羧基水溶性量子点在鼻咽癌标志物EBNA1标记中的应用

目的探讨605nm羧基水溶性量子点在鼻咽癌标志物EB病毒核抗原1(EBNA1)中的标记方法。方法将605nm羧基水溶性量子点和鼻咽癌EBNA1在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的作用下共价交联,生成量子点标记的抗原,对标记后的抗原采用紫外可见吸收谱、荧光光谱测定,琼脂糖凝胶电泳分析。结果羧基水溶性量子点与鼻咽癌EBNA1抗原通过表面氨基与羧基缩合形成的稳定共价键,羧基水溶性量子点与鼻咽癌EBNA1抗原之间实现了成功连接,标记后荧光发射光谱检测结果表明,标记后的量子点EBNA1溶液的发射峰位置在380nm附近,保持良好的荧光特性。结论 605nm羧基水溶性量子点采用共价交联法可稳定标记鼻咽癌标志物EBNA1,为后续研究提供可靠依据。     

单克隆乙型肝炎表面抗体的生产及其在检测乙型肝炎表面抗原的酶联免疫吸附试验系统中的应用

ELISA(酶联免疫吸附试验)系统检测HBsAg(乙型肝炎表面抗原)的敏感度与特异性,很大程度上取决于用作酶标记的抗-HBs(乙型肝炎表面抗体)的纯化程度。如用动物免疫血清,要经过饱和硫酸铵双沉淀法以及离子交换层析,获得的IgG(免疫球蛋白G)抗-HBs,再通过HBsAg亲和层析,制备高度纯化     

肺炎支原体抗原量子点免疫层析法的建立及初步应用

目的建立肺炎支原体(Mp)抗原量子点免疫层析的检测方法,初步评价其在临床辅助诊断中的应用价值。方法在偶联剂碳二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)作用下,使鼠抗人Mp单克隆抗体(针对P1蛋白)与羧基量子点(CdSe/ZnS)偶联,制备量子点标记抗体包被在玻璃纤维膜上,以另一株Mp单抗(针对P1蛋白)作为捕获抗体包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上,建立双抗体夹心量子点免疫层析法检测肺炎支原体抗原。该方法检测130份临床咽拭子标本,并与荧光聚合酶链反应方法相比较。结果经过一系列的反应条件优化,确定偶联剂EDC用量为0.4mg/mL,sulfo-NHS用量为0.58mg/mL,标记抗体浓度1∶100稀释,捕获抗体浓度为0.75mg/mL,反应时间为10min。量子点免疫层析法检测临床标本,阴性符合率为96.4%,阳性符合率为90.0%。结论量子点(CdSe/ZnS)标记免疫层析法检测Mp与荧光聚合酶链反应法具有较好的符合性,该方法操作简便、检测快速、灵敏度高,适用于Mp感染的早期诊断。     

基因工程重组乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎Dane颗粒在乙型肝炎表面抗体检测中的联合应用

目的用DNA重组技术在毕赤酵母中表达多聚组氨酸融合重组乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白，与血源乙型肝炎Dane颗粒联合使用，制备乙型肝炎表面抗体酶免试剂盒。方法将S基因插入酵母表达载体，转化毕赤酵母菌后表达重组抗原。表达产物包被聚丙乙烯反应板，与辣根过氧化物酶标记Dane颗粒配对，用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测HBsAb。结果用重组HBsAg和Dane颗粒酶标记物制备的试剂对卫生部临床检验中心HBsAb质控物及血清标本进行检测，灵敏度达10mIu／ml，特异性达100％，重复性及线性良好，与进口商品试剂检测结果一致。结论毕赤酵母表达系统表达的具有良好免疫反应性和特异性的重组HBsAg，可与酶标记血源Dane颗粒配对制备HBsAb免疫检测试剂，Dane颗粒的其他抗原成分不会干扰检测的特异性。     

