化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液对非小细胞肺癌患者的治疗效果及其机制

目的：探讨化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗非小细胞肺癌（NSCLC）患者的效果及其对患者生存质量的影响,并阐明其作用机制。方法：110例NSCLC患者根据采用的治疗方法不同分为化疗组（55例,采用单纯化疗）和联合组（55例,采用化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗）。比较2组患者的治疗有效率,治疗前后采用欧洲癌症研究与治疗组织肺癌生存质量（EORTC QLO-C43）量表对患者的生存质量进行评分,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者血清中血管内皮细胞生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素12（IL-12）水平。结果：联合组患者治疗后总有效率高于化疗组,但组间比较差异无统计学意义（χ²=0.806,P=0.369）。治疗前联合组和化疗组患者功能性量表、总体健康状况、症状子量表、肺癌特异性子量表评分比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后联合组患者功能性量表和总体健康状况评分明显高于化疗组（P<0.05）,症状子量表和肺癌特异性子量表评分明显低于化疗组（P<0.05）。治疗前联合组和化疗组患者血清中VEGF、TNF-α和IL-12水平比较差异无统计学意义（P>0.05）;治疗后联合组患者血清中VEGF水平明显低于化疗组（t=3.608,P<0.05）,TNF-α和IL-12水平明显高于化疗组（t=3.426,P<0.05;t=2.849,P<0.05）。结论：化疗联合斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗NSCLC患者的效果较好,且能明显改善NSCLC患者生存质量,其机制可能与降低血清中VEGF水平及升高血清中TNF-α和IL-12水平有关。     

斑蝥酸钠维生素B6注射液改善经射波刀治疗的非小细胞肺癌患者生活质量的研究

目的观察斑蝥酸钠维生素B6注射液(艾易舒)联合射波刀(CyberKnife,CK)治疗非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的临床疗效及生活质量。方法收集既往住院病历资料,纲入经射波刀治疗的晚期NSCLC住院患者77例,按是否联用斑蝥酸钠维生素B6注射液分为联合组和CK组。结果早期治疗有效率联合组为67.44%,CK组为52.94%(P>0.05)。生活质量提高率联合组为48.84%,CK组为23.53%;骨髓抑制发生率联合组发生率为27.90%,CK组发生率为55.88%;消化道反应联合治疗组发生率为20.93%,CK组发生率为44.12%,联合组生活质量提高率高于CK组,骨髓抑制和消化道反应发生率和程度均较于CK组低,两组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论斑蝥酸钠维生素B6注射液可改善经射波刀治疗的非小细胞肺癌患者生活质量。     

应用RNA干扰技术沉默NF—κB基因对肺癌A549细胞的影响

目的：运用RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术阻断肺癌细胞株A549中NF-κB p65基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖的影响。方法：实验以肺癌A549细胞株为材料,分为空白对照、脂质体对照以及siRNA干扰实验共3组。以体外转录法合成dsRNA,并用脂质体转染A549细胞株,RT-PCR法测定肺癌A549细胞内NF-κBp65mRNA的表达。ELISA法检测NF—κB亚单位p65的DNA结合活性的改变。MTT检测细胞增殖情况。结果：与空白对照和脂质体对照组相比,SiR—NA组具有明显抑制肺癌A549细胞NF-κBp65mRNA表达的作用（P〈O．01）,同时ELISA结果显示,siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于空白对照和脂质体对照组（P〈0．05）。MTT法显示siRNA组中细胞增殖减慢,生长受到抑制。结论：应用RNAi技术可以有效干扰肺癌A549细胞NF-κBp65的表达。     

氯化锂对A549肺癌细胞增殖及核因子-κ Bp65表达的影响

目的使用糖原合成酶激酶-3抑制剂氯化锂作用肺癌A549细胞后,观察对细胞增殖和核因子-κBp65（NF-κBp65）表达的影响。方法不同浓度氯化锂作用A549细胞48h后,以噻唑蓝（MTT）比色试验为指标观察氯化锂对人肺腺癌A549细胞增殖的影响;免疫细胞化学实验检测核因子-κBp65表达情况。结果不同浓度的氯化锂对A549细胞均具有抑制增殖的作用,并且这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系;NF-κBp65表达随氯化锂浓度增加而减弱。结论氯化锂可抑制A549人肺腺癌细胞增殖,这种作用可能是通过作用NF-κB信号系统完成的。     

