脂多糖对中性粒细胞核转录因子-κB活性的影响

目的：探讨在脂多糖（LPS）刺激下,中性粒细胞核转录因子-κB（NF-κB）活性变化及其抑制因子（IκBα）的影响。方法：离体培养人中性粒细胞,分为来普霉素B（LMB）干预组（A组）、LPS刺激组（B组）和LPM＋LPS组（C组）。各组分别在刺激后0、15、60、120min,用NF-κBp65试剂盒检测细胞核NF-κB活性,用Western-blot检测细胞核、浆中IκBα含量。结果：A组中各时相点NF-κB活性无明显变化;同一时相点细胞核、浆之间,以及不同时相点细胞核之间、细胞浆之间IκBα含量无明显变化。B组LPS刺激后,NF-κB活性较0点时明显增强;细胞核、浆中各时相点IκBα较未刺激时显著降低;细胞核、浆中呈现一致性变化。C组NF-κB活性于60min时点后,较B组同时相点明显受抑制;胞浆中IκBα于60min时较B组明显减少,而核中IκBα于60min后较B组明显增加。结论：NF-κB活性与核中IκBα含量呈负相关;IκBα在中性粒细胞存在核浆穿梭,通过抑制IκBα核浆穿梭,可显著降低NF-κB活性。     

细胞外调节蛋白激酶与核因子-κB活化对重症急性胰腺炎大鼠中性粒细胞凋亡延迟的调控作用

目的探讨细胞外调节蛋白激酶和核因子-κB活化对重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis,SAP）大鼠中性粒细胞凋亡延迟的调控作用。方法60只雄性SD大鼠随机分为对照组、SAP组、吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（pyrrolidine thiocarbamate,PDTC）组（CPTC组）和细胞外调节蛋白激酶特异性抑制剂PD98059组各15只,对照组大鼠仅作开腹再缝合,SAP组、PDTC组和PD98059组大鼠采用胆胰管逆行注射质量分数4％牛磺胆酸钠建立SAP模型,PDTC组和PD98059组大鼠造模前分别注射PDTC和PD98059,对照组和SAP组仅注射等量生理盐水。24h后于大鼠下腔静脉取血分离中性粒细胞,体外培养16h后采用流式细胞仪检测中性粒细胞凋亡率和Bcl—xl基因表达情况。结果体外培养16h后,SAP组中性粒细胞凋亡率明显低于对照组、PDTC组和PD98059组（P〈0．01）,Bcl—xl基因表达水平明显高于对照组、PDTc组和PD98059组（P〈0．01）;PDTC组和PD98059组中性粒细胞凋亡率低于对照组（P〈0．01）;PD98059组Bcl—xl基因表达水平高于对照组（P〈0．01）,PDTC组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SAP时大鼠中性粒细胞中Bcl-xl表达明显增加,导致其自发凋亡率减低,PD98059或PDTC可明显抑制Bcl-xl表达,恢复其自发凋亡率。     

核转录因子-κB在急性肾损伤细胞凋亡中的作用

急性肾损伤是临床常见的危重症,病死率高,缺乏有效的防治措施.研究发现,细胞凋亡在急性肾损伤的发生机制中起着重要作用.核转录因子-κB (NF-κB)是具有多向转录调节作用的核蛋白因子,与细胞凋亡关系密切,参与多种凋亡相关基因的转录调控,具有抑制和促进细胞凋亡的双向作用.本文就NF-κB信号传导在急性肾损伤细胞凋亡中的作用作一综述.     

核因子κB与血液系统肿瘤凋亡的关系

核因子κB(NF-κB)是调控多种基因的重要转录因子。近年来发现，NF-κB的不适当激活与血液系统肿瘤的发生、增殖、转移及细胞耐药密切相关。对NF-κB进行调控目前已经成为抗肿瘤治疗的热点。     

核因子κB与血液系统肿瘤凋亡的关系

核因子κB(NF-κB)是调控多种基因的重要转录因子。近年来发现,NF-κB的不适当激活与血液系统肿瘤的发生、增殖、转移及细胞耐药密切相关。对NF-κB进行调控目前已经成为抗肿瘤治疗的热点。     

