耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药基因检测及同源性

 目的 探讨某三甲医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)耐药基因携带情况及同源性。方法 收集该院2017年10月—2018年10月共40株CRAB,采用聚合酶链式反应(PCR)检测耐药基因携带情况,同时应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析其同源性。结果 40株CRAB对大部分抗菌药物耐药率在90%左右,对替加环素的耐药率相对较低,为2.9%(未包括中介)。耐药基因ADC检出率为100%,其他耐药基因检出率较高的依次为OXA-51(36株,90.0%)、qacE△1-sull(32株,80.0%),未检测出KPC基因。每株CRAB菌株检出2~8种耐药基因,以检出6种耐药基因的菌株最多(15株,37.5%);检出的耐药基因组合中,以同时检出ADC+OXA-23+OXA-51基因最多(29株,72.5%),其次为ADC+intl1+qacE△1-sull基因(26株,65.0%)、ADC+qacE△1-sull+ant(3″)-Ⅰ基因(19株,47.5%),11株(27.5%)同时检出ADC+ant(3″)-Ⅰ+aac(3)-Ⅰ基因。PFGE同源性检测分出19种不同型别,每种型别1~9株不等,其中A5型有9株,A18型有8株,主要来自重症监护病房。结论 该院CRAB对临床常见抗菌药物呈高度耐药,OXA-23和OXA-51两种基因最有可能是引起该院鲍曼不动杆菌耐药的主要因素,同源性分析显示该院不同病区存在CRAB医院感染传播。     

ICU多重耐药鲍曼不动杆菌的同源性分析

目的分析某院重症监护室(ICU)多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)的耐药性和同源性。方法 11株MDRAB在同一时期分离自ICU患者痰标本、环境物品和医务人员手。运用VITEK 2 Compact进行抗菌药物敏感试验(MIC),脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性。结果对左氟沙星的耐药率最低(54.5%),其次为哌拉西林/他唑巴坦(81.8%),对其他17种抗菌药物的耐药率均很高(90.9%~100%)。PFGE共分为A、B、C、D 4个型,其中A型为主要流行克隆株。结论该院ICU分离的MDRAB对临床常用的抗生素耐药性严重。患者间存在A型MDRAB克隆株的交叉感染。     

中山市两家医院鲍曼不动杆菌耐药性及同源性分析

目的 了解中山市两家医院临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性及耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)耐药基因的携带情况,并分析其同源性,为医院感染控制提供实验室依据。方法 收集2018年3—8月中山市两家医院临床分离的35株鲍曼不动杆菌,采用最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)法进行16种抗菌药物敏感试验,并筛选出CRAB菌株,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增CRAB中的耐药基因并测序确认;应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)技术对35株鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果 35株鲍曼不动杆菌中有33株为CRAB,其余2株对16种抗菌药物全敏感。33株CRAB对替加环素和多粘菌素B均敏感,对米诺环素的敏感率为45.45%,而对其他抗菌药物的耐药率均高达80%以上。33株CRAB均携带OXA-51基因,未检测到IMP和VIM基因。35株鲍曼不动杆菌共分为18个PFGE带型;分为A-F 6个聚类型别,A型(9/35,25.7%)和B型(22/35,62.9%)为主要流行克隆株。结论 鲍曼不动杆菌耐药现象严重,携带多种耐药基因可能是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类等多种抗菌药物耐药的重要原因。医院内存在不同克隆株播散以及同一克隆株在医院间流行播散。     

吴江地区多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因携带情况及同源性

目的了解吴江地区临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)碳青霉烯酶基因携带情况和同源性。方法收集吴江地区3所综合性医院2010年1月—2013年12月临床分离的非重复MDRAB 44株,测定其最低抑菌浓度(MIC);采用聚合酶链反应（PCR）扩增碳青霉烯酶基因OXA 51、OXA 23、OXA 24、OXA 58、IMP、TEM、SHV和GES,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果44株MDRAB主要来源标本为痰（占93.18%）,主要分布在重症监护病房（ICU）、呼吸科和神经外科,各占45.45%、27.27%和13.64%;MDRAB对米诺环素和多粘菌素B均敏感,对哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星耐药率均为100.00%,对亚胺培南和美罗培南耐药率均为97.73%。44株MDRAB均检出OXA 51、OXA 23和TEM基因,其中12株菌GES基因阳性,OXA 58和SHV基因阳性各1株,未检测到OXA 24及IMP基因;MDRAB分为A—G 7个型别,分别为19、3、9、3、1、4、5株。A型主要来源于吴江地区的两所大型综合性医院（吴江第一人民医院和盛泽医院）,吴江第一人民医院未发现B、D和E型;E型仅1株,分布在永鼎医院,其余型别散在分布。结论吴江地区临床分离鲍曼不动杆菌多重耐药严重,基因OXA 23和TEM是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,并以A、C型为主,呈克隆性传播。     

