四逆汤对脓毒症大鼠心肌细胞线粒体损伤的影响

目的:研究四逆汤(Sini decoction,SND)对脓毒症模型大鼠心肌细胞线粒体损伤的保护机理。方法:将70只大鼠随机分为正常对照组10只,模型组和四逆汤组各30只,(1、3、5 d各10只),通过失血以及静脉注射脂多糖2次打击以建立脓毒症大鼠模型。四逆汤组在二次打击后给予四逆汤灌胃,1次/d;模型组按相同溶液体质量剂量、时点灌蒸馏水。在模型建立后的1、3、5 d分别处死大鼠,采血行心脏有关酶学CK、CK-MB检测;分离心肌细胞线粒体,行线粒体肿胀度、膜电位及总ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)检测;电镜观察心肌细胞线粒体形态学变化。结果:与正常对照组比较,模型组CK、CK-MB及线粒体肿胀度显著升高(P0.01),1 d时出现峰值,而治疗组较模型组有显著改善(P0.01)。模型组的线粒体膜电位、总ATP酶、SOD及GSH值与正常对照组比较显著降低(P0.01),而治疗组较模型组显著(P0.05或P0.01)。电镜观察脓毒症模型组线粒体结构破坏明显,出现空泡化,而治疗组较模型组减轻。结论:四逆汤能有效保护脓毒症心肌细胞线粒体功能,其机制可能与提高线粒体的抗氧化能力、减少氧化损伤、改善线粒体的呼吸功能有关。     

茯苓四逆汤对脓毒症大鼠心肌保护机制的研究

目的研究茯苓四逆汤对脓毒症大鼠心肌抑制的保护作用机制。方法取SPF级SD雄性大鼠100只,随机分成5组:假手术组、脓毒症组,茯苓四逆汤低剂、中、高剂量组(1.3 g/d、2.6 g/d、3.9 g/d)。假手术组、脓毒症组给予等容量0.9%氯化钠注射液,茯苓四逆汤各剂量组给予相应药物,均为灌胃给药;盲肠结扎穿孔法制作脓毒症模型,假手术组仅是暴露盲肠,造模后6 h开始给药,每日剂量分2次给药,直至造模后第3日,记录其生存状态,并在术前、术后24 h、48 h、72 h 3个时间点各选5只大鼠尾静脉取血并处死,取心肌组织后超低温保存备用,测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)水平。结果脓毒症组及中药各剂量组的大鼠TNF-α、IL-6、H-FABP明显升高,与假手术组差异有统计学意义(P <0.01);与脓毒症组同时间点比较,中药各剂量组的大鼠TNF-α、IL-6水平明显下降(P <0.01),H-FABP水平也明显下降(P <0.05);而中药各剂量组同时间比较发现,剂量越高,其TNF-α、IL-6水平下降越明显(P <0.01或P <0.05);不同剂量治疗组中比较发现,随着时间的延长,剂量越高的茯苓四逆汤对于改善H-FABP水平越好(P <0.05)。结论茯苓四逆汤对脓毒症大鼠心肌抑制具有良好保护作用,其机制可能与减少炎症释放有关。     

新四逆汤治疗脓毒症心肌损伤的疗效观察

目的 观察新四逆汤治疗脓毒症心肌损伤的临床疗效。方法 99例脓毒症心肌损伤患者随机分为治疗组49例与对照组50例。两组均给予基础治疗,治疗组予新四逆汤颗粒剂,对照组予新四逆汤安慰剂,疗程7 d,比较两组治疗前后肌钙蛋白（c TnI）、肌酸激酶（CK-MB）、N末端B型利钠肽原（NT-proBNP）、左心室射血分数（LVEF）、平均动脉压（MAP）、乳酸（Lac）、急性生理与慢性健康状况Ⅱ（APACHEⅡ）评分、序贯器官功能衰竭评估（SOFA）评分等。结果 与治疗前对比,治疗组治疗后NT-proBNP、CK-MB、明显下降,LVEF明显升高（P <0.05）,APACHEⅡ评分明显下降（P <0.05）,治疗组第7天NT-proBNP和血Lac水平明显低于对照组（P <0.05）,LVEF明显高于对照组（P <0.05）。治疗第7天两组间MAP、c TnI、SOFA评分差异无统计学意义（P>0.05）。结论 治疗组可明显降低SIMD患者的NT-proBNP和血Lac水平,对CK-MB、LVEF和APACHEⅡ评分有一定程度改善,可有效改善心脏收缩功能障碍、减...     

