固相萃取-高效液相色谱法测定拟缺香茶菜中3个二萜类成分的含量

目的建立测定拟缺香茶菜药材中二萜类成分Kamebacetal-A、Kamebacetal-B、肾形香茶菜丙素的方法。方法采用固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定3个二萜类成分的含量。使用Venusil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)反相色谱柱;流动相:乙腈(A)-水(B)梯度洗脱;流速:1 m L/min;柱温:30℃;检测波长230 nm。结果拟缺香茶菜中Kamebacetal-A、Kamebacetal-B、肾形香茶菜丙素分别在0.056~0.448 g/L(r=0.999 2),0.002 6~0.020 8 g/L(r=0.999 4),0.016~0.128 g/L(r=0.999 7)内与峰面积成良好的线性关系;平均回收率分别为97.53%(RSD=2.16%),96.02%(RSD=2.01%),98.23%(RSD=2.10%)。结论所建立的方法灵敏、准确、稳定,可用于拟缺香茶菜中Kamebacetal-A、Kamebacetal-B、肾形香茶菜丙素的含量测定,为拟缺香茶菜抗肿瘤谱效关系的研究奠定基础。     

鄂西香茶菜的二萜—4-表鄂西香茶素A

唇形科香茶菜属(Rabdosia)植物在日本用于治疗胃肠道疾病,中国则用作抗肿瘤和抗炎剂,有几篇关于香茶菜属二萜的化学和生物活性的综述已经发表。本文报道鄂西香茶菜(Rabdosia henryj(Hemsl.)Hara)的一个新二萜—4-表鄂西香茶菜素A,(4-epi-henryine A_1)分离和结构。结构是通过光谱数据确定的,为鄂西香茶菜素A(henryine A)的4-差向异构体。鄂西香茶菜1986年10月采自湖北省陨西县,地上部分用95％乙醇回流,浓缩后的乙醇提取物在乙酸乙酯中研匀,乙酸乙酯层用5％碳酸钠振摇除去有机酸,干燥、蒸发,     

鄂西香茶菜素抗肿瘤作用研究

鄂西香茶菜Rabdosia henryi(Hemsl.)Hara为唇形科香茶菜属植物,广泛分布于河南、湖北、四川、贵州、陕西、山西、河北等省。全草具有抗菌、消炎等作用,民间用于治疗急性黄疸型肝炎、急性胆囊炎、跌打损伤、毒蛇咬伤、脓疱疹等。其药理作用未见报道。本课题组对鄂西香茶菜粗制剂进行了药理作用的研究,结果表明其对体内和体外的艾氏腹水癌(Ehrlichascites carcinoma,ECA)肿瘤细胞有明显的抑制作用。从鄂西香茶菜中提取的单体鄂西香茶菜素(简称鄂西素)属于二萜类化合物[1]。笔者采用多种动物移植性肿瘤模型,观察鄂西素对动物肿瘤的抑制作用,…     

HPLC-MS/MS法同时测定枳壳厚朴汤冻干粉中7个香豆素类成分的含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定枳壳厚朴汤冻干粉中异欧前胡素、佛手柑内酯、花椒毒酚、橙皮油素、6',7'-羟基佛手柑素、佛手柑素以及佛手酚7个香豆素类成分含量的方法。方法采用Waters BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)梯度洗脱,流速:0.25 m L/min,柱温:35℃,进样量10μL。质谱采用电喷雾离子源(ESI)进行正离子模式检测,多反应监测模式(MRM)用于定量测定。结果 7个香豆素类成分中异欧前胡素在1.01~101.20μg/L(r=0.999 6)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.42%,RSD为1.88%。佛手柑内酯在5.25~525.00μg/L(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.92%,RSD为1.30%。花椒毒酚在5.06~506.40μg/L(r=0.999 6)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.40%,RSD为1.76%。橙皮油素在4.96~496.00μg/L(r=0.999 7)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.65%,RSD为1.80%。6',7'-羟基佛手柑素在4.98~497.80μg/L(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为101.16%、RSD为1.36%。佛手柑素在0.99~98.60μg/L(r=0.999 6)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为102.05%,RSD为1.65%。佛手酚在5.05~505.00μg/L(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系,平均回收率为100.73%,RSD为1.71%。结论所建立的方法快速、灵敏、准确,可用于枳壳厚朴汤冻干粉中异欧前胡素、佛手柑内酯、花椒毒酚、橙皮油素、6',7'-羟基佛手柑素、佛手柑素以及佛手酚7个香豆类成分的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定复方维生素注射液(4)中三种组分的含量

