除草醚诱导的小鼠先天性膈疝肺发育不良模型的建立

目的 建立小鼠先天性膈疝(CDH)模型.方法 实验组10只妊娠第8天的BABL/C小鼠通过灌胃给于除草醚25 mg/只,正常对照组给予橄榄油,于妊娠第20天剖宫产取出子鼠,解剖显微镜下观察子鼠有无膈疝形成,测定子鼠体重及双肺重量,HE染色观测肺组织发育情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织SP-B、SP-C和VEGF表达水平.结果 实验组69只子鼠中有膈疝形成者39只,成功率为56.5%,子鼠双肺重量较对照组显著降低(P＜0.01);实验组有膈疝形成和无膈疝形成者的肺组织均发育不良,处于假腺体期和原始肺小管期;与对照组比较,实验组胎肺组织中SP-B、SP-C和VEGF表达水平均显著下调(P＜0.01),且与膈疝形成与否无关.结论 采用除草醚能在小鼠成功建立CDH模型,具有简便、成功率高的优点,为深入研究CDH发病机制及其治疗提供了新的手段.     

转化生长因子-β1在慢性同种移植肾病大鼠早期中的表达

慢性同种移植肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)是肾移植一年后晚期移植物丢失的主要原因,但其精确的发病机制并不清楚.近年来有研究发现转化生长因子-β1(TG F-β1)直接参与CAN的发病过程[1～3].但关于TGF-β1在CAN发病早期的表达情况报道甚少.我们利用国际标准CAN大鼠模型观察TGF-β1在CAN发病早期中的表达情况.     

两种大鼠肺动脉高压模型转化生长因子-β1及其I型受体表达的比较

目的 观察转化生长因子(TGF)-β1及其Ⅰ型受体在两种大鼠肺动脉高压模型中表达的变化.方法 36只Spargue-Dawley大鼠,对照组、分流型和药物型肺动脉高压模型各12只,使用原位杂交方法观察TGF-β1及其Ⅰ型受体在肺小动脉表达的定位,并使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观察两者mRNA转录量的变化.结果 大鼠分流型与药物型肺动脉高压模型中TGF-β1及其Ⅰ型受体mRNA主要分布于肺小动脉内皮细胞和外膜成纤维细胞,两种模型中TGF-β1(1.17±0.09、1.09±0.07)及其Ⅰ型受体(0.80±0.06、0.93±0.02)mRNA转录均较对照组明显增加,三组间均数比较差异有统计学意义(P0.05).结论 TGF-β1信号参与了肺动脉高压肺血管重塑的过程,但在不同的模型中作用机制不同.     

先天性膈疝模型胎鼠肺发育不良的超微结构动态观察

目的 探讨先天性膈疝(CDH)肺发育不良的机制,研究CDH模型胎鼠肺组织不同发育阶段的超微结构特点.方法 将7只Sprague-Dawley(SD)孕鼠用随机数字表法分为两组,膈疝组(n=4):于孕9.5 d用Nitrofen(125 mg/只,溶于2 ml橄榄油中)灌胃1次,分别于SD鼠孕16 d,18 d和21 d...     

胎儿和少儿皮肤内转化生长因子-β1和β3基因表达的变化

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1) ,TGF β3及其Ⅰ 型和Ⅱ 型受体 (TBRⅠ ,TBRⅡ )在胎儿和少儿皮肤中表达的特征。方法　提取 18例不同胎龄的胎儿皮肤和 6例少儿皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测这 4种基因的表达。结果　在早期妊娠胎儿的皮肤中 ,TGF β1,TBRⅠ和TBRⅡ基因表达较弱 ,随着胎龄的增加 ,这 3种基因表达逐渐增强。在少儿皮肤内 ,这 3种基因的表达量分别为妊娠早期皮肤的 1.3 ,1.3和 1.2倍 ,基因表达显著升高 (P <0 .0 5 )。在早期胚胎的皮肤中 ,TGF β3基因表达较强 ,而在少儿皮肤内 ,该基因表达低下。结论　在早期胚胎皮肤中 ,TGF β1,TBRⅠ和TBRⅡ基因低表达 ,TGF β3基因的高表达可能与胎儿皮肤创面无瘢痕修复密切相关。     

33例新生儿先天性膈疝

目的 分析新生儿先天性膈疝的临床表现及诊治经验,以提高先天性膈疝病婴手术成功率及生存质量.方法 回顾性分析2004年1月至2009年9月新生儿重症监护室收治的33例先天性膈疝新生儿临床表现及治疗结果.结果 33例先天性膈疝中21例行手术治疗,术后生存17例,其中4例产前经超声检出者术后均生存.死亡4例,死因与肺发育不良有关.12例未行手术者全部死亡,其中1例生后即刻死亡.结论 新生儿先天性膈疝的病死率较高,应加强产前诊断及产科、新生儿科、小儿心胸外科的合作以提高先天性膈疝病婴的生存率.

