通痹灵总碱对活化的小鼠T淋巴细胞CD69表达的影响

目的：研究通痹灵（TBL）总碱对活化的小鼠T淋巴细胞表达CD69的影响及其可能的免疫调控机制。方法：培养小鼠淋巴细胞，加入不同浓度的TBL总碱预孵1h后，再加佛波醇酯（PDB）或刀豆蛋白（ConA).24h后，用流式细胞术检测T淋巴细胞CD69的表达率。结果；不同质量浓度的TBL总碱对PDB或ConA激活的T淋巴细胞表达CD69，均有明显的下调作用（对ConA激活的T淋巴细胞表达CD69。均有明显的下调作用（对ConA激活的T淋巴细胞的作用要强于PDB激活的T淋巴细胞）。呈明显的量效关系。结论：TBL总碱可明显抑制活化的小鼠T淋巴细胞CD69的表达，为其用于类风湿性关节炎的治疗提供了实验依据。     

放线菌酮对小鼠T细胞活化影响的血清免疫药理评价

目的:利用淋巴细胞的早期活化标记物CD69的表达,探讨CHX对T淋巴细胞体外活化的影响。方法:分离小鼠淋巴结细胞,分别与放线菌酮(CHX)、CHX血清预孵1h,加入多克隆刺激剂继续培养,总计培养24h后收获细胞,进行双色免疫荧光标记,以流式细胞术对T细胞的CD69分子表达情况进行分析。结果:在CHX(终浓度10μmol/L)、CHX血清作用下,ConA活化的T细胞CD69表达百分率依次为(12.33±4.75)%、(20.39±6.32)%,与相应对照[分别为(64.67±3.00)%、(64.35±10.13)%]比较均有显著差异(P＜0.01);相应的,药物作用下PDB活化的T细胞CD69表达的百分率依次为(13.07±11.05)%、(6.10±4.91)%,与相应对照[分别为(84.79±6.87)%、(79.68±4.17)%]比较均有显著差异(P＜0.01)。结论:CHX(10μmol/L)、5%的CHX血清对ConA、PDB活化的T淋巴细胞均显示了强烈的抑制效应,证明T细胞活化过程中CD69的表达存在蛋白质的从头合成,对"CD69表达中CD69分子可能储存于细胞浆及其表达的发生并不需要蛋白质的从头合成"这一观点提出质疑。     

环孢菌素A对小鼠T细胞活化影响的血清免疫药理学评价

目的　应用血清免疫药理学技术 ,探讨环孢菌素A(CsA)对T细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CsA免疫调节的分子机制 ,为临床用药提供理论依据。方法　分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与CsA、5 %CsA血清预孵后 ,加入多克隆刺激剂继续培养共 2 4h。收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术分析T细胞上CD6 9分子的表达情况。结果　在CsA和 5 %CsA血清作用下 ,ConA活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (2 4 15± 3 38) %和 (2 3 6 8±6 89) % ,与相应对照组 [分别为 (6 4 6 7± 5 88) %和 (6 4 35± 10 13) % ]相比较均有显著差异 (P <0 0 1) ;在CsA和5 %CsA血清作用下 ,PDB活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (78 86± 7 70 ) %和 (80 0 5± 9 91) % ,与相应对照组 [分别为 (84 79± 6 87) %和 (79 6 8± 4 17) % ]相比较均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　CsA(410nmol/L)和含CsA血清均可强烈抑制ConA刺激的T细胞活化 ,而对PDB刺激的T细胞活化无抑制效应。 5 %CsA血清与CsA单纯药物体外实验的结果相一致 ,在一定程度上反映了临床等效剂量下血清免疫药理技术的有效性与可行性     

槲皮素对小鼠T细胞体外活化的抑制作用

目的:通过分析槲皮素对淋巴细胞早期活化标记物CD69表达的影响,探讨其对T淋巴细胞体外活化抑制作用的机制。方法:分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂及槲皮素共同培养,分别于2、6、24h收获细胞,进行双色免疫荧光标记,以流式细胞仪对T细胞的CD69分子表达情况进行分析并计算抑制率。结果:槲皮素(终浓度10μmol/L)对未受刺激的T细胞CD69表达百分率无明显影响,而经佛波醇酯(PDB)及刀豆蛋白A(ConA)活化同时加入槲皮素的T细胞CD69表达百分率在2h、6h及24h均显著下降(P＜0.01)。槲皮素对PDB的抑制率随作用时间延长而明显下降,对ConA的抑制率平缓而持久。结论:槲皮素对PDB、ConA活化的T淋巴细胞均显示明显的抑制效应,表明该药可能作用于T细胞活化信号传递通路蛋白激酶Cθ或其下游部位,并且,这种抑制效应表现出一定的可逆性。     