斑螯酸钠维生素B6注射液联合化疗对肺癌组织FAS表达及细胞超微结构的影响研究

目的 探讨斑螯酸钠维生素B6注射液(商品名:艾易舒)联合化疗对非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌变组织FAS蛋白表达及细胞超微结构的影响.方法 选取84例NSCLC患者为研究对象,随机数字表法分为联合组和对照组,每组42例.对照组中途剥落2例,共40例有效病例入组,予以单纯吉西他滨+顺铂(GP)化疗方案;联合组剥落4例,共38例有效病例入组,予以艾易舒注射液联合GP化疗方案.对比两组受试者2个化疗周期后临床疗效及毒副反应发生率的差异,记录其治疗前后Karnofsky功能状态量表(KPS)评分、癌变组织FAS蛋白阳性表达水平变化情况,分析联合组治疗前后细胞超微结构变化差异.结果 联合组治疗总有效率明显高于对照组(44.7％ vs.22.5％,P＜0.05).治疗后,两组发热、神经反应降低、肾损伤等毒副反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05),联合组骨髓抑制、恶心呕吐中重度毒副反应发生率明显低于对照组(P＜0.05).治疗后,两组受试者KPS评分及癌变组织FAS蛋白阳性表达率均较治疗前明显提升,且联合组高于对照组(P＜0.05).联合组受试者癌细胞的超微结构均出现不同程度的改变,部分可见癌细胞细胞质萎缩、染色质破裂、细胞器退变或凋亡;多数存在膜性结构裂隙、内质网结构松散或脱颗粒等变化.结论 艾易舒注射液联合GP化疗方案对促进NSCLC患者病情转归、改变癌细胞超微结构、减轻毒副作用等具有积极意义.     

氯胺酮对人肺癌A549细胞生长的影响及相关机制研究

目的:探讨麻醉类药物氯胺酮和吗啡对人肺癌A549细胞生长的影响及相关作用机制?方法:体外培养肺癌细胞系A549,细胞培养24 h后,随机分为3组:对照组(NC组,加0.9% NaCl处理)?氯胺酮组(K1?K2?K3组,分别加氯胺酮100?200?400 ?滋g/mL处理)和吗啡组(M1?M2?M3组,分别加吗啡25?50?100 ?滋g/mL处理)?持续作用24 h后,Transwell小室培养体系测定肿瘤细胞的迁移率;双荧光素酶报告基因法测定NF-κB转录活性;48 h后MTT法测定细胞增殖抑制率;Western blot技术测定NF-κB P65的蛋白表达;QPCR技术检测细胞内IL-1β和COX-2的mRNA表达?结果:①与NC组比较,M1?M2组表现为促进A549细胞迁移(P < 0.05),M3组作用不明显;K1?K2?K3组表现为抑制A549细胞迁移(P < 0.05);②与NC组比较,M1?M2组表现为促进A549细胞增殖(P < 0.05),M3组作用不明显;K2?K3组表现为抑制A549细胞增殖(P < 0.05),K1组不明显;③与NC组比较,M1?M2?M3组表现为促进IL-1β?COX-2的mRNA表达(P < 0.05);K2?K3组表现为抑制IL-1β?COX-2的mRNA表达(P < 0.05),K1组不明显;④与NC组比较,M1?M2?M3组表现为促进P65的转录和蛋白表达(P < 0.05),K1?K2?K3组表现为抑制P65的转录和蛋白表达(P < 0.05)?结论:与阿片类药物不同,氯胺酮通过NF-κB信号通路及其下游因子IL-1β和COX-2抑制人肺腺癌细胞A549的迁移和增殖,可能更适用于肺癌患者的术后镇痛?     

斑蝥酸钠注射液靶向PI3K/AKT/mTOR信号通路对人肺腺癌细胞A549迁移能力的影响

目的:探讨斑蝥酸钠注射液对人肺腺癌细胞A549侵袭与转移的影响及其作用机制.方法:分别用0.3125 mg·L-1、0.625 mg·L-、1.25 mg·L-1、2.5 mg· L-1、5 mg· L-1的斑蝥酸钠注射液处理A549细胞,MTT法检测斑蝥酸钠注射液对A549细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(half...     

