重组合异种骨移植成骨活性及量效关系的实验研究

观察重组合异种骨的成骨活性及其量效关系。方法采用ＲＢＸ移植建立ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠股后肌袋模型,术后定期对移植组织进行放射学,病理学及碱性磷酸酶活性检查。结果（１）含不同比例的牛骨形态发生蛋白的ＲＢＸ组,成活性与ｂＢＭＰ含量呈正相关,存在着剂量依赖关系;（２）ＲＢＸＩ组成骨良好,同样含量的纯ｂＭＰ组也出现可见的成骨效应,但最终未能成骨;（３）ＡＬＰ活性以术后７天最高,４２例时仍较明显。结论ＲＢＸ是高效     

重组合异种骨移植同源抗原刺激对脾细胞上清中IL—2的影响

为探讨重组合异种骨（ＲＢＸ）移植后对机体细胞免疫功能的影响，实验将ＲＢＸ、牛ＢＭＰ、经处理的同源松质骨粒、羟基磷灰石移植建立４组ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠股后肌袋模型，术后２、７、１４、２８、４２天取鼠脾细胞培养上清，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测体内植骨及体外同源抗原刺激后ＩＬ－２的生物学活性。结果表明，各组移植后２天体内ＩＬ－２均一过性升高；７、１４天ＲＢＸ、牛ＢＭＰ组显著降低；体外抗原刺激３Ｈ－ＴｄＲ掺入ＣＰＭ值明显降低，且与抗原量呈剂量依赖关系。上述结果提示，ＲＢＸ移植对Ｔ淋巴细胞和ＩＬ－２诱导ＣＴＬＬ增殖有明显的抑制效应，可能对ＩＬ－２也有直接的抑制作用；而术后２天各组ＩＬ－２普遍升高可能与手术局部刺激应激反应有关。本研究对ＲＢＸ移植后既能成骨又不发生明显免疫排异的机理提出了初步解释。     

庆大霉素重组合异种骨复合体修复兔桡骨节段性骨缺损的研究

观察庆大霉素重组合异种骨复合体（Ｇ－ＲＢＸ－Ｃ）修复兔桡骨节段性骨缺损的能力。方法采用兔桡骨干１５ｍｍ节段性骨缺损不愈合模型评价Ｇ－ＲＢＸ－Ｃ的骨缺损修复能力。结果植入Ｇ－ＲＢＸ－Ｃ术后４周,纤维组织长入,诱导形成多个新生软骨、骨岛;术后８周,新骨大量形成;术后１６周,初步形成正常骨干结构,骨皮质连续,骨髓腔再通。结论Ｇ－ＲＢＸ－Ｃ具有良好的骨缺损修复能力,有望成为临床开放性骨折合并骨缺损一期植骨治疗的较理想骨移植材料。     

VDR基因型分布及其与骨矿含量的关系

近年来，在骨质疏松研究领域，维生素Ｄ受体基因（ＶＤＲ）与骨量及骨代谢的研究受到许多国外学者的重视。我们利用国际合作的机会，对９６名沈阳妇女ＶＤＲ基因进行了分析。研究对象来自于一项正在进行的骨代谢影响因素研究课题。采用标准方法（Ｎｕｃｌｅｏｎｋｉｔ，ｓｃｏｔｌａｂ，ＵＫ）从白细胞中提取ＤＮＡ，以聚合酶链反应（ＰＣＲ）来扩增特定基因段。用ＢｓａＭＩ限制性内切酶消化ＰＣＲ产物，以２％琼脂糖电泳分离判定ＶＤＲ基因型。使用ＤＰＸ－Ｌ（ＬｕｎａｒＵＳＡ）骨矿测定仪测定研究对象的腰椎（Ｌ２～４）及髋部骨矿含量（ＢＭＣ）。结果：与其他国家人群相比，该人群ＶＤＲ基因的分布状态不同。ＶＤＲ基因的ｂｂ型占总数的９１．７％；Ｂｂ型仅占８．３％，而且ＢＢ基因型完全不存在。在青年妇女中发现ｂｂ基因型组股骨颈ＢＭＣ高于Ｂｂ型组股骨颈ＢＭＣ（Ｐ＝０．０２７）。老年妇女ｂｂ基因型组股骨颈ＢＭＣ也高于Ｂｂ型组，但差异无统计学意义，没有发现其他部位ＢＭＣ与ＶＤＲ基因型有关。     