川芎嗪对脓毒症大鼠心功能保护作用的研究

目的研究川芎嗪注射液对脓毒症大鼠心功能的保护作用。方法 45只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(CLP组)、川芎嗪组(TMP组),每组15只,分别在造模后12,24,48,72 h用心脏超声检测大鼠的心功能,72 h后留取大鼠左室心肌,进行组织形态学观察。结果与Sham组比较,在12,244,87,2 h 4个时点,CLP组大鼠EF值降低,差异有统计学意义(P<0.05),而TMP组大鼠在上述4个时点可提高EF值水平,与CLP组比较差异有统计学意义(P<0.05);在心肌组织形态学方面,与CLP组比较,TMP组大鼠心肌炎症较CLP组减轻。结论川芎嗪注射液有抑制炎症反应,改善脓毒症大鼠心功能的作用。     

血必净注射液对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡保护作用的机制研究

目的观察血必净注射液对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其相关机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白对照组20只,模型组20只,血必净组20组。血必净注射液(4 m L/kg)预先给药,连续3 d;模型组及空白对照组予生理盐水(4 mL/kg),连续3 d。采用大肠杆菌内毒素注射法复制脓毒症大鼠模型。分别于造模后12、24 h观察脓毒症大鼠心肌形态学改变;硫代巴比妥酸显色法检测心肌组织丙二醛(MDA)含量;黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)测定超氧化物歧化酶(SOD)活力;检测心肌细胞Caspase-3活性检测。结果空白对照组心内、外膜完整。与空白对照组比较,模型组心肌组织显示出无序的心内膜结构,广泛的炎症细胞浸润。血必净组心肌组织损伤程度有所降低,但仍有心肌结构轻微混乱,可见炎症细胞浸润、毛细血管扩张,出血,细胞坏死和纤维化,24 h时上述改变稍减轻。12 h时各组心肌组织MDA含量无显著差异(P>0.05);与空白对照组比较,24 h时模型组心肌组织的MDA含量明显升高;与模型组比较,24 h时血必净组MDA下降明显(P <0.01)。12 h时,与空白对照组比较,模型组心肌组织SOD含量下降明显(P <0.05),与模型组比较,血必净组心肌组织SOD含量升高明显(P <0.01)。与空白对照组比较,24 h时模型组心肌组织的MDA含量明显升高;与模型组比较,24 h时血必净组SOD下降明显(P <0.05)。12 h时,与空白对照组比较,模型组的Caspase-3活性明显升高(P <0.01),与模型组比较,血必净组心肌组织Caspase-3活性下降明显(P <0.01)。与空白对照组比较,模型组的Caspase-3活性明显升高(P <0.01);与模型组比较,24 h时血必净组Caspase-3下降明显(P <0.01)。结论预先给予血必净注射液对脓毒症大鼠心肌细胞凋亡具有保护作用,这可能与血必净注射液能够降低心肌细胞氧化损伤、减少心肌细胞凋亡有关。     

四逆汤对脓毒症休克患者炎症因子的影响

目的：观察四逆汤对脓毒症休克患者症状及hs－CRP、TNF－α、IL－10的影响。方法：将80例患者随机分为对照组40例、治疗组40例。治疗组在常规治疗基础上加四逆汤。对比分析治疗前后两组患者的中医症状积分,并分析两组治疗前、治疗后第3天、第7天的hs－CRP、TNF－α、IL－10指标。结果：治疗后两组中医症状疗效比较有明显差异。两组治疗后第7日炎症因子组间比较差异有统计学意义,治疗组下降明显。结论：四逆汤能有效改善脓毒症休克患者中医症状疗效,减轻炎症反应。     