Abstract：

Objective To review the clinical experience of diagnosis and treatment of the congenital diaphragmatic hernia in newborn infants. Methods Thirty-three neonates were diagnosed having congenital diaphragmatic hernia in our hospital from Jan. 1,2004 to Sept. 30, 2009. The clinical data was retrospectively reviewed. Results 21 cases were treated surgically and 17 survived, while 4 cases died. The main cause of death was congenital pulmonary dysplasia. Another 12 cases refused to accept surgical treatment and they all died, one died shortly after he was born. Four cases who had been diagnosed by prenatal ultrasonography were survived. Conclusion The mortality of congenital diaphragmatic hernia in neonates was still high. Prenatal diagnosis of the congenital diaphragmatic hernia is very important and the cooperation between the obstetrics, neonatology and cardiothoracic surgery will improve the survival rate of congenital diaphragmatic hernia in newborn infants.     

输精管阻断对大鼠睾丸转化生长因子β1表达的影响

目的　了解大鼠输精管阻断和阻断解除后睾丸内TGFβ1表达状况。　方法　大鼠 90只 ,随机分为输精管阻断 (VG)组 35只 ,输精管阻断解除 (VOG)组 2 0只 ,假手术组 (SOG) 35只 ,采用免疫组织化学染色和原位杂交技术检测TGFβ1的表达。　结果　VG组从实验第 8周起近基底膜的管周细胞和精原细胞TGFβ1表达较SOG组增强 ,其中 8、16、2 0、2 4周与SOG组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。表达量在 8周后并不随结扎时间延长而改变 ,而是维持在相对稳定的水平。VOG组TGFβ1表达亦较SOG组显著增高。　结论　输精管阻断后TGFβ1表达升高可能是导致睾丸细胞凋亡的原因 ,而阻断解除后TGFβ1水平无明显下降可能是导致生精功能恢复不完全的原因。     

转化生长因子、核心蛋白聚糖在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型前列腺组织中的检测及意义

目的 研究慢性非细菌性前列腺炎(chronic nonbacterial prostatitis,CNP) SD大鼠前列腺组织中转化生长因子(TGF-β1)和核心蛋白聚糖(DCN)的表达,并初步探讨前列腺组织纤维化的发病机制.方法 将60只6月龄SD大鼠随机分为对照组、30 d和45 d CNP模型组各20只.CNP模型组采用去势+高剂量苯甲酸雌二醇肌注方法建立.采用双抗体夹心法检测SD大鼠前列腺组织中TGF-β1、DCN的含量.结果 ①45 d、30 d CNP模型组大鼠TGF-β1表达水平[(140.78 ±37.94)、(106.28 ±30.63) ng/L]均显著高于对照组[(13.42-±4.24)ng/L,P＜0.05];且45 d CNP模型组高于30 d CNP模型组(P＜0.05);②45 d、30 d模型组DCN表达水平[(947.06±114.28)、(722.96±110.66) ng/L]显著高于对照组[(63.97±15.34) ng/L,P＜0.05];且45 d CNP模型组高于30 d CNP模型组(P＜0.05);③TGF-β1、DCN在CNP大鼠模型前列腺组织中表达呈正相关.结论 TGF-β1、DCN可能参与CNP发病过程,在前列腺纤维化的形成中起着重要的作用.     