核转录因子-κB与细胞凋亡

细胞凋亡在体内稳态平衡、机体防御、老年及许多疾病的发生过程发挥重要作用。核转录因子 κB(nuclearfactor kap pa ,NF κB)是细胞内一种重要的核转录因子 ,它在细胞因子诱导的基因表达中起关键性的调控作用 ,并参与机体的免疫反应、防御反应等。近年来 ,NF κB在抗细胞凋亡中的作用及其机制是医学研究中的热点之一。本文将对NF κB、细胞凋亡及其两者的关系作一综述。     

核因子-κB在大鼠烧伤后中性粒细胞致心功能损害中的作用

目的 探讨大鼠烧伤早期核因子-κB(NF-κB)活化对中性粒细胞(PMN)在心肌组织中聚集和发生损害作用的影响.方法 将170只Wistar大鼠随机分正常对照组(20只)、烧伤组(90只)、烧伤后吡咯烷二硫代氨基甲酸盐干预组(PDTC组,60只).后两组大鼠均于背部造成35%体表总面积Ⅲ度烧伤后,立即腹腔注射等渗盐水,且PDTC组同时皮下注射PDTC 250 mg/kg.对照组除不烧伤外,其余处理同烧伤组.伤后1、3、6、12、24 h,凝胶电泳迁移率分析法检测心肌组织NF-κB活性;逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测心肌组织白细胞介素8(IL-8)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达;八导生理记录仪记录左心室最大收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)及心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和下降速率(-dp/dtmax);并测定心肌组织髓过氧化物酶(MPO)活性.对照组作相同检测.数据采用SPSS 10.0统计软件行单因素方差分析.结果 烧伤组大鼠心肌组织NF-κB活性伤后迅速增高,伤后1 h达峰值(20.27±3.43)×104积分灰度值(A),明显高于对照组[(2.18±0.38)× 104A,P＜0.01],伤后24 h仍高于对照组(P＜0.01).伤后3、6、12、24 h心肌组织ICAM-1和IL-8mRNA表达、MPO活性均较对正常对照组明显升高(P＜0.01),:LVSP、±dp/dtmax明显低于正常对照组(P＜0.01),而LVEDP高于正常对照组(P＜0.01).与烧伤组比较,PDTC组上述指标指标均有明显的改善(P＜0.01).结论 严重烧伤可活化心肌组织NF-κB,从而上调黏附分子和趋化因子等的合成和释放,导致PMN在心肌组织中聚集,引起心肌功能损害.     

阿拓莫兰对体外循环中中性粒细胞核转录因子-κB的干预作用

目的　研究阿拓莫兰对临床体外循环 (CPB)患儿中性粒细胞核转录因子 (NF) -κB激活的干预作用。方法　随机抽取年龄 6～ 13岁先心病患儿 2 0例 ,配对分组为对照组 10例、干预组 10例 ,干预组CPB预充液中加入阿拓莫兰 30mg kg,分别于术前 2 4h、CPB开始 2 0min、复温前、CPB结束前、术后 4h、术后 2 4h抽取静脉血 ,分离中性粒细胞 ,提取核蛋白 ,以电泳迁移率实验测定NF -κB活性变化。结果　CPB开始 2 0min后 ,中性粒细胞NF -κB已被激活 ,在复温前达到峰值 ,术后 2 4h逐渐恢复至术前水平 ;干预组NF -κB活性下降 ,差异显著 ( P <0 0 5 )。结论　CPB过程可激活中性粒细胞NF -κB ,在中性粒细胞介导的CPB创伤、炎性反应中起重要作用 ;阿拓莫兰可抑制中性粒细胞NF -κB激活 ,减轻炎性反应。     

X射线辐射诱导HepG2细胞的凋亡及对核因子κB的激活作用

目的:探讨核因子κB在X射线电离辐射诱导HepG2细胞凋亡中的作用。方法:实验于2004-02/2005-03在南方医科大学南方医院完成。将HepG2细胞分3组:对照组不加任何处理因素;辐射组单纯X射线电离辐射6Gy;核转录因子κB抑制剂组是指在照射前30min用20μmol/L的lactacystin预处理细胞,然后按照同样的辐射条件进行X射线照射。流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫电泳迁移率改变分析法检测细胞内核因子κB的激活,应用SPSS10.0软件包行多组均数间方差分析。结果:对照组、辐射组、核转录因子κB抑制剂组的细胞凋亡率分别是1.73%,20.90%,35.23%。对照组的核因子κB微弱激活,辐射组明显激活,核转录因子κB抑制剂组的活性较辐射组减弱,与对照组相似。结论:辐射可以引起HepG2细胞凋亡,并诱导了核因子κB的激活,且可能在X射线辐射诱导HepG2细胞凋亡中发挥抗凋亡作用。     