23株鲍氏不动杆菌同源性分析及blaOXA耐药基因检测

目的 分析23株鲍氏不动杆菌(ABA)的同源性、耐药性和blaOXA基因类型.方法 采用K-B纸片法药敏试验测定抗菌药物敏感率;采用脉冲场凝胶电泳分析ABA的同源性;利用PCR扩增技术检测、分析OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、OXA-143基因.结果 23株ABA对阿米卡星的敏感率最高,为65.2％,其次为米诺环素52.2％,庆大霉素为21.7％,对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南和美罗培南敏感率均为8.7％,对头孢吡肟、环丙沙星、头孢他啶3种抗菌药物敏感率均为13.0％;23株菌株主要是A、B两个基因型,A基因型10株,B基因型3株;23株菌株OXA-51均呈阳性,其中有21株OXA-23亦呈阳性,未检测到OXA-24、OXA-58、OXA-143基因型.结论 医院感染的ABA对β-内酰胺类抗菌药物耐药率高;耐药机制可能与OXA-23有关;有医院内克隆传播.     

多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药基因研究

目的研究邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学特征与相关耐药基因流行情况。方法对临床分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌经采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法同源性分析获得的A、B、C、D 4种克隆株,应用聚合酶链反应及序列分析方法分析耐药基因类型。结果本院多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,未检出SHV、DHA、OXA-24、GES、IMP、VIM耐药基因。TEM-1检出率为100%,OXA-23(45%),PER-1(10%),其中2株菌同时检测到TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,分别为A型和C型各1株,另2株菌同时检测到TEM-1和PER-1两种耐药基因,分别为C型和D型各1株,有16株菌同时检测到TEM-1和OXA-23两种耐药基因。结论携带TEM-1和OXA-23耐药基因多重耐药鲍曼不动杆菌是本院主要流行菌株,且存在克隆流行。携带TEM-1、OXA-23、PER-1三种耐药基因的菌株和携带TEM-1、PER-1两种耐药基因的菌株在临床分离株中已不鲜见。临床应加强鲍曼不动杆菌医院感染的控制,防止耐药菌株在医院暴发流行。     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学及耐药基因研究

目的探讨岳阳市第一人民医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的分子流行病学特征,以及碳青霉烯酶基因在介导CRAB对碳青霉烯类药物耐药性形成中的作用。方法收集岳阳市第一人民医院分离的CILAB共65株,其中对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌（IRAB）38株,亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌（ISAB）27株。采用琼情稀释法检测上述细菌对15种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;PCR扩增碳肯霉烯酶基因;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性。结果在检测的15种药物中,敏感性最高的药物为多黏蒂素B-IRAB与ISAB组除对头饱两丁、多黏菌素B耐药性较一致外,对其他抗菌药物耐药性差异均有统计学意义（P〈0．05）;改良Hodge试验阳性率为66％（43／65）,其中38株IRAB中,阳性36株,27株ISAB中,阳性4株;38侏IRAB有32株携带OXA-23基因,1SAl3组菌株中均未检测到OXA-23基因;65株菌主要分为6型,A型52株,是主要的流行克隆。结论本院存在CRAB的流行,主要为A型株。OXA-23基因的产生在介导CRAB碳青霉烯药物耐药中发挥作用。     

鲍曼不动杆菌的耐药基因分型与脉冲场凝胶电泳分型的比较

[目的]了解耐药鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii,Ab）中耐药基因的分布情况,并比较基于耐药基因分型和脉冲场凝胶电泳分型的差异性。[方法]对2005年宁波市第二医院收集的27株流行和散发的Ab进行耐药分析,并对脉冲场凝胶电泳方法和基于耐药基因聚合酶链反应的聚类分析方法进行比较。[结果]27株Ab耐多种抗生素和携带多种耐药基因。基于多个类别的耐药基因分型与脉冲场凝胶电泳方法分型相比有88.9%的一致性,而且耐药基因分型能更好地反映不同耐药株的耐药过程。[结论]与脉冲场凝胶电泳方法相比,耐药基因分型方法可以用于院内感染的流行研究,且有助于临床的诊断和治疗。     