孕激素调节人成骨细胞转化生长因子-β1、β2的表达

目的研究孕激素对正常成人成骨细胞转化生长因子(TGF)-β1、TGF-β2表达的调节作用,探讨孕激素治疗绝经后骨质疏松症(OP)的作用机制.方法鉴定成人成骨细胞(hOB),测定碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素分泌,Van Gieson氏苦味酸酸性复红染色法进行Ⅰ型胶原染色.hOB用孕酮干预.Northern杂交、ELISA分别检测hOB TGF-β1、TGF-β2 mRNA和蛋白质分泌.结果观察到hOB分泌的ALP活性为(74.3±4.7)mU/mg蛋白,培养上清液骨钙素含量为(3.84±0.39)ng/ml蛋白,Ⅰ型胶原染色呈红色.观察到孕酮增强hOB TGF-β1、TGF-β2 mRNA表达呈剂量依赖性(P＜0.001);10-9mol/L孕酮诱导12～24 h促进TGF-β1、TGF-β2 mRNA表达,呈时间依从性.孕酮促进hOB TGF-β1、TGF-β2蛋白质分泌呈剂量依赖性(P＜0.001);10-9mol/L孕酮诱导12～24 h促进TGF-β1、TGF-β2蛋白质分泌,呈时间依从性.结论孕激素可能通过诱导成骨细胞TGF-β1、TGF-β2表达,促进成骨细胞增殖与分化,增强成骨功能及骨基质合成,促进骨形成.     

转化生长因子-β1在脑血管畸形中的表达

转化生长因子 β(TGF β)具有细胞生长与分化、细胞黏连与细胞外基质的形成、修复损伤、免疫调节以及胚胎发育等多种生物学功能[1,2 ] 。小鼠体内实验显示TGF β能快速诱导血管形成,在体外实验中也观察到促进胶原蛋白的形成[3 ] 。我们采用TGF β1RNA狭缝杂交观察TGF β1在脑血管畸形(AVMs)中的作用。一、材料和方法1.标本来源:取自我院和华山医院神经外科(陈衔成教授提供部分标本)手术切除14例脑AVMs及其周围脑组织标本和8例正常脑血管和脑组织标本液氮速冻,-70℃保存。2 .总RNA提取、RNA电泳:用Trizol试剂提取总RNA电泳…     

强脉冲光促进大鼠皮肤转化生长因子-β1表达的实验研究

目的观察强脉冲光照射对SD大鼠皮肤转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响,以进一步阐明强脉冲光治疗皮肤光老化可能的机制。方法随机选取15只SD大鼠,两侧背部皮肤去毛,以一侧为强脉冲光照射实验组,对侧背部皮肤作对照组。采用波长560～1200 nm、能量27 J/cm~2、脉宽3.0 ms、双脉冲方式、脉冲延时10 ms的强脉冲光照射实验组皮肤,取术前及术后4周大鼠实验侧和对照侧皮肤标本,行大鼠皮肤TGF-β1蛋白免疫组化染色定位,观察大鼠皮肤TGF-β1的分布情况以及强脉冲光照射后TGF-β1的表达变化。结果TGF-β1分布于大鼠正常皮肤全层,主要分布在细胞外结缔组织基质胶原纤维中。强脉冲光照射刺激大鼠皮肤分泌TGF-β1,实验组强脉冲光照射4周后,大鼠皮肤TGF-β1表达较对照组显著增强(P<0.001),阳性产物主要分布在细胞外结缔组织中。真皮浅层较对照组有非常强烈的棕黄色着染,同时皮肤表皮细胞亦出现明显的阳性表达产物。阳性表达区成纤维细胞数量明显增多。结论强脉冲光照射后上调大鼠皮肤TGF-β1的表达,是强脉冲光治疗皮肤光老化的内在机制。     

老年大鼠骨痂中转化生长因子-β_1的表达

目的　探讨增龄对骨折愈合过程中转化生长因子 β1(TGF β1)表达的影响。方法　建立老年大鼠股骨骨折模型 ,于第 1、2、4、8、12周取骨痂 ,进行组织学观察 ,并用免疫组织化学方法进行TGF β1表达测定。结果　在 2、4周TGF β1主要在软骨细胞、间充质细胞而在 8周新生类骨质中有TGF β1表达。结论　增龄可引起成骨细胞功能降低 ,导致TGF β1分泌减少 ,使骨折的愈合延缓     

