单核巨噬细胞集落刺激因子对创面愈合及血管新生调控的研究进展

单核巨噬细胞集落刺激因子是一种具有多效能的生长因子,具有促进创面愈合的重要作用。单核巨噬细胞集落刺激因子在创面愈合过程中的每个阶段都发挥着重要的作用,主要表现为:趋化并激活炎性细胞,提高创面抗感染能力;促进创面角质细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞的增殖和分化;有助于创面愈合的细胞因子的分泌。近年来,单核巨噬细胞集落刺激因子对创面愈合及血管新生调控的研究成为热点,现予以综述。     

感染性心内膜炎早期心脏瓣膜MCSF-1和受体基因表达的对比

目的:探讨MCSF-1和其受体在感染性心内膜炎(IE)中的作用和其对瓣膜组织在赘生物形成中的影响.方法:比较研究感染性心内膜炎早期家兔心脏瓣膜MCSF-1和c-fms mRNA表达水平变化.与7只正常家兔对照;7只家兔静脉注射5×106CFU金葡菌;7只家兔行二尖瓣手术;7只家兔行二尖瓣手术 静脉注射金葡菌;7只家兔行三尖瓣手术;7只家兔行三尖瓣手术 静脉注射金葡菌.6 h后取出心脏瓣膜,应用RT-PCR技术测量MCSF-1和c-fms mRNA表达水平.结果:二尖瓣和三尖瓣MCSF-1 mRNA在各自的房室瓣手术后表达水平明显提高(P＜0.05).附加金葡菌注射后,二尖瓣MCSF-1 mRNA表达水平进一步提高(P＜0.01),而三尖瓣无明显变化.二尖瓣和三尖瓣c-fms mRNA在各自的房室瓣手术后表达水平明显降低(P＜0.05).结论:感染性心内膜炎早期二尖瓣和三尖瓣有不同的MCSF-1/c-fms表达反应,折射出左右心脏IE的不同临床发病特点与预后.     

芦荟提取物C诱生小鼠多重集落刺激因子的作用

目的:研究芦荟提取物C(aloe extract C,AE—C)在BALB/C鼠体内诱生多重集落刺激因子的作用。方法:经腹腔连续5 d给BALB/C鼠注射AE-C,第6 d取骨髓细胞,在半固体甲基纤维素培养基中培养观察集落形成数量和AE-C在小鼠体内的持续作用时间及AE—C注射剂量与集落形成的关系。结果:AE-C能诱生BALB/C鼠骨髓细胞形成集落,且与对照组比较有明显差异(P<0.01)。集落形成高峰为停药后前6 d,第8 d呈下降趋势。而注射AE-C剂量与集落形成数量在25-100μg/只范围内有剂量依赖关系。结论:AE-C有诱生BALB/C鼠多重集落刺激因子的作用。     

白细胞介素10对小鼠腹腔巨噬细胞体外抗白念珠菌活性的影响

目的　探讨白介素 10 (IL 10 )对小鼠腹腔巨噬细胞体外抗白念珠菌 (白念 )活性的影响。方法　用γ干扰素、脂多糖作为刺激因子 ,与小鼠腹腔巨噬细胞及不同浓度的IL 10共同培养 2 4h后 ,加入一定浓度的白念培养 4h ,检测每毫升中白念菌落形成单位 (CFU/ml) ,同时取上清用Griess试剂测一氧化氮 (NO)的浓度。用NBT还原法检测超氧阴离子 (O2 -) ,比较实验组与对照组O2 -平均阳性细胞百分率。结果　当IL 10的浓度分别为 0、 1、 10、 10 0ng/ml时 ,其白念生长抑制率分别为 75 0 7%、 6 4 79%、 5 6 2 9%、 4 6 6 7% ,培养上清中NO的浓度分别为 115 13± 2 7 72、10 8 91± 17 98、 77 82± 7 76、 6 0 5 4± 8 96 ,组与组之间的差异具有显著性意义 (P <0 0 5 )。实验组O2 -平均阳性细胞百分率为 (5 2 76± 5 16 ) % ,对照组为 (6 0 4 9± 3 0 1) % ,其差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　IL 10可能通过降低NO及超氧阴离子的产生 ,从而抑制活化的巨噬细胞体外抗白念的活性。     