亚硒酸钠对哮喘大鼠肺组织核因子-κB和抑制蛋白α表达的影响

目的:观察哮喘大鼠肺组织中核因子-κB(NF-κB)和抑制蛋白α(IκBα)的表达及炎性细胞的浸润,探讨用亚硒酸钠干预后对其的影响及其作用机制。方法:18只健康雄性SPF级W istar大鼠随机分为哮喘组(A组),亚硒酸钠干预组(Se组)和正常对照组(C组),每组6只。A组和Se组用卵清蛋白(OVA)致敏激发复制哮喘模型,Se组每次激发前用亚硒酸钠干预,C组用生理盐水作为对照。免疫组化方法观察NF-κB、IκBα在哮喘大鼠肺组织的表达。结果:哮喘组支气管肺组织NF-κB的蛋白表达(31.96±6.22)%显著高于对照组(5.08±1.92)%,IκBα蛋白的表达(1.64±0.58)%低于对照组(14.01±3.99)%,有统计学差异(P<0.01)。干预组NF-κB(18.09±4.13)%的蛋白表达与哮喘组相比显著降低(P<0.01),IκBα(5.04±0.45)%则增高(P<0.05)。哮喘大鼠肺组织NF-κB与IκBα蛋白表达呈负相关(r=-0.819,P<0.01)。结论:亚硒酸钠能够抑制哮喘大鼠肺组织IκBα的降解和NF-κB的激活,进而抑制气道炎症。     

橙皮甙对人非小细胞肺癌A549/DDP细胞增殖的影响

目的 观察橙皮甙对耐顺铂的人非小细胞肺癌A549/DDP细胞增殖的影响.方法 培养A549及A549/DDP细胞,绘制细胞生长曲线 ;MTT法测定A549/DDP细胞对顺铂的耐药倍数 ;②测定6、12、24、48及96 mg/L橙皮甙在6、12、24及48 h对A549/DDP细胞增殖的抑制率.③用24 mg/L橙皮甙处理A549/DDP细胞24 h后,用流式细胞计量术分析细胞周期.结果 ①A549/DDP细胞和A549细胞的生长曲线相似,倍增时间分别为(33.68±0.11)h和(33.54±0.84)h; A549/DDP细胞对顺铂的耐药倍数为12.90.②橙皮甙对A549/DDP细胞的抑制率随橙皮甙浓度增加和(或)时间的延长而增强(Pearson相关分析P＜0.05).③24 mg/L橙皮甙作用A549/DDP细胞24 h后,实验组G2/M期和S期细胞数比对照组减少(P＜0.05).结论 ①A549/DDP细胞基本保留了A549细胞的生长特性,对顺铂有明显耐药性.②橙皮甙对A549/DDP生长有抑制作用.③橙皮甙可诱导A549/DDP细胞阻滞于G2/M期.     

蟾蜍灵联合阿霉素对人肺癌A549细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：探讨天然药物蟾蜍灵、阿霉素以及两者联用对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影 响。方法：采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT )法观察蟾蜍灵、阿霉素以及两者联用对A549细胞增 殖的影响;采用赫斯特(Hoechst 33342)染色法观察细胞核形态变化;采用流式细胞仪检测蟾蜍灵、阿霉素以及两者联 用对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;采用Western印迹检测凋亡蛋白的表达。结果：蟾蜍灵和阿霉素单独用药均能 抑制A549细胞的增殖,且呈剂量与时间依赖关系;与蟾蜍灵和阿霉素单独用药相比,1,20,100 nmol/L蟾蜍灵分别 与1.0 μg/mL阿霉素联合作用A549细胞24,48,72 h的抑制率显著升高(均P<0.05)。蟾蜍灵和阿霉素均可在一定程度上 诱导细胞凋亡,两药联用后诱导细胞凋亡作用显著增强。蟾蜍灵和阿霉素联用可将细胞周期阻滞在S期,并上调凋亡 蛋白caspase-3的表达。结论：蟾蜍灵联合阿霉素可显著抑制A549细胞的增殖,其抗肿瘤的机制可能与诱导细胞凋亡、 细胞周期S期阻滞及凋亡蛋白caspase-3的上调有关。     

大黄酸对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其机制

目的：探讨大黄酸对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其机制。方法：将NSCLC A549细胞分为对照组和低、中及高剂量大黄酸组,采用不含大黄酸的培养基和含有质量浓度为5、10和20 μmol·L^-1大黄酸的培养基分别培养细胞24、48和72 h。采用MTT法检测各组A549细胞增殖率,流式细胞术检测A549细胞凋亡率以及不同细胞周期A549细胞百分比,Western blotting法检测各组A549细胞中半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）、半胱氨酸蛋白酶9（Caspase-9）、细胞色素C（Cyt-C）和凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达水平,划痕实验和Transwell实验检测各组A549细胞迁移和侵袭能力。结果：大黄酸处理24h后,与对照组比较,低、中和高剂量大黄酸组A549细胞增殖率明显降低（P<0.05）,细胞迁移距离明显减少,侵袭细胞数量明显减少;中和高剂量大黄酸组A549细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;高剂量大黄酸组G₁期细胞百分比明显降低（P<0.05）。大黄酸处理48 h后,与对照组比较,中和高剂量大黄酸组A549细胞中Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C和AIF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：大黄酸可抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与上调Caspase-3、Caspase-9、Cyt-C和AIF蛋白表达有关。     