转化生长因子β1对大鼠原代肾小球系膜细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨原代培养的大鼠肾小球系膜细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）对其表达的影响。方法：采用RT-PCR和Westernblot方法检测大鼠原代培养的肾小球系膜细胞VEGF表达及不同浓度、不同时间的TGF-β1刺激对VEGF表达的作用。结果：原代培养的大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF164、120mRNA，TGF-β1呈时间依赖性增加其表达，在12h表达最高，分别为刺激前3．17、2．925倍，有统计学差异（P〈0．001）。在剂量反应曲线上，2ng／ml TGF-β1刺激作用最强，VEGF164、120mRNA表达分别为未刺激组的2．82、2．45倍，有统计学差异（P〈0．001）。与VEGF mRNA表达一致，大鼠原代肾小球系膜细胞仅见VEGF164蛋白表达，2ng／ml TGF-β1呈时间依赖性的增加VEGF 164蛋白表达，24h达高峰，为刺激前的2．37倍。结论：促进肾小球系膜细胞VEGF表达可能是TGF-β1介导肾脏损害发生、发展的机制之一。     

转化生长因子β1及其Ⅱ型受体在慢性胰腺炎大鼠中的表达

目的 建立大鼠慢性胰腺炎模型,检测模型大鼠胰腺组织转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGFβ1)及转化生长因子β1Ⅱ型受体(transforming growth factor-β1 type Ⅱ receptor,TβRⅡ)mRNA的表达.方法 24只健康雄性Wistar大鼠,随机分为2组:模型组大鼠尾静脉注射二丁基二氯化物(dibutyltin dichlo-ride,DBTC)溶液7 mg/ks,对照组仅注射相同体积的溶剂,28 d时剖杀动物,采用HE染色和Masson染色观察两组大鼠胰腺组织病理变化,采用荧光定量PCR检测TGFβ1和TβRⅢmRNA在胰腺组织的表达.结果 模型组大鼠胰腺组织镜下可见纤维组织增生明显,胰腺小叶结构破坏或消失,腺泡萎缩;与对照组相比,模型组大鼠胰腺组织TGFβ1和TBRⅡmRNA表达均升高(P<0.05).结论 TGFlβ1和TβRⅡ在DBTC诱导的大鼠慢性胰腺炎胰腺组织表达升高.     

早期慢性移植肾肾病大鼠的肾组织学改变及转化生长因子-β1的表达

目的探讨早期慢性移植肾肾病（CAN）大鼠的组织学改变与转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的关系。方法以F344大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立大鼠CAN模型,分为移植组、F344对照组和Lewis对照组。观察3组大鼠肾功能、肾组织学改变及。肾组织TGF-β1的表达。结果①与F344对照组和Lewis对照组比较,移植组大鼠24h尿蛋白及血肌酐明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,肾组织改变以单个核细胞浸润为主,肾组织TGF-t31表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;②移植组大鼠肾组织单个核细胞浸润与TGF-β1表达呈正相关,慢性病变与TGF-β1表达无相关性。结论早期CAN功能学上表现为出现蛋白尿、血肌酐升高,组织学上表现为以单个核细胞浸润为主,并与TGF-β1表达升高呈正相关。     

肝肺综合征大鼠肺微血管内皮细胞肌样分化时转化生长因子β1表达的变化

目的 评价肝肺综合征(HPS)大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)肌样分化时转化生长因子β1 (TGF-β1)表达的变化.方法 健康SD大鼠40只,雌雄不拘,3～4月龄.采用随机数字表法,随机取20只大鼠,采用慢性胆总管结扎法制备HPS模型,剩余大鼠行假手术,取腹主动脉血样4ml,离心后取血清.另取健康成年SD大鼠10只,原代培养、纯化及鉴定PMVECs.PMVECs接种于低糖DMEM培养基(106个/cm2),采用随机数字表法,将细胞随机分为2组:对照组(C组)和HPS组,每组24皿.C组给予正常大鼠血清,HPS组加入HPS大鼠血清,血清终浓度为10％.于细胞孵育24h(T1)、48 h(T2)和72 h(T3)时分别采用RT-PCR法和Western blot法测定PMVECs内平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、平滑肌肌动蛋白α(SM-α-actin)、肌钙蛋白、TG F-β1 mRNA及其蛋白的表达.结果 C组PMVECs内SM-α-actin、肌钙蛋白表达阴性,可见少量SM-MHC表达,HPS组PMVECs内SM-MHC、SM-α-actin、肌钙蛋白表达阳性.与C组比较,HPS组SM-MHC、TGF-β1 mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05);与T1时比较,T2.3时HPS组SM-MHC、SM-α-actin、肌钙蛋白、TGF-β1 mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05);与T2时比较,T3时HPS组SM-MHC、SM-α-actin、肌钙蛋白、TG F-β1 mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05).结论 TGF-β1在HPS大鼠PMVECs肌样分化时可能起到重要的调控作用.     

