唇腺组织中CytC蛋白和mRNA进行检测,比较分析其在2组之间的差异。使用SPSS14.0软件对数据进行t检验。结果原发性干燥综合征患者组织中CytC蛋白和mRNA的表达高于非干燥综合征患者,2组之间具有显著性差异。结论 CytC在原发性干燥综合征患者唇腺组织中存在表达异常。     

颞下颌关节骨关节病髁突软骨细胞雌激素受体β差异表达的研究

目的 探讨大鼠颞下颌关节骨关节病髁突软骨细胞雌激素受体β（ERβ）的差异表达。方法 25只SD大鼠随机分为实验组（15只）和对照组（10只）。实验组以去除左侧 部分关节盘的方法建立大鼠颞下颌关节骨关节病模型，术后3个月处死动物，取其髁突软骨细胞进行培养，采用免疫组化、逆转录聚合酶链反应、肽质量指纹谱（PMF）和Western blot等方法观察软骨细胞中ERβ蛋白和mRNA的表达。结果 PMF显示，ERβ是软骨细胞线粒体蛋白质组的成分，Western blot、逆转录聚合酶链反应和免疫组化结果显示，ERβ在实验组细胞和线粒体中表达水平较对照组降低（P<0.01）。结论 ERβ可能通过线粒体途径参与了颞下颌关节骨关节病的病理过程。     

Toll样受体7、8、9在原发性舍格伦综合征中的表达

目的:检测原发性舍格伦综合征(primary Sjogren's syndrome,pSS)患者血细胞中Toll样受体(TLR)7、8、9的表达水平,并检测TLR7、9在pSS患者腮腺组织中的表达.方法:采用实时定量PCR,对37例pSS患者和24例对照组患者血细胞中TLR7、8、9的水平进行检测,分析2组之间的差异.应用免疫荧光法和免疫组化分别检测TLR7和TLR9在pSS患者腮腺组织中的表达.应用SAS6.12软件包,对数据进行t检验.结果:实时定量PCR显示,pSS组的TLR7、9的mRNA表达量显著高于对照组,2组之间有显著差异(P<0.05),pSS组的TLR7是对照组的2.17倍,pSS组的TLR9是对照组的2.33倍.而TLR8在2组之间无显著差异(p>0.05).免疫荧光和免疫组化发现,TLR7、9在pSS组患者腮腺组织中的导管上皮细胞、淋巴细胞和上皮岛均为阳性;而对照组腮腺组织中仅导管上皮细胞为阳性.结论:TLR7和TLR9在原发性舍格伦综合征患者中存在表达异常.