巨噬细胞集落刺激因子及受体在感染性心内膜炎早期的表达

目的: 探讨巨噬细胞集落刺激因子及其受体(MCSF-1,c-fms)在感染性心内膜炎(IE)中的作用和其对瓣膜组织在赘生物形成中的影响.方法: 比较研究IE早期家兔心脏瓣膜MCSF-1和 c-fms mRNA 表达水平变化.7只正常家兔做对照;7只家兔静脉注射5×106CFU金黄色葡萄球菌(金葡菌);7只家兔行二尖瓣手术;7只家兔行二尖瓣手术加静脉注射金葡菌;7只家兔行三尖瓣手术;7只家兔行三尖瓣手术加静脉注射金葡菌.6 h后取出心脏瓣膜,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测量MCSF-1和c-fms mRNA表达水平.结果: 二尖瓣和三尖瓣 MCSF-1 mRNA 在各自的房室瓣手术后明显提高表达(P<0.05).附加金葡菌注射后,二尖瓣MCSF-1 mRNA 表达水平进一步提高(P<0.01),而三尖瓣没有明显变化;二尖瓣和三尖瓣c-fms mRNA在各自的房室瓣手术后明显降低表达水平(P<0.05).结论: M-CSF,c-fms是参与IE发生的重要因子之一;二尖瓣和三尖瓣在IE早期有不同的MCSF-1,c-fms表达反应.瓣膜组织的MCSF-1 mRNA 表达水平与IE炎症发展状态相平行.     

细胞实验检测蓖麻蚕蛹生物反应器表达的重组人表皮生长因子的生物学活性

目的探讨蓖麻蚕蛹生物反应器中分离纯化获得的重组人表皮生长因子(rhEGF)蛋白质的生物学活性。方法采用Tricine-SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)鉴定rhEGF,通过MTT和台盼蓝法检测rhEGF的细胞活性。结果 Tricine-SDS-PAGE、Western blot结果显示,蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF具有正确的分子量和免疫原性;MTT法显示,纯化的rhEGF具有酶促活性,且酶促活性优于rhEGF标准蛋白(P<0.05),其最高活性浓度为1.0μg/L,在0.0625～1.0μg/L浓度范围内具有剂量依赖性;rhEGF能够促进Balb/c3T3细胞的分裂增殖,效果优于rhEGF标准蛋白(P<0.05)。结论 AnpehEGF感染的蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF,具有类似天然hEGF的生物学活性,且效果优于rhEGF标准蛋白;rhEGF的细胞实验为进一步的动物实验提供了基础。     

Chronic Toxicity of a Novel Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor in Rats

Objective To assess the severity and reversibility of the chronic toxicity of a novel recombinant human granulocyte colony-stimulating factor (rhG-CSFa) in rats and the dose-effect relationship.Methods A total of 100 Sprague-Dawley rats (equal numbers of male and female) were randomly divided into five groups (20 rats in each group):four groups were treated with rhG-CSFa at 500,100,10,1 μg/kg,respectively,and one group was treated with vehicle only to serve as the control.The rats were received subcutaneous...     

粒细胞集落刺激因子对脑出血大鼠神经行为学的影响

目的:观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对脑出血大鼠的神经行为学的影响。方法:胶原酶定位注射构建脑出血大鼠模型,然后给予G-CSF腹腔注射连续5d,通过肢体置放实验检测大鼠神经功能恢复情况。结果:术后给予G-CSF的大鼠肢体置放实验评分明显高于未给药组。结论:G-CSF能够促进脑出血大鼠的神经功能的恢复。     

Pharmacokinetic Study of a Novel Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor in Rats

Objective To study the pharmacokinetics of a novel recombinant human granulocyte colonystimulating factor （rhG-CSFa） in rats and to determine the proteolytic rates of rhG-CSFa in the whole blood and serum of rats in vitro. Methods The pharmacokinetics of rhG-CSFa and conventional （wild type,WT） granulocyte colonystimulating factor （G-CSF） were investigated in Sprague-Dawley rats which received either intravenous or subcutaneous injection of rhG-CSFa or WT G-CSF at three different doses （20,50,or 100 μg/kg）. The blood samples of rats were collected at multiple time points （from 0.08 to 12 h） and the concentrations of rhG-CSFa and WT G-CSF in serum were determined with a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. For the study of proteolytic rates in vitro,the concentrations of rhG-CSFa or WT G-CSF were determined at 3-minute intervals after addition of the respective drug to rat’s whole blood or serum. Results Pharmacokinetic analysis of serum rhG-CSFa or WT G-CSF levels indicated that,at each dose tested,for either route of drug administration,the area under concentration-time curve values and the maximum serum concentration of rhG-CSFa were higher than those of WT G-CSF,and the serum half life of rhG-CSFa was longer than that of WT G-CSF. Subsequent in vitro whole blood and serum stability study showed that the rates of drug degradation in WT G-CSF were 1.8 folds and 1.5 folds higher than those in rhG-CSFa,respectively. Conclusion rhG-CSFa has better serum and whole blood stability in vitro and higher bioavailability in vivo as compared to WT G-CSF.     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)与创面愈合