通冠胶囊对脓毒症大鼠心肌保护作用实验研究

目的 探讨通冠胶囊对脓毒症大鼠心肌的保护作用。方法 选择SD大鼠120只,行盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症动物模型。造模后分为假手术组、模型组、通冠胶囊治疗组(治疗组),每组40只,每组按照不同时点分成5个亚组(CLP术后12 h、24 h、48 h、72 h及7天5个时点),每个亚组8只。模型组及治疗组均行盲肠结扎穿孔术,假手术组打开腹腔轻轻翻动盲肠后缝合腹壁切口,盲肠不作穿刺。模型组及假手术组给予生理盐水［10 mL/(kg·d)］灌胃,治疗组给予通冠胶囊混悬液［600 mg/(kg·d)］灌胃,每天1次,共7天。观察各组各时间点血流动力学变化［左心室内压峰值(LVSP)、左心室等容收缩期压力最大变化速率(+dp/dtmax)、左心室舒张期压力下降最大变化速率(-dp/dtmax)］ 、炎症因子［肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)］、心肌损伤标记物［肌钙蛋白 I(CTnI)］。光镜及电镜下观察3天后各组大鼠心肌细胞形态变化。结果 与假手术组比较,模型组术后24～72 h LVSP、+dp/dtmax均降低,-dp/dtmax 、CTnI、TNF-α及IL-6均升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,治疗组24～72 h LVSP、+dp/dtmax均升高,-dp/dtmax、CTnI、TNF-α及IL-6均降低,差异均有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。光镜下显示治疗组心肌细胞偶见颗粒样变性,心肌横纹较清晰,冠状动脉扩张充血, 间质轻度炎症。电镜下显示治疗组心肌细胞核结构完整, Z线较清晰,线粒体数目增加,可见肿胀,但嵴的结构较清晰,间质轻度纤维化。结论 通冠胶囊可以改善脓毒症大鼠的心肌抑制状态,从而改善脓毒症的预后。     

四逆汤抗氧化应激性损伤保护心肌细胞机制的探讨

目的:观察四逆汤在乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤过程中的保护效应,探讨四逆汤抗氧化应激性损伤保护心肌细胞的机制.方法:采用H2O2诱导损伤制备SD乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含不同浓度的四逆汤含药血清DMEM培养基培养细胞,应用流式细胞仪检测培养细胞的存活率,用1 m mol/LH2O2处理心肌细胞,分别在处理0.5h,1 h,2 h,4 h和8 h后检测细胞的凋亡率和坏死率,同时检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶(LDH)和细胞内丙二醛(MDA);对H2O2处理不同时间的心肌细胞线粒体膜电位进行检测.结果:采用含15%四逆汤含药血清的DMEM培养基是心肌细胞生长的合适浓度;四逆汤含药血清能降低细胞培养液中的LDH活性以及细胞内MDA的含量,减少细胞的凋亡率和坏死率;降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度.结论:四逆汤对于H2O2造成的心肌细胞损伤具有保护作用,这种作用与保护线粒体膜电位的稳定有关.     

四逆汤对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

目的:研究四逆汤对实验性大鼠心肌缺血的保护作用。方法:分别采用垂体后叶素(pituitrin,PIT)和注射异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)的方法制备大鼠心肌缺血模型,通过观察体表心电图(ECG),测定血清心肌三酶(AST、LDH、CPK),血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果:与模型对照组比较,四逆汤可明显改善缺血性ECG中ST段偏移的幅度(P<0.05);四逆汤高剂量组可显著降低血清AST、LDH、CPK和MDA的活性,同时可提高血清SOD的活性(P<0.05或P<0.01)。结论:四逆汤对实验性心肌缺血具有保护作用。     

