血浆肺特异性X基因mRNA检测对诊断肺癌的意义

摘要：目的：探讨肺特异性X基因（lung-specific X gene,LUNX）mRNA检测在肺癌辅助诊断中的意义。 方法：荧光定量PCR法检测肺癌患者、肺良性疾病患者、肺外肿瘤特异性对照患者及体检健康者血浆LUNX mRNA,评估循环LUNX mRNA对肺癌的诊断意义。 结果：肺癌患者血浆LUNX mRNA相对含量（0.287±0.106）显著高于健康组（0.045±0.018）（q=30.34, P<0.01）、肺良性疾病组（0.064±0.041）（q=24.33,P<0.01）和特异性对照组（0.032±0.024）（q=30.44,P<0.01）。肺癌组血浆LUNX mRNA相对含量在不同性别、年龄段及病理类型的患者中无显著性差异（P>0.05）,Ⅲ~Ⅳ期患者该基因含量（0.334±0.096）显著高于Ⅰ期（0.253±0.081）（q=4.09,P<0.05）和Ⅱ期（0.271±0.083）（q=3.49,P<0.05）患者。 结论：血浆LUNX mRNA检测对肺癌有特异的辅助诊断价值。     

支气管哮喘患者外周血单个核细胞中IL-9 mRNA检测及临床意义

目的检测支气管哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-9mRNA水平,探讨IL-9在支气管哮喘发生、发展中的意义。方法收集支气管哮喘患者和健康对照者外周血标本,分离PBMC,经佛波酯和离子霉素刺激活化后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用实时定量PCR(qRT-PCR)方法检测IL-9mRNA的表达水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中总IgE浓度。结果建立人IL-9的SYBRGreenⅠ检测方法。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平显著高于健康对照组(P0.05),而临床缓解组和健康对照组间差异无统计学意义(P0.05)。支气管哮喘急性发作期患者PBMC中IL-9mRNA水平与总IgE浓度呈正相关。结论支气管哮喘患者PBMC中IL-9mRNA水平升高,与疾病的发生、发展关系密切。     

乳腺浸润性导管癌患者外周血CEA mRNA的检测及临床意义

目的观察乳腺浸润性导管癌患者外周血中癌胚抗原信使核糖核酸（CEAmRNA）的表达情况,从而探讨其在乳腺癌诊治方面的临床价值。方法使用实时荧光定量RT—PCR方法,分别检测48例乳腺浸润性导管癌患者、28例乳腺良性疾病患者外周血中CEAmRNA的表达情况。结果乳腺浸润性导管癌组患者外周血CEAmRNA阳性表达率（18／48）明显高于乳腺良性疾病组（2／28）,差异具有统计学意义（x0=8．40,P〈0．05）。各分期乳腺浸润性导管癌患者外周血中均有CEAmRNA阳性表达,II期和III期患者的CEAmRNA表达阳性率明显高于I期患者,差异具有统计学意义（X2=7．74,P〈0．05）。结论外周血中CEAmRNA的联合检测,可提高乳腺浸润性导管癌的检出率,有助于判断患者发生微转移的风险．值得临床上进一步研究。     

急性乙型肝炎患者外周血单个核细胞颗粒溶素mRNA定量测定及临床意义

目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测乙型肝炎（简称乙肝）患者外周血单个核细胞（PBMC）中颗粒溶素（GNLY）mRNA的表达,探讨GNLY基因表达水平与急性乙肝的关系。方法实时荧光定量RT-PCR分别检测40例急性乙肝患者及100名正常对照的PBMC的GNLY基因表达水平,同时检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。结果急性乙肝患者发病期mRNA表达显著高于正常对照组（P〈0.01）,恢复期GNLY基因表达与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。乙肝患者GNLYmRNA与血清ALT、AST呈正相关。结论实时荧光定量RT-PCR检测GNLY mRNA的表达准确可靠。患者外周血GNLY基因表达水平与急性乙肝的发生发展存在一定的相关性。     

