尼莫地平治疗缺血性脑血管病的临床观察

尼莫地平为1、4-二氢吡啶类的钙离子拮抗剂。其药理作用是有效地调节细胞内钙的水平，使之保持正常的生理功能。临床实验表明尼莫地平能够扩张血管，增加缺氧缺血区脑组织的血液供应：且不会引起60例缺血性脑血管的后遗症患，其主要症状为头晕、头痛、失眠和记忆减退等慢性脑功能障     

Nogo-A中不同功能片段对体外培养大鼠皮质神经元细胞内钙离子浓度的影响

目的研究Nogo-A主要功能片段Nogo-66、amino-Nogo对大鼠皮质神经元细胞内钙离子浓度的影响。方法体外原代培养并鉴定新生大鼠皮质神经元,将神经元按照干预药物不同分为对照组(给予Krebs-ringer液)、Nogo-66组、amino-Nogo组、amino-Nogo+尼莫地平组,以Fluo4/AM标记神经元细胞内钙离子,采用激光共聚焦显微镜技术检测药物干预1、3、5、7 min时各组神经元细胞内钙离子信号。结果加入药物后,对照组和Nogo-66组神经元细胞内钙离子信号强度在各时间点未见明显变化(P>0.05),而amino-Nogo组和amino-Nogo+尼莫地平组钙离子信号持续升高(P<0.05)。组间比较结果显示,在药物干预1 min时,4组间的神经元细胞内钙离子信号比较差异无统计学意义(P>0.05);在药物干预3、5、7 min时,Nogo-66组神经元细胞内钙离子信号与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05),而amino-Nogo组和amino-Nogo+尼莫地平组神经元细胞内钙离子信号与对照组和Nogo-66组同时间点比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在药物干预3 min时,amino-Nogo组神经元细胞内钙离子信号与amino-Nogo+尼莫地平组比较差异无统计学意义(P>0.05);在药物干预5、7 min时,amino-Nogo组神经元细胞内钙离子信号高于amino-Nogo+尼莫地平组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 amino-Nogo是Nogo-A中导致神经元细胞内钙离子浓度升高的责任功能片段。     

壬基苯酚对H9c2心肌细胞钙信号和细胞增殖的影响及其作用机制

目的探讨壬基苯酚(NP)对H9c2心肌细胞内钙离子浓度和细胞增殖的影响以及GPR30受体的作用。方法采用细胞内钙测定方法来记录H9c2心肌细胞内钙离子浓度变化,采用MTT法来观察H9c2心肌细胞增殖程度。结果 1×10-10mol/L NP使细胞内钙离子浓度升高的幅度增加,并促进H9c2细胞增殖,而1×10-6mol/L NP使细胞内钙离子浓度升高的幅度降低,并抑制细胞增殖。G15可以阻断1×10-10mol/L NP对细胞内钙离子浓度和细胞增殖的促进作用,但不能阻断1×10-6mol/L NP对细胞内钙离子和细胞增殖的抑制作用。结论 NP对H9c2细胞的快速钙信号变化和细胞增殖具有非单调的剂量依赖性作用,其机制可能是由于GPR30受体在不同浓度下参与的机制不同。     

尼莫地平的药理作用及临床应用

尼莫地平是双氢吡啶类钙通道拮抗剂,呈脂溶性,易通过血脑屏障,在脑内能达到较高的浓度。近20年来尼莫地平的扩张脑血管改善脑血供应等作用已得到肯定并应用于临床,主要用来防治急性缺血性脑血管疾病,对偏头痛、心绞痛、心肌梗塞以及内耳疾病也有良好的药效。1　治疗急性缺血性脑血管疾病及预防蛛网膜下腔出血并发脑血管痉挛[1]在急性脑缺血时,缺血区脑组织内皮素合成和释放增加,内皮素作用于内皮素受体,通过促进钙离子的内流收缩血管平滑肌,并使缺血区脑细胞内钙超载,从而影响线粒体功能,使能量代谢障碍,加重缺血区脑细胞损害[2]。近年来,许…     

西比灵对缺血性神经元胞质内钙离子和细胞活性的影响

目的　研究类缺血状态下神经元胞质内游离钙离子及细胞活性变化 ,探讨缺血性神经元的损伤与细胞内钙离子的关系及西比灵的治疗意义 .方法　利用 Ca2 +指示剂 Flu- 3/AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的神经元 ,共聚焦技术检测细胞内荧光强度的变化 ,利用四唑蓝 (MTT)比色试验检测缺血性神经元的损伤程度 .结果　给予神经元类缺血处理 10 min后 ,缺血组神经元胞质内钙离子浓度和细胞损伤程度明显高于西比灵预处理组 (P<0 .0 1) .结论　西比灵可明显抑制神经元胞质内钙离子的升高 ,减轻由此引发的缺血性神经元的损伤程度     

