九州虫草的核苷类成分及不同部位两种活性成分含量的分布

目的快速测定九州虫草中的部分核苷类成分及其主要活性成分虫草素与腺苷的含量,并考察九州虫草不同部位虫草素和腺苷含量的分布.方法用高效毛细管区带电泳法确定野生和人工九州虫草中的核苷类成分,测定虫草素和腺苷的含量,并比较它们在九州虫草不同部位含量的分布.结果蒙山九州虫草中含有至少8种核苷或碱基,其中抗肿瘤活性成分虫草素的含量远高于冬虫夏草和蛹虫草,且人工栽培九州虫草中虫草素的含量又显著高于野生九州虫草.腺苷主要存在于九州虫草子座中,而虫草素则不仅在九州虫草子座中含量甚高,人工栽培九州虫草虫体中虫草素含量也较高.结论天然和人工九州虫草及其不同部位的核苷和碱基成分存在一定差异,九州虫草中的虫草素含量高,具有良好的栽培、药用与开发前景.     

九州虫草的核苷类成分及不同部位两种活性成分含量的分布九州虫草的核苷类成分及不同部位两种活性成分含量的分布

目的快速测定九州虫草中的部分核苷类成分及其主要活性成分虫草素与腺苷的含量，并考察九州虫草不同部位虫草素和腺苷含量的分布。方法用高效毛细管区带电泳法确定野生和人工九州虫草中的核苷类成分,测定虫草素和腺苷的含量，并比较它们在九州虫草不同部位含量的分布。结果蒙山九州虫草中含有至少8种核苷或碱基，其中抗肿瘤活性成分虫草素的含量远高于冬虫夏草和蛹虫草,且人工栽培九州虫草中虫草素的含量又显著高于野生九州虫草。腺苷主要存在于九州虫草子座中，而虫草素则不仅在九州虫草子座中含量甚高，人工栽培九州虫草虫体中虫草素含量也较高。结论天然和人工九州虫草及其不同部位的核苷和碱基成分存在一定差异，九州虫草中的虫草素含量高，具有良好的栽培、药用与开发前景。     

HPLC法测定冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的建立用HPLC法测定不同方法(熏干、新鲜和阴干)处理冬虫夏草样品中核苷类成分(腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷和胸苷)含量的方法。方法样品用纯化水超声提取,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1。结果虫草中含有的5种核苷标准曲线的相关系数均在0.999 0以上,精密度检测RSD值为0.31%~1.95%(n=5),重复性检测RSD值为0.50%~2.56%(n=5),回收率在99.46%~100.11%之间。结论该方法灵敏、简便、快速、准确、重复性好,能有效测定虫草中核苷类成分的含量,可为评价虫草的质量提供依据。     

蒙山九州虫草中黄酮类化合物提取、鉴定和含量分析

目的比较蒙山九州虫草不同部位黄酮类化合物的含量及不同提取方法对黄酮类化合物得率的影响,探讨蒙山九州虫草中粗黄酮的最佳提取工艺,并对提取所得黄酮类化合物进行定性和定量分析。方法分别采用乙醇回流法、微波法、超声波法提取蒙山九州虫草中黄酮类化合物,以分光光度法测定总黄酮的含量。结果蒙山九州虫草子座中黄酮含量最高,微波法提取得率最高,最佳提取工艺为:功率为140 W,提取时间为1.5 min,料液比为1∶25,pH 10。结论微波提法具有工艺简单、耗费小、产物纯、提取得率较高等特点,适于实验室条件下使用。     

不同产地人工蛹虫草子实体及冬虫夏草中核苷类成分的比较

目的 测定不同产地人工蛹虫草子实体与天然冬虫夏草中核苷类成分的含量,为人工蛹虫草的质量评价提供依据. 方法 以尿苷、腺苷、虫草素为主要评价指标,采用高效液相色谱法测定9个厂家11批人工蛹虫草样品和4种来源天然冬虫夏草中核苷类成分的含量. 结果 不同产地人工蛹虫草的核苷含量为0.265%～0.870%,冬虫夏草核苷含量为0.168%～0.250%,其中虫草素含量变化较大,而天然冬虫夏草中几乎不含或含有少量虫草素. 结论 产地不同,人工蛹虫草中核苷类成分含量不同,但明显高于天然冬虫夏草中核苷类成分含量,其中腺苷、尿苷含量较为稳定,可为人工蛹虫草的合理开发利用和质量评价提供依据.     