核转录因子-κB在烧伤早期的活性变化及意义

目的：研究严重烧伤后早期血液中白细胞核转录因子-κB（NF-κB）的活性变化及意义。方法：通过测定烫伤大鼠早期（48h）内血液中白细胞NF-κB的活性变化规律以及反映其与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及细胞黏附分子-1（ICAM-1）的关系。结果：大鼠烧伤后血液中白细胞NF-κB活性较伤前高，以伤后12h最为明显。血浆TNF-α和ICAM-1及中性粒细胞数（PMN）均有类似变化，与NF-κB变化呈正相关。结论：烧伤早期血中白细胞NF-κB活性增高，它可能在烧伤后全身炎症反应综合征的发生发展过程中起重要作用。     

X射线辐射诱导HepG2细胞的凋亡及对核因子κB的激活作用

目的：探讨核因子κB在X射线电离辐射诱导HepG2细胞凋亡中的作用。 方法：实验于2004—02／2005—03在南方医科大学南方医院完成。将HepG2细胞分3组：对照组不加任何处理因素；辐射组单纯X射线电离辐射6Gy；核转录因子κB抑制剂组是指在照射前30min用20μmol／L的lactacystin预处理细胞，然后按照同样的辐射条件进行X射线照射。流式细胞仪检测细胞凋亡率，免疫电泳迁移率改变分析法检测细胞内核因子κB的激活，应用SPSS10．0软件包行多组均数间方差分析。 结果：对照组、辐射组、核转录因子κB抑制剂组的细胞凋亡率分别是1．73％，20．90％，35．23％。对照组的核因子κB微弱激活，辐射组明显激活。核转录因子κB抑制剂组的活性较辐射组减弱，与对照组相似。 结论：辐射可以引起HepG2细胞凋亡，并诱导了核因子κB的激活，且可能在X射线辐射诱导HepG2细胞凋亡中发挥抗凋亡作用。     

三氧化二砷诱导白血病细胞凋亡与核因子-κB活化的关系

为了研究三氧化二砷（As2O3）诱导白血病细胞凋亡与核因子-κB（NF-κB）活化以及血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（MMP9）表达的关系,应用流式细胞仪Annexin V FITC法检测白血病细胞系K562-n凋亡;采用免疫组织化学方法半定量分析K562-n细胞NF-κB、VEGF、MMP9表达的动态变化.结果显示：As2O3在诱导K562-n细胞凋亡的过程中可活化NF-κB,而VEGF、MMP9的表达也随之增强.地塞米松（DXM）1μmol/L能显著增加As2O3诱导K562-n细胞凋亡的作用和抑制K562-n细胞NF-κB活化,细胞凋亡增加率为43.04%,（P＜0.05）,NF-κB活化抑制率为31.15%（P＜0.05）,VEGF、MMP9变化与NF-κB一致.结论：As2O3诱导K562-n细胞凋亡的过程中可使NF-κB活化,VEGF、MMP9表达亦随之增强;DXM可通过抑制NF-κB活化增强其诱导K562-n细胞凋亡的作用,VEGF、MMP9的表达也随之下降.     

核因子-κB激活在急性重症胰腺炎发病中的作用

目的:探讨核因子-κB激活在急性胰腺炎患者血液中的表达与时间关系。方法:急性胰腺炎患者40例,对照组40例,采用流式细胞术检测外周血中核因子-κB激活。结果:胰腺炎组各时段(<24h、24～48h、48～72h、>72h核因子-κB激活明显高于对照组(P<0.01)。24h内核因子-κB明显激活;24～48h达高峰,48h以后逐渐减弱,1周后核因子-κB激活向正常水平接近。对照组各时段核因子-κB激活不明显(P>0.05)。结论:急性胰腺炎患者早期外周血中核因子-κB明显激活。可望应用核因子-κB抑制剂抑制核因子-κB激活,控制急性胰腺炎的进展。     

