一株多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因的研究

目的:研究铜绿假单胞菌多重耐药情况和相关机制。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)法对一株多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、氯霉素类基因、耐消毒剂和磺胺类基因检测。结果:PCR结果显示该株PA的TEM,MIR,CTX-M1群,OXA-1群,OXA-10群,aac(6′)-b,aac(6′)-,aac(3)-,ant(2″)-,catB,qacE△1-sul1基因均为阳性,GES,DHA,VEB,cmlA基因均阴性,Opr D2未缺失。结论:该株铜绿假单胞菌存在多重耐药基因,而且对胺类、胍类消毒剂耐受。     

鲍曼不动杆菌老年患者分离株中发现16S rRNA甲基化酶基因新亚型

目的了解鲍曼不动杆菌老年患者分离株16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因型。方法采用PCR检测20株鲍曼不动杆菌老年患者分离株12种16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果7株检出16SrRNA甲基化酶基因（armA），19株检出氨基糖苷类修饰酶基因[其中aac（3）-I阳性率为95％，ant（3″）-I为95％，aac（3）-II为40％，aac（δ′）-Ib为15％）]。6号株armA基因测得序列翻译成氨基酸序列与美国核酸库（GenBank）已登录的armA氨基酸不同，为新亚型。结论本组鲍曼不动杆菌老年患者分离株95％携带16SrRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。     

浙江丽水铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶编码基因研究

目的了解临床分离的铜绿假单胞菌中氨基糖苷类修饰酶编码基因存在状况。方法对临床分离的40株铜绿假单胞菌采用聚合酶链反应（PcR）检测基因[aac（3）-Ⅱ、aac（6）-Ⅰ,aac（6＇）-Ⅱ、ant（3＂）-Ⅰ、ant（2＂）-Ⅰ]。结果40株菌中aac（6＇）-Ⅰ阳性18株（45.0％）、ant（2＂）-Ⅰ阳性21株（52.5％），其余基因均阴性。结论丽水临床分离的铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶编码基因携带率高。     

多重耐药大肠埃希菌16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解多重耐药大肠埃希菌(ECO)氨基糖苷类药物耐药机制。方法采用PCR检测20株多重耐药ECO菌11种16S rRNA甲基化酶和氨基糖苷类修饰酶基因。结果1株检出16S rRNA甲基化酶基因(5.0%),并为新亚型;16株检出氨基糖苷类修饰酶基因(80.0%)。15号株rmtB基因测得序列翻译成氨基酸序列与美国核酸库(GenBank)已登录的rmtB氨基酸不同,为新亚型。结论本组多重耐药ECO菌氨基糖苷类耐药机制与产16S rRNA甲基化酶和产氨基糖苷类修饰酶相关。多重耐药ECO菌存在新的氨基糖苷类药物耐药机制。     

南京地区铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因分子类型分析

目的 调查南京地区铜绿假单胞菌(PA)氨基糖苷类药物修饰酶基因(AMEs)分子类型.方法 K-B药敏法测定2003～2005年临床分离的PA对庆大霉素、阿米卡星、链霉素的药敏表型,筛选出56株对氨基糖苷类药物耐药(至少对一种受试药物耐药)的菌株,聚合酶链反应(PCR)的方法对6种AMEs进行了检测和分析.结果 PA对庆大霉素的耐药率为51.8%(29/56),对阿米卡星的耐药率为26.8%(15/56),对链霉素的耐药率为96.4%(54/56).6种AMEs检出率由高到低分别为:aac(3)-Ⅱ 48.2%、ant(2')-Ⅰ 48.2%、aac(6')-Ⅱ 41.0%、ant(3')-Ⅰ 17.8%、aac(6')- 12.5%、aac(3)-Ⅰ 0.0%.总AMEs检出率为68.0%.结论 南京地区PA对氨基糖苷类抗菌药的耐药主要由AMEs引起.     

一株铜绿假单胞菌携带多种耐药基因的研究

目的：了解分离自烧伤患者的铜绿假单胞菌携带的耐药基因情况。方法：应用聚合酶链反应对多重耐药的铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、oprD2基因和消毒剂-磺胺耐药相关基因以及Ⅰ类整合酶基因检测和分析。结果：PCR结果显示TEM、GES型β-内酰胺酶基因，aac（6’）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ氨基糖苷类修饰酶基因扩增阳性。oprD2基因扩增检测呈缺失型。qacEΔ1-sulⅠ、intⅠ1基因扩增阳性。结论：铜绿假单胞菌携带多种抗生素灭活酶及耐消毒剂和Ⅰ类整合酶基因。多重耐药铜绿假单胞菌的逐渐增多，严重威胁烧伤抗感染治疗。     

多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因研究

目的 调查临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌中介导氨基糖苷类高水平耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的流行情况.方法 收集台州市中心医院、台州市立医院两家多重耐药鲍曼不动杆菌128抹,用K-B法测定18种抗菌药物;采用琼脂稀释法测定4种氨基糖苷类药物MIC值;PCR检测armA、rmtA、rmtB...     

