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1.
反义寡核苷酸体外抑制丙型肝炎病毒的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
研究反义寡核苷酸体外抑制丙型肝炎病毒(HCV)的方法。方法以重组丙型肝炎病毒(pCD-HCV)转染的H9细胞为对象,通过半定量逆转录聚合酶链反应和dotELISA检测HCVmRNA和抗原表达的变化,观察与HCV结构区(包括AUG)互补和同源以及随机的硫代磷酸化寡核苷酸(PS-ASON、PS-ODN、rPS-ODN)对HCV的抑制作用。结果PS-ASON和PS-ODN可有效地进入靶细胞并在体外与靶基因杂交结合,终浓度为10μmol/L的PS-ODN、rPS-ODN对HCV均无抑制作用,但PS-ASON可明显降低HCVmRNA和抗原表达水平,具有药物浓度和时间依赖效应,脂质体修饰可增强PS-ASON的反义抑制作用,磷酸钙修饰却无此作用。结论与HCV互补的PS-ASON是HCV的反义寡核苷酸,在翻译水平上具有反义抑制作用。 相似文献
2.
恶性疟原虫裂殖子表面蛋白基因在减毒伤寒杆菌诱导株中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 用含PLtetO启动子的pZE11质粒在减毒伤寒杆菌CVD908疫苗株中表达恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白。方法 将克隆有恶性疟原虫裂殖子表面蛋白C末端基因(MSP1-42)的重组pZE11质粒用电穿孔转化法转化入减毒伤寒杆菌CVD908/tetR疫苗株中,用SDS-PAGE、免疫印迹反应和免疫荧光反应检测MSP1-42在CVD908/tetR株中的体内外四环素诱导表达。结果 构建了CVD08 相似文献
3.
应用PCR-SSCP方法初步了从华南地区收集的3份畸胎组织标本人微小病毒B19分离株,其意泳图谱与国外参数株相同,提示两者衣壳蛋白VP1编码区的基因结构可能无差异。 相似文献
4.
氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用 总被引:1,自引:0,他引:1
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)是一种强的单核细胞趋化因子,在体外可由多种细胞分泌,包括血管平滑肌细胞(SMC)。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)及氧化修饰极低密度脂蛋白(OX-VLDL)对培养的兔主动脉SMCMCP-1mRNA表达的作用。结果表明,培养的SMC可表达MCP-1mRNA,而且SMC暴露于OX-LDL、VLDL及OX-VLDL后,其MCP-1mRNA表达水平明显增高,分别增高约11倍、6倍和20倍。因此我们认为OX-LDL、VLDL及OX-VLDL可以刺激培养的兔主动脉SMCMCP-1mRNA的表达。 相似文献
5.
通过118例肾病患者和50例健康人血浆一氧化氮、过氧化脂质、和抗氧化物:PU-SOD、P-β-CAR、P-VitE的含量的变化,结果发现肾功能Ser、BUN越高,P-NO,P-LPO含量越高,抗氧化物:PU-SOD、P-β-CAR、P-VitE含量越低,与正常对照组相比均有显著性差异。 相似文献
6.
采用Doppler超声测量CHD、HD、HCD-CHD及s四组AT、ET、AT/ET、ICT、PEP/ET、PEP、IVRT、AcTE、AcTE/MVOT,结果CHD、HD、HCD-CHD三组IVRT明显升高(P<0.01),HD、CHD与HCDCHD之IVRT差异有显著性(P<0.01),NS、CHD、HD与HCD-CHD组PEP/ET、ICT、PEP差异均有显著性(P<0.05),HCD-CHD组PEP/ET、ICT、PEP值升高,NS、HD与CHD、HCD-CHD、AT/ET差异有显著性(P<0.05),CHD及HCD-CHD组AT/ET下降,HR、AT、ET、ACTE各组间差异均无显著性(P>0.05),Doppler超声时间指标评价左室功能具有一定价值。 相似文献
7.
PDGF—B基因的膜型表达产物促进血管平滑肌细胞增殖和胶原合成 总被引:2,自引:0,他引:2
考察PDGF-B基因的膜型表达产物对血管平滑肌细胞(VSMCs)增生、胶原合成的影响。制备供转导人PDGF-B基因的重组逆转录病毒,感染NIH3T3细胞,受染NIH3T3细胞经筛选、扩增后,制备细胞膜上表达产物PDGF-BB以观察其对VSMCs生长的影响,并以3H-ProLine掺入率评估该重组蛋白对VSMCs胶原合成的影响。结果:重组逆转录病毒介导PDGF-B基因转移并表达出具有生物学活性的重组PDGF-BB,免疫荧光细胞化学染色证实其表达;该膜型重组蛋白可促进VSMCs增殖和胶原合成。 相似文献
8.