丹曲林钠对类缺血小鼠皮质神经元的[Ca2+]i和细胞活力的影响

目的: 观察类缺血后神经元内钙离子浓度及细胞活性的变化,探讨缺血性神经元的损伤与细胞内钙离子的关系及丹曲林钠(Dantrolene)的作用. 方法: 采用孕小鼠皮层神经元培养技术,应用相差显微镜观察培养的神经元形态,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子浓度. 结果: 给予神经元类缺血处理5 min后,神经元内钙离子浓度与丹曲林钠组无显著差异(P>0.05). 类缺血处理10 min后再灌注15 min细胞损伤程度较丹曲林钠干预组[Ca2+]i和MTT有显著性差异(P<0.01). 结论: 丹曲林钠可抑制神经元细胞内钙离子浓度的升高,降低缺血性神经元损伤的程度.     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度的作用

目的：观察三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度的作用。方法：体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞，分别以400μg／mL和800μg／mLPNS处理细胞，在激光共聚焦显微镜下观察细胞内钙离子浓度的变化。结果：随着给药浓度的增加，和空白对照组相比，各给药组的细胞内钙离子浓度均有所下降（P〈0．05），两给药组之间差异也具有统计学意义（P〈0．05）。结论：三七总甙能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度，并具有剂量依赖效应。     

脑缺血—再灌流损伤后生长抑素及其mRNA表达及[Ca^2＋]i改变与尼莫地平影响的

目的：研究大鼠短暂性全脑缺血-再灌流损伤后，海马齿状回门（DH）、CA1区和大脑皮质纹状18a(Str18a)区生长抑素（SS）、SSmRNA表达及脑组织细胞内钙离子浓度[Ca^2 )i的改变与尼莫地平对这些改变的影响。方法：大鼠麻醉后烧闭双侧椎动脉，右侧颈总动脉（CCA）注射尼莫地平（治疗组）或生理盐水（对照组），夹闭双侧CCA持续2min,5min或10min，松钳形成再灌流（持续2h)。脑组织石蜡切片免疫组化、原位杂交检测SS、SSmRNA的表达；Fura-2/AM检测脑组织[（Ca^2 ]i。结果：治疗组与对照组短暂缺血（5min、10min)-再灌流损伤后DH区内SS、SSmRNA神经元显著减少，其它区域无明显变化。尽管治疗组差；（2）尼莫地平虽可减轻缺血后细胞内钙超载，但对于缺血诱导的DH区SS神经元的丢失无保护作用。     

期刊文摘

氟桂利嗪阻滞小鼠皮质神经元胞浆钙离子内流的实验研究[万　琪,刘勇红,李　力,张　巍,宋琳琳,高军宪,粟秀初.中化老年心脑血管病杂志,2 0 0 3;5 (3) :1 95 - 1 97]　　目的:研究缺血状态下神经元胞浆内游离钙离子的变化及氟桂利嗪阻滞钙离子内流的作用.方法:用Flu 3/AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的小鼠皮质神经元标记物,应用激光共聚焦技术检查缺血条件和加用氟桂利嗪嗪后细胞内荧光强度(△FI)的变化.结果:给予缺血处理1 0min后,神经元胞浆内钙离子△FI明显升高(1 7.5 2±3.1 6 ) ;经氟桂利嗪预处理后,可以明显抑制钙离子的△F…     

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛防治研究进展

脑血管痉挛 (CVS)是蛛网膜下腔出血 (SAH)致残和死亡的主要原因[1 ] 。因此国内外医学界人士对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的防治研究工作不断深入 ,取得了一定的进展。1　无创性药物治疗1.1　钙拮抗剂尼莫地平在蛛网膜下腔出血脑血管痉挛防治中的作用　尼莫地平选择性作用于脑血管 ,能阻滞Ca的跨膜向细胞内流 ,使细胞内Ca浓度保持在一定水平 ,并能对抗 5 羟色胺的缩血管作用及通过减少血小板TXB1 的释放 ,从而解除SAH后的脑血管痉挛。临床研究表明 ,尼莫地平注射液与大剂量尼莫地平片剂均降低CVS发生率及SAH病死率 (P <0 .0 5 ) …     

尼莫地平对实验性腹膜粘连的防治作用

腹膜粘连是引起肠梗阻的原因之一。笔者以大鼠腹膜粘连模型研究钙离子拮抗剂尼莫地平对预防腹膜粘连的作用，结果对照组鼠均有腹膜粘连形成，粘连积分为（3．30±0．82），实验组鼠腹腔内注入尼莫地平后积分降至（2．0±0．76），P＜0．05，两次给药后降至（1．63±1．06），并有部分鼠未形成腹膜粘连。钙离子拮抗剂防治腹膜粘连的机理可能与该药具有抗血管收缩、抗缺血作用以及参与炎症调节、抑制血小板聚集、抑制胶原合成等作用有关。     