PKC的活化和Smac释放的改变在四逆汤预处理抑制心肌细胞凋亡中的作用

目的:观察四逆汤预处理24h后对心肌缺血再灌注(MI/R)后心肌细胞凋亡的影响,并以PKC和Smac为着眼点,探讨其可能的机制。方法:SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组,缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1 h,再灌1 h;四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5 g/kg.d)连续3d,末次灌药24h后心肌缺血1h,再灌1h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,免疫组织化学方法检测心肌PKC的表达,进行Smac的Western blotting分析并检测Caspase-3的活性。结果:四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R后心肌细胞凋亡率,PKC发生转位且蛋白表达升高,Smac自线粒体的释放减少,Caspase-3的活性下降。结论:四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R造成的细胞凋亡,机制可能与其活化PKC,保护线粒体,抑制Smac的释放,阻碍细胞凋亡的信号转导有关。     

超微四逆汤对大鼠的长期毒性试验

目的:观察超微四逆汤对大鼠灌胃给药的长期毒性反应,评价其安全性,为临床研究提供依据。方法:采用长期毒性试验方法观察超微四逆汤对大鼠产生的毒性反应。结果:给药12周和停药2周,超微四逆汤对大鼠动物行为、活动、毛色、大小便、饮食、饮水无明显影响,眼、鼻、口腔无异常分泌物出现;对红细胞、血红蛋白和血小板、凝血酶原时间无明显影响;对血液生化学指标亦无明显影响。结论:超微四逆汤及传统饮片四逆汤均安全。     

不同折算剂量四逆汤对放血致低血压状态大鼠的升压作用

目的采用动物实验方法对《伤寒杂病论》中四逆汤进行习惯认为的“1两=3g”,和预期研究的目标折算标准、即推定的“1两=13.8g”,进行不同折算剂量的药效学比较研究。方法采用多导生理仪观察放血致低血压状态大鼠血压、心率改变及不同折算剂量四逆汤的影响,并与正常对照组比较。结果放、止血后模型组、各给药组大鼠血压下降;给药后2h,四逆汤给药组放血致低血压状态大鼠血压升高,大剂量组较小剂量组升压效果明显;放、止血后模型组、各给药组心率减慢;给药后2h,四逆汤大剂量对于放血致低血压状态大鼠有明显的加强心肌收缩,提高心率作用。结论与按照习惯认为的“1两=3g”折算的四逆汤小剂量组比较,按照“1两=13.8g”折算的四逆汤大剂量能够升高放血致低血压大鼠血压,提高心率,作用明显。     

四逆汤对阿霉素性心衰大鼠心肌线粒体功能的影响

目的:探讨四逆汤对阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体的保护机制.方法:SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(3.75 g生药/kg/d),3周后测定大鼠心功能,线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn SOD活性,肿胀程度及Na K ATP酶和Ca2 ATP酶活力,RT-PCR法检测Mn SOD mRNA表达.结果:四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,提高Mn SOD的活性及其mRNA表达,减少心肌细胞线粒体MDA的含量及肿胀程度,提高ATP酶活力.结论:阿霉素性心力衰竭心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以通过减轻氧化损伤,改善线粒体功能,保护心肌组织.     

四逆汤对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化Smad2和Smad7的影响

目的 观察四逆汤对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化Smad2和Smad7的影响。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃。4周后,各组行Masson染色和电镜分析;通过免疫组化方法检测心肌Smad 2和Smad 7蛋白在心肌的表达;RT-PCR法检测Smad 2和Smad 7 mRNA表达。结果 Masson染色示模型组心肌胶原纤维IOD值为9303,而四逆汤组为2459,对照组为4224,提示模型组心肌纤维化较四逆汤和对照组明显;模型组心肌Smad 2蛋白IOD值为20275,mRNAI OD值为0.919;而四逆汤组Smad 2蛋白IOD值为9949,mRNAI OD值为0.561,提示模型组Smad 2表达明显高于四逆汤组（P<0.05);模型组心肌Smad 7蛋白IOD值为25667,mRNAI OD值为0.222,而四逆汤组Smad 2蛋白IOD值为93 147,mRNAI OD值为0.412,提示模型组Smad 7表达明显低于四逆汤组（P<0.05)。结论 四逆汤可以有效抑制异丙肾上腺素所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与下调Smad 2表达和上调Smad 7表达有关。     