酶联免疫联合核酸检测对减少输血传播疾病风险的探讨

目的研究酶联免疫联合核酸检测对减少输血传播疾病风险的效果。方法选取2016年1月-2017年12月三明市中心血站采集的献血者血液样本68345例为研究对象。所有血液样本均采用两种不同厂家生产的试剂进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、艾滋病抗体(抗-HIV)以及梅毒抗体(抗-TP)平行检测。分析所有献血者血液样本其HBsAg、抗-HCV、抗-HIV以及抗-TP检测结果。此外,对于酶联免疫检测阴性以及0.7≤样本检测值/临界值(S/CO)≤3.0的血液样本进行核酸检测,分析核酸检测结果。结果 68345例献血者血液样本中HBsAg、抗-HCV、抗-HIV以及抗-TP酶联免疫检测不合格人数占比为0.83%(570/68345),其中1.0≤S/CO≤3.0血液样本89例,S/CO3.0样本164例,0.7≤S/CO1.0样本319例,合格血液样本67775例。67775例酶联免疫检测合格献血者检出HBV-DNA、HCV-RNA与HIV-RNA阳性人数占比分别为0.07%(46/67775),检出HCV-RNA与HIV-RNA阳性人数占比均为、0.00%和0.00%。(0/67775)。酶联免疫检测HBsAg0.7≤S/CO1.0献血者核酸检测阳性率(5.36%)明显低于酶联免疫检测HBsAg1.0≤S/CO≤3.0献血者为5.36%(6/112),明显低于酶联免疫检测HBsAg1.0≤S/CO≤3.0献血者的阳性率(22.58%(7/31),组间对比差异有统计学意义(P0.05)。结论采用酶联免疫联合核酸检测可显著降低输血传播疾病风险,从而达到提高血液质量以及输血安全的目的,值得推广应用。     

抗体电极在酶标测定中的初步应用

本文作者依据酶标(EIA)测定乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的方法,制成抗体电极,来测定生物液中的HBsAg.其方法是:首先分离提纯人血清中HBsAg,用以免疫家兔,制备特异性的抗体。分离纯化抗体,先用电泳,再用二乙基氨基乙基纤维素(DEAE-Cellulose)柱层析。采用NaKace等人的方法,将所得家兔抗HBsAg的γ球蛋白与辣根过化氧物酶连接。所得的抗体-酶的复合物,用葡聚糖G200分离提纯。用403nm的波长测定。按2-3个分子的辣根过氧化物酶与一个分子的IgG结合,将未标记的抗体,固定到人工膜上后,将其浸泡在每升含1克的庆大霉素,pH6.80 20mmol/L的磷酸     

基于石墨烯量子点和Fe_3O_4纳米复合探针的肾病管型的荧光成像技术的研究

目的建立一种基于石墨烯量子点(GQDs)的肾病管型荧光检测技术。方法首先,将Fe_3O_4纳米颗粒与抗人免疫球蛋白抗体(anti-IgG)结合,然后,将氨基化修饰的GQDs连接到Fe_3O_4/anti-IgG表面,构建荧光探针。为了避免交联试剂N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)对GQDs的荧光猝灭效应,只加入交联试剂1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)。再用牛血清清蛋白(BSA)封闭纳米颗粒上的剩余活性基团。最后,将Fe3O4/GQDs复合材料作为荧光探针,标记样品中的管型,再用荧光成像进行检测,对该方法进行初步性能评价。结果 Anti-IgG、GQDs与Fe_3O_4纳米颗粒表面连接后通过透射电子显微镜成像显示连接成功。GQDs的荧光强度没有在Fe_3O_4/anti-IgG连接后明显下降。这种荧光检测方法具有高灵敏度(最低检出限为2mL~(-1))、高特异性及线性范围宽(2~2 000mL~(-1))的特点,可对肾病患者尿中的管型(红细胞管型、白细胞管型、颗粒管型)进行准确定量分析。结论这种标记管型荧光成像分析可作为肾病诊断的新方法。     

