川芎嗪促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的信号传导机理研究

目的　探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓造血微环境的影响及其信号传导机理。方法小鼠经60 Coγ射线 (6 0Gy)照射后即胃饲磷酸川芎嗪注射液 ,4mg 只 ,2次 d,连续 1 3d。分别于照射后第 3 ,7,1 4天处死小鼠 ,取尺骨制备石蜡切片 ,用免疫组化方法检测骨髓组织中因子Ⅷ相关抗原和VEGF受体flk 1的表达水平 ;培养骨髓基质细胞 ,用Westernblot方法分析骨髓基质细胞黏着斑激酶(磷酸化FAK)的表达水平。结果　川芎嗪组小鼠造血恢复明显比对照组快 ,照射后第 1 4天 ,川芎嗪组骨髓组织flk 1染色吸光度值 (A)显著高于对照组 (P <0 0 5) ,其基质细胞磷酸化FAK的表达在第1 4天时已接近正常水平 ,而对照组的表达仍较弱。结论　川芎嗪可以促进骨髓内皮细胞上flk 1的表达和基质细胞中FAK的磷酸化 ,是改善放射损伤小鼠骨髓微环境、促进造血恢复的的机理之一     

人骨髓粒-巨噬祖细胞和基质祖细胞的辐射敏感性:剂量率效应

体外培养的人类白血病细胞系已显示出比骨髓基质细胞更高的辐射敏感性。然而,所提供的有关照射剂量率方面的资料并不多。要了解正常人骨髓造血细胞辐射敏感性是否与剂量率有一定关系,首先,必须纯化各种造血祖细胞。大量资料表明,新鲜骨髓含有很多其他非造血系细胞群,这些细胞同造血干细胞相比,可能对辐射有个高的固有敏感性。但目前还不能从骨髓中将其所含的非造血性基质细胞分离出来,致使人骨髓造血细胞的放射生物学研究工作陷入困境。本文报道以新鲜骨髓细胞及通过长期骨髓培养LTBMC方法,从基质细胞中分离出的非贴壁造血细胞作为靶细胞,观察不同剂量率的X线对同系细胞活存的影响。     

X线照射后骨髓基质的恢复

放射疗法损伤造血基质,使照射野的造血受抑制。有些研究者认为,基质细胞不参与辐射损伤的修复。为了测定基质对辐射的敏感性和该部位造血的恢复,作者以X线全身照射小鼠1000拉德以下,或用≥1000拉德X线进行局部照射(一侧后肢)。以照后l小时至1个月的有核红细胞计数和体外骨髓     

骨髓基质成纤维样祖细胞的辐射敏感性和照射后的变化

造血组织照射后的变化首先是由于造血细胞损伤引起的,但这些变化也发生在维持造血细胞增殖和分化的造血基质中。局部受大剂量照射后,继发的骨髓     

小鼠骨髓细胞长期培养中支持造血的基质细胞辐射抗性

骨髓基质细胞确切的辐射敏感性是一个尚有争论的问题。为此,Zuckerman KS 等对照射0、9、15、20、25、50、100、200或500Gy 的长期培养小鼠骨髓细胞贴壁融合基质细胞层进行了研究。所有受照射的培养物造血均迅速停止。并且,观察十周未见恢复。辐射剂量在100Gy 以下时,基质细胞看不出明显形态学改变。但是随着剂量加大,则出现细胞浆肿胀、细胞溶解和基质细胞的明显减少。照射9Gy 后两天内,RNA和蛋白质总合成下降35～60%,下降的主要原因可能是由于贴壁层中造血细胞的丢失。辐射剂量达100Gy     

CD34在放射损伤小鼠骨髓细胞的表达及其意义

目的 研究辐射所致造血功能障碍时造血干／祖细胞表面CD34抗原表达的变化及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）及斑点杂交的方法,初步检测了昆明种小鼠受6．0Gy辐射后不同时相点时骨髓单个核细胞CD34表达量的变化,并对其可能的机理及其临床意义进行了探讨。结果 放射损伤后小鼠骨髓单个核细胞CD34表达在受照后24h即明显增高,之后一直维持在较高水平,至照后15d时仍较正常时高50％。结论 在此照射剂量时小鼠骨髓内残存的、具有造血功能的早期造血祖细胞在骨髓造血的内稳态遭到破坏后,可代偿性地迅速增加其增殖能力和细胞数量,以加速造血的恢复过程。这可能是机体对损伤导致造血功能低下时的一种代偿性增生机理。     