核因子-κB、MMP-9在非小细胞肺癌中的表达及相关性分析

目的探讨核因子-κB（NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及相关性。方法应用免疫组织化学法,检测80例NSCLC组织及35例非肿瘤性肺组织标本中NF-κB、MMP-9的表达,并与临床病理因素进行相关性分析。结果NF-κB、MMP-9在NSCLC中高表达,阳性率分别为67.5%、72.5%,显著高于非肿瘤性肺组织中阳性表达17.1%、11.4%（P〈0.05）。NF-κB、MMP-9表达与TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）,MMP-9表达还与组织的低分化有关。NF-κB表达与MMP-9呈正相关（rs=0.350,P=0.001）。结论在NSCLC中存在NF-κB、MMP-9的高表达,NF-κB、MMP-9的高表达与NSCLC的恶性程度及淋巴结转移有关。NF-κB可能通过上调MMP-9的表达促进肺癌的侵袭转移。二者表达的检测有助于肺癌侵袭转移的判断。     

甘草查尔酮B对人非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨甘草查尔酮B(LCB)对于人非小细胞肺癌A549细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法：采用CCK-8法和平板克隆形成法检测LCB对A549细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞技术检测对细胞周期、凋亡的影响;采用Western blotting法检测线粒体凋亡蛋白表达。结果：LCB可显著抑制A549细胞的增殖。LCB经处理后将A549细胞阻滞在G0/G1期（P<0.05）,同时细胞凋亡率也明显增加（P<0.05）。Bax/Bcl-2比值及Caspase-3蛋白表达明显上升（P<0.05）。结论：LCB可通过阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,从而抑制非小细胞肺癌A549的增殖。     

姜黄素对A549细胞亚群SP和NON-SP的NF-κB、VEGF及Notch通路的影响

[目的] 通过动物实验了解姜黄提取物-姜黄素抗肿瘤血管生成的具体作用机制。[方法] 将40只BALB/C雄性裸小鼠分为4组,每组10只。分别为A组(SP亚群细胞姜黄素组)、B组(SP亚群细胞荷瘤对照组)、C组(NON-SP亚群细胞姜黄素组)、D组(NON-SP亚群细胞荷瘤对照组).A、B两组于实验前建立肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型,C、D两组建立肺腺癌A549 NON-SP细胞亚群荷瘤模型,建立模型后观察16 d,于A组、C组小鼠腹腔注射姜黄素,隔天1次,B、D两组注射生理盐水。16 d后将小鼠称重后处死,剥离瘤块组织,比较各组瘤质量;免疫组化法检测肿瘤组织中血管生长因子(VEGF)、核因子-κB(NF-κB)的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch1 mRNA含量。[结果] 肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠瘤体与NON-SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠相比体积较大;SP亚群细胞姜黄素组抑瘤作用及抗肿瘤血管生成优于NON-SP亚群细胞姜黄素组,两组相比差异具有统计学意义。[结论] 姜黄素可以抑制肿瘤生长,考虑可能与其抑制NF-kB的表达,下调Notch1 mRNA含量,阻断Notch信号通路,抑制肿瘤组织中VEGF的表达有关。     

环孢素A诱导人胃癌MGC80-3细胞凋亡以及对NF-κB p65表达的影响

目的研究环孢素A(CsA)诱导胃癌MGC80-3细胞凋亡作用以及对NF-κB p65表达的影响。方法倒置显微镜观察CsA高剂量(5、10、15、20μmol/L)组与CsA低剂量(1、2、4、8μmol/L)组处理MGC80-3细胞24 h后细胞形态变化;MTT比色法分别检测两剂量组处理24 h对MGC80-3细胞增殖的抑制作用,以细胞生长抑制率≤5%评价CsA的非毒性剂量;Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞仪(FCM)检测CsA高、低剂量组处理后的细胞凋亡率;Western blot法检测CsA高、低剂量组细胞内NF-κB p65的表达。结果 CsA低剂量组处理MGC80-3细胞24 h后显微镜下见细胞生长状况良好,CsA高剂量组见多数细胞生长贴壁不牢、皱缩变圆及坏死脱落的现象。CsA高剂量组对MGC80-3细胞增殖有抑制作用,而CsA低剂量组显示在4μmol/L浓度范围以下对细胞增殖无明显抑制作用。FCM检测表明CsA低剂量组诱导细胞凋亡率与空白组相比差异无显著性,随药物作用剂量增加CsA高剂量组诱导细胞凋亡作用增强。Western blot法表明CsA高剂量组作用后NF-κB p65表达逐渐降低(P<0.05,P<0.01),而CsA低剂量组NF-κB p65的表达基本不变。结论 CsA诱导人胃癌MGC80-3细胞凋亡作用与药物作用浓度呈剂量效应关系,CsA可能通过抑制NF-κB信号通路诱导MGC80-3细胞凋亡。     