麻黄碱、β-细辛醚和去甲乌药碱对大鼠心肌细胞钙离子浓度和细胞膜钙通道的影响

 目的初步筛查麻黄细辛附子的活性单体麻黄碱、β-细辛醚、去甲乌药碱对大鼠心肌细胞钙离子的作用,探讨3种活性单体对心肌细胞功能的影响。方法用酶解法急性分离大鼠心室肌细胞,采用Fluo-3AM荧光探针测定麻黄碱、β-细辛醚、去甲乌药碱对大鼠心室肌细胞内钙离子浓度的影响。利用电生理片钳技术的全细胞电压钳方法测定心肌细胞内高电压依赖性钙离子电流的变化。结果（1）麻黄碱使心肌细胞内钙离子浓度升高,而细胞外液钙离子浓度为零时则无此现象。同时,麻黄碱液使心肌细胞I_Ca峰电流密度显著增大;（2）β-细辛醚和去甲乌药碱分别使心肌细胞内钙离子浓度降低,I_Ca峰电流密度也呈轻度减弱趋势。结论麻黄碱能够增强I_Ca峰电流密度,提高细胞内钙离子浓度,因而具有兴奋心肌细胞的作用,与高电压门控性钙通道开放有关;β-细辛醚和去甲乌药碱通过降低细胞内钙离子浓度和轻微阻断钙离子内流而可能起到保护心肌细胞避免钙超载损害的作用。麻黄碱、β-细辛醚和去甲乌药碱三者对心肌细胞内钙浓度和功能的影响结果符合中药方剂学的相反相成、补偿控制配伍理论。     

溶血卵磷脂对牛视网膜微血管内皮细胞凋亡及细胞内钙离子浓度的影响

目的: 探讨溶血卵磷脂(LPC)对牛视网膜微血管内皮细胞(BRECs)凋亡及细胞内钙离子浓度的影响.方法: 原代分离培养牛视网膜微血管内皮细胞,加入不同浓度的LPC,分别培养6 h、12 h、24 h,通过吖啶橙染色在荧光显微镜下观察细胞凋亡,流式细胞检测细胞凋亡率,F2000荧光光度计测细胞内钙离子浓度,并计算游离钙浓度.结果:(1)60 μmol/L LPC作用牛视网膜微血管内皮细胞24 h后, 细胞凋亡率明显高于LPC浓度为20 μmol/L及40 μmol/L时;(2) LPC浓度从20 μmol/L增加到60 μmol/L过程中,细胞内游离钙离子浓度明显增加,而且细胞内游离钙离子浓度的增加与LPC的作用时间有关,作用时间越长,钙离子浓度越高.结论: LPC能增加细胞内游离钙离子浓度,促使BRECs的凋亡,而且LPC的这种作用具有时间和剂量依赖性.因此,脂代谢紊乱可能是通过诱导BRECs的凋亡而发挥作用的.     

8 Hz/130 dB次声对大鼠海马细胞内钙离子浓度的影响

目的: 探讨8 Hz,130 dB次声作用对海马细胞内钙离子浓度的影响. 方法: 将48只SD大鼠随机分为6个组,即对照组、次声作用1 d组、次声作用7d组、次声作用14 d组、次声作用21 d组、次声作用28 d组. 采用急性细胞分离技术,通过钙离子荧光探针及激光共聚焦显微镜观察大鼠脑海马细胞内钙离子浓度变化. 结果: 频率8 Hz,声压级130 dB次声分别作用2 h/d后,海马细胞内钙离子浓度于1 d组即有增高(P<0.01),7 d组仍呈增高趋势,至14 d组达高峰并呈现细胞内钙离子超载征象,至28 d组已回落. 结论: 8 Hz,130 dB次声作用不同时间可导致海马细胞内钙离子浓度不同程度增高,随作用时间延长,海马细胞对次声作用呈现适应性.     

二氢杨梅素对H202诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的影响

目的：研究二氢杨梅素（DMY）对过氧化氢（H02）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤的影响并探讨其作用机制。方法：用不同浓度DMY（5μg·mL^-1,20μg·mL^-1,80μg·mL^-1）预处理保护HUVECs 12h,再用0．5mmol·L^-1H202干预12h,用MTT法检测细胞活力;用Hoechst33258进行细胞核染色;并取上清液检测超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量;用流式细胞仪分别测活性氧（ROS）和细胞内钙离子含量。结果：DMY能明显提高H202（0．5mmol·L^-1）损伤后HUVECs存活率（P〈0．05）,增加上清液SOD活性,降低MDA含量,减少细胞内ROS表达,下调细胞内钙离子浓度,其中DMY5ug-mL。时效果最明显。结论：DMY对H202诱导内皮细胞损伤具有保护作用,其机制与清除细胞内ROS,抑制细胞内钙离子介导的细胞凋亡相关,浓度以DMY5μg·mL^-1时效果最明显。     

