阴道分泌物支原体固体和液体培养基培养结果差异及原因分析

目的分析阴道分泌物支原体固体培养基和液体培养基培养结果差异及其原因,为临床医生科学解读阴道分泌物支原体通过不同方法培养后的结果提供试验依据。方法收集该院妇产科送检的354份阴道分泌物标本,同时做固体培养基和液体培养基培养,比较两种培养方法的阳性率,并将液体培养基培养阳性但固体培养基培养阴性的标本进一步做细菌和真菌鉴定,支原体液体培养基培养阴性但固体培养基培养阳性标本再进行液体培养。结果354份阴道分泌物标本中固体培养基培养阳性[解脲脲原体(Uu)或人型支原体(Mh)阳性]标本为112份,阳性率为31.64%。112份阳性标本中,单纯Uu阳性86份,阳性率为24.29%;单纯Mh阳性9份,阳性率为2.54%;Uu合并Mh阳性17份,阳性率为4.80%。液体培养基培养阳性率(40.96%)明显高于固体培养基培养阳性率(31.64%),差异有统计学意义(χ2=6.65,P<0.001)。结论支原体固体培养基培养阳性率明显低于液体培养基培养,通过观察固体培养基的菌落形态,可准确诊断Uu和Mh感染;分解尿素和精氨酸的细菌或真菌感染是造成支原体液体培养基假阳性的主要原因。     

泌尿生殖道解脲支原体感染的检测方法与诊断

目的 评价解脲支原体(Uu)液体培养法的诊断价值.方法 采集130例患者的泌尿生殖道分泌物、前列腺液,同时进行液体培养法和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测Uu,并对Uu阳性和判为污染的液体培养基进行细菌培养.然后,比较结果、分析原因.结果 130份标本中,液体培养法Uu阳性71份、判为污染的13份、阴性46份.FQ-PCR法Uu阳性66份,其中63份与液体培养法一致,另3份中,2份为液体培养法判为污染的标本、1份为液体培养法阴性标本.细菌培养结果,8份液体培养阳性而FQ-PCR法阴性的标本及13份判为污染的标本,均培养出细菌和/或真菌,菌株做脲酶和精氨酸分解试验,至少一项为阳性.结论 用液体培养法检测Uu时,阴性标本可能受分解尿素、精氨酸的细菌的影响,而误判为阳性,阳性标本可能受混浊生长的细菌影响,而误判为阴性,从而导致诊断上的错误.     

泌尿生殖道支原体培养假性结果原因探讨

目的探讨泌尿生殖道支原体培养假性结果的原因以及提高准确率的方法。方法对380例标本进行支原体液体培养法、固体平板培养法、血平板培养法检测,并对血平板上生长的菌落作脲酶和精氨酸分解试验。结果 380例标本Uu-Mh二合一液体培养有180例颜色变红呈阳性反应,而这180例标本支原体固体平板培养仅115例检出支原体,检出率仅为63.9%,在液体培养变红且未见浑浊的140例标本中,固体培养法未见支原体的有33例,而这33例标本采用血平板培养法全部有菌落生长,这些菌株的脲酶或精氨酸分解试验呈阳性。结论支原体液体培养易受分解尿素或精氨酸菌株的干扰而呈现假阳性结果,因此支原体培养应以固体平板培养结果为准。     

支原体确证琼脂培养基检测泌尿生殖道支原体的优势分析

[目的]评价支原体确证琼脂培养基在诊断泌尿生殖道标本中锵脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）和人型支原体（Mycoplsma hominis，Mh）的优势，为提高临床泌尿生殖道支原体感染实验室诊断的准确性提供依据。[方法]取经过12h Uu／Mh肉汤增菌的临床疑似标本洗脱液直接接种于支原体确证琼脂培养基，在5％CO2和95％N2的气体环境中培养24h～48h后，低倍镜下观察特征性菌落，计数其菌落形成单位（Colony Forming Units，cfu）。同时用支原体药敏试剂盒作对照，观察Uu孔、Mh孔及计数孔颜色的变化。[结果]172例泌尿生殖道标本中，支原体确证琼脂培养基检出Uu感染59例，Mh感染19例，混合感染16例，Uu计数≥10^4cfu者40例，Mh计数≥10^4cfu者15例；支原体药敏试剂盒检出uu感染63例，Mh感染13例，混合感染13例，uu计数≥10^4cfu者45例，Mh计数≥10^4cfu者10例。[结论]支原体确证琼脂培养基，简便易行，观察菌落准确性高，提高Mh的检出率及液体培养基的确证性。     