铜绿假单胞菌分离株与耐药相关性研究

目的 是确调查期间铜绿假单胞菌血清学分型及分布,检测充行株的药物敏感性,方法 采用玻片法分型,Ｋｉｒｂｙ－Ｂａｕｅｒ纸片法进行敏感性测定。结果 血清型分布主要为１１型,并确定该型为此间主要血清型分离株,药敏试验结果 对５种内科常用抗生素有不同程度的耐药,其中对头孢噻肟的耐药达３２．８６％,敏感菌株只有８．５７％,对醵安卡娜,头孢喹酮,头孢他定有较高的敏感性。     

鲍曼不动杆菌临床分离株16S rRNA甲基化酶基因研究

目的 了解临床分离鲍曼不动杆菌(ABA)氨基糖苷类药物耐药性与16S rRNA甲基化酶基因存在的关系,探讨多药耐药机制.方法 收集临床标本20株鲍曼不动杆菌,采用K-B法测定细菌对卡那霉素、阿米卡星、妥布霉素、庆大霉素、奈替米星的敏感性;采用PCR法检测armA、rmtA、rmtB、rmtC和rmtD 5种16S rRNA甲基化酶基因.结果 19株鲍曼不动杆菌对上述5种氨基糖苷类药物全部耐药,1株对阿米卡星敏感,对另外4种表现为中度耐药.基因检测显示armA阳性率为90％,且armA基因存在变异,未检测到rmtA、rmtB、rmtC和rmtD基因.结论 鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药情况严重,16S rRNA甲基化酶基因armA为本次临床分离菌株耐药的主要原因,且armA基因存在变异.     

264株临床分离铜绿假单胞菌耐药性分析

目的：了解医院铜绿假单胞菌的分布及耐药状况。方法：标本经分离培养,采用美国BD公司BBLCrystal细菌鉴定分析仪进行鉴定。结果：铜绿假单胞菌医院感染主要发生在呼吸科病房（37.1%）,从临床标本中分离的264株铜绿假单胞菌中196株来源于痰,对氨苄西林、环丙沙星的耐药率分别为100.0%、40.9%;对其他β-内酰胺类抗菌药物中的阿米卡星、哌拉西林、哌拉西/他唑巴坦耐药率分别为20.1%、54.1%、28.4%;亚胺培南耐药率达20.0%,头孢他啶的耐药率最低,为12.5%。结论：铜绿假单胞菌是下呼吸道感染的主要致病菌之一,其耐药机制复杂,有多重耐药的特性,希望临床医生在治疗铜绿假单胞菌的感染过程中充分考虑其耐药机制,选用耐药率低的药物,避免诱导铜绿假单胞菌对抗菌药物广泛耐药。     

氨基糖苷类药物双圈耐药型鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因研究

目的 探讨在K-B法药物敏感试验中对氨基糖苷类药物双圈耐药的鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因携带状况以及药物诱导对该基因mRNA表达量的影响.方法 收集42株鲍曼不动杆菌,K-B法测定其药敏情况;PCR法扩增三种16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtB及rmtC;用RT-PCR的方法分析阿米卡星诱导前后耐药基因表达量.结果 90.4％(38/42)的菌株阿米卡星药敏纸片周围呈现双圈耐药,且均检测到armA,未检测到rmtB及rmtC,其余3株为敏感,1株为普通耐药,且PCR检测耐药基因为阴性.RT-PCR结果显示经阿米卡星诱导后细菌armA基因mRNA表达量显著上升.结论 双圈耐药现象与armA基因诱导型表达有关.     

应用16SrRNA基因序列分析快速鉴定临床标本中的革兰氏阳性杆菌

目的探索一种快速鉴定临床标本中革兰氏阳性杆菌的方法。方法利用PCR技术扩增待检菌株的16SrRNA基因序列,通过分析待检菌株的16SrRNA基因序列对其进行鉴定。结果5株待检菌株的16SrRNA基因序列均成功扩增,其中4株的16SrRNA基因序列与基因库中已注册的核酸序列相似率达99．9％以上,将其鉴定到种的水平,1株的16SrRNA基因序列与基因库中雷弗森菌属的核酸序列相似率为97．09％,将其鉴定为雷弗森菌属。结论应用16SrRNA基因序列分析可快速、准确地鉴定临床标本中的革兰氏阳性杆菌。     

多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶研究进展

氨基糖苷类抗生素在治疗鲍曼不动杆菌引起的感染中起着重要的作用.而鲍曼不动杆菌对该类抗生素的耐药机制主要包括产氨基糖苷修饰酶,外膜孔蛋白表达缺失,药物外排泵的表达和核糖体结合位点的改变等.质粒介导的16S rRNA甲基化酶是近年在多重耐药鲍曼不动杆菌中发现的一种新的耐药机制,可导致对氨基糖苷类抗生素的高水平耐药.本文就细菌rRNA的修饰作用、16S rRNA甲基化酶的发现、耐药与传播机制、耐药菌的流行、多重耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基[因的研究进展等方面作一综述.     