增液汤和四逆汤抗心室重构的比较研究

目的探讨寒性方增液汤和热性方四逆汤对实验性心室重构的影响.方法采用皮下注射异丙肾上腺素及腹主动脉不完全结扎法分别制备小鼠和大鼠心室重构模型、观察增液汤和四逆汤对心脏指数、血压、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、醛固酮(ALD)、内皮素(ET)、羟脯氨酸(Hyp)的影响.结果与正常对照组或假手术组比较,模型组心脏指数显著增加,血压升高,心肌组织AngⅡ、ET、HyP含量明显增加,血清ALD含量明显增加;增液汤能明显减少心脏指数,降低血压,减少AngⅡ、ET、Hyp、ALD含量;四逆汤除了对心肌组织ET含量有一定的降低作用外,对其他指标作用不明显.结论寒性方增液汤抗心室重构作用显著,其作用机制与降低血压、抑制神经内分泌因子有关.热性方四逆汤无明显抗心室重构作用.     

四逆汤抗缺血再灌注引起小鼠心肌细胞凋亡的作用观察及其机制研究

目的:探讨心肌缺血再灌注模型中细胞凋亡的发生及四逆汤的保护作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为四逆汤组、模型组和正常组,观察心肌细胞 DNA ladder,检测超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、Bcl-2蛋白、Caspase-3活性和 Bcl-2、Caspase-3mRNA 转录情况。结果:模型组存在氧化损伤,出现 DNA lad-der,凋亡指数增加;四逆汤可减少凋亡对抗氧化损伤。模型组 Bcl-2蛋白表达增加,四逆汤组更为显著,与mRNA 转录结果一致;模型组明显升高的 Caspase-3活性在四逆汤组被显著抑制,mRNA 转录未见明显变化。结论:此缺血再灌注模型存在心肌细胞凋亡,四逆汤可能通过提高机体抗氧化能力,增加 Bcl-2蛋白表达,抑制 Caspase-3激活减少凋亡发生。     

四逆汤对心肌缺血大鼠心肌内皮素影响的实验研究

目的：研究四逆汤对心肌缺血大鼠心肌内皮素（ET）影响的分子机制。方法：将SD大鼠随机分为对照组，缺血组和四逆汤组，用垂体后叶素造模，分别测定各组心肌ET浓度并做心肌ET－1的免疫组化及基因表达。结果：四逆汤组心肌ET浓度明显低于缺血组（P＜0．01）。免疫组化显示ET－1主要定位在心肌细胞和血管内皮细胞，缺血组心肌ET－1染色灰度值明显低于对照组和四逆汤组（P＜0．01）；RT－PCR结果显示缺血组PCR产物条带灰度值显著高于对照组和四逆汤组（P＜0．01）。结论：四逆汤可显著降低缺血心肌ET浓度，这可能与四逆汤能有效抑制缺血心肌ET－1基因的表达及蛋白合成有关。     

炙甘草汤对大鼠心房肌细胞L型钙电流及其动力学特征的影响

目的：研究炙甘草汤对大鼠心房肌细胞L型钙电流(I_Ca-L)及其动力学特征的影响。方法：选取24只大鼠随机分为空白对照组和炙甘草汤低剂量组(1.125 g/mL)、中剂量组(2.25 g/mL)、高剂量组(4.5 g/mL),每组6只。3组药物组大鼠分别按各自浓度给予相同体积的炙甘草汤药液灌胃,对照组大鼠予以等体积生理盐水灌胃。给药1周后利用酶解法对4组大鼠心房肌细胞进行急性分离,用全细胞膜片钳技术记录4组心房肌细胞I_Ca-L并比较I-V曲线,选取中剂量组与对照组的心房肌细胞比较I_Ca-L通道的动力学特征。结果：与对照组比较,炙甘草汤低、中、高剂量组的大鼠心房肌细胞I_Ca-L均发生不同程度的抑制效果,I-V曲线均上移。观察比较中剂量药物组与对照组的I_Ca-L通道动力学特征,发现2组细胞的激活曲线和半数激活电压,差异无统计学意义(P>0.05),但中剂量药物组细胞的稳态失活曲线发生向右偏移,半数失活电压V_1/2升高(P<0.05),失活后恢复曲线向...