峰值骨量及影响因素在骨质疏松诊断中价值的探讨

为了对骨质疏松进行诊断，必须建立自己实验室的峰值骨量正常值，并应考虑到对峰值骨量的各种影响因素。本文采用ＳＰＡ和ＤＥＸＡ，测定了中国３６８７９人群的挠骨、尺骨中远１／３部位的骨矿密度（ＢＭＤ）及股骨近端（股骨颈、大转子，ＷＡＲＤ’Ｓ区）ＢＭＤ。通过其中所测１０９７５人群上述部位的结果建立了峰值骨量的正常值，峰值骨量的年龄段是在２０～３９岁。本文在讨论中与国内外不同作者进行了对比，并分析了影响峰值骨量的各种因素，以便在诊断骨质疏松时恰当使用峰值骨正常值。     

纤维蛋白用作BMP载体的研究

目的：将纤维蛋白用作ＢＭＰ（骨形态发生蛋白）的载体材料。方法：用５ｍｇ ＢＭＰ分别与３种不同浓度的纤维蛋白制成复合物，植入小鼠肌囊后不同时间进行组织学观察、测定碱性磷酸酶活性和钙含量等。结果：纤维蛋白浓度为１２０ｍｇ／ｍｌ的复合物具有良好的骨诱导活性，成骨量是单纯５ｍｇ ＢＭＰ的两倍。结论：纤维蛋白是理想的ＢＭＰ载体材料，复合物可望应用于临床骨缺损的修复。     

陶瓷样异种骨复合骨髓异位成骨的实验研究

目的了解陶瓷样异种骨（ＣＸＢ）与骨髓（ＢＭ）复合移植的成骨作用。方法将ＣＸＢ与ＢＭ复合及单纯ＣＸＢ植入兔的骶棘肌内,术后２、４、８、１２、１６及２４周取出植入材料作组织学及组织化学检查,观察植入材料的成骨作用。结果ＣＸＢ与ＢＭ复合植入后２周开始有软骨和新骨生成,以后软骨逐渐钙化成骨,８周时出现髓腔,并随植入时间的延长,新骨生成增多,成骨更为典型。而单纯ＣＸＢ植入后无新骨或软骨形成。结论ＣＸＢ与ＢＭ复合移植通过骨传导、骨诱导及提供成骨细胞或成软骨细胞而成骨,是一种理想的骨移植替代材料,可望在临床上用于骨缺损的修复。     

新型复合人工骨成骨效应的实验研究

新型复合人工骨，ＨＡ／ＴＣＰ／ＢＭＰ为含孔块料，含孔率４０－４６％，孔径２００－４００μｍ该材料不但有一定的生物降解性能，良好的组织相容和隐固性，且具有诱导成骨作用。动物实验，经Ｘ－线，Ｙ－照像，骨密度测量及组织学检查后表明：ＨＡ／ＴＣＰ／ＢＭＰ成骨效应高于ＨＡ／ＴＣＰ，而ＨＡ／ＴＣＰ和ＨＡ／ＴＣＰ／ＢＭＰ的成骨效应都高于不具生物降解性能的ＨＡ。新型复合人工骨是一种有希望过渡于临床应用的人体硬组织     

天然型无机骨的制备及其成骨效应的实验研究

已有多种材料修复骨缺损，但天然型无机骨（ｎａｔｕｒａｌｎｏｎ－ｏｒｇａｎｉｃｂｏｎｅ，ＮＮＢ）的骨作用研究较少。采用动物骨，经物理、化学及高温处理，除去其有机成分，保留其无机成分的三维结构外型。天然型无机骨既具有类似人骨的网状孔隙，又有利于传导成骨。植入家兔的肌肉、桡骨内和胫骨内，采用Ｘ线，组织学荧光标记等方法观察。证实，该材料组织相容性好，且具有新生骨出现早、生长快及成骨量多的特点，是当前较理想的新型人体骨组织替代材料     

多孔β—TCP／BMP复合人工骨的研制和动物体内的相关研究

多数人工骨缺损修复材料无骨诱导活性，为使人工植骨材料具有骨诱导活性并可在体内降解，本研究采用可降解陶瓷β－磷酸三钙（β－ＴＣＰ）与骨形成蛋白（ＢＭＰ）复合形成具有骨诱导能力的人工骨。将β－ＴＣＰ／ＢＭＰ、单纯ＴＣＰ、羟基磷灰石（ＨＡ）和ＴＣＰ／ＨＡ分别植入１６８只小鼠股部肌肉内，在２４、７２小时，１、２、４、８周取材，作大体观察、组织形态学观察、扫描电镜观察及碱性磷酸酶（ＡＬＰ）检测。另将上述材料植入５５只兔桡骨１．５ｃｍ缺损中，分别在２、４、８、１２、１６周取材，作大体、Ｘ线、组织形态学观察及计算机图像分析。研究结果显示：将β－ＴＣＰ／ＢＭＰ植入小鼠肌袋后１周软骨生成，４周有造血骨髓的板层骨生成。ＡＬＰ检测１、２周水平最高。植入材料与骨组织之间无纤维组织间隔。在兔桡骨缺损修复的研究中发现，β－ＴＣＰ／ＢＭＰ的骨缺损修复作用最强，１６周植入材料的降解达５３％，成骨量亦最多。研究结果表明：β－ＴＣＰ／ＢＭＰ是一种可降解、具有较强骨诱导能力、生物相容性较好的人工骨。     