放射损伤及烧伤血清对小鼠骨髓基质细胞的影响

为了探讨骨髓基质细胞与放烧复合伤所致造血功能障碍之间的关系 ,观察了不同剂量的γ射线体外照射及照射后培养不同时间对骨髓基质细胞损伤的影响。同种小鼠烧伤后不同时间的血清对基质细胞贴壁率和基质祖细胞 (ＣＦＵ Ｆ)集落形成的影响 ,以及放射损伤复合烧伤血清对体外培养的骨髓基质细胞的作用。一、材料和方法1 实验动物 :昆明种健康小鼠 ,雌雄各半 ,体重 (18～ 2 2 )ｇ ,由第一军医大学实验动物中心提供。2 烧伤小鼠血清的制备 :根据公式Ｓ(ｃｍ ) 2 =9 13Ｗ2 / 3(Ｗ =体重 ,ｇ)计算动物体表面积 ,背部剪毛后 ,3%凝固汽油烧 7ｓ,致 1…     

rhM-CSF扩增的基质细胞联合造血干/祖细胞输注对小鼠造血重建作用的初步观察

增殖期造血细胞是机体中对辐射最敏感的细胞。各种急、慢性放射病 ,都直接或间接地与造血功能的改变 ,包括因造血功能衰竭所引起的出血和感染有关 ,造血干 祖细胞移植是改善急性放射损伤所致造血功能障碍的主要方法之一。骨髓基质细胞是组成骨髓造血微环境的主要细胞成份 ,由其产生的多种细胞因子对造血细胞归巢、增殖和分化产生关键的作用。有研究报道[1 ,2 ] 基质细胞与骨髓造血干 祖细胞(ＨＳＣ)联合回输可加快骨髓造血重建 ,但由于基质细胞来源困难 ,限制了该方法的应用。笔者应用ｒｈＭ ＣＳＦ体外有效地扩增小鼠骨髓来源基质细胞 ,继…     

放射复合伤对骨髓基质细胞粘附功能影响的初步观察

目的初步探讨放射复合伤对骨髓造血微环境中基质细胞粘附功能损伤的机理。方法采用流式细胞仪、细胞粘附实验和细胞粘附阻断实验等方法,检测５０Ｇｙγ射线全身照射、１５％体表面积Ⅲ度烧伤和放射复合伤小鼠骨髓基质细胞表达血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ１）、纤维连接素（Ｆｎ）、层粘素（Ｌｎ）和Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）等成分的变化以及骨髓基质细胞贴壁层对骨髓单个核细胞粘附能力的影响。结果①骨髓基质细胞表达ＶＣＡＭ１、Ｆｎ、Ｌｎ和ＣｏｌⅣ的水平具有以单烧组＞正常组＞复合伤组＞单放组的特点。②伤后第３～７天,单烧组骨髓基质细胞的粘附能力显著高于正常组（Ｐ＜００５～Ｐ＜００１）;单放组和伤后第３天的复合伤组则反之。③分别用ＶＣＡＭ１、Ｆｎ、Ｌｎ和ＣｏｌⅣ单抗处理骨髓基质细胞贴壁层后,骨髓单个核细胞的粘附率较未加单抗组均有不同程度的下降。结论骨髓微环境基质细胞粘附功能的损伤可能是影响放射复合伤骨髓造血功能障碍的原因之一。     

基质成纤维样祖细胞(CFU-f)在造血放射损伤修复中的作用

目前,急性放射病尚无理想的治疗措施。巳知造血组织的再生是本病恢复的关键。为了促进造血再生,许多学者从移植骨髓干细胞着手进行了一系列的研究,并取得了一定的进展。但人们巳发现,放射损伤时,若无造血基质的迅速恢复,则骨髓移植的疗效亦难显现。因在大荆量照射后,由于基质成分的损伤,造血微环境遭受破坏,造血组织便不能再生[1~0]。因此,造血的最终恢复,基质微环境起着重要作用。基质成纤维样祖细胞(CFU-f)是造血基质的再生源泉和重要成分,故研究CFU-f的性质、形态、功能及其对放射损伤造血修复的作用,已成为当前一个重要的研究课题[7]。     