胶体金免疫层析试验检测乙肝两对半时HBsAg假阴性结果的处置

目的胶体金免疫层析试验(GICA)检测乙肝两对半时,对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果疑似假阴性的标本分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)和时间分辨荧光分析法(TRFIA)定量试验进行HBsAg检测,并用抗体中和确认试验进行确认,以获得一个处理GICA检测HBsAg产生假阴性结果的可靠方法。方法 2014年1月至2015年2月用GICA检测乙肝两对半的标本3 078例,选取其中结果为单乙型肝炎核心抗体(抗-HBc),或单乙型肝炎e抗体(抗-HBe)为阳性,或抗-HBc和抗-HBe同为阳性,而HBsAg、乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)均为阴性的标本86例,分别用ELISA和TRFIA检测其HBsAg,对检测为阳性的标本进行抗体中和确认试验确认。结果 86例标本经抗体中和确认试验确认阳性的为35例;ELISA检出阳性标本28例,其中2例为假阳性;TRFIA检出阳性标本35例与抗体中和确认试验符合率100%。结论 GICA检测乙肝两对半时,对HBsAg结果疑似假阴性的标本可选用TRFIA进行复查确认。     

核酸检测在入院患者乙型肝炎病毒筛查中的应用

目的探讨核酸检测在入院患者乙型肝炎病毒(HBV)筛查中的应用。方法横断面研究。收集2021年7月至2021年12月, 国内10家医疗机构入院患者血浆样本, 采用血清学免疫法和核酸筛查的方法, 分别检测乙型肝炎标记性指标如乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)及HBV DNA, 对不同方法学检测结果阳性数及患者临床信息进行统计学分析。结果 8 655例患者样本中, 血清学免疫法检出HBsAg阳性者216例(2.50%), 核酸筛查出HBV DNA阳性者238例(2.75%), 差异无统计学意义(P>0.05);其中, HBsAg、HBV DNA均阳性者210例(2.43%), HBsAg阴性、HBV DNA阳性者28例(0.32%), HBsAg阳性、HBV DNA阴性者6例(0.07%)。结论对入院需行乙型肝炎病毒筛查患者开展HBV DNA检测, 可与现行的血清学免疫法同样有效且能提高HBV的检出率。     

丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法酶联免疫试剂的初步临床评价

目的对研制的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）酶联免疫检测试剂进行临床评价。方法以克隆表达的HCV多表位嵌合蛋白作为包被抗原,经多表位嵌合蛋白修饰后用于标记抗原,研制HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂;检测血液筛查阴性标本440份,乙肝表面抗原阳性标本90份,HIV抗体阳性标本10份,梅毒螺旋体抗体阳性标本90份及丙型肝炎病毒抗体阳性标本259份。结果对259份HCV抗体阳性标本进行检测时,有3份标本未检出,应用Chiron RIBA确认试剂检测后,结果为阳性。其余标本的检测结果均为阴性。结论采用HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂共检测889份标本,其中只有3份标本结果不一致,总符合率99．7％,敏感性和特异性较好。     

量子点荧光免疫渗滤法定量检测血清C反应蛋白的研究

目的：对基于量子点荧光的免疫渗滤快速定量检测血清 C 反应蛋白（CRP）方法进行初步探索，旨在建立一种较好的快速定量检测方法。方法采用双抗夹心法原理在免疫渗滤板上建立自制量子点和量子点-抗体复合物快速免疫检测法，其结果在紫外光照射下进行荧光定性检测。采用激光器和荧光光谱仪相结合的方法，可对荧光检测结果进行定量分析。结果定性检测到 CRP 的最低浓度为0．156 mg/L；定量检测 CRP 浓度范围在0．1～100．0 mg/L 的样本，其检测荧光值与浓度有线性对应关系，线性拟合方程为：log（Y ）＝0．563log（X）＋4．570，r2＝0．958。结论荧光免疫渗透快速定量法可对血清 CRP 进行定量检测；量子点免疫标记技术平台具有开发新型免疫诊断试剂的潜力。     