某院ICU患者及环境分离鲍曼不动杆菌同源性分析

目的 调查某院ICU患者及环境分离鲍曼不动杆菌的同源性。方法 对江苏省该院ICU采集的180份 患者和环境标本进行鲍曼不动杆菌分离、药敏分析以及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型。结果 从180份样本中 分离出41株鲍曼不动杆菌,其中临床菌株9株,环境菌株32株。药敏结果显示除对左氧氟沙星耐药率较低外（34.1%）,对其他抗菌药物的耐药率均高于70%。41株鲍曼不动杆菌PFGE基因分型分成19型,其中I、M、N、O、P 5个型别每型包含2株及以上,其余均为1株一型别;P型16株,其中有5株来自于医院感染患者,其余株来自于患者的呼吸机、治疗车以及周围环境,同时该型AB的检出时间跨度长达141 d。结论 该院ICU患者及环境分离鲍曼不动杆菌具有同源性,存在医院内传播及医院感染的流行。应加强消毒措施实施的监管,尽量避免医院感染的发生及流行。     

RICU患者鲍曼不动杆菌感染临床特点及同源性

目的研究某院呼吸科重症监护室(RICU)鲍曼不动杆菌克隆传播特点及感染患者的临床特点,以指导临床有效防控鲍曼不动杆菌的传播。方法对40株分离自RICU住院患者的鲍曼不动杆菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)同源性及聚类分析,比较并确定菌株间的亲缘关系,同时对其耐药性及临床资料进行分析。结果 40株鲍曼不动杆菌分为A~K11种基因型,主要流行株为A、B、E型。耐药率最低的抗菌药物是亚胺培南(70.00%),其次是左氧氟沙星(77.50%)。40例感染者的平均年龄为67岁,平均住院时间41 d,12例感染者经治疗无效死亡。感染A型及E型菌株患者在各自住院时间上均存在交叉;而感染B型菌株的患者,后6例与前6例并无住院时间上的交叉。结论该组RICU鲍曼不动杆菌感染流行株为A、B、E基因型,耐药率高;感染者平均年龄较高,住院时间长。合理应用抗菌药物,严格执行无菌操作,加强对医疗环境和医疗器械的消毒灭菌,对减少鲍曼不动杆菌的传播至关重要。     

多重PCR在多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因检测中的应用

目的 建立能够同时检测多重耐药鲍曼不动杆菌(Multidrug-Resistant Acinetobacter Baumannii , MDRAB)多个耐药基因的多重PCR反应体系,了解MDRAB耐药基因分布情况,为临床治疗及感染控制MDRAB提供分子生物学依据。 方法 针对MDRAB 4种耐药基因blaoxa-23、blaAde-B、blaint-1及blaISCR-1分别设计4对引物,设计反应条件在同一PCR反应体系中同时检测这4种耐药基因,并采用建立的多重PCR反应体系检测临床分离MDRAB耐药基因携带情况。结果 本研究成功建立了一个可以同时检测4种MDRAB耐药基因的多重PCR反应体系,临床分离68株MDRAB耐药基因检测显示,1株同时携带有4种耐药基因,5株携带有blaAde-B、blaint-1及blaISCR-1,62株携带有blaoxa-23和blaAde-B。结论 多重PCR可以快速、高效、低成本检测MDRAB携带的耐药基因,多重PCR检测显示blaoxa-23及blaAde-B 是MDRAB携带的主要耐药基因。     

鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型及分子流行病学研究

目的研究宁波地区3家综合性医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集宁波市李惠利医院、宁波市第一人民医院、宁波市第二人民医院碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌28株。琼脂稀释法和E-test法测定14种抗菌药物的最小抑菌浓度值;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型。结果28株鲍曼不动杆菌对多粘菌素E耐药率最低为4．7%,头孢哌酮/舒巴坦为87%,其余抗菌药物耐药率均高于90%耐药。PFGE分型共分为4型,以A、B两型为主。28株鲍曼不动杆菌中均产OXA-23碳青霉烯酶基因,未检测到VIM、IMP型金属酶基因。结论宁波地区碳青霉烯抗生素耐药鲍曼不动杆菌均产OXA-23型碳青霉烯酶,3家医院均有克隆播散流行。     

