蟾酥注射液对恶性腹水的实验研究

目的:探讨蟾酥注射液对恶性腹水的作用机理。方法:将30只荷瘤昆明小鼠随机分为3组。给小鼠腹腔注射药物:蟾酥注射液组(简称治疗组1:注射蟾酥注射液每次1.5mL/只)、环磷酰胺组(简称治疗组2:注射环磷酰胺,每次以生理盐水稀释0.5mL中含0.5mg的环磷酰胺/只)和生理盐水组(简称对照组:每次注射生理盐水0.5mL/只。),每组10只。全部组隔离5天注射1次,共给药3次。每次注射前,称体重1次,最后1次注射后5天,采集血液,检测T淋巴细胞CD3、CD4、CD8,肿瘤坏死因子。结果:显示小鼠体重治疗组与对照组比较P<0.05,治疗组之间比较P>0.05;T淋巴细胞CD3治疗组与对照组比较P<0.05,治疗组之间比较P>0.05,CD4治疗组与对照组比较P>0.05,治疗组之间比较P>0.05;CD8治疗组与对照组比较P<0.05,治疗组之间比较P>0.05;肿瘤坏死因子治疗1组与对照组比较P<0.01,治疗2组与对照组比较P>0.05,治疗组之间比较P<0.05。结论:蟾酥注射液对恶性腹水具有抑制作用,能够提高免疫功能,其对免疫功能的影响,主要是通过提高CD、降低CD,使CD/CD比值降低体现,与环磷酰胺相比效果更优。     

斑蝥酸钠和肿节风对腹水型肝癌H22细胞及荷瘤小鼠肝脏能量代谢与环核苷酸代谢的影响

实验结果表明:斑蝥酸钠和肿节风能改善肿瘤细胞和荷瘤小鼠的能量代谢,提高过氧化氢酶活力,即降低荷瘤小鼠的癌毒激素水平,故改善能量代谢可能是它们控制和缓解癌变的途径之一;H22癌细胞的 cAMP 与 cGMP 的比值明显低于正常鼠肝,经斑蝥酸钠治疗后的荷瘤小鼠癌细胞的 cAMP 和 cAMP/cGMP 均高于未经治疗的荷瘤小鼠,同时测得癌细胞 cAMP-磷酸二酯酶(低 Km)明显下降。因此,斑蝥酸钠的抗癌作用可能与降低cAMP-磷酸二酯酶活性从而提高癌细胞的 cAMP 有关。     

蟾酥注射液对恶性腹水的实验研究

目的：探讨蟾酥注射液对恶性腹水的作用机理。方法：将30只荷瘤昆明小鼠随机分为3组。给小鼠腹腔注射药物：蟾酥注射液组（简称治疗组1：注射蟾酥注射液每次1．5ml/只）、环磷酰胺组（简称治疗组2：注射环磷酰胺，每次以生理盐水稀释0．5mL中含0．5rag的环磷酰胺／只）和生理盐水组（简称对照组：每次注射生理盐水0．5mL／只。），每组10只。全部组隔离5天注射1次，共给药3次。每次注射前，称体重1次，最后1次注射后5天，采集血液，检测T淋巴细胞CD3、CD4、CD8，肿瘤坏死因子。结果：显示小鼠体重治疗组与对照组比较P〈0.05．治疗组之间比较P〉0．05；T淋巴细胞CD3治疗组与对照组比较P〈0．05，治疗组之间比较P〉0．05，CD4治疗组与对照组比较P〉0．05，治疗组之间比较P〉0．05；CD8治疗组与对照组比较P〈0．05，治疗组之间比较P〉0．05；肿瘤坏死因子治疗1组与对照组比较P〈0．01，治疗2组与对照组比较P〉0．05，治疗组之间比较P〈0．05。结论：蟾酥注射液对恶性腹水具有抑制作用，能够提高免疫功能，其对免疫功能的影响，主要是通过提高CD3、降低CD4，使CD4／CD8比值降低体现，与环磷酰胺相比效果更优。     