胎儿骨基质对纯钛种植体-骨结合的作用研究

为探索胎儿脱钙骨基质（ＦＤＢＭ）对纯钛与骨结合的影响，采用荧光显微镜、偏光显微镜、定量组织学测量，以及扫描电镜能谱分析等研究手段，对复合ＦＤＢＭ及未复合ＦＤＢＭ的钛骨界面进行了骨密度、骨整合率、新骨生长率，以及界面上Ｃａ、Ｐ含量等的对比实验研究。结果表明，ＦＤＢＭ植入钛骨界面无抗原性，明显促进和加速了界面新骨形成，使钛骨结合时间提前约２个月。认为，胎儿骨可能比成人骨内的诱导成骨因子作用大或含量高。ＦＤＢＭ作为无抗原性、制备简便、价格便宜、便于保存及骨诱导作用明显的骨诱导剂之一，具有深入研究的价值     

异种骨移植时T淋巴细胞总数及亚群的变化

以新鲜小牛松质骨（ＦＸ）、脱抗原处理的牛松质骨载体（ＢＣ）及不同复合比例的重组合异种骨（ＲＢＸ）植入Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股部肌袋内，正常小鼠模拟手术做为对照组。术后７、１４及２８天，取材做组织学检查，同时以间接免疫荧光法测定外周血及脾脏淋巴细胞中Ｔｈｙ１、Ｌ３Ｔ４、Ｌｙｔ２及Ｔａｃ阳性细胞百分数。结果示：脱抗原载体植入组与正常对照组无明显差异。ＦＸ组阳性淋巴细胞百分数均明显升高，以Ｔａｃ升高显著；组织学示局部免疫排斥而无骨诱导生成。ＲＢＸ植入组Ｔａｃ无增高，组织学见活跃的异位诱导成骨而无免疫排斥反应，但Ｔｈｙ１及Ｌｙｔ２细胞荧光染色阳性率增高，以Ｌｙｔ２增高明显，Ｔｈ／Ｔｓ比值下降或倒置，为ＲＢＸ中所含ＢＭＰ所致。这一现象可能与机体对异种ＢＭＰ及ＲＢＸ不引起明显免疫排斥有关。Ｔａｃ细胞阳性表达率对评价异种骨移植时免疫排斥反应有一定的意义。     

内源性骨形态发生蛋白研究进展

内源性骨形态发生蛋白研究进展张子军，卢世壁从脱钙骨基质的诱导成骨作用，到骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的提纯和命名，Ｕｒｉｓｔ的杰出贡献奠定了今天诱导成骨研究的基础。多学科研究的介入大大加快、深化了ＢＭＰ的认识。许多临床、实验研究显示了生物合成或提取ＢＭＰ...     

同种异体骨基质明胶在椎体间融合术中的实验研究

目的 通过同种异体骨基质明胶（ＢＭＧ）在腰椎间诱导成骨的实验结果,证明同种ＢＭＧ能够在椎间诱导成骨,达到椎间融合的目的。方法 以兔腰椎间盘摘除后的椎间隙作为动物模型,分别植入明胶海绵、同种ＢＭＧ、脱钙骨基质和酒精保存骨。植入后４、８及１２周进行Ｘ线摄片和组织学检查。结果 同种ＢＭＧ无明显免疫排斥反应,并且具有良好的骨诱导作用,术后４及８周有大量新骨出现于椎间隙中央部,术后１２周椎间完全融合。结论：     

重组人骨形态发生蛋白—2诱导成骨作用的动物实验研究

骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）的主要作用和用途是诱导新骨形成和促进骨损伤的修复。作用采用多种动物模型，观察了大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ－２（ｒｈＢＭＰ－２）的生物学作用。小鼠股部肌肉内植入试验结果表明，ｒｈＢＭＰ－２具有较强的诱导成骨活性。植入后第２１天，局部有硬有的形成，新生骨有骨皮质和不规则的骨髓腔，植入区局部的股骨增粗，股骨重量明显增加。组织形     