目的: 建立用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定复方维生素注射液(4)中三种组分含量的方法。方法: 采用HPLC法,C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-乙醇(80:20),检测波长270 nm。结果: 维生素A棕榈酸酯在12.5~125.5 μg/m l之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为99.38%,相对标准偏差(RSD)为1.36%;维生素E在125~1251 μg/m l之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为98.87%,RSD为0.95%;维生素K₁在16.5~166.5 μg/m l之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为98.08%,RSD为1.57%。结论: HPLC法测定复方维生素注射液(4)中3种维生素的含量专属性强,灵敏度高,准确性好,可用于复方维生素注射液(4)的含量测定。     

高效液相色谱法测定菟丝子中绿原酸、对-香豆酸和金丝桃苷的含量

[目的]建立同时测定菟丝子中绿原酸、对-香豆素和金丝桃苷的含量的高效液相色谱法,为菟丝子的质量标准建立提供依据。[方法]色谱柱为依利特ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 m L/min,检测波长为360 nm。[结果]在此色谱条件下,3种成分可完全分离。绿原酸、对-香豆素和金丝桃苷的线性分别为2.00~100μg/m L(r=0.999 3),6.25~100μg/m L(r=0.999 1),0.50~50μg/m L(r=0.999 1)。平均回收率分别为100%(RSD=3.2%)、102%(RSD=1.7%)和102%(RSD=3.1%)。[结论]该方法简便可行,重复性好,可用于菟丝子的质量评价。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪中单糖和双糖的含量

目的采用高效液相色谱-蒸发光散射法建立黄芪中单糖和双糖含量的测定方法。方法色谱柱为Waters X BridgeTM氨基柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(70∶30),流速为1.0mL/min,柱温为30℃。蒸发光散射检测器参数:雾化器温度为50℃,漂移管温度为90℃,气体流量为1.60L/min,增益值为1.0。结果果糖、蔗糖和麦芽糖分别在0.10~0.90μg(r=0.999 9)、1.00~9.00μg(r=0.999 6)、0.25~2.25μg(r=0.999 4)范围内其对数值与峰面积的对数值呈良好的线性关系;平均回收率分别为97.97%(RSD=1.56%)、97.82%(RSD=1.53%)、97.36%(RSD=1.59%)。结论所建立的高效液相色谱-蒸发光散射法简单、准确、重复性好,可用于黄芪中单糖和双糖的含量测定。     

UPLC法测定复方虎黄喷剂中虎杖苷、黄芩苷、欧前胡素

目的利用梯度洗脱,建立同时测定复方虎黄喷剂中3种指标成分虎杖苷、黄芩苷和欧前胡素的UPLC检测方法。方法采用UPLC法,Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),流动相:乙腈(A)和0.05%磷酸水溶液(B)梯度洗脱;流速:0.4mL/min;检测波长:280nm;柱温:35℃。结果虎杖苷的线性范围为0.59~59.0mg/L(r=0.999 2),平均回收率为100.6%,RSD为1.56%;黄芩苷的线性范围为1.128~112.8mg/L(r=0.999 9),平均回收率为101.5%,RSD为1.68%;欧前胡素的线性范围为0.109~10.9mg/L(r=0.999 9),平均回收率为100.6%,RSD为2.75%。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于复方虎黄喷剂的质量控制。     

合煎与单煎对四物汤中4种化学成分溶出量的影响

[目的]建立同时测定四物汤水提液中芍药苷、阿魏酸、藁本内酯和洋川芎内酯I 4种化学成分含量测定的方法,并考察合煎与单煎对这4种成分溶出量的影响。[方法]采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Cosmosil C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3%甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长为280 nm,流速为1 m L/min,柱温为30℃,分析在合煎、单煎条件下四物汤中4种化学成分溶出量的变化。[结果]芍药苷、阿魏酸、藁本内酯、洋川芎内酯I在19.38~310.00μg/m L(r=0.999 4),1.51~24.16μg/m L(r=0.999 4),1.50~24.00μg/m L(r=0.999 6),2.00~32.00μg/m L(r=0.999 4)线性范围内关系良好;平均加样回收率分别为95.89%(RSD=2.90%),97.08%(RSD=2.28%),96.84%(RSD=2.87%),98.77%(RSD=1.98%)。四物汤合煎液中洋川芎内酯I的溶出量低于当归、川芎药材溶出总量,而阿魏酸和藁本内酯的溶出量均高于当归、川芎药材溶出总量,芍药苷溶出量高于芍药药材溶出量。[结论]合煎与单煎中化学成分的溶出量并不是组方药味的简单叠加,而有其内在的配伍规律。     