大蒜素注射液对S180肉瘤和H22肝癌移植瘤小鼠的肿瘤抑制作用

目的:研究大蒜素注射液以及口服液对S180和H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫器官的影响.方法:建立S180肉瘤、肝癌H22荷瘤小鼠动物模型,注射液连续腹腔注射给药8d后脱颈椎处死剥离肿瘤、胸腺、脾脏,称质量,计算抑瘤率及胸腺、脾脏、肝脏指数.结果:大蒜素注射液7.5 μg/kg、15 μg/kg、30μg/kg、60μg/kg、120μg/kg对H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为23.5％、31.5％、39.4％、40.4％、52.4％,其中120μg/kg剂量组相对于模型组有显著性差异(P＜0.05);对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为11.9％、15.9％、18.3％、33.7％、38.4％,其中120μg/kg剂量组相对于模型组有显著性差异(P＜0.05).结论:大蒜素注射液对H22、S180荷瘤小鼠具有良好的抑制作用,且基本不影响免疫器官.     

十枣汤对腹水型荷瘤小鼠血管内皮生长因子的影响

[目的]观察十枣汤对腹水型荷瘤小鼠血管内皮生长因子(VEGF)的影响。[方法]使用随机平行对照方法,将6～7周龄健康昆明种小鼠90只随机分为正常对照组、荷瘤模型组、5-FU组、十枣汤大、中、小剂量组,每组15只。正常对照组不予处理,其余小鼠局部消毒后,腹腔内注射腹水型H22肝癌瘤细胞株0.2mL/只。次日起5-FU对照组腹腔内注射5-FU 25mL/kg,隔日1次,共5次。十枣汤组小鼠按27g/kg、81g/kg、160g/kg不同剂量等体积十枣汤灌胃,0.4mL/次,1次/d,连续10天。荷瘤模型空白对照组等容积生理盐水灌胃。各组末次给药24h后(腹腔传代第7日),称体重,脱颈椎处死,眼眶取血,抽吸乳白色浓稠腹水。检测血清VEGF、腹水VEGF。[结果]血清VEGF模型组、5-FU组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组较正常对照组血清VEGF均有不同程度增高(P<0.01);与模型组相比,均有显著性差异(P<0.05);与5-FU组相比,中药组均无显著性差异(P>0.05);其中中药低剂量组与中药高剂量组相比有显著性差异(P<0.05)。腹水VEGF 5-FU组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组较模型组腹水VEGF均有不同程度降低(P<0.05);与5-FU组相比,各中药低剂量组有显著性差异;中药中、高剂量无显著性差异(P>0.05);中药低剂量与中药中、高剂量均有显著性差异(P<0.05);中药中剂量与中药高剂量相比较无显著性差异(P>0.05)。[结论]十枣汤对腹水型荷瘤小鼠血清VEGF、腹水VEGF有与5-FU类似的抑制作用,并与剂量呈量效关系,这可能是十枣汤治疗恶性腹水,延长生存期、改善生存质量的作用机制。     

蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞凋亡的影响

[目的]探讨醇溶性蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠肝癌细胞凋亡的影响。[方法]用乙醇溶解蟾蜍分泌物原浆,采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(EET),将其作用于H22荷瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率,应用光、电镜法观察H22肝癌细胞凋亡的变化。[结果]蟾蜍毒素组和氟脲嘧啶组的肿瘤抑制率分别是25.6%和30.8%(P<0.05),与对照组比较,肿瘤团块较小,细胞体积较小,异型性不明显,病理性核分裂较少,间质血管较少,坏死现象较轻。电镜下可见凋亡小体形成。[结论]蟾蜍毒素可通过诱导H22荷瘤小鼠肝癌细胞凋亡来达到抗肿瘤的作用。     

中药溪黄草对小鼠肝癌H22荷瘤抑制作用的实验研究

中药溪黄草有清热利湿、凉血散瘀之功效。曾与其他中药配伍用于治疗急性肝炎、急性胆囊炎、肠炎、痢疾等消化系统疾病。我们应用抗肿瘤中药时发现溪黄草有抑制人肝癌细胞增殖的作用 ,为此做了溪黄草注射液对小鼠移植荷瘤抑制作用的研究 ,其结果如下。1　材料与方法1.1　药物　溪黄草注射液 (肿瘤研究所提供 ) ,水醇法提取制备 ,符合中华人民共和国药典注射剂质检要求 ( 1995年版 ) ,生药浓度含量为 0 .2 5ｍｇ/ｍｌ。1.2　实验动物　昆明小鼠由哈医大肿瘤所动物室提供。1.3　瘤株　小鼠肝癌Ｈ2 2 细胞株从北京实验动物中心引进。1.4　实验用…     