经皮注射骨形态发生蛋白和成纤维细胞生长因子促进兔骨缺损愈合

作者报告了以聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）作为牛骨形态发生蛋白（ｂＢＭＰ）和基因重组碱性人成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）可溶性载体，将三者的混悬液经皮注射入小鼠肌肉和兔桡骨缺损处的实验研究。经不同时间点的Ｘ线摄片，组织学检查，结果发现成骨量及骨缺损愈合明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）。注射入小鼠肌肉后及兔桡骨缺损区，观察到与新骨伴随的血管增生。证实该两种因子的联合植入，成骨作用大于单用骨形态发生蛋白，骨成     

重组人骨形态发生蛋白－2诱导成骨作用的动物实验研究

骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）的主要作用和用途是诱导新骨形成和促进骨损伤的修复。作者采用多种动物模型，观察了大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ—２（ｒｈＢＭＰ—２）的生物学作用。小鼠股部肌肉内植入试验结果表明，ｒｈＢＭＰ—２具有较强的诱导成骨活性。植入后第２１天，局部有硬质骨的形成，新生骨有骨皮质和不规则的骨髓腔，植入区局部的股骨增粗，股骨重量明显增加。组织形态学观察表明，诱导成骨过程符合典型的软骨内成骨的时相。另在大鼠颅骨大面积缺损模型中观察到，在颅骨缺损区植人ｒｈＢＭＰ—２三个月后，缺损区内有从周边向中央生长的新骨生成，实验组缺损区的面积明显小于对照组，并且颅骨的厚度也显著增加。家兔股骨骨膜下植入试验发现，ｒｈＢＭＰ—２植入后２１天，植入区股骨的骨皮质增厚，并有沿骨干延伸的骨痂组织的产生。以上结果证明，大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ—２有较强的跨种诱导成骨活性和骨损伤修复作用，具有较好的临床应用前景。     

庆大霉素重组合异种骨复合体的制备及相关研究

目的研制既有抗感染能力又有较高成骨活性的新型骨移植材料。方法用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定庆大霉素重组合异种骨（ＧＲＢＸ）在小鼠肌袋内药物释放度,并在污染的兔桡骨骨缺损模型中观察其抗感染与骨修复功能。结果明胶包裹４ｍｇ庆大霉素的ＧＲＢＸ具有良好的药物缓释功能,在植入部位周围软组织中维持有效浓度可达１７天,提高明胶浓度能进一步延缓药物释放度。ＧＲＢＸ植入３×１０７ＣＦＵ金葡菌污染的兔桡骨干１．５ｃｍ骨缺损模型可有效抑制感染,１６周后获得完全骨连接。结论局部应用抗生素与骨移植相结合有可能改进开放性骨损伤及感染后骨不连骨缺损的治疗。     

陶瓷样异种骨的制备及复合骨髓移植成骨的实验研究

为寻找理想的骨移植替代材料，将市售新鲜猪肋骨经物理、化学方法处理后，制得类似人骨的具有天然网状孔隙系统的陶瓷样异种骨（ＣＸＢ）。用ＣＸＢ与兔骨髓基质细胞体外混合培养；用ＣＸＢ与自体红骨髓（ＢＭ）复合移植于兔的骶棘肌内，经相差显微镜、组织学和扫描电镜观察。结果表明，ＣＸＢ对兔骨髓基质细胞的生长、附着及增殖无不良影响，显示了良好的组织相容性。ＣＸＢ加ＢＭ植入肌内后第２周开始成骨，并随时间而增加。至２４周时有明显的新骨形成，其新骨生成过程与羟基磷灰石（ＨＡ）加ＢＭ复合移植相似，但其降解快，形成典型的松质骨结构早，而单纯植入ＣＸＢ则无新骨形成。探讨了复合移植的成骨机理及临床意义。     

肿瘤坏死因子-α和骨形成发生蛋白2诱导成纤维细胞成骨表型表达的体外研究

成纤维细胞的成骨作用已在体内外得到证实。为进一步探索诱导成纤维细胞成骨潜能得以表现的调控因素，以实现体外获得大量成骨型成纤维细胞、形成骨修复材料的设想，采用分离，纯化人皮肤成纤维细胞，使其生长在含不同浓度的ＥＧＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α、ＢＭＰ２培养液的干预条件下，采用生物化学，组织化学和电镜观察方法，检测成纤维细胞成骨性标志物形成状况。发现：ＴＮＦ－α和ＢＭＰ２联合应用，可使成纤维细胞分泌碱性磷酸