小鼠骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤的影响

目的：探讨小鼠骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC）同种异体移植对接受全身大剂量辐射小鼠造血修复的影响。方法：在体外对小鼠骨髓基质细胞进行培养、扩增,并将第三代细胞通过尾静脉移植到同种接受全身大剂量射线照射的小鼠,测定移植后不同时期小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）值,观测各组脾集落形成单位（colony forming unit,CFU-S）,探讨同种异体骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤修复的影响。结果：经骨髓基质细胞移植的小鼠,其WBC、RBC、PLT、HGB在移植后15-20 d较对照组明显增高（WBC、PLT、HGB：P〈0.01;RBC：P〈0.05）,移植组CFU-S明显高于对照组（P〈0.01）。结论：同种异体小鼠骨髓基质细胞移植,能促进小鼠造血干细胞在脾脏定居,增强造血干细胞形成集落的能力,并能显著提高外周血细胞数量,促进损伤后早期造血功能重建。     

银耳制剂对小鼠骨髓造血干细胞及其放射敏感性的影响

水文研究了银耳制剂对小鼠骨髓及造血干细胞的影响。腹腔注射后早期,骨髓有核细胞数明显下降,而外用血白细胞数未见增多,药物使骨髓CFU-S和GM-CFC生成率显著提高,但对其放射敏感性的影响较小。该制剂对照射动物造血功能的恢复有明显的促进作用,揣测与其改善造血微环境有关。     

人骨髓和脾脏基质成纤维细胞的辐射敏感性

照射后的造血改变首先取决于造血细胞自身的损伤。但有根据认为,照射能引起作用于造血器官建造特殊环境组织的改变。负责造血微环境的不是造血细胞,而是基质组织,其中包括造血器官基质成纤维细胞。本文报道了一种基质细胞即成集落性基质祖细胞(CUF-f)辐射敏感性的研究结果。实验用体外单层培养法,借此可定最测定CFU-f在骨髓和脾脏中的含量。前曾报道,原发性淋巴肉芽肿病病人骨髓CFU-f比肺结核病人的有较高辐射耐受性。穿刺淋巴肉芽肿病人胸骨或髂骨嵴取骨髓。脾脏小块取自这种病人(7例)切脾时。打碎脾脏断片,     

Notch信号在放射损伤小鼠骨髓基质细胞中的表达

目的探讨小鼠骨髓基质细胞放射损伤后Notch信号的表达。方法应用小鼠骨髓基质细胞体外放射损伤模型，采用RT-PCR检测了小鼠骨髓基质细胞Notch1、Jagged1、Hes1基因的表达。结果正常小鼠骨髓基质细胞中未见Notch1受体、Notch1配体Jagged1、Notch通路活化的下游基因Hes1mRNA的表达，给予^60Coγ射线照射后2h即可见上述基因的表达，照射后4h达高峰，8～12h恢复正常。各组间比较，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论γ射线作用于小鼠骨髓基质细胞后有Notch通路的活化。Notch通路参与了小鼠骨髓基质细胞的放射损伤过程。     

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞的变化及其对粒系祖细胞增殖的影响

放烧复合伤是战时核爆炸与平时核事故所致的主要伤类之一。放烧复合伤时造血组织损伤明显。它不仅累及造血实质细胞,支持造血的微环境也发生了明显的改变。本文研究放射损伤复合烧伤后骨髓基质祖细胞的改变及骨髓基质细胞对粒系祖细胞增殖的影响。一、材料和方法1实验动物、致伤方法和分组昆明品系健康小鼠,体重20～24ｇ。单放组:60Ｃｏγ射线一次全身照射6Ｇｙ,距离15ｍ,剂量率04Ｇｙ/ｍｉｎ;单烧组:3%凝固汽油烧7ｓ,致成15%Ⅲ度烧伤;放烧组:按以上条件先照射后烧伤;对照组:正常动物。所有动物致伤后腹腔注射生理盐水2ｍｌ。每组动物不少于…     