N-乙酰半胱氨酸对心力衰竭兔核因子NF-κB活化及心肌凋亡的干预作用

目的 探讨慢性心衰兔心肌核因子-κB(NF-κB)活化与心肌凋亡的关系以及N-乙酰半胱氨酸(NAC)的作用机制.方法 健康日本大耳白兔共50只,雌雄不限(武汉大学医学院实验动物中心提供),随机选取10只设为对照组.余40只兔采用盐酸阿霉素复制心衰模型(阿霉素1mg/kg,每周2次,连续8周),造模成功25只,随机分为心衰组(n=12)和NAC干预组(n=13),NAC组给予NAC注射液(300 mg/kg)耳缘静脉注射,每天1次共4周.对照组与心衰组均注射等体积生理盐水.观测血流动力学指标、心肌凋亡指数、血清和心肌总抗氧化能力、bcl-2、Bax蛋白在心肌细胞中表达的水平,以及NF-κB p65的表达和核结合活性的改变.通过t检验、方差分析和直线相关分析等统计学方法,观察NAC对上述指标的影响.结果 对照组、心衰绀和NAC组心肌细胞凋亡指数(AI)分别为1.57%、55.62%和21.71%,NAC组较心衰组心肌细胞凋亡率显著降低(P＜0.001).心衰组Bax蛋白、NF-κBp65的核内表达增高,bcl-2表达下调,bcl-2/Bax比值和总抗氧化能力[血清中(8.86±2.21)U/ml,心肌中(1.26±0.30)U/mgprot]下降.NAC可不同程度地改善心功能指标,降低心肌凋亡指数和Bax的表达,显著降低NF-κB p65核内表达及升高总抗氧化能力[血清中(13.23±2.92)u/ml,心肌中(1.58±0.19)U/mgprot]、bcl-2/Bax比值和bcl-2的表达.结论 氧化应激可激活NF-κB,启动bcl-2和Bax的转录调节相应蛋白的合成,介导心肌凋亡,促进慢性心衰的发生发展.NAC具有抗氧化作用,通过降低心肌NF-κB活性,减少心肌细胞凋亡,改善心功能.     

急性胰腺炎患者核因子-κB激活的检测

目的探讨核因子-κB激活在急性胰腺炎患者血液中的表达与时间关系。方法急性胰腺炎患者20例,对照组12例。采用流式细胞术检测外周血中核因子-κB激活。结果胰腺炎组各时段(<24h、24~48h、48~72h、>72h核因子-κB激活明显高于对照组,P<0.05。24h内核因子-κB明显激活(54.07±18.17)%;24~48h达高峰(70.03±5.62)%,48h以后逐渐减弱,一周后NF-κB激活向正常水平接近。对照组各时段核因子-κB激活不明显(P>0.05)。结论急性胰腺炎患者早期外周血中NF-κB明显激活。可望应用NF-κB抑制剂抑制NF-κB激活,控制急性胰腺炎的进展。     

结核分枝杆菌调控巨噬细胞凋亡机理的研究进展

综述了结核分枝杆菌感染机体后，巨噬细胞凋亡的正、反向调控机制。在感染早期，结核分枝杆菌可以激活caspase酶系，引发一系列级联反应，在细胞因子IL-1β、TNF-α的作用下，激发信号转导途径。胞内线粒体发生一系列结构和功能的变化，释放凋亡诱导因子。一系列因子协同作用．最终启动巨噬细胞凋亡，并导致细菌被杀灭。同时，结核分枝杆菌某些菌体成分可被巨噬细胞表面特异性受体识别．抑制巨噬细胞中分泌细胞因子的生物学活性．从而减少凋亡。结核杆菌通过一系列调控机制．以休眠状态存活于巨噬细胞中，与宿主达成一种动态平衡。     