快速检测血清HCG的半定量金免疫渗滤法的建立

目的建立一种伴有质控点的金免疫渗滤法（GIFA），用于半定量检测血清人绒毛膜促性腺激素（HCG）。方法应用2株抗HCG单克隆抗体，其中一株包被在固相膜上，另一株与胶体金结合，组成金免疫渗滤试剂。膜上另包被2种浓度的HCG，用于测定时的定量质控。结果该方法经HCG标准液测定，结果判定可分为〈50、50-300、〉300 IU／L3个半定量区；94例经化学发光免疫分析系统定量测定HCG浓度的临床血清标本用于本法的比对测定，结果符合性良好。结论该方法具有半定量和内质控的特点，结果可靠，适用于妊娠的早期诊断，方法简便、快速，特别适合中、小医院和门诊部使用。     

Highly luminescent polyethylene glycol-passivated graphene quantum dots for light emitting diodes

The emergence of fluorescent graphene quantum dots (GQDs) is expected to enhance the usefulness of quantum dots (QDs), in terms of their unique luminescence, photostability, low toxicity, chemical resistance, and electron transport properties. Here we prepared blue-photoluminescent polyethylene glycol GQDs (PEG-GQDs) through PEG surface passivation. The photoluminescence (PL) quantum yield (QY) of PEG-GQDs with 320 nm excitation was about 4.9%, which was higher than that of pure GQDs. The as-fabricated PEG-GQDs with high QY were then used as light-emitting diode (PGQD-LED) emitters, in which the GQDs were incorporated into polymeric host layers in a multilayer electroluminescent device; blue emission with a luminance exceeding 800 cd m⁻² was achieved, thus demonstrating the potential of PEG-GQDs as emitters in electroluminescence applications. Furthermore, the fluorescence mechanism of PEG-GQDs was investigated and proved that the origin of strong fluorescence of PEG-GQDs is associated with the luminescence from intrinsic states. The highly fluorescent PEG-GQDs will allow new devices, such as multicolor LEDs, to be developed with extraordinary properties, by tailoring the intrinsic and extrinsic states.

We prepared blue-photoluminescent polyethylene glycol GQDs (PEG-GQDs) through PEG surface passivation. The PL intensity was stronger than that of pristine GQDs. These were then used as LED emitters and the fluorescence mechanism was investigated.     

A highly sensitive fluorescent immunosensor for sensitive detection of nuclear matrix protein 22 as biomarker for early stage diagnosis of bladder cancer

A novel strategy is reported for highly sensitive, rapid, and selective detection of nuclear matrix protein NMP22 using two-color quantum dots based on fluorescence resonance energy transfer (FRET). Quantum dots (QDs) are highly advantageous for biological imaging and analysis, particularly when combined with (FRET) properties of semiconductor quantum dot (QDs) are ideal for biological analysis to improve sensitivity and accuracy. In this FRET system narrowly dispersed green emitting quantum dot CdTe core is used as a donor and labelled by monoclonal (mAb) antibody, while orange emitting quantum dot CdTe/CdS core shell is used as an accepter and labelled by polyclonal (pAb) antibody. The quantum dots are labelled by antibodies using EDC/NHS as crosslinking agent. Bovine serum albumin (BSA) solution was added to block nonspecific binding sites. The fluorescence intensity of QDs accepter decreased linearly with the increasing concentrations of NMP22 from 2–22 pg mL⁻¹ due to FRET system and fluoroimmunoassay reaction. This method has good regression coefficient (R² = 0.998) and detection limit was 0.05 pg mL⁻¹. The proposed FRET-based immunosensor provides a quick, simple and sensitive immunoassay tool for protein detection, and can be considered as a promising approach for clinical applications. The proposed FRET-based immunosensor provides a quick, simple and sensitive immunoassay tool for protein detection, and can be considered as a promising approach for clinical applications.

A novel strategy is reported for highly sensitive, rapid, and selective detection of nuclear matrix protein NMP22 using two-color quantum dots based on fluorescence resonance energy transfer (FRET).     