姜黄素对小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)生物学行为的影响

目的研究姜黄素对小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)生长和转移行为的影响。方法体外实验中用15~250μmol/L姜黄素分别处理HCa-F细胞48h,以MTT法检测HCa-F细胞的生长活性;以生长曲线评估姜黄素对细胞增殖的影响;以流式细胞仪检测姜黄素对细胞周期分布的影响。体内实验中,于615小鼠腹腔、足垫接种HCa-F细胞,通过ip给药的方法,观察姜黄素对腹腔接种HCa-F细胞的615小鼠生存率的影响和对HCa-F细胞在615小鼠淋巴道转移的影响。结果姜黄素可抑制HCa-F细胞的生长,对HCa-F细胞生长抑制率为7.23%~82.23%,呈剂量依赖性,IC50为51.48μmol/L。以非细胞毒性最大剂量15μmol/L姜黄素作用48h后,HCa-F细胞的群体倍增时间增加,生长速度受到抑制,细胞周期被重新分布,阻滞于S期。姜黄素ip给药50mg/kg抑制小鼠腹水瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存期,使瘤细胞淋巴道转移率从70%下降到40%。结论姜黄素可抑制小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)的增殖与转移。     

乌三颗粒提高腹水型荷瘤小鼠生存质量实验研究

目的：探讨乌三颗粒提高腹水型荷瘤小鼠的生存质量。方法：昆明种小鼠腹腔分别接种腹水型S180和肝癌（HePA）癌性腹水，用乌三颗粒灌胃10天，记录各组小鼠死亡时间，统计生存期延长率。结果：乌三颗粒在16.0g/kg剂量下，对S180和HepA癌性腹水型小鼠生存期延长率分别达55%和57%以上。结论：乌颗粒能明显延长恶性肿瘤小鼠的生存期。     

蟾酥总蟾蜍甾烯对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及组织中代谢物的初步分析

目的:评价蟾酥总蟾蜍甾烯(total bufadienolides from toad venom,TBFs)对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用,同步对体内组织中的代谢物进行初步分析.方法:采用HPLC和LC-MS对制备的受试药TBFs的化学组成进行表征;采用灌胃和腹腔注射2种方式给予H22荷瘤小鼠高、中、低3个剂量的受试药,给药后第13天处死,剥取瘤组织,称重,计算抑瘤率;同时取心、肝、脾、肺、肾各脏器组织,采用HPLC和LC-MS对其中的药物进行初步分析.结果:在对照品对照,在线紫外吸收光谱和质谱数据的基础上,明确了受试药TBFs的化学组成,以日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、酯蟾毒精、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基和酯蟾毒配基为主.与空白对照组比,灌胃给予TBFs对H22荷瘤小鼠的体重无影响,低(5 mg· kg-1),中(10 mg·kg-1),高剂量组(20 mg·kg-1)的抑瘤率分别为14.76％,16.38％,10.32％;腹腔注射给予TBFs,与空白对照组比,中、高剂量组在给药第5天时体重增加较慢,第13天时恢复正常;低(1.5mg· kg-1),中(3 mg·kg-1),高剂量组(6 mg·kg-1)的抑瘤率分别为17.30％,19.80％,40.95％,呈一定的剂量依赖性.小鼠心、肝、脾、肺、肾脏器组织HPLC分析表明,肝组织中存在蟾蜍甾烯类成分,LC-DAD-MS初步推测其中的11个化合物.结论:灌胃给予TBFs对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有一定的抑制趋势,但作用不明显;腹腔注射则展示了显著性抑瘤作用,同时给药初期也表现了一定的毒性反应;肝组织中推测的蟾蜍甾烯类化合物为进一步研究其体内代谢途径奠定基础.     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。     