靶向核因子κB p65siRNA促人血管内皮细胞EAhy926的凋亡

背景:作者前期工作已经证实,子宫内膜异位症患者的在位、异位内膜中核因子κBmRNA和蛋白均表达升高,核因子κB参与了子宫内膜异位症细胞黏附、侵袭和血管形成的病理过程.目的:观察RNA干扰技术(RNAi)靶向抑制核因子κB p65基因对人血管内皮细胞(EAhy926)增殖的影响.方法:10 μg/L血管内皮生长因子刺激下培养EAhy926细胞,给予转染核因子κB p65 siRNA,同时设立对照组,分别是阴性对照siRNA转染组、空白脂质体组及正常对照组(不给予其他任何处理),48 h后分别采用Heochst 33342荧光检测法、MTT法及流式细胞仪术检测细胞的增殖抑制与凋亡情况.结果与结论:与正常对照组比较,核因子κB p65 siRNA组的细胞增殖抑制率及细胞凋亡率均明显升高(P＜0.05);而阴性对照siRNA转染组及空白脂质体组的细胞增殖抑制率及细胞凋亡率则差异无显著意义.结果证实,核因子κB p65 siRNA能显著抑制人血管内皮细胞增殖,促进内皮细胞的凋亡发生.     

核因子κB及其在脓毒症器官衰竭中的作用

真核细胞转录因子κB（nuclear factor κB,NF-κB）是一种普遍存在于真核细胞中具有序列特异性二聚体结构的转录因子,在脓毒症多种免疫调节因子的表达中发挥关键作用。细菌产物和细胞因子受体,如肿瘤坏死因子（TNF-α）受体和白细胞介素（IL）1受体,通过与Toll样受体（toll-like receptor,TLR）相互作用启动信号转导途径导致核内NF—κB积聚,并使负责细胞因子、趋化因子、黏附分子、调亡因子等基因的转录增加。     

弥漫性脑损伤后大鼠肠黏膜上皮细胞的凋亡和核因子-κB的表达

目的 观察弥漫性脑损伤后大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡以及核因子-κB（NF-κB）表达的动态变化，探讨两者在肠黏膜屏障功能障碍中的作用。方法 采用Marmarou模型致大鼠重型弥漫性脑损伤，150只雄性Wistar大鼠随机分成对照组和伤后1、2、4、8、12、24、48、72、168h组，共10组，利用免疫组化技术检测NF-κB在不同时相组的表达，采用原位末端标记（TUNEL）法计数不同时相组凋亡细胞。结果 致伤组NF-κB表达的积分光密度均显著大于对照组（P〈0．01）；伤后1h凋亡细胞数量即开始增加，于伤后12h达到峰值后逐渐下降，但直到168h均较对照组明显升高（P〈0.01）。结论 弥漫性脑损伤后激活NF-κB。肠黏膜上皮细胞凋亡增加，两者在肠黏膜屏障功能障碍发生中可能起重要作用。     

三氧化二砷对哮喘小鼠肺组织IκB-α表达和核因子κB激活的作用

目的研究三氧化二砷(As2O3)对哮喘小鼠肺组织核因子κB(NF-κB)激活和抑制蛋白IκB-α表达的影响,探讨As2O3抗炎作用的可能机制以及哮喘防治的新思路。方法BALB/c小鼠36只随机分为对照组、哮喘组(卵蛋白末次激发后1,4,12和24h)和As2O3治疗组(4mg/kg),每组6只。Diff-Quick染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)中嗜酸细胞募集特点,电泳迁移率实验和免疫印迹实验分别检测肺组织NF-κB活性和IκB-α表达水平。结果①哮喘组BALF中嗜酸细胞募集[(48.72±5.38)%]较对照组[(0.56±0.21)%]增加(q=33.46,P<0.01),治疗组较哮喘组减少(q=34.65,P<0.01)。②哮喘组肺组织NF-κB活性均较对照组增加(q=41.84,72.75,61.61,16.32,P<0.01或0.05),以4h活性最高,治疗组较哮喘组减少(q=89.48,P<0.01)。③哮喘组肺组织IκB-α表达较对照组减少(q=30.94,P<0.01),治疗组较哮喘组增加(q=23.67,P<0.01)。④BALF中嗜酸细胞募集、肺组织NF-κB活性与IκB-α表达水平均呈负相关(r=-0.82,-0.94,P<0.01)。结论肺组织NF-κB过度激活可能是哮喘慢性气道炎症持续存在的基础;诱导肺组织IκB-α表达和抑制NF-κB激活,可能是As2O3发挥广泛抗炎作用的重要机制。