基因重组人白细胞介素-Ⅱ中氨苄青霉素残留量的测定

目的:测定基因重组人白细胞介素Ⅱ中氨苄青霉素残留量。方法:采用抗生素微生物学测定法测定基因重组人白细胞介素 Ⅱ中氨苄青霉素残留量,在测定结果为阳性时用HPLC法作氨苄青霉素鉴定。结果:微生物学测定法最低检出量为0 .0 0 5 μg/ml,HPLC法最低检出量为0 .0 0 2 μg。结论:本法灵敏度高,简便可行。     

重组人白细胞介素-2治疗晚期肿瘤Ⅱ期临床研究

目的:通过前瞻性多中心Ⅱ期临床试验,观察重组人白细胞介素-2(125Ser-rhIL-2)对晚期实体肿瘤及恶性胸腹腔积液患者的疗效及不良反应.方法:180例入组患者可评价疗效者174例,癌性胸腹腔积液和实体瘤患者分别为126例和48例,肾透明细胞癌和恶性黑色素瘤等实体瘤采用皮下注射(200～300万IU,每周3次,疗程4～6周),胸腔内注射(200～300万IU,每周1～2次,疗程2周),恶性胸腔积液采用腹腔内注射(300～400万IU,每周1～2次,疗程2周).结果:恶性胸腹腔积液和晚期实体瘤的总有效率分别为59.5%和25.0%,治疗后大部分患者生存质量和免疫功能有一定提高.主要的不良反应为低热、寒颤、乏力、局部皮肤红肿及消化道反应.未发现低血压及毛细血管渗漏综合征.结论:125Ser-rhIL-2对恶性黑色素瘤、肾透明细胞癌及恶性胸腹腔积液有效,不良反应较轻.     

重组人白细胞介素-2细菌内毒素检查法的建立

目的:确定白介素-2合理的内毒素限值,建立快速、准确的细菌内毒素检查法。方法:根据《中国药典》2005年版内毒素检查法并参考其他药物的内毒素限值,确定白介素-2的内毒素限值及最佳稀释倍数。结果:白介素-2的内毒素限值L= 1．5 EU／2 000IU。当用灵敏度为0．25 EU·ml-1的鲎试剂进行细菌内毒素检查时,白介素-2的稀释倍数为6。结论:白介素-2 内毒素限值按1．5 EU／2000IU进行内毒素检查是可行的。     

提高重组人白细胞介素-2得率的研究

目的提高重组人白细胞介素- 2 (rhIL- 2 )的得率。方法用-2 巯基乙醇将rhIL- 2纯化过程中收集的二聚体和错配体还原,重新氧化复性。结果得到具有生物活性的rhIL- 2 ,使rhIL 2的得率由原来的4 0 %左右提高到6 0 %以上。结论显著提高了rhIL- 2的得率,重复实验结果稳定可靠     

重组人白细胞介素-11工程菌的诱导时机的选择

为了探讨诱导时机对大肠杆菌表达重组人白细胞介素-11蛋白的影响.在相同培养条件下.在不同的菌体密度时对工程菌进行诱导优化诱导时机.确定了相同的培养条件下的诱导时机.培养基配方：10g·L-1蛋白胨,5g·L-1酵母取物,8g· L-1氧化钠,1.6·L-1的Na2HP04,0.33g·L-1的KH2PO4,0.6g·L-1MgCL,Amp浓度0.1g·L-1维生素B1 0.02g·L-1,培荞中流加补料：N源（蛋白胨、酵母混合物）,葡萄糖.接种量10%,装液量30%,根据pH流加葡萄糖,按4/3流加葡萄的流速流加N源,IPTG诱导,诱导时问为4h,同时发酵三罐重复三批实验,结果衣明：在OD600为20左右时为最佳时机,工程均量（OD600）达44,重组人白细胞介素-11蛋白表达量为14%,为中试研究奠定了基础.     