四种方法检测抗双链DNA抗体诊断效能的对比分析

目的评价绿蝇短膜虫间接荧光免疫法（CLIFT）、酶联免疫吸附法（ELISA）、线性免疫分析法（LIA）和化学发光免疫分析法（CLIA）4种方法检测抗双链DNA（dsDNA）抗体对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断效能。方法用4种方法学分别检测2012年7月-2013年6月178例研究对象血清,其中SLE患者86例,其他自身免疫性疾病患者62例,健康体检者30例。结果 4种方法检测抗dsDNA抗体对SLE的诊断效能从高到低依次为ELISA、CLIA、CLIFT和LIA,其中以ELISA的灵敏度最高（67.4%）,而CLIA的特异度最高（95.6%）;3种实验方法（ELISA、LIA、CLIA）与比较方法（CLIFT）的检测一致性非常高（Kappa值均〉0.8）;如果特异度设定为95.0%,ELISA和CLIA的的灵敏度差异无统计学意义（58.1%、60.5%,P〉0.05）。结论 CLIFT、ELISA、LIA和CLIA均可用于抗dsDNA抗体的临床检测,检测结果一致性高,诊断效能与方法学本身和所使用的截断值密切相关。     

前S1抗原与HBV血清标志物的相关性及临床意义

目的探讨前S1抗原与乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物的相关性及其在临床应用中的意义。方法用酶联免疫吸咐试验(ELISA法)检测前S1抗原和乙肝两对半,观察不同乙肝模式前S1抗原的表达水平以及乙肝患者在治疗过程中前S1抗原的变化情况。结果在452例乙肝病毒表面抗原(HbsAg)阳性的血清标本中,"大三阳"、HBsAg加抗-HBc(+)及"小三阳"三种模式的前S1抗原阳性率分别为88.73%、72.04%、60.83%;乙肝病毒e抗原(HbeAg)阳性组的前S1抗原阳性率88.73%,明显高于HBeAg阴性组的64.19%(P<0.01);16例经临床治疗HbeAg阴转的患者前S1抗原的阴转率为43.75%(7/16)。结论前S1抗原能较好地反映乙型肝炎病毒的存在与复制情况,有助于对乙肝患者的临床诊断、病情判断及疗效观察。     

含生物素化脂膜超声造影剂的制备与初步评价

目的 制备一种含生物素化脂膜的超声造影剂,并对其功能进行初步评价.方法 以冷冻干燥法在自制＂脂氟显＂（对照微泡）的基础上制备含生物素化脂膜超声造影剂微泡,检测其理化性质和造影功能,同时应用激光共聚焦显微镜和平行板流动腔法观察含生物素化脂膜微泡与链亲和素的黏附性.结果 ①含生物素化脂膜微泡造影剂在理化性质与小鼠肝脏造影显像方面能力与对照微泡比较差异无统计学意义（P〉0.05）;②与异硫氰酸荧光素（FITC）标记的链亲和素孵育后,含生物素化脂膜微泡荧光检测呈阳性,对照微泡为阴性;③含生物素化脂膜微泡可结合于链亲和素包被的培养皿上,且随着链亲和素包被浓度的增加其结合稳定性也相应提高.结论 应用冷冻干燥法在制备＂脂氟显＂微泡造影剂的基础上,可成功制备含生物素化脂膜超声微泡造影剂,为今后制备靶向显影及载药（基因）超声造影剂奠定了基础.     