益气活血方对放射损伤骨髓基质细胞生长的影响

骨髓基质细胞在调节造血细胞的增生和分化中起活性作用 ,是造血诱导微环境的主要组成成分[1 ] ,放射诱导造血功能障碍的主要机理是基质细胞的损伤[2 ] 。本研究观察不同类型中药对放射损伤后小鼠骨髓基质细胞体外集落 (ＣＦＵ-Ｆ)形成能力的影响。一、材料和方法 :1 动物　清洁级昆明小鼠 2 0 0只 ,雌雄各 1 0 0只 ,体重2 5～ 30 ｇ ,随机分成治疗组及照射对照组 ,各组均为 40只。2 药物　按健脾益气、补肝肾、活血化瘀、益气活血治疗原则分别组成ａ、ｂ、ｃ、ｄ方剂。各方药物组成如下 :ａ 黄芪 30ｇ、山药 1 5ｇ、太子参 30 ｇ、茯苓、…     

雄甾与二甾体醚对小鼠造血干细胞的辐射防护作用

照前注射TP、19-NOR或ETIO,对700rad照射小鼠造血组织有防护作用,可提高照后7天骨髓有核细胞数、CEU-S含量和DNA含量及内源性脾结节数.照后给药无效.雌二醇与雄甾或孕甾结合的二甾体醚对照射小鼠骨髓CEU-S也有防护作用,主要是促进造血干细胞损伤的恢复.     

早期和晚期放射损伤发展的放射生物学分析

恶性肿瘤病患者的放射治疗,对人体伴有两种平行的有害并发症:在照射剂量不足时,肿瘤的治疗不彻底;在超剂量照射时,周围正常的组织可能发生明显的损伤。放射治疗以后患者寿命的提高,导致晚期放射损伤的发生率的增加。因此,研究放射损伤的各个方面(发病机制,发生放射损伤与照射剂量的相关性)和相应的治疗和预防方法是当前迫切的任务。本文目的是提供文献资料的分析,并探索早期放射损伤和晚期放射损伤综合性放射生物学概念的关系。细胞和组织的放射敏感性与放射损伤的发病机制。众所周知,受照射组织损伤时,在某种程度上包括组织结构的所有成份:主质、神经末梢、结缔组织     

裂变中子和γ线照射小鼠造血损伤和修复的特点

中子对造血系统的影响已有不少报道。其作用是肯定的。但是关于中子引起造血损伤和修复特点的研究还不够系统、完整,尤其对照射后的恢复问题尚有争议。因此,进一步系统地比较研究中子和γ线照射后造血系统损伤和修复特点,对了解两种射线作用的异同,估计中子照射动物可能治疗的潜力都是有益的。本文报道了裂变中子和γ线照射小鼠骨髓造血干细胞的辐射敏感性,骨髓CFU-S和GM-CFU-C的再殖能力,以及骨髓有核细胞和外周血白细胞数的改变,藉以了解造血系统损伤和修复的特点。材料和方法动物:LACA成年健康雄性小鼠,10—     

核事故后骨髓移植的作用

骨髓造血干细胞移植可挽救遭受致死放射剂量的动物和人的性命。移植的造血干细胞在受者体内是长期还是暂时发挥造血功能,取决于放射剂量、供受者的组织相容性及残存的免疫活力。全身照射剂量在1～3Gy时,宿主大量造血干细胞及淋巴细胞仍存活,移植后会立即出现细胞排斥反应。当受照剂量≥8Gy,宿主免疫系统和造血干细胞受到抑制,但即使受照剂量已≥12Gy时,T细胞还可能存活。实验发现,中等剂量3～5Gy照射后,在出现明显临床损害前,即行骨髓移植的小鼠,其存活率反较未行移植的对照组小鼠低,这种现象被称为中间致死带效应。在大动物如狗、猴等一般不显示中间致死带效应。临床上,对受照剂量<8Gy者,不行骨髓移植。