柔茎香茶菜的二萜

柔茎香茶菜(Rabdosia flexicaulis C. Y. Wu et H. w. Li)是唇形科多年生草本植物,在四川西南部生长丰富。它的化学成分过去未曾研究过。作者现在报道从该植物的叶分离到一个新的二萜,命名为柔茎香茶素A(flexicaulin A)1和两个已知二萜,鄂西香茶菜素A(henryin A)5和香茶菜星B(rabdoloxin B)6。结构是通过光谱和化学方法确定的。柔茎香茶菜(采自四川冕宁县)干叶(11.5kg),在索氏提取器中用乙醚提取,蒸去乙醚得一绿色残物,溶于甲醇,加活性炭(100g)回流1h,过滤(×3),滤液蒸发至1/3体积,过滤,得50g黄色粉末。甲醇蒸干得残     

HPLC法测定鬼针草不同部位三种黄酮成分含量

目的 :建立同时测定鬼针草中三种黄酮类成分含量的方法 ,并比较鬼针草茎和叶中三种成分的含量。方法 :采用HPLC法对鬼针草中三种黄酮类成分芦丁、异奥卡宁7-0-β-D-葡糖苷和异槲皮苷的含量测定方法学进行考察,并同时分析三种黄酮类成分在鬼针草茎和叶总黄酮中的含量。结果:芦丁在0.010~1.040 mg/m L(r=0.999 9)、异奥卡宁7-0-β-D-葡糖苷在0.012~1.168 mg/m L(r=0.999 5)、异槲皮苷在0.012~1.230 mg/m L线性关系良好;平均回收率(n=6)分别为98.51%、99.21%、98.73%、97.33%、98.92%、98.77%。采用此方法同时测定鬼针草茎和叶中芦丁、异奥卡宁7-0-β-D-葡糖苷、异槲皮苷三种黄酮的含量。结论:建立的HPLC法同时测定鬼针草中三种黄酮类成分含量的方法良好,可用于鬼针草不同部位中黄酮的含量测定。     

IP-RPHPLC法检测电针后肥胖大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP含量

目的 建立一种离子对反相高效液相色谱(IP-RPHPLC)法并将其用于检测电针对肥胖大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP含量的影响。方法 应用岛津SIL-20AT高效液相色谱系统,Megres-C₁₈(5μm,250mm×4.6mm)耐水性色谱柱,对大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP进行分离,流动相为0.18mol/L的磷酸二氢钾缓冲液(含5%甲醇且pH=6.25),检测波长为254nm,流速为0.8mL/min,进样体积为20μL,柱温为25℃。结果 ATP在1.1~212.2μg/mL(r=0.9999),ADP在0.9~180.0μg/mL(r=0.9999)及AMP在0.9~181.8μg/mL(r=0.9997)范围内线性关系良好。ATP、ADP和AMP平均回收率分别为96.4%、98.3%、100.8%;RSD分别为2.50%、2.88%、4.14%;日内和日间精密度RSD分别为0.06%~0.40%和0.06%~0.69%;准确度均在99.0%~108.6%之间;ATP、ADP和AMP检测限为0.11、0.09、0.045μg/mL。结论 建立的高效液相色谱法用于检测大鼠肝脏组织中ATP、ADP和AMP含量简便、快速并且准确可靠,为针刺干预治疗后组织中小分子生物活性物质浓度的检测等研究工作奠定了基础。      

高效液相色谱法同时测定双五胶囊中4种有效成分的含量

目的建立同时测定双五胶囊中紫丁香苷、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素含量的方法。方法HPLC法,采用Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为A:甲醇-乙腈(1∶1),B:水,梯度洗脱,0～5min,35%～60%A;5～10min,60%～70%A;10～50min,70%～90%A;50～90min,90%A。流速为1ml/min,柱温:35℃,检测波长220nm。结果紫丁香苷、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素浓度分别在1.28～20.40μg/ml(r=0.9997)、6.30～100.80μg/ml(r=0.9996)、1.20～19.20μg/ml(r=0.9998)和3.75～60.00μg/ml(r=0.9996)范围内呈良好的线性关系。4种成分精密度实验RSD<1%。24h内稳定性RSD<1.5%。紫丁香苷、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的平均加样回收率分别为99.47%、102.50%、99.21%、101.86%。结论所建立的方法具有快速、简便、准确等优点,可用于双五胶囊的质量控制。     