染料木黄酮对小鼠T细胞体外活化及增殖的影响

目的:研究染料木黄酮(Gen)对T细胞体外活化及增殖的影响,并探讨其机制。方法:利用荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术,检测多克隆刺激剂佛波醇酯(PDB)或刀豆蛋白(ConA)刺激下小鼠T细胞表达活化抗原CD69、CD25的百分率;以羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)标记技术结合流式细胞术,分析PDB＋Ion(Ionomycin)或ConA刺激下T细胞增殖相关指数。结果:Gen对ConA刺激组T细胞CD69、CD25表达有明显抑制作用(P＜0.05),且呈剂量依赖关系,而对PDB刺激组T细胞CD69及CD25表达的抑制需要较高浓度(＞50μmol/L);Gen无论对ConA或PDB＋Ion刺激组T细胞增殖均有显著抑制作用(P＜0.01),且均呈剂量依赖关系。结论:Gen可明显抑制多克隆刺激剂诱导的T细胞体外活化及增殖,其作用机制可能是抑制早期活化相关蛋白酪氨酸激酶活性。     

青藤碱对T淋巴细胞活化及TH1类细胞内细胞因子表达的影响

目的：深入研究青藤碱对T淋巴细胞Thl类细胞因子表达的影响。方法：分离小鼠淋巴结细胞，加入不同浓度的青藤碱作用1小时后，加多克隆刺激剂PDB和离子霉素，继续培养4小时后收获细胞，进行细胞内细胞因子染色，以流式细胞术对T细胞Th1类细胞因子TNF-γ、炎症性细胞因子TNF-α分子表达情况进行分析；同时，观察药物对T细胞活化早期标志CD59表达的影响；结果：1000μmol／L(329．24μg/ml)青藤碱能够抑制CD69表达，200μmol/L青藤碱对CD69表达无影响；200、1000、2000μmol／L青藤碱能够剂量依赖性地显著降低T细胞内细胞因子TNF-γ、TNF-α分子表达。结论：抑制T细胞活化异常可能是青藤碱治疗类风湿关节炎免疫药理机制之一，此抑制效应可能主要不是通过影响PKC而是与影响钙离子依赖的T细胞活化信号传导途径相关。     

补肾宁心方对鼠成骨细胞协同刺激分子表达的升调节作用

目的：探讨补肾宁心方药物血清对成骨细胞（OB）及CD4^＋T细胞协同刺激分子表达的调控作用。方法：颅骨酶解法培养OB，体外模拟雌激素撤退；MACS法分离CD4^＋T；将OB或CD4^＋T分别予以20％对照鼠血清、E2及20％中药血清培养并以LPS刺激，流式细胞术分析OB表面CD80、CD86以及CD4^＋T细胞表面CD28、CTLA-4的表达。结果：E2及中药血清组OB表面CD80、CD86的表达显著增加（P〈0．01）；CsA可降低对照鼠血清组及中药血清组OB表面CD80、CD86的表达（P〈0．01）；各组CD4^＋T细胞CD28和CTLA4的表达无显著改变（P〉0．05）。结论：补肾宁心方可上调OB协同刺激分子CD80、CD86表达；该作用可被CsA阻滞；而对T细胞CD28／CTLA-4表达无显著影响，其免疫学意义有待进一步研究：     