RP-HPLC法测定青海不同产地冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的:测定青海不同产地冬虫夏草中主要核苷类成分的含量并比较其差异。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定不同产地的9份样品中尿苷、鸟苷、肌苷、腺苷、虫草素的含量。色谱柱为Symmetry ShieldTMRp18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.2～1.2mL·min-1,检测波长为260nm,柱温为30℃。结果:5种成分的进样量分别在0.331～1.796、0.375～2.046、0.256～1.389、0.338～1.844、0.384～2.110mg范围与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.9999、0.9999、0.9998、0.9997、0.9998);平均回收率分别为98.72%、101.48%、99.74%、98.46%、98.09%,RSD分别为1.96%、1.68%、1.82%、1.57%、2.74%(n均为6)。青海不同产地间冬虫夏草主要核苷类成分含量有差异。结论:本方法能有效鉴别天然冬虫夏草中的核苷类成分,而冬虫夏草化学成分与生态因子的相关性还需要进一步研究。     

皖产古尼虫草中核苷和碱基成分的HPLC分析

目的:建立高效液相色谱法测定皖产古尼虫草中核苷和碱基成分(尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷)的含量,并比较其与天然冬虫夏草核苷和碱基成分的异同。方法:采用Zorbax SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷进样浓度分别在0.38～191.08,0.37～188.48,0.37～189.72,0.37～190.92,0.37～188.55,0.50～168.55,0.37～190.36,0.24～125.00μg.mL-1范围内线性关系良好,R2为0.9998～0.9999;加样回收率分别为102.1%,102.1%,95.3%,96.2%,96.9%,94.1%,108.7%,101.8%,RSD未超过2.8%。皖产古尼虫草和冬虫夏草均含有核苷和碱基成分,其中:皖产古尼虫草含有较高的尿嘧啶、尿苷、腺苷,而冬虫夏草中肌苷含量较高;二者的次黄嘌呤、鸟苷、腺嘌呤的含量相近;在该检测限下,两者均未测得虫草素。结论:初步认...     

北虫草中6种核苷类成分的含量测定与质量控制

目的建立同时测定北虫草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)腺苷含量的定量分析方法,建立北虫草中尿苷、腺苷、虫草素的定性分析方法,对北虫草进行质量控制研究。方法采用高效液相色谱法对北虫草中6种核苷类成分进行定量分析,Shiseido CAPCELL PAK MG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,检测波长260 nm,流速1.0 m L·min~(-1),柱温25℃。采用薄层色谱法对北虫草中3种核苷类成分进行定性分析,硅胶SGF_(254)薄层板,乙酸乙酯–丙酮–氨水体积分数为2.5∶6∶1.5作为展开剂,置于波长254 nm的紫外光灯下检视。结果尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)腺苷的定量测定分别为1.223~156.66、3.914~125.25、1.959~125.38、1.223~156.66、1.225~156.75和3.906~125.00μg·m L~(-1),呈良好的线性关系,r≥0.999 6;平均加样回收率分别为98.31%、101.12%、100.72%、99.96%、100.29%和100.40%,RSD均小于3.0%,在20批北虫草样品的平均含量分别为0.043%、0.097%、0.022%、0.082%、0.986%和0.175%,不同来源北虫草样品中核苷类的含量差别较大。北虫草薄层色谱中尿苷、腺苷、虫草素的分离度良好,特征性强,可以用于北虫草的定性鉴别。结论以核苷类成分作为指标性成分所建立的定性定量分析方法简便,专属性强,重复性好,可实现对北虫草进行质量控制的目的。     