高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度

目的:用高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度。方法:采用转篮法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度,以高效液相色谱法定量。色谱柱为RP-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为0.033 mol/L,磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0 mL/min;检测波长265 nm;进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱在0.992~9.920μg/mL范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为100.2%,RSD=0.38%(n=9),3批样品45 min溶出度均在75%以上。结论:高效液相法测定溶出度简便、准确、灵敏度高,可用于复方黄连素片中盐酸小檗碱溶出度的测定。     

地骨皮中咖啡酰丁二胺、地骨皮乙素和绿原酸含量测定方法研究

目的建立地骨皮中咖啡酰丁二胺、地骨皮乙素与绿原酸的含量测定方法。方法采用单因素考察方法建立供试品溶液制备方法;采用高效液相色谱(HPLC)法测定咖啡酰丁二胺、地骨皮乙素与绿原酸的含量,色谱条件为Waters Xbridge C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.05%三氟乙酸溶液梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长为290 nm,柱温30℃。结果地骨皮药材采用100倍量的70%甲醇回流提取60 min,制备供试品溶液;咖啡酰丁二胺在0.013 75~0.220 0 g/L范围内线性关系良好,r=0.999 5,平均加样回收率为99.25%,RSD=1.81%(n=6);地骨皮乙素在0.057 875~0.926 0 g/L范围内线性关系良好,r=0.999 8,平均加样回收率为101.01%,RSD=2.81%(n=6);绿原酸在0.009 25~0.148 0 g/L范围内线性关系良好,r=0.999 5,平均加样回收率为99.51%,RSD=2.32%(n=6)。结论所建立的含量测定方法简便准确,重现性好,为地骨皮药材质量控制和评价奠定基础。     

高效液相色谱法测定清化消食颗粒中芍药苷的含量

目的利用高效液相色谱法以芍药苷为指标对清化消食颗粒样品进行定量分析,建立清化消食颗粒中芍药苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱：Kromasil-C18（4.60mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈—水（17∶83）;检测波长：230 nm;进样量：10μL;流速：1.0 mL.min-1;柱温：30℃。结果在上述测定条件下,回归方程线性关系良好,回归方程为Y=1 628.634X＋28.98,r=0.999 8,n=6,线性范围为0.161～0.805μg,加样回收率为96.2%,其RSD为3.5%。结论本研究建立的HPLC法,有操作方法简捷,分析条件易于精确控制,待测成分易于分离等优点,具有较好的重复性和较高的精密度,可作为清化消食颗粒的含量测定方法。     

HPLC法测定山绿茶中芦丁的含量

目的:建立山绿茶中芦丁含量的测定方法.方法:采用ODS C18柱,5μm,4.6 mm×250 mm;以乙腈-体积分数2.5％的醋酸溶液(15∶85)为流动相;流速1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长254 nm.结果:芦丁在0.01833～0.18330 g/L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998...     

高效液相色谱法测定蜂王浆含片中10-羟基-2-癸烯酸的含量

目的研究蜂王浆含片中10-羟基-2-癸烯酸的含量测定。方法采用高效液相色谱法进行测定。选用ODS柱(5mm×245mm,5μm),甲醇-0.03mol/L盐酸溶液-水(55∶10∶5)为流动相,流量为1.0mL/min,检测波长为210nm。结果 10-羟基-2-癸烯酸在0.110～0.660μg之间线性关系良好,相关系数r=0.999 6,回收率为100.12%,RSD为1.36%。结论方法灵敏、简便、准确,可用于本制剂的测定和质量控制指标。     

淫羊藿总黄酮中乙酸乙酯、正丁醇溶剂残留量的测定

目的:建立气相色谱法测定淫羊藿总黄酮中有机溶剂乙酸乙酯和正丁醇残留量的方法。方法:采用毛细管气相色谱法,以SE-54毛细管柱为色谱柱,程序升温,氮气为载气,进样口温度为230℃,FID检测器温度为240℃。结果:乙酸乙酯和正丁醇残留量分别在1.606～16.06 mg/L(r=0.999 1)、1.622～16.22 mg/L(r=0.999 3)的浓度范围内呈良好的线性关系,三批样品中乙酸乙酯和正丁醇残留量均符合中国药典有机溶剂残留量规定。结论:毛细管气相色谱法可作为淫羊藿总黄酮提取物中有机溶剂残留量的测定方法。