急性乙型肝炎患者外周血单个核细胞颗粒溶素mRNA定量测定及临床意义

目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测乙型肝炎(简称乙肝)患者外周血单个核细胞(PBMC)中颗粒溶素(GNLY)mRNA的表达,探讨GNLY基因表达水平与急性乙肝的关系。方法实时荧光定量RT-PCR分别检测40例急性乙肝患者及100名正常对照的PBMC的GNLY基因表达水平,同时检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。结果急性乙肝患者发病期mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.01),恢复期GNLY基因表达与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。乙肝患者GNLYmRNA与血清ALT、AST呈正相关。结论实时荧光定量RT-PCR检测GNLY mRNA的表达准确可靠。患者外周血GNLY基因表达水平与急性乙肝的发生发展存在一定的相关性。     

RT-PCR法检测非小细胞肺癌患者外周血Lunx mRNA的表达及临床意义

目的 探讨Lunx mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及临床意义.方法 采用RT-PCR技术,检测NSCLC患者外周血中的Lunx mRNA的表达情况.结果 腺癌患者外周血微转移的阳性率66.7%,高于非腺癌患者36.1%(χ2＝4.506,P＜0.05);低分化癌的外周血微转移阳性率为 74.1%,而中分化15.0%、高分化28.6%,低分化组与高、中分化组比较,P＜0.05,差异显著;Ⅰ期和Ⅱ期的外周血微转移阳性率分别为20.0%和21.7%,Ⅲ Ⅳ期为85.7% K,与Ⅰ期和Ⅱ期比较,χ2＝21.886,P＜0.05;54例NSCLC患者外周血微转移阳性率与该患者的年龄、性别、吸烟史和原发肿瘤部位之间没有统计学差异,P＞0.05.结论 Lunx mRNA 是一种检测 NSCLC 外周血微转移新型的、较好的特异性标记物;NSCLC 患者外周血微转移与病理类型、细胞分化程度及 TNM 分期均存在密切关系;通过Lunx mRNA检测对判断病程发展和指导临床治疗具有重要意义.     

肺癌患者外周血微转移检测的意义

目的研究肺癌患者外周血中CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA的表达及联合检测的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测48例肺癌患者、8例肺良性病变和30名健康志愿者外周血CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平。结果48例肺癌患者外周血CEAmRNA的水平为(16264±28765)copies/ml,其中26例阳性,阳性率为54.2%;CK19mRNA的水平为(14891±27244)copies/ml,其中27例阳性,阳性率为56.3%;CK20mRNA的水平为(10924±21678)copies/ml,其中20例阳性,阳性率为41.7%。8例肺良性病变中CK20mRNA阳性1例(12.5%),CEAmRNA和CK19mRNA均为阴性,健康志愿者30例未见表达。单项检测敏感度和准确性较低,联合其中二项检测敏感度和准确性较高,联合三项敏感度达77.1%、准确性可达87.2%。CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA水平和阳性率与肺癌类型和不同临床分期有关。结论CEAmRNA、CK19mRNA和CK20mRNA可作为标志物检测肺癌患者外周血微转移,联合二至三项指标有较高的检出率,定量检测有助于肺癌微转移的监测。     

CK19 mRNA在非小细胞肺癌患者外周血表达及临床意义

目的探讨细胞角蛋白19信使核糖核酸(CK19 mRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中的表达,不同临床病理的关系及指导意义。方法以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对56例NSCLC患者外周血标本CKl9 mRNA的表达进行了研究,并以20例健康献血员和13例肺部良性疾病患者作对照。结果56例中CK19 mRNA的阳性率为76.8%(41/56),有淋巴结转移和无淋巴结转移的NSCLC患者的阳性率分别为27.9%(5/18)和71.0%(27/38),有显著性差异,正常对照组CK19 mRNA的阳性率为6.1%(2/33),与NSCLC患者的阳性率有显著性差异,但CK19 mRNA的表达与NSCLC是鳞癌和腺癌无关。结论NSCLC患者CK19mRNA检测不仅可及早评估癌细胞血行播散情况,而且对正确评价肺癌的病理分期,预后及指导临床大夫制定合理的治疗方案有重要价值。     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞中HCV RNA检测及意义