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Granulocyte macrophage colony factor,GM-CSF）作为一种多功能的造血生长因子,除了具有促进恢复骨髓造血和增强机体免疫功能的生物学作用,它还具有促进创面愈合的生物学作用,本文综述GM-CSF在创面愈合中的促愈作用及相关机制。     

巨噬细胞移动抑制因子在原发性肝癌中的临床意义

 【目的】探讨肝癌患者血清巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor,MIF）水平与其临床特征及预后的关系。【方法】用酶联免疫吸附法检测2004年1月至2006年5月60例确诊初治的原发性肝癌患者的血清MIF水平,并与30例健康人相比较,分析其与临床特征及预后的关系。【结果】原发性肝癌患者血清MIF水平较健康对照组显著升高（中位值,34.1ng/mL与15.9ng/mL,P〈0.001）。血清MIF水平与血管侵犯（P=0.014）、进展的临床TMN分期（P=0.037）及转移（P=0.026）密切相关。血清MIF高（〉34.1ng/mL）的患者2年生存率较血清MIF低的患者（≤34.1ng/mL）明显降低（59%与28%,LogRank为6.02,P=0.014）。多因素分析表明MIF水平是影响患者生存的独立预后因素。【结论】MIF可能参与了原发性肝癌的疾病进展过程,提示MIF在原发性肝癌患者中可作为反应肿瘤侵袭及预后的一个有用的生物标记物。     

巨噬细胞移动抑制因子在原发性肝癌中的临床意义

【目的】探讨肝癌患者血清巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor,MIF）水平与其临床特征及预后的关系。【方法】用酶联免疫吸附法检测2004年1月至2006年5月60例确诊初治的原发性肝癌患者的血清MIF水平,并与30例健康人相比较,分析其与临床特征及预后的关系。【结果】原发性肝癌患者血清MIF水平较健康对照组显著升高（中位值,34.1ng/mL与15.9ng/mL,P〈0.001）。血清MIF水平与血管侵犯（P=0.014）、进展的临床TMN分期（P=0.037）及转移（P=0.026）密切相关。血清MIF高（〉34.1ng/mL）的患者2年生存率较血清MIF低的患者（≤34.1ng/mL）明显降低（59%与28%,LogRank为6.02,P=0.014）。多因素分析表明MIF水平是影响患者生存的独立预后因素。【结论】MIF可能参与了原发性肝癌的疾病进展过程,提示MIF在原发性肝癌患者中可作为反应肿瘤侵袭及预后的一个有用的生物标记物。     

粒细胞集落刺激因子受体在甲亢药物治疗患者中的表达及其临床意义

目的观察粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)在甲状腺机能亢进症(甲亢)药物治疗患者中的表达及与粒细胞减少间的关系。方法采用G-CSFR单克隆抗体及流式细胞技术,检测38例正常健康人及46例应用抗甲状腺药物(ATD)的初发甲亢患者治疗前后外周血中G-CSFR的表达率变化,了解药物所致粒细胞减少与G-CSFR表达的关系。结果与正常对照比较,甲亢患者ATD治疗前G-CSFR表达率、白细胞总数及中性粒细胞绝对值无明显统计学差异(P>0.05)。ATD治疗后,患者G-CSFR表达率、白细胞总数及中性粒细胞绝对值均较治疗前降低,但治疗前后比较,统计学上无明显差异(P>0.05)。在中性粒细胞绝对值≤2.5×109/L组中,G-CSFR表达率与中性粒细胞绝对值呈显著相关(γ=0.59,P<0,05);而中性粒细胞总数>2.5×109/L组中,二者之间的相关性则不明显(γ=0.09,P>0.05)。结论ATD所致的中性粒细胞减少与G-CSFR的表达率下降有关,提示ATD部分作用环节可能在G-CSF受体水平。     

巨噬细胞移动抑制因子诱导血管生成相关基因的表达

【目的】研究巨噬细胞移动抑制因子（MIF）对人血管内皮细胞表达血管生成相关基因的诱导作用。【方法】通过亚克隆，构建原核表达质粒pET22b—MIF，并转化人工程菌BL21（DE3）。用Ni-亲合柱分离纯化BL21（DE3）中经IPTG诱导表达的重组MIF。用巨噬细胞移动抑制试验鉴定复性的重组MIF的活性。分别用0、30、60、120ng／mL的重组MIF处理人血管内皮细胞12h，通过Real—time定量PCR检测人血管内皮细胞中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF—α、PDGF-α的mRNA表达。用体外血管生成试验检测重组MIF诱导人血管内皮细胞的成管腔作用。【结果】正确构建了重组质粒pET22b—MIF。经IPTG诱导，在大肠杆菌中以包涵体形式表达出重组MIF。复性的重组MIF对巨噬细胞移动的抑制水平达30％（P〈0．05）。重组MIF能特异地诱导HVECs中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF—α、PDGF-α表达，并能特异地诱导人血管内皮细胞形成管腔结构。【结论】在大肠杆菌中成功表达出MIF，MIF能特异地诱导人血管内皮细胞中血管生成相关基因的表达。     