小鼠派氏集合淋巴结T细胞活化和调节性T细胞的分析

目的： 通过对小鼠派氏集合淋巴结（PPs）、肠系膜淋巴结（MLNs）和腹股沟淋巴结（ILNs）的比较性研究，以分析PPs T细胞活化和调节性T细胞的功能特点。 方法： 无菌分离小鼠PPs、MLNs和ILNs，分别制备单个淋巴细胞悬液，运用流式细胞术结合荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞、CD3+CD4+辅助性T细胞和CD4+CD25＋调节性T细胞的比例；用多克隆刺激剂刀豆蛋白A（Con A）、佛波醇酯（PDB）和离子霉素（Ion） 刺激活化淋巴细胞，随后运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测T细胞早期活化标志CD69的表达水平。 结果： PPs内CD3+T细胞所占比例明显低于MLNs和ILNs，然而CD4+CD25＋调节性T细胞的比例明显高于MLNs和ILNs；在没有加入刺激剂的培养条件下，PPs来源的T细胞CD69的表达水平明显高于MLNs和ILNs来源的T细胞，MLNs来源的T细胞CD69的表达水平明显高于ILNs来源的T细胞；而在加入Con A或者单纯PDB的培养条件下，PPs来源的T细胞却表现出低反应性；在加入PDB＋Ion的培养条件下，3者来源的T细胞CD69的表达水平没有明显差别。 结论： PPs内CD3+T细胞所占比例较低，CD4+CD25＋调节性T细胞的比例较高，这可能是PPs整体T细胞低反应性的原因之一；PPs来源T细胞的高基础活化率可能与其不断接触小肠来源的食物和共生菌抗原有关；PPs来源T细胞选择性地对某些刺激剂表现出低反应性，提示这群细胞处于某种程度的无能状态。上述特征的生物学意义在于避免因为不断接受小肠来源的食物和共生菌抗原的刺激而发生病理性炎症的同时还保留对病原微生物抗原的应答。     

红车轴草提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化的抑制作用

探讨红车轴草提取物(Trifolium pratense Leguminosae extract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化的影响。无菌条件下制备小鼠淋巴细胞悬液;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分别分析TLE对小鼠T淋巴细胞在刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)刺激下的体外分化抗原CD69、CD25、CD71表达的影响。终质量浓度为20、30、40 mg/L的TLE对小鼠T淋巴细胞在ConA或PDB刺激下的体外分化抗原CD69、CD25、CD71表达具有明显的抑制作用(P<0.01)。TLE对ConA或PDB刺激的不同时期的小鼠T淋巴细胞的体外活化具有明显的抑制作用。     

通痹灵对于IL-2及其受体α链影响的体内外研究

从体内体外两个方面 ,研究通痹灵对于CIA大鼠关节滑膜原代细胞分泌IL 2 ,以及通痹灵总碱对于IL 2受体α链CD2 5表达的影响。体内实验采用CIA大鼠动物模型。容积法测量足肿胀度 ,原代滑膜细胞培养、放免法检测培养液上清 ,观察通痹灵对滑膜内IL 2的影响 ;体外实验 ,分离大鼠淋巴细胞 ,佛波醇酯 (PDB )或刀豆蛋白 (ConA )体外刺激 ,双色免疫荧光标记 ,流式细胞仪检测 ,观察通痹灵总碱对CD3+CD2 5 +表达的影响。结果是体内实验 ,通痹灵高剂量可明显减轻CIA大鼠的足肿胀度 ,与MTX比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,通痹灵高、低剂量可明显抑制CIA大鼠滑膜内IL 2的合成 (P <0 0 1) ;体外实验 ,通痹灵总碱显著抑制ConA刺激下的CD3+CD2 5 +的表达 ,而对PDB加ionomycin没有明显作用。提示通痹灵可以通过抑制IL 2合成及ConA激活的IL 2受体α链CD2 5信号转导通路 ,减轻局部关节的炎症 ,为其用于类风湿性关节炎的治疗提供了实验依据     

西咪替丁对小鼠中孕妊娠影响的实验研究

目的 :初步研究西咪替丁对中孕妊娠的影响。方法 :用昆明种小鼠 ,在妊娠第 9～ 1 2天分别连续灌胃给予西咪替丁 80mg·kg 1,1 60mg·kg 1,3 2 0mg·kg 1,640mg·kg 1,于妊娠第 1 6天解剖记录活胎数 ,吸收胎死胎数。结果 :西咪替丁 1 60mg·kg 1,3 2 0mg·kg 1,640mg·kg 1剂量对小鼠的妊娠抑制率分别为 1 0 % ,45 % ( p <0 .0 0 5 ) ,65 % ( p <0 .0 0 5 )。 结论 :西咪替丁具有一定的终止中孕妊娠作用。     