关注泌尿生殖道支原体培养和鉴定

支原体培养基的商品化以及不需要特殊试验条件,使泌尿生殖道支原体检测得到普及,为临床研究打下了基础。目前,l临床实验室检测解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）的液体培养基（包括冻干复溶培养基）的鉴定原理是：Uu分解尿素、Mh分解精氨酸产碱,使培养基由黄变红（酚红指示剂）。相对于细菌学鉴定,支原体的鉴定特征少,如：菌落细小,需借助放大镜观察,临床实验室又不常规做菌落的分离培养;菌体细小,     

快速液体培养法检测呼吸道标本中的肺炎支原体

目的 探讨快速液体培养法检测肺炎支原体(MP)的临床应用价值,分析其假阳性的情况及原因.方法 对93例呼吸道标本进行MP快速液体培养,培养液用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测肺炎支原体核酸,同时测定血清中肺炎支原体抗体,进行统计学分析.结果 在93例检测标本中,肺炎支原体快速培养阳性16例,检出率是17.2%(16/93);FQ-PCR法阳性10例,检出率10.7%(10/93);血清学检测阳性22例,检出率23.6%(22/93).3种方法检测结果无显著差异.结论 快速液体培养法干扰因素多,影响其特异性;结果判断时结合显微镜检查,排除细菌或真菌等导致的假阳性,其特异性可达到与血清学及FQ-PCR法一致水平.     

提高侵袭性烟曲霉感染痰标本病原学检出率的方法探讨

目的:探讨一种可提高临床痰标本的侵袭性烟曲霉感染检出率的培养基。方法:收集临床常规痰标本分离菌(包括白假丝酵母菌),分析其耐药性,并将其作为"干扰菌"与烟曲霉标准株的孢子以不同比例混合接种培养,模拟痰标本的混合感染,观察彼此的干扰情况。同时添加抗菌药物于MediumB培养基中,分析培养基对烟曲霉的生长选择性。结果:当铜绿假单胞菌浓度≥104CFU/mL时,即可完全抑制烟曲霉(103CFU/mL)的生长;金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌则必须在>105 CFU/mL时,才能完全抑制103 CFU/mL的烟曲霉生长;当白假丝酵母菌与烟曲霉以100∶1混合接种时,其基本抑制了烟曲霉的生长。根据"干扰菌"的耐药特性,同时添加亚胺培南和万古霉素至培养基,结果显示其能有效抑制上述3种细菌的生长;添加氟康唑5μg/mL可抑制白假丝酵母菌的生长,而上述3种药物对烟曲霉的生长均无影响。结论:在所研究的真菌分离培养基中添加适宜的抗细菌及抗真菌药物,可有效抑制"干扰菌",提高烟曲霉的检出率。     

1183例泌尿生殖系统支原体检测及耐药性分析

目的了解该院泌尿生殖系统支原体感染及耐药情况。方法回顾性分析2012年1月至2015年12月1 183例患者支原体培养结果,并对体外药敏结果进行分析。结果 1 183例受检标本中有636例支原体培养呈阳性,阳性率为53.8%,男、女性标本的阳性率分别为26.3%和56.2%;其中解脲脲原体(Uu)感染、人型支原体(Mh)感染及两者混合感染的感染率分别为40.4%、1.2%和12.1%;67.8%的Uu感染者菌落计数≥104 cfu/mL,18.9%的Mh感染者菌落计数≥104 cfu/mL;药敏结果显示,支原体感染患者对原始霉素、交沙霉素、强力霉素和四环素具有较高的敏感性(98.3%、97.0%、92.5%、91.0%);对氧氟沙星和环丙沙星耐药性较高(65.1%,81.2%)。单一Uu感染患者对红霉素和克拉霉素具有一定的敏感性。结论本地区支原体感染率与以往比有所下降,但依然较高。耐药监测与以往无明显变化,临床应根据支原体培养及药敏结果合理用药。     