联用色谱用于冬虫夏草的化学成分测定

目的：对冬虫夏草虫体和子座部分的甾醇和核苷类化合物进行多组分定性定量分析,并比较核苷类化合物的提取方法。方法：用HPLC-DAD联用色谱检测,借助HELP法解析,基于组分的色谱保留时间和光谱曲线进行定性,然后用总体积积分法定量。结果：HPLC-DAD联用色谱检测和HELP法解析相结合,可验证色谱峰的纯度,分辨重叠峰,得到各组分的纯色谱和光谱曲线。该法的样品回收率为99.97%～100.81%,虫体和子座部分的化学成分存在差异,用水提取核苷类化合物的效果较好。结论：综合利用色谱和光谱两方面信息,可提高组分定性定量结果的准确度。     

高效液相色谱法同时测定人工蛹虫草子实体中核苷类成分的含量

目的:建立高效液相测定人工培养蛹虫草子实体中核苷类成分含量的方法。方法:采用KNAUER Eurospher-100 C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-50mmol.L-1磷酸二氢钾(7∶93)为流动相,检测波长为260nm。结果:测定3批人工培育蛹虫草中核苷类成分的含量,腺苷、腺嘌呤、虫草素的平均含量分别为0.14%,0.0095%,0.42%。结论:本方法能同时测定人工蛹虫草中多种核苷类成分的含量,具有较高的灵敏度,操作简单,可用于人工蛹虫草的质量评价。     

3种虫草抗氧化活性的研究

目的研究蒙山虫草、蛹虫草、冬虫夏草等 3种虫草水提液的抗氧化活性 ,并考察实验条件对结果的影响。方法采用邻苯三酚自氧化法测定 3种虫草的抗氧化活性。结果 3种虫草的抗氧化活性都较强 ,且比较接近。结论 3种虫草具有较强的抗氧化活性 ,具有延缓衰老的功效。     

天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成分的含量及其变化

目的比较天然和人工培养冬虫夏草中核苷类成分的含量,并考察其变化.方法用高效毛细管电泳法测定天然和人工冬虫夏草中核苷类成分的含量;考察湿热对冬虫夏草中核苷类成分含量的影响.结果人工冬虫夏草的核苷含量明显高于天然冬虫夏草;新采集的天然冬虫夏草中核苷类物质含量极低,而采集日久者核苷类成分含量较高;湿热可明显增加天然冬虫夏草中核苷类物质的含量,但对人工冬虫夏草中核苷类成分的含量无明显影响.结论天然和人工冬虫夏草中核苷类成分存在一定差异,天然冬虫夏草中核苷类物质可能主要来源于大分子核苷(酸)的降解.     

天然与发酵培养冬虫夏草中核苷类成分的含量及其变化

目的 比较天然和人工冬虫夏草中核苷类成分的含量,并对其变化进行考察。方法 采用高效毛细管电泳法测定天然和人工冬虫夏草中核苷类成分的含量;考察湿热对冬虫夏草中核苷类成分含量的影响。结果 人工冬虫夏草的核苷含量明显高于天然冬虫夏草;新采集的天然冬虫夏草中核苷类物质含量极低,而采集日久者核苷类成分含量却较高;湿热可明显增加天然冬虫夏草中核苷类物质的含量,但对人工冬虫夏草中核苷类成分的含量无明显影响。结论 天然和人工冬虫夏草中核苷类成分存在一定差异,天然冬虫夏草中核苷类物质可能主要来源于大分子核苷(酸)的降解,腺苷在天然冬虫夏草质量控制中的应用价值尚值得进一步研究。     

冬虫夏草和虫草菌丝体中腺苷成分的比较

目的 比较冬虫夏草与虫草菌丝体(以下简称菌丝体)中腺苷成分,为菌丝体在临床治疗中替代冬虫夏草提供实验依据.方法 采用薄层色谱法对腺苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(色谱柱为Hypersil ODS2 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.01 mmol·L-1磷酸二氢钾水溶液∶甲醇=17:3;流...     