胰腺细胞缩胆囊素和胆碱能受体对细胞内Ca~2 的调节

本文使用Fura-2做为细胞内钙离子荧光指示剂,在大白鼠胰腺分离细胞观察缩胆囊素和乙酰胆碱对细胞内钙离子的影响及其相互作用.结果表明1nmol/L缩胆囊素和lmmol/L乙酰胆碱分别使细胞内钙离子浓度从基础水平的122±8nmol/L增高至360±32nmol/L和380±20nmol/L,半最大有效浓度分别为0.45nmol/L及54μmol/L。不同剂量的缩胆囊素和乙酰胆碱彼此不同程度抑制对方的作用,后加入的试剂提高细胞内钙离子浓度的幅度与先加入的试剂所引起的增加幅度成反比,加入各自相应的受体拮抗剂可使细胞恢复对另一激素(蛙皮素)刺激的反应。说明了缩胆囊素受体和胆碱能受体的相互调节影响细胞内钙离子的活动.加入受体拮抗剂后,细胞恢复反应过程中的时间动力学改变可能与受体阻滞后钙离子通道关闭的程度和时间有关.     

盐酸普罗帕酮注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞钙离子和氧自由基的影响

目的 研究盐酸普罗帕酮对缺血再灌注损伤心肌细胞钙离子和氧自由基影响及其发生的可能机制.方法 体外培养心肌细胞,建立缺血再灌注损伤模型,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙离子荧光染色;722可见光分光广度计检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;透射电镜观察心肌细胞超微结构的变化.结果 盐酸普洛帕酮注射液可以使培养液中的荧光像素值和染色面积降低,可以使缺血再灌注心肌细胞培养液中的SOD升高,MDA降低,并且在药物浓度为40%的时候效果达到最佳.结论 盐酸普洛帕酮注射液对缺血再灌注损伤的心肌细胞有保护作用,最佳药物浓度为40%.     

氨培养胎鼠神经细胞钙离子浓度变化与凋亡的相关性

目的 观察体外培养神经细胞在氨作用下钙离子浓度变化与凋亡的关系,探讨氨毒性机制.方法 体外培养胎鼠神经细胞7d,实验分组为对照组、低氨组和高氨组;分别作用24 h后,用流式细胞仪测定神经细胞凋亡比率,用Fluo-3/AM荧光探针测定细胞内钙离子浓度.结果 对照组神经细胞有少量凋亡,细胞内钙离子浓度正常,随着NH4CL浓度的提高,细胞内钙离子浓度明显升高,神经细胞凋亡增加.低氨组和对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）,高氨组和低氨组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氨诱导神经细胞凋亡与细胞内钙离子浓度相关.     

前列腺素E2受体EP3在AngⅡ-AT1信号转导通路中的作用

目的 研究前列腺素E2活性受体EP3在AngⅡ信号转导通路中的作用.方法 通过培养稳定传代的LVIP2.0Zc细胞,分别转染进AT1受体和EP3受体的DNA质粒,以不同浓度的AngⅡ和sulprostone对转染后的细胞进行刺激,用荧光标记法检测细胞内游离钙离子的浓度变化.结果 仅转染了AT1受体DNA质粒的细胞,在AngⅡ的刺激下,钙离子浓度呈剂量依赖性上升.在细胞共同转染了AT1受体和EP3受体DNA质粒后,细胞内游离钙离子浓度随AngⅡ剂量的增加而增加,再加入sulprostone后,随药液浓度的增加,细胞内钙离子浓度在原有已升高基础上继续上升,P＜0.001,有统计学差异.结论 前列腺素E2受体EP3可正向调节血管紧张素Ⅱ与AT1受体结合导致钙离子增加的信号转导路径.     

盐酸氟桂嗪对缺血神经细胞保护作用的研究

目的 探讨盐酸氟桂嗪（西比灵）对缺血损伤的神经细胞的保护作用。方法 在缺氧缺糖条件下培养神经细胞,作为体外缺血损伤模型;实验组为无糖培养剂中添加４０μｍｏｌ／Ｌ西比灵,对照组为无糖培养剂,测定缺氧损伤后细胞内钙离子浓度、细胞大小（支配面积）、以及所释放的乳酸脱氢酶的活性,分析判断西比灵的作用。结果 实验组细胞的胞内钙离子浓度显著低于对照组,细胞所支配面积大于对照组细胞,所释放的乳酸脱氢酶活性低于对照组。结论 西比灵能抵抗缺氧缺糖损伤后细胞内的钙离子浓度的升高,能有效减少缺氧缺糖对细胞所造成的损害,具有保护作用。