泌尿生殖道支原体感染2456例培养及药敏结果分析

目的　了解福建莆田地区泌尿生殖道支原体的感染状况，分析解脲支原体和人型支原体对不同药物的敏感性。 方法　用解脲支原体和人型支原体培养鉴别定量药敏试剂盒进行检测，当有解脲支原体（Uu）和人型支原体（Mh）生长时，尿素与精氨酸被分解， pH值上升， 培养基由黄变红即阳性； 培养基内含有混合抗生素， 能抑制革兰阳性（G+）和革兰阴性（G-）细菌及真菌生长即敏感。 结果　5260例受检患者支原体培养总的阳性2456人份（46.7%）。其中Uu阳性1343人份(25.5%)，Mh阳性635人份(12.1%)，Uu+Mh混合阳性478人份9.1%。男、女性患者的阳性率分别为23.8%和56.4%。支原体对药物敏感率较高的药物依次是交沙霉素（88.9%）、美满霉素（75.3%）、强力霉素（72.3%）；耐药率较高的是罗红霉素（65.6%）、阿奇霉素（55.3%）、林可霉素（51.1%）。 结论　本地区支原体检出总的阳性率与国内其他地区报道接近，女性患者的阳性率比其他地区偏高，女性患者检出阳性率比男性高。解脲支原体感染对抗生素敏感率较高的依次为交沙霉素、美满霉素。人型支原体感染对抗生素敏感率较高的依次为美满霉素、交沙霉素。     

假丝酵母菌对解脲脲原体检测的干扰分析

目的通过对女性分泌物及其中分离的假丝酵母菌进行支原体培养,探讨假丝酵母菌是否对解脲脲原体检测产生干扰及支原体黏附假丝酵母菌的条件。方法将女性分泌物及其中分离的假丝酵母菌进行支原体培养,制备第1代、第10代菌株及支原体阳性培养液和阴性培养液,交叉混匀后作为标本进行支原体的检测。结果 445份标本中,阳性培养液中分离出假丝酵母菌的标本5份,其中仅1份第1代假丝酵母菌检测呈阳性但第10代菌呈阴性结果,1份第1代和第10代假丝酵母菌均呈阳性结果。第10代假丝酵母菌和支原体培养液混合培养后,分离的假丝酵母菌支原体检测均阴性。结论假丝酵母菌对解脲脲原体的定性检测不产生干扰,但对解脲脲原体的部分药敏试验结果可产生干扰,解脲脲原体黏附假丝酵母菌需特定的条件。     

肺炎支原体液体培养方法的应用

目的对肺炎支原体（Mp）快速液体培养的方法进行分析,探讨其应用价值。方法采用Mp快速液体培养基对呼吸系统感染患者的咽拭子进行培养,根据颜色变化判断结果,分析真菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希菌、产气肠杆菌、铜绿假单胞菌、链球菌、葡萄球菌对结果的影响,然后用PCR荧光探针方法进行验证。结果真菌能在培养液中生长引起假阳性,其它细菌可被抑制,阳性培养液（无真菌）PCR荧光定量94％阳性,阴性培养液PCR荧光定量100％阴性。结论Mp快速液体培养的方法快速、简便,光学显微镜排除真菌后结果准确。     

肺炎支原体液体培养方法的应用

目的 对肺炎支原体(Mp)快速液体培养的方法 进行分析,探讨其应用价值.方法 采用Mp快速液体培养基对呼吸系统感染患者的咽拭子进行培养,根据颜色变化判断结果 ,分析真菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠埃希菌、产气肠杆菌、铜绿假单胞菌、链球菌、葡萄球菌对结果 的影响,然后用PCR荧光探针方法 进行验证.结果 真菌能在培养液中生长引起假阳性,其它细菌可被抑制,阳性培养液(无真菌)PCR荧光定量94%阳性,阴性培养液PCR荧光定量100%阴性.结论 Mp快速液体培养的方法 快速、简便,光学显微镜排除真菌后结果 准确.     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱直接检测尿路感染病原菌性能评价