目的 了解丙肝患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中HCV RNA存在情况及其临床意义。方法 应用套式PCR检测46例急性丙型肝炎(丙型肝炎以下简称丙肝)和42例慢性丙肝患者血清和PBMC中HCV RNA.结果 慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于急性丙肝患者(P<0.001);急、慢性丙肝患者血清和慢性丙肝患者PBMC中HCV RNA检出率显著高于ALT正常的抗-HCV阳性者(P<0.001);2例患者血清中HCV RNA阴性,PBMC中可测及,12例患者血清抗-HCV阴性,而血清HCV RNA阳性。结论 血清HCV RNA检测有助于抗-HCV阴性丙肝的诊断和早期诊断;丙肝的肝损害可能与HCV RNA血症有关;PBMC中HCV感染在丙肝的慢性化和慢性肝损害中可能起一定作用,PBMC中可贮存HCV RNA。     

乳腺癌肿瘤细胞检测及其临床意义

目前,在部分未见转移的乳腺癌患者中,通过免疫细胞化学和分子生物学的方法能检测到骨髓中的微转移细胞和外周血中的循环肿瘤细胞,而且研究证实检测肿瘤细胞的存在与否,对预后判断和治疗效果监测都有一定的意义,本文就目前所采用的检测微转移细胞和循环肿瘤细胞的方法和它们的临床意义作一简要综述。     

膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP-7mRNA的表达及意义

目的探讨膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP7mRNA的表达及其临床意义。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应检测36例膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP-7mRNA表达含量,以30例健康人作为对照。结果36例膀胱尿路上皮癌患者中,28例（77．8％）外周血MMP7mRNA表达阳性,阳性表达率与肿瘤大小、数目及初复发无明显相关性,但不同病理分期及分级间的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05）,肿瘤浸润和病理高级别者的阳性表达率明显高于肿瘤表浅和低级别者（P〈0．05）。30例对照组无阳性表达。结论检测膀胱尿路上皮癌患者外周血中MMP-7mRNA表达有助于识别高危患者、预测肿瘤浸润与转移和预后评估。     

外周血STC-1mRNA测定及其在结直肠癌诊断中的价值

目的比较斯钙素（STC-1）mRNA在结直肠癌患者和健康人外周血中表达水平的差异,初步探讨STC-1mRNA作为循环肿瘤标志物的临床意义。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测37例结直肠癌患者、18名健康人外周血STC-1mRNA的表达水平,并对其中30例患者的癌胚抗原（CEA）和糖链抗原199（CA199）等血清肿瘤标志物进行比较分析。结果结直肠癌患者与健康人的外周血STC-1mRNA表达水平差异有统计学意义,患者组高于健康组;以受试者工作特征（ROC）曲线分析,发现STC-1mRNA作为结直肠癌诊断指标具有较高的敏感性和特异性,其曲线下面积为0．730;以0．5为表达阳性界值,STC-1mRNA检出结直肠癌的效能优于血清肿瘤标志物CEA和CA199的联合应用。结论应用荧光定量RT—PCR检测结直肠癌患者外周血STC-1mRNA表达水平具有较高的诊断价值,其可能成为新的用于结直肠癌诊断的循环肿瘤标志物。     

原发性胆汁性肝硬化患者B淋巴细胞刺激因子基因表达的测定及临床意义

目的建立检测人B淋巴细胞刺激因子(BLyS)mRNA的相对定量方法,探讨其基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性。方法基于TaqM an-MGB探针技术,以18SrRNA为内参照,通过目的基因与内参基因荧光强度达到一定阈值时的循环数之差(△CT值)定量原始模板浓度,建立实时荧光逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)相对定量方法,检测30名正常人和40例PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)BLyS基因的表达。结果PBC患者外周血单个核细胞BLyS mRNA表达的△CT值为9.5±2.5,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),其原始模板浓度为正常对照组的4.3倍。PBC患者中抗核抗体(ANA)阳性占80%;其中ANA 1∶100组BLyS检测的△CT为11.4±0.9,与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);而ANA 1∶1 000和ANA 1∶10 000组BLyS的△CT值与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.001),两组间△CT值比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论PBC患者PBMC BLyS mRNA表达水平明显升高,且与ANA滴度相关。     