重组人白细胞介素-11的胰蛋白酶切肽图分析

目的　建立标准肽图分析法,用于rhIL-11的质量控制。方法　应用Alliance HPLC系统及其温控自动进样器探索最佳胰蛋白酶切和色谱条件。结果　连续3批rhIL-11样品的RP-HPLC图谱完全一致,与rhIL-11对照品比较,有20个峰与对照品吻合,但第6峰的峰高和峰面积均明显较小,且在第9和第10峰之间多一个峰,说明rhIL-11样品蛋白质结构与对照品比较存在细小差别。这种差别经多肽片段分离和氨基酸序列测定证明是由于样品N端多2个氨基酸引起的。结论　本法精确度高、重复性好、自动化程度高,可用于rhIL-11的质量控制。     

基因重组白细胞介素—2的研究开发

综述了重组白细胞介素-2(rIL-2)的理化性质、生物效应,以及研究开发,包括工程菌发酵、分离纯化、活性测定等工艺开发及质量控制的进展。     

重组人白细胞介素-11致严重双下肢水肿

1例61岁男性患者,因小细胞肺癌化、放疗期间出现血小板减少,给予重组人白细胞介素-11(rhIL-11)3 mg,1次/d,皮下注射。给药第5天患者出现双下肢轻度水肿,第7天发展为重度水肿。考虑水肿与rhIL-11有关,立即停用rhIL-11,给予氢氯噻嗪、螺内酯利尿治疗。停药2 d后患者水肿逐渐消退。2个月后患者再次出现血小板减少,再给予皮下注射rhIL-11,3 mg/d,给药5 d后患者再次出现双下肢轻度水肿,停用rhIL-11,2 d后水肿消退。     

重组人白细胞介素—Ⅱ中氨苄青霉素残留量的HPLC测定

以水－乙腈－１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾－１ｍｏｌ／Ｌ醋酸（９０９：８０：１０：１）为流动相,采用ＨＰＬＣ法测定重组人白细胞介素－Ⅱ中的氨苄霉素残留量。线性范围０．０９￣０．９３μｇ／ｍｌ,最低检出限０．０９μｇ／ｍｌ。方法灵敏,重现性好,操作简便。     

重组人白细胞介素-11对小鼠尾部表皮颗粒层形成和血清白细胞介素-2水平的影响

目的观察重组人白细胞介素-11(rhIL-11)对小鼠尾部表皮颗粒层生成和血清白细胞介素-2(IL-2)水平的影响。方法采用小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成模型,不同组别的小鼠给予rhIL-11或甲氨喋呤,观察其对鼠尾鳞片表皮颗粒层和血清IL-2含量的影响。结果rhIL-11可显著促进小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成(P<0.01),并显著抑制血清IL-2的水平(P<0.01)。结论rhIL-11可抑制角质细胞增殖分化不全和减少促发因子IL-2的生成,对银屑病具有较好的防治作用。     

重组人白细胞介素-11对环磷酰胺致猕猴血小板减少模型的作用

目的探讨国产重组人白细胞介素 11(rhIL 11)对化疗药物致猕猴血小板减少模型的升血小板作用。方法iv环磷酰胺诱导猕猴骨髓抑制以制备血小板减少模型 ,受试动物分成 6组 (n =4) ,分别为试验组rhIL 11[5 0、10 0及 2 0 0 μg/ (kg·d) ],阳性对照组Neumega[10 0 μg/ (kg·d) ],均连续sc 14d治疗 ,另设模型组及正常动物对照组。于化疗前及后不同时相 (d 0、3、6、9、12、15、18、2 1)观察外周血小板计数及其它血细胞计数 ;并行血小板凝集功能及骨髓涂片检查 (d 0、12、2 1)。结果受试药组血小板计数在d 12可恢复至正常 ,d 18、2 1略高于正常 ,血小板聚集率达 71.4%～ 74.6 % ,高于模型组。结论rhIL 11可以防治猕猴环磷酰胺模型的血小板下降。rhIL 11可用于因化疗所致的血小板减少症。     

重组人白细胞介素-11对环磷酰胺致犬血小板减少症的实验研究

目的观察重组人白细胞介素 11(rhIL 11)对环磷酰胺致犬血小板减少症的治疗作用。方法分别用rhIL 112 0 0、10 0 μg/(kg·d)两个剂量对环磷酰胺致犬血小板减少症皮下注射 15d ,然后动态观察血小板数 ,并检测骨髓有核细胞总数和CFU Meg。结果rhIL 11能明显减轻环磷酰胺犬血小板减少的最低值 ,促进外周血小板数恢复正常 ,使骨髓有核细胞总数和CFU Meg增加 ,与对照组比较 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论rhIL 11对环磷酰胺致犬血小板减少症有明显升高血小板的治疗作用     

rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响

目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果　rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论　rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 ,并参与抗炎与免疫调节过程而发挥治疗银屑病动物的作用     