核转录因子κB家族蛋白及HPV E6/E7mRNA与早期宫颈癌复发的关系

目的 探讨核转录因子κB（NF-κB）家族蛋白表达及人乳头瘤病毒（HPV） E6/E7 mRNA水平与早期宫颈癌复发的关系。方法 收集2017年1月至2020年12月在开滦总医院妇产科接受宫颈癌根治术的163例早期宫颈癌患者的临床资料,设为宫颈癌组;另收集医院同期收治的101例非宫颈癌患者的临床资料,设为非宫颈癌组,根据病理结果分为3个亚组：对照组（子宫肌瘤患者,n=31）、低度鳞状上皮内瘤变（LSIL）组（n=26）、高度鳞状上皮内瘤变（HSIL）组（n=44）。比较宫颈癌组与非宫颈癌组及非宫颈癌3个亚组间宫颈组织中c-Rel、p65、p50核表达及HPV E6/E7 mRNA表达情况,分析c-Rel、p65、p50核表达及HPV E6/E7 mRNA在不同临床病理特征宫颈癌患者中的差异性表达,采用Kaplan-Meier法分析c-Rel、p65、p50及HPV E6/E7 mRNA表达与宫颈癌术后无复发生存的关系,Cox法分析宫颈癌术后复发的影响因素。结果 宫颈癌组c-Rel、p65、p50及HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组（P＜0.05）,HSIL组c-Rel、p50及HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组（P＜0.05）,LSIL组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于对照组（P＜0.05）。c-Rel表达与脉管浸润程度有关,p65表达与FIGO分期、宫旁浸润及淋巴结转移有关,p50表达与间质浸润有关,HPV E6/E7mRNA表达与肿瘤直径、宫旁浸润及间质浸润有关（P＜0.05）。随访36（12~75）个月期间,163例宫颈癌患者复发率为19.63%（32/163）,Kaplan-Meier结果显示,c-Rel、p50阳性患者与阴性患者的无复发生存率差异无统计学意义（LogRankχ²=0.820、3.181,P=0.367、0.075）,p65、HPV E6/E7 mRNA阴性患者无复发生存率分别优于阳性患者（LogRankχ²=10.597、4.474,P=0.001、0.034）。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期IIa期、淋巴结转移、p65阳性、HPV E6/E7 mRNA阳性可增加宫颈癌术后复发风险（HR=1.617、1.506、3.180、1.460,P＜0.05）。结论 转录因子NF-κB家族核表达、HPV E6/E7 mRNA表达在宫颈病变进展过程中存在差异,其表达水平与早期宫颈癌多种病理特征有关,且p65、HPV E6/E7 mRNA可影响宫颈癌术后复发,可作为评估早期宫颈癌术后复发的可靠参考指标。     

非小细胞肺癌hnRNP A2/B1免疫组化及定量测定的临床意义

目的:探讨hnRNP A2/B1对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值及与NSCLC临床病期、淋巴结转移的关系.方法:标本系胸外科手术切除的石蜡包埋组织或新近手术切除标本,其中原发性NSCLC 39例、肺良性肿瘤22例、正常肺50例,各组年龄、性别均具可比性.采用免疫组化S-P法和流式细胞术(FCM)分别检测肺组织hnRNP A2/B1的表达及细胞内hnRNP A2/B1的含量.结果:(1)NSCLC组hnRNP A2/B1免疫组化表达阳性率(74.4%)显著高于肺良性肿瘤组(40.1%,P<0.01)及正常肺组(38.0%,P<0.01),NSCLC组中有淋巴结转移者阳性率(94.7%)明显高于无淋巴结转移者(55.0%,P<0.05);(2)NSCLC细胞内hnRNP A2/B1定量测定含量(67.25±14.02,阳性率82.1%)显著高于肺良性肿瘤细胞(31.79±6.79,阳性率4.5%,P<0.01)及正常肺细胞(30.15±5.85,阳性率0,P<0.01),NSCLC组中有淋巴结转移者阳性率(100%)明显高于无淋巴结转移者(65.0%,P<0.05).结论:hnRNP A2/B1对NSCLC的诊断、病情预测、判断淋巴结转移的程度均具有重要的临床价值.FCM与免疫组化方法相比,具有阳性率高、简便、快速等优点.