外周血游离LUNX mRNA检测在非小细胞肺癌患者辅助诊断中的意义

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血细胞外游离 LUNX mRNA,探讨其在 NSCLC 辅助诊断中的意义。方法选择原发性NSCLC患者65例,将体检正常的50例健康者设为对照组。采用实时聚合酶链反应（RT-PCR）检测其外周血游离LUNX mRNA,评价该指标对NSCLC辅助诊断的价值。结果65例肺癌患者38例外周血游离LUNX mRNA 检出阳性,阳性率显著高于健康体检者,差异有统计学意义（P＜0．01）;低分化以及晚期肺癌患者该基因检出阳性率高于中高分化及早期肺癌患者,差异有统计学意义（P＜0．01）;LUNX mRNA阳性率与患者性别、年龄、肿瘤组织类型、发生部位及患者吸烟与否无关。结论外周血游离LUNX mRNA检测对NSCLC具有特异辅助诊断价值。     

外周血细胞因子和炎性细胞在肺癌患者中的表达变化及临床意义

目的 探讨肺癌患者外周血12种细胞因子和3种炎性细胞及其比值的变化与临床意义。方法 研究对象为2020年3月至2022年6月期间在青岛大学附属医院诊治的458例肺癌患者及44例健康查体人员,采用多重微球流式免疫荧光发光法检测外周血细胞因子水平,荧光流式细胞技术检测炎性细胞计数。统计学分析采用秩和检验。结果 对照组、小细胞肺癌(SCLC)组和非小细胞肺癌(NSCLC)组3组间外周血白细胞介素(IL)-2、IL-5、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子(TNF)-α 5种细胞因子水平差异存在统计学意义(P均<0.05)。与对照组相比,SCLC组和NSCLC组IL-6、IL-8、TNF-α水平均明显升高,同时NSCLC组IL-5水平明显升高而IL-2水平明显降低(P均<0.05);SCLC组IL-6水平较NSCLC组显著升高(P<0.01);肺鳞癌组IL-2、IL-6水平较肺腺癌组明显升高(P均<0.01)。对照组、SCLC组、NSCLC组3组间外周血中性粒细胞计数(ANC)、淋巴细胞计数(ALC)、单核细胞计数(AMC)、中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值(NLR)和单核...     

色素上皮细胞衍生因子在膀胱癌中的表达和临床意义

目的探讨膀胱癌中色素上皮细胞衍生因子(PEDF)mRNA的表达及其临床意义。方法用聚合酶链反应(PCR)检测30例膀胱肿瘤和10例癌旁正常组织中PEDF mRNA的表达情况。通过CD34免疫染色的方法检测肿瘤组织中微血管密度。结果30例肿瘤组织中有23例(76.6%)检测到PEDF表达下调,而10例正常组织只有1例(10.0%)。PEDF表达与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤数量以及肿瘤分期没有明显相关性。PEDF表达下调与肿瘤的恶性程度和微血管密度相关。结论本研究首次报道PEDF膀胱癌中的表达情况,该基因的表达沉默可能与膀胱癌的发展进程有关。     

色素上皮细胞衍生因子在膀胱癌中的表达和临床意义

目的探讨膀胱癌中色素上皮细胞衍生因子（PEDF）mRNA的表达及其临床意义。方法用聚合酶链反应（PCR）检测30例膀胱肿瘤和10例癌旁正常组织中PEDF mRNA的表达情况。通过CD34免疫染色的方法检测肿瘤组织中微血管密度。结果30例肿瘤组织中有23例（76.6%）检测到PEDF表达下调,而10例正常组织只有1例（10.0%）。PEDF表达与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤数量以及肿瘤分期没有明显相关性。PEDF表达下调与肿瘤的恶性程度和微血管密度相关。结论本研究首次报道PEDF膀胱癌中的表达情况,该基因的表达沉默可能与膀胱癌的发展进程有关。