重组人白细胞介素11生物学活性测定方法研究

目的建立重组人白细胞介素 11(rhIL 11)生物活性测定方法。方法运用单克隆方法筛选出rhIL 11敏感细胞株T 10 ,采用溴化四唑蓝比色法进行rhIL 11生物活性测定 ,采用四参数方程对测定结果进行计算。结果以世界卫生组织国际标准品作为参照品 ,与美国Genetics公司rhIL 11上市产品NeumegaTM进行测定比较 ,结果显示国内同类产品与其生物活性一致 ,RSD均小于 10 %。结论此方法可用于rhIL 11生物活性测定     

放射免疫分析法测定重组人白细胞介素-2含量

目的:建立用双抗体放射免疫分析法测定重组人白细胞介素-2(IL-2)注射剂的含量.方法:以重组人IL-2为抗原与放射物标记的抗体结合,采用放射免疫分析仪测出抗原-抗体-第二抗体免疫复合物的放射强度计数cpm值.建立重组人IL-2药物浓度与复合物放射强度之间的关系曲线.根据此关系曲线得出重组人IL-2的含量.结果:重组人IL-2在0～150 μg·L-1浓度范围内标准曲线较好.注射用粉针剂重组人IL-2的含量以重量浓度单位表示为50 mg·g-1.质量控制符合要求.精密度RSD为4.34%,在误差许可范围内.结论:双抗体放射免疫分析法可用于制剂中重组人IL-2的定量分析,相关辅料对测定结果无影响.     

HPLC法测定氨苄西林胶囊的含量

目的　建立 HPLC法测定氨苄西林胶囊含量。方法　采用 C18柱为固定相 ;0 .0 2 5 mol· L-1磷酸二氢钾溶液 (p H 4.5 ) -乙腈 (96∶ 4)为流动相 ;流速 1 m L· min-1;检测波长为 2 5 4 nm;灵敏度为 0 .0 5 AUFS。结果　浓度在 0 .2 6～ 1 .3 2 g·L-1范围内线性关系良好。 r=0 .9999,平均回收率为 1 0 0 .1 % ,RSD 0 .3 % (n =5 )。结论　该法快速、简便、准确 ,适用于氨苄西林胶囊的含量测定     

高效液相色谱法检测生物样品中喹诺酮类药物的研究进展

综述了生物样品中喹诺酮类抗生素的高效液相色谱检删法，并报道对于了临床常用的喹诺酮类抗生素简单、高效的高效液相检测方法的最新进展，对于药物开发和临床用药有积极的意义。     

HPLC法测定氨苄西林胶囊溶出度

目的建立氨苄西林胶囊的溶出度检测方法,以控制产品质量.方法采用水为溶出介质,照高效液相色谱法,用Alltima-C18(4.6mm×250mm,5μm)柱,以水-乙腈-1 mol/L磷酸二氢钾溶液-1mol/L醋酸溶液(909:80:10:1)为流动相,检测波长254nm,流速1.0ml/min的条件来检测溶出度.结果氨苄西林在浓度为0.035～0.436g/L范围内线性关系良好(r=1.0000);平均回收率为99.2%,RSD为0.49%(n=9).3批样品有较好的均一性,溶出度平均值为99.5%.结论方法简便,准确度高,能较好地控制产品质量.     

HPLC-荧光检测法测定舒他西林颗粒剂中氨苄西林血药浓度

目的建立HPLC测定舒他西林颗粒剂中氨苄西林血药浓度的方法,并研究其在健康人体内的药物动力学.方法待测血样经除蛋白、水解后进样,以0.05 mol·L-1KH2PO4(pH=4.0)-乙腈(78:22,v/v,内含0.05 mol·L-1戊磺酸钠)为流动相,激发波长为360 nm,发射波长430 nm.9名健康志愿者,单剂量口服舒他西林颗粒剂750 mg,经时采集静脉血测定血药浓度,3P87程序处理药-时数据.结果氨苄西林在0.22～13.8 mg·L-1浓度范围内线性关系良好,平均回收率为97.08%±4.13%,日内RSD≤5.7%,日间RSD≤6.7%.舒他西林颗粒剂中氨苄西林药物动力学参数分别为:t1/2(0.89±0.12)h,Tpk(0.59±0.16)h,Cmax(15.42±2.33)mg·L-1.结论此方法具有较强的专属性,简便、准确,可用于舒他西林颗粒剂中氨苄西林血药浓度测定.