补骨脂复方对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用和生存期影响的研究

目的:观察补骨脂复方对小鼠移植性肝癌H22实体瘤抑制作用及生存期的影响。方法:①抑瘤作用观察:小鼠接种H22腹水瘤后,造成移植性小鼠肝癌模型。随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、补骨脂复方组、补骨脂组、蔻仁组,分别观察荷瘤小鼠的抑瘤率。②生存期观察:造模方法同前,随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、补骨脂复方组,观察其对荷瘤小鼠生命延长率的影响。结果:补骨脂复方组、补骨脂组、蔻仁组肿瘤抑制率分别为43.73%(P<0.05)、35.82%(P<0.05)、3.54%。阳性对照组(5-FU组)、补骨脂复方组生命延长时间分别为-15%、16%(P<0.05)。结论:补骨脂组有一定的抑制实体瘤生长的作用,蔻仁组对抑制肿瘤生长无明显作用。补骨脂与蔻仁有协同抑瘤作用,补骨脂复方组可显著抑制小鼠肿瘤的生长,并延长小鼠生存期。     

葶苈子对昆明种小鼠移植H22肝癌移植瘤抑瘤作用的研究

目的：探讨不同品种葶苈子对H22荷瘤小鼠动物模型的影响。方法：观察不同品种葶苈子对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结果：南北葶苈子的抑瘤作用与荷瘤对照组比较有显著性差异（P〈0．05）;南北葶苈子与顺铂合用组与单用顺铂组比较有极显著性差异（P〈0．01）。结论：葶苈子具有一定的抑瘤作用;与顺铂合用,可以明显对抗顺铂对肺的损伤和对机体的免疫抑制作用,具有显著的减毒增效作用。     

复方乌梅散对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用和生存期影响的研究

目的:观察复方乌梅散对小鼠移植性肝癌H22实体瘤抑制作用及生存期的影响。方法:(1)抑瘤作用观察:小鼠接种H22腹水瘤后,造成移植性小鼠肝癌模型。随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、复方乌梅散水提液组、复方乌梅散醇提液组、复方乌梅散超微粉碎组,分别观察荷瘤小鼠的抑瘤率。(2)生存期观察:造模方法同前,随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、复方乌梅散超微粉碎组,观察其对荷瘤小鼠生命延长率的影响。结果:(1)复方乌梅散水提液组、复方乌梅散醇提液组、复方乌梅散超微粉碎组肿瘤抑制率分别为:27.08%(P<0.05)、33.05%(P<0.05)、34.44%(P<0.05)。(2)复方乌梅散超微粉碎组生命延长时间为27.6%(P<0.05)。结论:复方乌梅散醇提液组、复方乌梅散超微粉碎组可抑制肿瘤生长,复方乌梅散超微粉碎组可有效延长小鼠生存期。     

环磷酰胺联合柿叶乙酸乙酯部位对H22小鼠瘤组织抗氧化能力及Bcl-2,Bax蛋白表达的影响

目的: 通过研究环磷酰胺(CTX)联合柿叶乙酸乙酯部位(PE)对H22荷瘤小鼠瘤组织的抗氧化作用和对瘤组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白表达的影响,探讨两药联合应用的效果。 方法: 昆明种小鼠,取H22荷瘤鼠腹水接种于昆明种小鼠右前肢腋窝皮下,建立H22荷瘤小鼠模型,将荷瘤小鼠随机分为模型组,CTX组(0.1 g ·kg^-1),CTX联合PE高、中、低剂量组(2,1,0.5 g ·kg^-1),连续ig给药10 d,处死小鼠后计算抑瘤率,采用金氏q值法判断两者合用的效果,检测瘤组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量,采用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白表达情况。 结果: 与模型组比较,各给药组抑瘤率明显升高,SOD水平和Bax蛋白表达均明显升高,MDA水平和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);CTX联合PE各剂量组的抑瘤率均高于CTX组,0.85<q<1.15,两药合用作用相加;与CTX组比较,联合用药各剂量组SOD水平和Bax蛋白表达均升高,MDA水平,Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax均降低(P<0.05,P<0.01)。 结论: CTX联合PE能使抑瘤作用相加,其机制可能与两药合用能明显增强H22小鼠机体抗氧化能力,下调Bcl-2蛋白及上调Bax 蛋白的表达有关。     