Overview on the effects of progestins on bone

In view of the fact that fractures are the clinically relevant events, risk factors for fractures are discussed first. Bone mineral density (BMD) appears to be a much less important risk factor for the most severe hip fractures than the risk of falling. No results of experimental studies on hormones and fractures at advanced age are available. An overview of the effects of progestins on bone is given. Effects of progestins on bone have been studied by in vitro experiments using cell lines and by more relevant clinical observations. Prospective studies have been conducted following the use of progestins contained in oral contraceptives, alone or in combination with oestrogens; long-term contraception by injection of depot preparations; so-called "add-back" hormonal therapy attempting to reverse the adverse effects of gonadotropin releasing hormone agonists on bone and after different regimens of hormone replacement therapy (HRT) in postmenopausal women. From the data there are no indications that the various progestins, used in clinical practice, have either a bone-protective or an oestrogen antagonistic activity. Progestins do not add or subtract much of the protective action of oestrogens on the bones.     

酵母细胞表面展示的hDAF对补体在酵母细胞表面沉积的抑制作用

目的 :研究酿酒酵母细胞表面展示的人衰变加速因子 (hDAF) ,是否具有天然衰变加速因子的补体抑制活性。方法 :先用正常人血清处理酵母细胞EBY10 0 ,然后用流式细胞仪检测酵母细胞表面C5b 9复合物的沉积和hDAF在酵母细胞表面的表达。结果 :酵母细胞EBY10 0可直接活化人血清中的补体成分 ,导致酵母细胞表面C5b 9的沉积 ;而表达DAF的酵母细胞表面C5b 9的沉积明显减少。结论 :酵母细胞表面展示的DAF可正确折叠 ,并表现出DAF分子的补体抑制活性     

Studies on the Effect of Starvation on Mycobacteria

Ten cultures of Mycobacterium tuberculosis, one of Mycobacterium kansasii (nonsignificant), and one of Mycobacterium phlei were submitted to starvation. As a result they lost first their acid fastness and then all other staining affinities but, in this chromophobic state, they survived for at least 2 years and, after that time, produced cultures of acid-fast bacilli when transferred onto nutrient media. Chromophobic tubercle bacilli similar to those produced experimentally had previously been demonstrated in caseous lesions of lungs surgically removed from patients under chemotherapy. Since it has been shown that experimentally produced chromophobic bacilli can recover their original biological properties, the opinion is warranted that, under suitable conditions, those in the lung could also become reactivated and cause a relapse of the disease.     

基于弓丝预应力分析的正畸有限元仿真

利用CT扫描的牙齿数据,使用逆向工程软件Mimics和CAD软件Catia,建立了具有较高精度的包含正畸托槽、牙弓、牙周膜和颌骨在内的可以进行布尔运算的实体模型;基于高等机构学的理论,将弓丝装配过程等效为托槽移动的过程,分析求得该等效过程中托槽运动的参数,利用所得参数对等效过程进行有限元仿真,以获得弓丝初始预应力及弓丝作用在每颗牙齿上的初始力和力矩;将牙齿和牙槽骨建模为刚性接触体,牙周膜为弹性体,施加分析获得的初始力系,进行接触分析,得到正畸临床状态下整个上牙颌牙周膜的应力大小和分布.通过对矫治器和牙弓、槽骨联合建模,并使用空间螺旋坐标系,本方法可以获得临床状态下的正畸矫治力和牙周组织响应,为正畸理论研究和临床实践提供指导.     

夫妻冲突对子女情绪影响的研究

目的探讨夫妻冲突对子女抑郁、焦虑情绪的影响,为相关心理干预提供参考。方法采用父母冲突儿童知觉问卷(CPIC)、自编初中生认知情绪调节策略问卷、流调中心抑郁量表(CES-D)及焦虑自评量表(SAS)对635名初中生进行问卷调查。结果夫妻冲突能够有效预测抑郁、焦虑(t=7.883,5.505;P<0.001),在理性思考和积极重新关注进入方程后,预测系数降低但仍然显著;通过构建结构方程模型进一步验证了认知情绪调节策略在夫妻冲突与抑郁、焦虑之间起部分中介作用。结论夫妻冲突对子女的情绪既有直接的作用,又有通过认知情绪调节策略而间接产生的影响。