天津地区鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因的检测与耐药性分析

目的:了解天津地区鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因的携带情况,并进行耐药分析.方法:收集天津地区2所医院2010年8月-12月临床分离的152株鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法或纸片扩散法测定菌株药敏情况;聚合酶链反应(PCR)对鲍曼不动杆菌扩增7种16SrRNA甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE、npmA)并测序.结果:152株鲍曼不动杆菌对多黏菌素B的耐药率最低(0),其次是头孢哌酮/舒巴坦(15.79％)和左氧氟沙星(36.84％),对其他11种抗菌药物耐药率均在45％以上.83株耐氨基糖苷类菌株中armA阳性率为87.95％ (73/83),占实验菌株的48.03％(73/152),未检出其他6种16SrRNA甲基化酶基因.armA阳性菌株耐药严重,除多黏菌素B外,armA阳性菌株对其余13种抗菌药物的耐药率明显高于armA阴性菌株(均p＜0.01).多重耐药和泛耐药占的比例在armA阳性株中(100％和69.86％)也明显高于阴性株(21.52％和11.39％).结论:armA广泛存在于鲍曼不动杆菌中,未检出其他6种基因.     

关节液中细菌16s rRNA与23s rRNA诊断膝关节置换术后感染的价值

目的 探讨利用关节液中细菌16s rRNA与23s rRNA诊断全膝关节置换术后感染的效率及两种基因诊断方法的差异.方法 对33例无菌性松动及19例假体周围感染行人工膝关节翻修的患者,通过RT-PCR检测关节液中细菌16s rRNA、23s rRNA保守基因片段诊断假体周围感染.比较两种诊断策略的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性.结果 以国外关于假体周围感染诊断方法的文献判定假体周围感染,利用16s rRNA进行诊断的敏感性78.8％,特异性93.9％,阳性预测值88.2％,阴性预测值为88.6％,准确性为88.5％;而采用23s rRNA扩增方法诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确性分别为68.4％、78.8％、65.0％、81.2％和75.0％.两种基因诊断的各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 通过检测关节液中细菌16s rRNA或23s rRNA诊断人工膝关节置换术后感染,具有较高的诊断效率,且两者差异无统计学意义.     

Diverse prevalence of 16S rRNA methylase genes armA and rmtB amongst clinical multidrug-resistant Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae isolates

In this study, 112 Escherichia coli and 55 Klebsiella pneumoniae isolates with a multidrug-resistant (MDR) phenotype were collected from 2007 to 2009. All isolates simultaneously exhibited resistance to cefotaxime (or ceftazidime), ciprofloxacin (or levofloxacin) and amikacin. Plasmid-mediated 16S rRNA methylases, including armA, rmtA, rmtB, rmtC, rmtD, rmtE and npmA, were detected by polymerase chain reaction (PCR) amplification. Common β-lactamase genes, including bla_TEM, bla_SHV, bla_CTX-M, bla_PER, bla_VEB, bla_GES and bla_OXA, as well as plasmid-mediated bla_AmpC and plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) determinants, including qnrA, qnrB, qnrS, qepA and aac(6′)-Ib-cr, were also screened. The transferable capacity of resistance plasmids was established by conjugation testing. The genetic relatedness of isolates was analysed by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Only armA and rmtB genes were detected in this study. Data showed that 93.8% of MDR E. coli and 94.5% of MDR K. pneumoniae carried at least one of armA or rmtB. The armA and rmtB genes were present in 11.6% and 82.1% of MDR E. coli, respectively. In parallel, 58.2% and 40.0% of MDR K. pneumoniae were armA- and rmtB-positive, respectively. Furthermore, the qepA gene was present in 66.3% of rmtB-carrying MDR E. coli, but it was rarely detected in MDR K. pneumoniae. Approximately 71.9% of armA-positive MDR K. pneumoniae simultaneously co-carried qnrB and bla_DHA. Moreover, 78.1% and 63.6%, respectively, of armA-positive and rmtB-positive MDR K. pneumoniae strains harboured qnr alleles and 53.1% and 59.1% harboured aac(6′)-Ib-cr. In addition, MDR E. coli strains exhibited a low prevalence of qnr alleles and aac(6′)-Ib-cr. PFGE analysis revealed divergent genetic relatedness, suggesting horizontal dissemination of armA and rmtB along with common β-lactamases and PMQR determinants amongst clinical MDR E. coli and K. pneumoniae isolates.