汉防己甲素对先天性膈疝大鼠模型胎仔肺内表皮生长因子及其受体的影响和意义

目的 探讨中药成分汉防己甲素（tetrandrine,TET）对大鼠先天性膈疝（congenital diaphragmatic hernia,CDH）模型胎仔肺内表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）及其受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的影响和意义。方法 实验组20只雌性SD大鼠于孕9．5d灌胃给予除草醚115mg／只;对照组4只灌胃给等量食用油。孕18．5d,实验组根据给药不同随机分为生理盐水组（normal solution group,NS组）、地塞米松组（dexamethasone group,Dex组）、汉防己甲素组（tetrandringe group,TET组）、地塞米松＋汉防己甲素组（D＋T组）,每组5只。孕21．5d对所有孕鼠行刮宫产,取出胎鼠两侧肺组织行大体观察、HE染色、EGF、EGFR免疫组织化学染色和图像分析。结果 正常对照组共产胎仔36只,无隔疝形成。实验组共产胎仔137只,CDH形成64只,致畸率46．7％。在Dex组、TET组和T＋D组,肺组织处于原始肺泡期或进一步成熟。EGF在NS组、Dex组、TET组、D＋T组及对照组的表达量依次递减（P〈0．05）,而EGFR在NS组、Dex组、TET组、D＋T组和对照组的表达量依次递增（P〈0．05）。结论 TET可使CDH胎鼠肺内EGF表达高峰提前,使EGFR表达上调,TET和Dex联合作用对促进EGF表达高峰提前及EGFR表达上调具有明显的协同效应。TET可以通过调节EGF及EGFR在肺内的表达而实现其促进肺组织细胞发育分化和改善肺血管构型的效应。     

转化生长因子-β1介导的足细胞损伤

肾小球足细胞既是免疫介导,也是非免疫介导损伤耙点,足细胞的损伤是导致大量蛋白尿和肾小球硬化的关键,机制十分复杂.转化生长因子-β1是多功能的细胞因子,近年来的研究发现其在介导足细胞凋亡、脱落及功能异常等方面发挥着重要作用.     

转化生长因子-β1与IgA肾病

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是由Assoian等[1]首次从血小板中提取出来的,它是一类多功能的细胞生长因子,能够抑制多类细胞的增殖、分化、促进细胞间质的形成.IgA肾病又称Berger's病,是以肾小球系膜区IgA免疫复合物沉积为特征的一类肾小球肾炎,病理改变以系膜增殖为基本组织学改变,临床上以血尿为主要表现.我国为IgA肾病高发地区,约占原发性肾小球肾炎的26%～34%,其预后较差,在确诊后5～25年内约20%～40%的患者发展为终末期肾脏疾病,这些引起了国内外学者的广泛关注,近年来发现TGF-β1的表达在IgA肾病中显著增高,与IgA肾病的转归密切相关.现将这一领域的有关研究进展作一概要综述.     

大鼠移植肝内胆管上皮细胞转化生长因子-β表达的变化

目的探讨肝移植术后肝内胆管上皮细胞(BEC)转化生长因子(TGF)-β的表达。方法建立大鼠原位肝移植模型,根据供肝冷保存时间而分为CP 1 h组(冷保存1 h)、CP 12 h组(冷保存12 h)、SO组(假手术组)。分别于术后1、3、7、14 d检测血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP);免疫组织化学法检测BEC增殖、TGF-β表达、肌纤维母细胞(MFB)分布。结果CP12 h组术后各时相点BEC增殖率(7.0%、27.8%、23.1%、17.8%)明显高于CP 1 h组同时相点水平(2.0%、6%、2.6%、2.3%)及SO组(1.2%)水平;血清ALT(>200 IU/L)、ALP (>160 IU/L)、TBIL(>3.6μmlo/L)水平持续高于CP 1 h组(ALP<200 IU/L,ALT<160 IU/L,TBIL<3.6μmol/L);CP 12 h组术后3 d,BEC分泌TGF-β,7、14 d表达显著,伴有大量MFB聚集于BEC周围。结论供肝较长时间的冷保存严重损伤胆道,诱导BEC活跃增殖并分泌TGF-β,促进胆管周围成纤维细胞发生向MFB的表型转化,是肝移植术后胆管周围纤维化、胆道狭窄等并发症的产生的细胞学基础。