消癌解毒方对H22荷瘤小鼠移植瘤的抗肿瘤作用机制

目的:通过消癌解毒方(XAJD)对H22荷瘤小鼠移植瘤肿瘤组织全基因组芯片的检测以及对相关蛋白的表达影响,探讨其抑制肿瘤的作用机制。方法:ICR小鼠随机分组,接种H22荷瘤小鼠腹水,移植瘤模型成功后,将模型小鼠随机分为空白组,XAJD低、中、高剂量组(10,30,90 g·kg~(-1)·d~(-1)),顺铂组(1 mg·kg~(-1)·d~(-1))。给药结束,动物处死并取各组动物瘤体组织,无菌生理盐水洗去血渍,称重,计算肿瘤抑制率,取部分新鲜瘤体组织进行全基因组表达谱芯片检测,部分瘤体组织用实时荧光定量PCR(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其相关mRNA及蛋白表达。结果:与空白组比较,消癌解毒方低、中、高剂量能够显著降低移植瘤瘤重(P0.05),消癌解毒方中剂量组与顺铂组效果优于消癌解毒方低、高剂量组(P0.01),抑瘤率分别达42.8%,58.6%;全基因组芯片检测分析发现,基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMPs)相关蛋白在消癌解毒方不同剂量组中均发生了明显的改变。Real-time PCR,Western blot检测显示,与空白组比较,MMP-9 mRNA及蛋白在消癌解毒方低、中、高剂量组及顺铂组中表达均显著降低(P0.01),MMP~(-1)2 mRNA及蛋白在消癌解毒方中、高剂量组及顺铂组中表达均显著降低(P0.01),TIMP2 mRNA及蛋白在消癌解毒方中、高剂量组及顺铂组中表达均明显升高(P0.05)。结论:消癌解毒方能够抑制H22荷瘤小鼠移植瘤生长,可通过抑制MMPs相关蛋白的表达,降低肿瘤的转移和复发可能是其抗癌机制之一。     

榆耳酸溶性多糖对肝癌H22小鼠的抑瘤作用研究

目的：研究榆耳酸溶性多糖对小鼠H₂₂移植瘤的生长抑制作用及其机理。方法: 以抑瘤率、肝指数、胸和脾脏指数、白细胞介素-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α等指标来考察榆耳酸溶性多糖对H₂₂荷瘤小鼠肿瘤抑制作用,以H&E染色法观察肿瘤组织的病理改变,采用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果：榆耳酸溶性多糖3个剂量组能显著抑制肿瘤的增殖,提高荷瘤小鼠脾脏、胸腺指数以及血清细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α;肿瘤组织H&E染色和TUNEL实验表明,榆耳酸溶性多糖可以通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抑制肿瘤生长作用。结论：榆耳酸溶性多糖具有显著的抗肿瘤作用,其作用机制可能与免疫调节、促细胞凋亡、保护肝脏功能有关。     

石见穿对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的:观察石见穿对肝癌H22小鼠肿瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:肝癌H22荷瘤小鼠随机分为5组:模型组、石见穿提取物高、中、低(40,10,2.5 g·kg-1 ig)3个剂量组和阳性药环磷酰胺(CTX,0.025 g·kg-1,ip)对照组.连续10d.于第11天观测抑瘤率、脾指数、胸腺指数、血清中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和血骨内皮细胞生长因子(VEGF)的含量.结果:与模型组比较,石见穿提取物高、中、低剂量组的抑瘤率分别为23.83％,48.93％ (P ＜0.01)和27.48 (P＜0.05);石见穿提取物中、低剂量组脾指数和胸腺指数升高,但差异无统计学意义;石见穿提取物各剂量组血清中TNF-α和VEGF含量下降,以中剂量组VEGF含量下降明显,模型组(28.64±7.18)pg·mL-1,中剂量组(21.22 +5.60)pg·mL-1(P＜0.05).结论:石见穿提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其作用机制可能与下调细胞因子VEGF含量有关.