人胃癌转移因子特异活性的体外鉴定

用培养的人MGc 803胃癌细胞免疫小鼠,取小鼠脾制备人胃癌特异性小鼠TF(小鼠Sp-TF);用手术摘除胃癌组织标本所提抗原免疫山羊,同法制备人胃癌特异性羊TF(羊Sp-TF)。以经改进的~3H-Leu白细胞移动抑制试验(~3H-Leu LMI法)为指标检测和比较其活性,结果表明,小鼠Sp-TF具有机抗原特异活性,羊Sp-TF具有同样的抗原特异活性。     

重组人血小板型PLA2体外抗菌活性研究

目的观察重组人血小板型磷脂酶A2（PLA2）的体外抗菌活性。方法将不同浓度的重组PLA2与9种细菌在37％共同孵育2h,然后倾注琼脂板,次日记录每一琼脂板上的菌落生成数（CFU）,计算出PLA2杀菌率和PLA2的最低杀菌浓度（MBC）。结果重组人血小板型PLA2对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、炭疽杆菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌等革兰氏阳性（G^＋）菌有较强杀菌作用,作用2h后PLA2的MBC范围为0．015～0．240μg／ml。对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等革兰氏阴性（G^-）菌则需要较高浓度的血小板型PLA2,作用2h后的MBC为30～90μg／ml。结论血小板型PLA2对G^＋菌有较强的杀菌作用,对G^＋菌的杀菌作用较弱。     

琥珀酸雌三醇酯钠盐对小鼠血清集落刺激因子水平的影响

用琼脂集落培养法和[~3H]-TdR参入法结合检测琥珀酸雌三醇酯钠盐(E_3·SNa)腹腔注射后小鼠血清集落刺激因子(CSF)水平升高的规律,CSF的类型及E_3·SNa本身对骨髓细胞增殖的影响。结果表明,E_3·SNa后6 h CSF水平即达到较高水平,24 h达最高峰,30 d时仍维持于较高水平。CSF活性在0.14～28 mg E_3·SNa剂量范围内随剂量增大而增加。CSF类型主要是GM-CSF。E_3·SNa本身对骨髓细胞增殖未见直接刺激作用。从而认为,雌激素对造血的作用很可能部分是由CSF介导的。     

巨噬细胞集落刺激因子受体激酶及其抑制剂的研究进展

巨噬细胞集落刺激因子受体（c-Fms）是原癌基因c-fms的编码产物,属于Ⅲ型受体酪氨酸激酶家族成员。巨噬细胞集落刺激因子与c-Fms结合,激活其酪氨酸激酶,在单核巨噬细胞系的存活、增殖、分化以及胚胎发育过程中发挥着重要的作用。c-Fms及其配体的过度表达,引起该受体介导的细胞信号通路异常激活,参与了肿瘤形成和炎症发生过程。因此,靶向c-Fms激酶的抑制剂能抑制受体的磷酸化,阻断受体介导的细胞信号通路,是治疗肿瘤、关节炎等疾病的潜在药物。     

粒细胞集落刺激因子对大鼠脑出血后脑水肿及MMP-9的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿的影响及可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组,断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1小时后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)60μg/kg。3组大鼠于术后6、12、24、48、72h和7d处死,干湿重法测定脑组织含水量,免疫组化染色观察MMP-9的动态表达。结果模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P<0.05),在造模后48、72h最明显,且与6、12、24h和7d相比差异显著(P<0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P<0.05)。模型组脑组织MMP-9的表达明显高于假手术组(P<0.05);治疗组各时间点MMP-9的表达低于模型组(P<0.05)。结论 G-CSF可减轻ICH后脑水肿程度,其机制可能与G-CSF抑制MMP-9表达密切相关。     

G-CSF对大鼠脑出血后脑水肿及基质金属蛋白酶-9的影响

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿的影响及可能机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组。断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1h后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)60μg/kg。3组大鼠于术后6h、12h、24h、48h、72h、7d处死,干湿重法测定脑组织含水量、免疫组化染色观察MMP-9的动态表达。结果:模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P<0.05),在造模后48h、72h最明显,且与6h、12h、24h、7d相比差异显著(P<0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P<0.05)。模型组脑组织MMP-9的表达明显高于假手术组(P<0.05);治疗组各时间点MMP-9的表达低于模型组(P<0.05)。结论:G-CSF可减轻ICH后脑水肿程度,其机制可能与G-CSF抑制MMP-9表达密切相关。