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接检测尿路感染病原菌的性能。方法收集1 000例门诊及住院患者中段尿样本,接种于固体培养基,采用MALDI-TOF MS仪和全自动微生物鉴定系统对单个菌落进行鉴定;对中段尿样本进行前处理后直接采用MALDI-TOF MS仪进行分析。结果1 000例中段尿样本中,培养法检出215例菌落计数≥10~5 CFU/mL的细菌,阳性检出率为21.5%;其中162例分离到单一细菌,53例分离到混合细菌。2种仪器对215株细菌鉴定结果的符合率达100%。革兰阴性杆菌占76.3%,革兰阳性菌占23.7%。MALDI-TOF MS仪直接检测检出185例菌落计数≥10~5 CFU/mL的细菌,阳性检出率为18.5%;其中145例分离到单一细菌,40例分离到混合细菌。直接检测法无假阳性,但阳性检出率较培养法低,阳性漏检率达到14.0%(30/215)。结论采用MADLI-TOF MS仪直接检测感染性中段尿样本,具有鉴定诊断时间短、成本低和适用性好的优点。     

用支原体培养鉴定试剂同时检测假丝酵母菌

目的探讨用支原体培养鉴定试剂在作支原体培养鉴定的同时,同步进行假丝酵母菌的增菌培养及检测的可行性。方法同一个病人同时取两份标本平行操作,一份标本按照传统的方法接种于TTC-沙保罗琼脂培养基上,37℃48 h后观察结果。另一份标本接种于支原体培养鉴定试剂的液体培养基内,在作支原体培养鉴定的同时,保留培养瓶内剩余的培养液作假丝酵母菌的增菌培养,37℃24 h后用接种环挑取一环转种于TTC-沙保罗琼脂培养基上,37℃48 h后观察结果;同时再取一环于玻片上直接镜检。结果320例女性标本直接接种固体培养基阳性65例,液体增菌后直接镜检与转种固体培养基阳性均为85例;180例男性标本直接接种固体培养基阳性15例,液体增菌后直接镜检与转种固体培养基阳性均为22例。表明通过培养液的增菌培养,阳性检出率明显提高,增菌后直接镜检与转种固体培养基的阳性检出率是一致的。结论支原体培养液可以一基多用,同时用于假丝酵母菌的增菌培养,既节约了成本又节省了时间,还为临床医生多提供了一条诊断信息。     

两种方法对解脲脲原体与人型支原体进行联合检测的意义

目的对在人型支原体与解脲脲原体检测中联合应用液体药敏检测法与固体培养法的临床意义进行探讨。方法把临床收集的样本在固体培养基上(支原体的分离培养)与药敏检测培养基上(液体稀释法)直接接种后,再做抗菌药物的敏感性检测。结果 200例样本中,共检出解脲脲原体64例(32%),人型支原体26例(13%),两种支原体被同时检出16例(8%);对固体培养基进行肉眼观察,能够见到细菌菌落发生生长,其液体培养基能够见到变红的有4例(2%)。将9种药物进行药敏检测,其中解脲脲原体对环丙沙星的耐药率为79.1%,氧氟沙星为65.2%,阿奇霉素为4.0%,红霉素为4.0%,交沙霉素为0.0%,克拉霉素为2.7%,磷霉素为0.0%,强力霉素为1.4%,四环素为5.4%;而人型支原体对红霉素的耐药率为100.0%,环丙沙星为83.1%,氧氟沙星为83.6%,克拉霉素为67.9%,阿奇霉素为49.0%,交沙霉素为18.1%,磷霉素为18.1%,强力霉素为0.0%,四环素为13.6%。结论联合应用液体药敏检测法与固体培养法,能够准确鉴定与培养人型支原体与解脲脲原体,同时能够排除由于细菌污染所导致单纯的液体培养中产生的假阳性反应。     