Yellow fluorescent graphene quantum dots as a phosphor for white tunable light-emitting diodes

In recent decades, quantum dots have been considered to be highly promising photoluminescent materials for white light devices. During the application of quantum dots in the fabrication of white LEDs, the spectrum and color temperature of the devices are modulated; these devices often involve quantum dots with different emission wavelengths. In this study, yellow-green emitting graphene quantum dots (GQDs) were fabricated using a simple, low-cost and eco-friendly method. The obtained GQDs were cast in UV-curable siloxane. Then, a polymer film with superior optical transparency and excellent monodisperse properties of GQDs was formed. Via the simple adjustment of thickness and the GQD concentration of the color convert matrix, tunable color temperatures (3196–10 870 K) of the GQD-based white light-emitting diodes (LEDs) were achieved. The CIE (Commission Internationale de L''Eclairage) coordinates of the GQD-based white light-emitting diodes matched well with the blackbody radiation curve. Using the fluorescent polymeric matrix in white LEDs, good quality emission and gratifying stability could be obtained. Moreover, this indicates that this technology has the potential for applications in high-end lighting.

Tunable color temperature of graphene quantum dot-based white lighting emitting diodes had been achieved adjusting the thickness and concentration of color convert matrix.     

HBV—DNA和HBV—M定量检测的相关性研究

目的探讨HBV—DNA和乙型肝炎五项（HBV—M）定量检测之间的相关性及其在乙型肝炎感染诊断中的应用价值。方法收集我院363例乙型肝炎和既往感染HBV患者血清,实时荧光定量PCR检测HBV—DNA,同时以时间分辨免疫荧光技术（TRFIA）定量检测HBV-M,用统计软件分析两者之间的关系。结果乙型肝炎大三阳（HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性）患者外周血HBV—DNA阳性率为92．9％（79／85）,平均DNA含量（4．31±1．64）×10^6Copies／ml。乙型肝炎小三阳患者（HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性）外周血HBV．DNA阳性率为47．7％（105／220）,平均DNA含量（2．47±2．21）×10^4Copies／ml。HBsAg、HBcAb阳性3例,HBV-DNA均阳性,HBV—DNA为（5．73±1．14）×10。Copies／ml。余人群外周血HBV—DNA均阴性。HBV—DNA拷贝量与HBeAg载量呈正相关（r=0．59,P=0．041）;HBV。DNA拷贝量与HBsAg含量相关一致性不明显（r=0．221,P=0．077）。结论HBV—M与HBV—DNA之间既有联系又有不同,临床上可以多项检测来估计病情,判断疗效。     

对映异构聚乳酸/聚乙二醇空间异构复合水凝胶的药物释放及形貌和细胞毒性（英文）

背景：目前生物降解水凝胶已被广泛应用于抗癌药物及生物活性大分子的装载,但为了保护生物活性大分子的活性,需要得到凝胶化条件更温和,凝胶化时间更短的凝胶体系。目的：制备对映异构聚乳酸∕聚乙二醇的空间异构复合水凝胶,使其具有更短的凝胶化时间,实现对模拟药物溶菌酶的装载和控释。方法：以聚乙二醇为引发剂,辛酸亚锡为催化剂,丙交酯与聚乙二醇发生开环聚合反应,得到聚乳酸/聚乙二醇的三嵌段共聚物（PLLA-PEG-PLLA和PDLA-PEG-PDLA）。用1HNMR,FT-IR和XRD表征三嵌段共聚物。10%PLLA20-PEG227-PLLA20的水溶液和10%PDLA21-PEG227-PDLA21的水溶液在室温下混合,12h后形成凝胶。通过XRD考察凝胶化机制,以溶菌酶为模拟药物,考察凝胶的释药特性,通过扫描电镜考察凝胶的形貌,采用MTT法考察凝胶的细胞毒性。结果与结论：成功得到聚乳酸/聚乙二醇的三嵌段共聚物,在嵌段共聚物中,聚乳酸嵌段和聚乙二醇嵌段都能结晶,但以聚乙二醇嵌段的结晶为主。通过XRD证明凝胶中存在空间异构复合作用,溶菌酶在凝胶中通过凝胶的溶蚀和降解行为,在7d之内释放完全。通过扫描电镜观察到冻干的水凝胶呈三维贯穿的多孔结构,空隙尺寸在50~100μm之间。鼠成纤维细胞与浓度为100%的凝胶浸提液共培养72h之后,细胞的存活率为99.3%。