鲍曼不动杆菌院内感染调查及耐药分析

目的调查鲍曼不动杆菌院内感染分布特点及耐药性。方法常规细菌培养方法，细菌鉴定采用法国生物梅里埃鉴定系统，药敏试验采用琼脂纸片扩散法。结果鲍曼不动杆菌最常出现于痰标本中，占78．7％，其次是脓汁和分泌物标本；鲍曼不动杆菌感染以病房为主，尤以重症监护病房（ICU）病房颁布最多，其次是神经外科病房；该菌耐药现象严重，耐药率较低的抗菌药物有碳青霉烯类药物、一含酶抑制剂复合制剂及左旋氧氟沙星。结论应合理选择使用抗菌药物，加强医院环境和人员消毒。控制鲍曼不动杆菌在医院内的定值和播散。     

多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药性分析

目的分析邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌菌株DNA同源性与耐药性,了解多重耐药鲍曼不动杆菌在该院的流行状况。方法DNA同源性分析：收集该院2009年1—6月份临床送检标本分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌,采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法;药敏试验：采用VITEK一2细菌鉴定仪器法与KB法确定药敏结果。结果DNA同源性分析结果：40株多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出4种电泳条带数目位置完全相同的克隆株,其中A型11株,B型11株,C型9株,D型9株。菌株分布在该院外科、内科、ICU、新生儿科四个病区,10个科室。普通病室与ICU病室均存在A、B、c、D4种型别克隆株感染。药敏试验结果：头孢哌酮／舒巴坦耐药率仅为5％,4种克隆株均对头孢哌酮／舒巴坦较敏感;阿米卡星耐药率为17．5％,A、B、C型克隆株对阿米卡星较敏感,但D型克隆株对阿米卡星的敏感性明显降低;4种克隆株对亚胺培南耐药率已达75．0％,显著高于文献报道的耐药率。4种克隆株对庆大霉素、氨苄西林／舒巴坦、哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星7种抗生素耐药率均达60％以上,较多克隆株的耐药率已达100％。结论A、B、C、D4种克隆株在该院未见明显集中流行趋势,呈散在分布特点。4种克隆株检出率差异无统计学意义。     

泛耐药鲍曼不动杆菌相关耐药基因检测及亲缘性分析

目的 了解临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)携带β-内酰胺酶(bla)基因、整合酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因及喹诺酮类耐药基因情况以及它们的亲缘性关系.方法 用PCR及序列分析方法对50株PDR-AB进行各种耐药基因的检测,采用DNAMAN软件进行基因的树状结构的构建和亲缘性分析.结果 50株PDR-AB共检测耐药基因21种,TEM、SHV、PER、VEB-1、CTX-M-1、ADC、IMP-1、IMP-2、VIM-2、OXA-23、OXA-24、IntI1、IntI2、IntI3、qnrAm、qnrBm、qnrS、qepA、gyrA突变基因、parC突变基因、Aac(6')-1b阳性检出率分别为100％、100％、86％、0、38％、100％、100％、76％、88％、86％、0、98％、22％、2％、6％、60％、6％、0、100％、100％、76％.50株PDR-AB间具有一定的亲缘性.结论 PDR-AB同时携带多种耐药基因是导致其对常用药物均耐药的重要原因,临床应加强有效的监测工作来控制PDR-AB传播并选择有效的抗生素进行治疗.     

医院重症监护室多耐药鲍曼不动杆菌耐药基因的流行特征

【目的】分析医院重症监护室临床病例与环境分离的鲍曼不动杆菌株携带多种耐药基因的相关性,探索多重耐药鲍曼不动杆菌携带的耐药基因特征与传播耐药基因的途径。【方法】采用微量肉汤稀释法(MIC)作药敏试验、聚合酶链式反应及基因测序。【结果】2013—2014年ICU临床病例标本分离的150株鲍曼不动杆菌对头孢类菌素、氨基糖苷类抗菌药物、庆大霉素耐药率在96%以上。环境标本分离的103株鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类抗菌药物阿米卡星耐药率最高,达62.39%;对碳青霉烯类抗菌药物(亚氨培南、美罗培南)的耐药率为53.21%、55.96%。基因分析显示主动外排泵adBe阳性时,它分别与A类、D类β-内酰胺酶或A类、C类β-内酰胺酶基因、膜孔蛋白carO基因、氨基糖苷类基因等相关。carO基因与氨基糖苷类基因aph(3′)-Ι、aac(6′)-Ⅰb、D类β-内酰胺酶OXA-51,66群、回旋拓普酶gyrA基因相关。【结论】携带adBe基因的鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物产生多重耐药性具有重要作用;膜孔蛋白carO阳性,介导碳青霉烯类药物的渗透,要谨防新耐药基因的亚型出现,加强病区环境消毒与管理,有效阻断医院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌传播。     

鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的了解郑州市三院鲍曼不动杆菌的耐药情况。方法从郑州市三院收集618株大鲍曼不动杆菌进行药敏分析,检测这种细菌的耐药率。结果鲍曼不动杆菌的耐药率对哌拉西林在内的广谱青霉素素耐药率在60%左右;对一代、二代头孢唑林的耐药率在70%左右;对三代头孢头孢噻肟的耐药率在70%左右;对四代头孢头孢吡肟和其他含β—内酰胺酶抑制剂的复方制剂保持了较好的抗菌活性,耐药率在35%左右。结论鲍曼不动杆菌对多种抗生素的耐药性呈上升趋势,应引起高度重视。阿米卡星对鲍曼不动杆菌的抗菌作用较好,是除碳青霉烯类之外值得注意的抗鲍曼不动杆菌抗菌药物。要加强对呼吸科、外科和重症监护病房（ICU）等重点科室的细菌耐药性监测,并采取有效措施控制其传播。     

62株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的同源性分析

目的了解某院住院患者分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)同源性,为预防CRAB医院传播提供依据。方法检测2015年8月—2016年11月该院住院患者各类临床标本分离的62株CRAB药敏结果,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性及其流行特征。结果 62株CRAB主要来自痰标本(占88.71%),对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星均耐药,对左氧氟沙星的耐药率(25.81%)最低。62株CRAB分为14个不同的型别,分别为A~N型,其中B、D、E、J和M型别仅包含1株菌,其中F型别包含5个亚型,A、G、H和K型别均有3个亚型,C和I型各有2个亚型。对主要的克隆株临床资料进行分析,32株菌(占51.61%)来自重症监护病房(ICU),另有12株菌(占19.35%)分离患者曾入住ICU。结论医院内流行的鲍曼不动杆菌存在外部带入和内部传播两种形式,需加大对其感染控制力度。     

鲍曼不动杆菌异质性耐药研究进展

异质性耐药是指细菌的不同亚群对某种抗菌药物表现出不同的敏感性,多报道于对万古霉素中介的金黄色葡萄球菌。近年来,在以鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌等为代表的革兰阴性菌中这一现象不断地被揭示,并且被逐渐认识到其可能是导致抗感染治疗失败的原因之一。细菌一旦出现异质性耐药,在抗菌药物选择性压力下,即使是小部分的耐药亚群也可表现出高水平的表型耐药,从而导致临床应用抗菌药物抗感染治疗的失败。异质性耐药体现了细菌群体从部分耐药向完全耐药转变的过程。研究异质性耐药对于认识临床常见病原菌耐药的发展过程,以及评估治疗方案和指导临床使用抗菌药物具有重要的意义。本文对鲍曼不动杆菌异质性耐药的研究现状进行了综述。     

某院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药基因及临床特征

目的 分析某院临床分离的耐亚胺培南鲍曼不动杆菌（IRAB）耐药基因携带情况，为医院感染防控和指导临床治疗提供实验室依据。方法 采用聚合酶链反应（PCR）方法检测该院临床分离的26株IRAB碳青霉烯类耐药基因（blaIMP、blaKPC、blaNDM-1、blaOXA-23、blaOXA-50、blaOXA-51、blaOXA-58）、氨基糖苷类耐药基因［ant（3"）-Ⅰ、aac（6''）-Ⅰ、armA］和消毒剂耐药基因qacE△1携带情况。结果 26株IRAB均携带碳青霉烯酶基因OXA-23和OXA-51，检出率为100%，未检出其他碳青霉烯类耐药基因。氨基糖苷类耐药基因ant（3"）-Ⅰ、aac（6''）-Ⅰ和armA检出率均为96.15%，消毒剂耐药基因qacE△1基因携带率为65.38%。临床分离IRAB菌株92.31%来源于患者的痰液。结论 该院临床分离IRAB多数携带相同的碳青霉烯类耐药基因和氨基糖苷类耐药基因，需加强医院感染防控措施。