毛细管区带电泳法同时测定冬虫夏草中多种核苷及其碱基成分含量

目的探讨毛细管电泳法研究天然冬虫夏草用不同溶剂提取的效果及测定其中核苷及其碱基含量的可行性。方法采用Unimicro毛细管电泳仪 ,石英毛细管柱 ( 6 0cm× 75 μmI D ) ,运行缓冲液分别为 36mmol/L硼砂 1 5mmol/L磷酸二氢钠 ( pH 8 9) ,分离温度 2 0℃ ,分离电压1 5kV ,测定波长 2 5 4nm ,虹吸进样 1 5s。结果基线分离冬虫夏草不同溶剂提取的样品。腺苷、尿苷、尿嘧啶和次黄嘌呤含量分别为 0 30 %、0 2 8%、0 1 4 %、0 0 5 % ;平均回收率分别为 96 4 %、98 2 %、94 3%、95 1 % ;RSD分别为 0 89%、1 2 %、1 4 %、1 8% (n =6 )。结论该法准确 ,快速 ,灵敏度高 ,对名贵药冬虫夏草的质量控制有较重要意义。     

高糖对肾小管上皮细胞内质网应激的影响及冬虫夏草的干预作用

目的：观察高糖对肾小管上皮细胞凋亡和内质网应激标志物表达的影响,研究冬虫夏草提取液对高糖诱导的肾小管上皮细胞内质网应激的可能保护机制。方法：体外培养大鼠肾小管上皮细胞,分为正常低糖组、低糖+冬虫夏草组、高渗组、高渗+冬虫夏草组、高糖组、高糖+冬虫夏草组和高糖+高渗+冬虫夏草组,用Realtime-PCR法检测各组细胞葡萄糖调解蛋白78（Grp78）、半胱氨酸蛋白酶蛋白12（caspase-12）及I型胶原mRNA的表达,采用酶联免疫吸附法测定细胞上清液中I型胶原的分泌,Western-blotting检测Grp78及caspase-12蛋白表达。结果：高糖组与低糖组相比,Grp78、Caspase-12及Ⅰ型胶原mRNA和蛋白水平明显上升,差异均有统计学意义（P<0.05）;低糖+冬虫夏草组、高渗组及高渗+冬虫夏草组与低糖组相比,Grp78、Caspase-12 mRNA及Ⅰ型胶原mRNA和蛋白水平无明显差别（P>0.05）;与高糖组相比,高糖+冬虫夏草干预组Grp78、Caspase-12及Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：冬虫夏草对高糖诱导下肾小管上皮细胞凋亡及肾脏纤维化具有一定抑制作用,其机制可能与抑制内质网应激反应有关。     

Morphological and microscopic identification studies of Cordyceps and its counterfeits

Macroscopic and microscopic studies were applied to distinguish Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc. and its 5 common counterfeits. Transverse sections of stroma and larvae and surface sections of stroma of C. sinensis, Cordyceps gunnii, Cordyceps barnesii, Cordyceps gracilis, Cordyceps liangshanensis and Cordyceps militaris were examined and their morphological and microscopic features photographed. The main morphological and microscopic features of the 6 species of Cordyceps were basically similar except for certain diagnostic differences. These included macroscopic differences from C. sinensis as follows: the stroma of C. gunnii is stout and rough with sterile bulgy or branched apex; the larvae of C. barnesii has a pair of teeth on the head; the stroma of C. liangshanensi is thread-like; C. gracilis is without stroma; and C. militaris is without larvae. There were also microscopic differences: from C. sinensis as follows: the stroma of C. barnesii is without perithecia; C. gunnii, C. liangshanensis and C. gracilis are without bristles on the larva body. These differences allow C. sinensis and its counterfeits to be easily distinguished.