门诊病人解脲支原体培养以及药敏状况分析

目的探讨门诊病人非淋病性尿道炎解脲支原体培养方法以及药敏状况,指导临床用药。方法收集2009年性病门诊就诊患者的泌尿生殖道标本共250例,分别进行固体培养基和液体培养基的培养,并对药敏状况进行分析。结果液体培养基法检测出阳性85例,固体培养基法检测出阳性70例,液体培养基阳性而固体培养基阴性者23例,固体培养基阳性而液体培养基阴性者8例。进行一致性检验,两组方法有较强的吻合度(Kappa=0.758),有统计学意义(P<0.01)。解脲支原体对四环素类以及大环内酯类药品耐药率较高。结论解脲支原体的检测以液体培养基进行筛选,以固体培养基进行确诊,可大幅度提高检测结果的精确性。解脲原体对司帕沙星、克拉霉素、交沙霉素、美满霉素等药物敏感。     

变形杆菌对解脲支原体培养结果的影响

目的了解变形杆菌对解脲支原体培养结果的影响。方法用80株已鉴定的变形杆菌对解脲支原体进行干扰试验。结果70％的变形杆菌使解脲支原体培养产生假阳性。结论变形杆菌对支原体培养的影响很大,可以在培养基中加入亚胺培南或哌拉西林／他唑巴坦,以消除变形杆菌对解脲支原体培养的影响,提高检测的准确率。     

细菌或真菌对UF-1000i尿沉渣分析仪红细胞检测的影响

目的探讨不同浓度不同种类细菌或真菌对UF-1000i尿沉渣分析仪(简称UF-1000i)红细胞(RBC)测定结果的影响,以对泌尿系统疾病诊断、评估提供更可靠的实验室依据。方法健康体检者尿液标本制作成混合尿基质,将不同浓度泌尿系统感染常见细菌和真菌菌液加入制备混合尿基质,用UF-1000i检测各种浓度菌尿RBC。收集各种RBC浓度梯度病理血尿标本,加入白念珠菌菌液,调整真菌终浓度后用UF-1000i检测各种浓度菌尿RBC。每份标本同时进行显微镜镜检。结果泌尿系统感染常见革兰阴性杆菌(大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌)、革兰阳性球菌(金黄色葡萄球菌)和低浓度的白念珠菌(<106/mL)对UF-1000i RBC测定结果无明显影响。粪肠球菌制备菌尿中,细菌浓度为109/mL时UF-1000i检测结果显示尿RBC假阳性。白念珠菌制备菌尿中,真菌浓度从106/mL开始UF-1000i检测结果显示尿RBC假阳性。真菌浓度增至108/mL时,导致血尿标本RBC定量结果显著假性增高(P=0.006)。结论 UF-1000i具有独立的双检测通道,在很大程度上减少了细菌对尿RBC检测的干扰。但并不能有效避免高浓度真菌对RBC检测结果的影响,易造成尿RBC检测假阳性结果而影响实验室检测质量,需进行显微镜镜检校正以保证检验结果的准确性。     

肺炎支原体快速液体培养方法的实验评价

目的对肺炎支原体快速液体培养的方法进行评价，探讨其应用价值。方法采用肺炎支原体快速液体培养基对呼吸系统感染患者的咽拭子进行培养，根据颜色变化判断结果，分析上呼吸道微生物对结果的影响。结果真菌能在快速液体培养基内生长引起假阳性，而其他细菌可被抑制。结论肺炎支原体的快速液体培养的方法快速，简便--只需6小时即可报告，但须光学显微镜排除真菌后结果会更准确可靠。     

关注泌尿生殖道支原体培养和鉴定

支原体培养基的商品化以及不需要特殊试验条件,使泌尿生殖道支原体检测得到普及,为临床研究打下了基础.目前,临床实验室枪测解脲脲原体(Uqu)和人型支原体(Mh)的液体培养基(包括冻干复溶培养基)的鉴定原理是:Uu分解尿素、Mh分解精氨酸产碱,使培养基由黄变红(酚红指示剂).