目的 观察重组人白介素10(rhIL-10)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 VSMC并分别接受不同浓度rhIL-10、肿瘤坏死因子(TNF-α)、血小板源性生长因子(PDGF-BB)的刺激,采用MTS/PES 法确定VSMC的增殖状态并与对照组比较。结果 与对照组相比,TNF-α和PDGF-BB均对VSMC增殖具有明显的刺 激作用(P<0.05)。单独应用rhIL-10对血管平滑肌细胞生长没有影响。在TNF-α和PDGF-BB分别刺激下,rhIL-10均可 抑制VSMC的生长(P<0.05)。结论 rhIL-10可抑制细胞因子和生长因子诱导的VSMC增殖。 相似文献
9.
目的探讨脑出血患者氧化与抗氧化系统功能状况及其临床意义。方法检测133例脑出血患者和100例健康对照者血浆一氧化氮(P-NO)含量、血浆维生素C(P-VC)含量、血浆维生素E(P-VE)含量、血浆过氧化脂质(P-LPO)含量、血浆超氧化物歧化酶(P-SOD)活性、红细胞超氧化物歧化酶(E-SOD)活性、红细胞过氧化脂质(E-LPO)含量。结果与对照组比较,患者组的P-NO、P-LPO、E-LPO平均值均显著升高(P<0.001),P-VC、P-VE、P-SOD、E-SOD平均值均显著降低(P<0.001),逐步回归分析发现,患者临床神经功能缺失程度积分与P-NO、P-VC、E-LPO值相关最为密切,而颅内血肿量却与P-NO、P-VE、E-LPO值相关最为密切。结论脑出血患者体内氧化抗氧化平衡严重失调,且这一病理改变在脑出血后继发性脑损害的形成过程中起着重要的作用。 相似文献
10.
以HSV-1为抗原,免疫BALB/C鼠,取其脾细胞在PGE介导下与SP2/0细胞常规融合,IFA法筛选鉴定,反复克隆,共获得7株能稳定、持续分泌抗HSV的McAb的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为87~103条之间,Ig类型分别为LgG_1、IgG_(2g)、IgG_3,腹水抗体效价在10 ̄(-5)~10 ̄(-7)之间免疫沉淀。SDS—PAGE分析,2株与132K多肽发生特异性反应,只具有HSV-1型特异性,其余3株与120~128K多肽,2株与60K多肽发生特异性反应,具有HSV型共同抗原特异性。7株McAb与CMV均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于HSV的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。 相似文献
11.
癫痫患者血浆和脑脊液中β-EP、DynA、NT、AVP和SS含量的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的测定癫痫患者血浆和脑脊液中β-EP、DynA、NT、AVP和SS的水平,以探讨这些物质在癫痫患者的变化及临床意义。方法癫痫患者40例,均符合临床诊断,另选无癫痫者作对照。全部研究对象均于确诊后按要求收集血浆和脑脊液(CSF)标本,用放射免疫法测定β-EP、DynA、NT、AVP和SS水平。结果与对照比较,癫痫患者血浆和CSF中β-EP,DynA和NT升高(P<0.05),而AVP和SS降低(P<0.01)。β-EP和DynA升高与癫痫患者中枢神经系统(CNS)损伤程度呈正相关(P<0.05),而AVP和SS降低则与癫痫后智力低下相关(P<0.05)。结论提示癫痫患者血浆和脑脊液中β-Ep、DynA、NT、AVP和SS可以发生改变,测定这些物质对研究癫痫患者的临床有一定参考价值。 相似文献
12.
氨甲酰磷酸合成酶I(CPSI)cDNA全序列基因片段与pSV2载体的重组及重组质粒pSV2-CPScf在7402人肝癌细胞、CHO细胞和NIH/3T3细胞中的表达结果表明,pSV2-CPScf转染的以上3株细胞均可稳定、高效地表达CPSI。通过核Run-off转录活性的检测和Northern杂交证实,表达的CPSI转录产物结构完整。提示CPSI肝组织特异表达主要与转录改变有关。 相似文献
13.
抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究 总被引:1,自引:1,他引:0
以HSV-1为抗原,免疫BALB/C鼠,取其脾细胞在PGE介导下与SP2/0细胞常规融合,IFA法筛选鉴定,反复克隆,共获得7株能稳定、持续分泌抗HSV的McAb的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为87 ̄103条之间,Ig类型分别为IgG1、IgG2b、IgG3,腹水抗体效价在10^-5 ̄10^-7之间免疫沉淀。SDS-PAGE分析,2株与132K多肽发生特异性反应,只具有HSV-1型特异性,其余3 相似文献
14.
神经系统疾病患者血清和脑脊液髓鞘碱性蛋白及其抗体的ELISA定量研究 总被引:5,自引:0,他引:5
用简易的髓鞘碱性蛋白(MBP)及其抗体(Anti-MBP)酶联免疫吸附定量测定(ELISA)法对6组共337例神经系统疾病患者进行检测,其中脊髓压迫症(CMP)36例,多发性硬化(MS)33例,脑血管疾病(CVD)34例,中枢神经系统感染性疾病(ID)31例,癫痫(EP)161例和其他神经系统疾病(OND)42例。结果显示:CMP、MS.CVD、ID和EP5组血清MBP均值明显高于OND组(P<0.01),其中又以急性外伤所致脊柱骨折伴截瘫为主(33例)的CMP患者血清MBP值最高,与MS组比较P<0.05,与CVD、ID和EP组比较P<0.01。CVD患者CSFMBP均值也明显高于OND组(P<0.05)。本法检测6组血清和CSF的Anti-MBP含量差异不显著(P>0.05)。 相似文献
15.
本文采用PCR方法扩增了恶性疟原虫云南株(PFD-3/YN)环子孢子蛋白(CSP)部分基因,将扩增的基因片断克隆于M13测序载体进行了基因序列测定。用PCGENE软件对恶性疟原虫不同虫株CSP基因序列进行了一系列比较分析。其结果表明恶性疟原虫虫株间CSP基因存在多态性,PFD-3/YN株CSP基因序列与T4、Welcome、NF54、3D7及7G8等虫株均有不同程度的差异。 相似文献
16.
胃癌耐药细胞株耐药谱的体外实验 总被引:5,自引:0,他引:5
观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物耐的耐受情况,方法:胃癌细胞系SGC7901在体外分别与长春新碱(VCR),5氟尿嘧啶(5-Fu),阿霉素(ADM)及氨甲喋呤(MTX)作用,获得SGC7901/VCR,SGC7901/ADM,SGC7901/5-Fu及SGC7901/MTX4个耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对VCR,ADM,5-Fu,MTX,顺铂(CDDP)以及丝裂霉素C(MMC)的敏 相似文献
17.
MVP和P—MVP方案治疗晚期非小细胞肺癌的效果 总被引:1,自引:0,他引:1
①目的 探讨MVP和P-MVP方案对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的效果及免疫功 能的影响。②方法选择42例晚期NSCLC分别进行MVP及P-MVP方案各3周期的化疗、不良反应及免疫学指标、AgNORs变化。③结果MVP组有效率40.0%,P-MVP组54.5%,两组比较差异无显著性(χ^2=0.898,P>0.05);NSCLC病人的CD3,CD4,CS4/CD8均低于对照组(t=2.082~3.27 相似文献
18.
研究白细胞整体合素CR3α亚基的Ⅰ结构域在配体结合中的作用。方法克隆CD11b的Ⅰ结构域,用重叠PCR的方法将其与信号肽DNA连接,克隆到表达载体PEE6HCMV.GS,转化CHO-K1细胞。表达的Ⅰ-结构域经SP-Sepharose和mono-S柱纯化后,与C3bi进行配体结构实验。结果用SDS-PAGE测得重组的Ⅰ结构域分子量为29KD。重组的Ⅰ结构域可以与C3bi结合,Scatchard分析 相似文献
19.
20.
中国人丙型肝炎病毒囊膜蛋白2HVR1 cDNA的序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:了解中国HCV流行株高变区1(HVR1)的特点。方法:对来自山东(SD)、上海(SH)两地患者血清RNA进行逆转录-巢式PCR,扩增HCV囊膜蛋白2基因片段,用PCR直接测序法对该片段进行序列测定。结果:(1)扩增片段(命名为P388)对应于日本HCV-J株序列核苷酸1439 ̄1826位(氨基酸位371 ̄498);(2)中国人HCV HVR1位于氨基酸位384 ̄410,与发表的HCVⅡ型HV 相似文献