旋覆代赭汤对RE模型大鼠食管黏膜Na+-K+-ATP酶及 Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响

目的: 观察旋覆代赭汤对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性的影响,探讨RE食管黏膜细胞能量代谢障碍与黏膜损伤的关系以及旋覆代赭汤治疗RE的作用机制。方法: 将96只雄性Wistar大鼠随机分成6组,即假手术组、模型组、旋覆代赭汤组高、中、低剂量组(24,12,6 g·kg^-1)及西药对照组(奥美拉唑10 mg·kg^-1+2 mg·kg^-1莫沙必利),每组16只。采用"食管-十二指肠端侧吻合术"制备胃及十二指肠液混合RE模型。从术后第3天开始,假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,药物治疗组分别给予旋覆代赭汤高、中、低剂量、西药(奥美拉唑10 mg·kg^-1+莫沙必利2 mg·kg^-1)灌胃,连续7天,记录大鼠体重变化及死亡情况,于第8天处死大鼠留取标本,观察食管下段黏膜大体及病理组织学变化;化学法检测食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性。结果: 与假手术组比,模型组大鼠体重明显减轻(P<0.05),食管黏膜肉眼及镜下病理改变明显,评分增高(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组及西药组比,旋覆代赭汤高、中剂量组大鼠死亡率明显降低(P<0.05):与模型组比,旋覆代赭汤高、中剂量组、西药组肉眼及病理评分显著降低(P<0.05);食管黏膜组织Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性明显提高(P<0.05)。结论: 旋覆代赭汤能明显提高RE大鼠食管黏膜细胞膜Na⁺-K⁺-ATP 酶及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性, 从而保持食管黏膜细胞完整性,减轻黏膜损伤。     

芍药苷对沙土鼠不全性脑缺血后能量代谢、NO和NOS的影响

目的:观察芍药苷抗不全性脑缺血后脑组织能量代谢、NO和NOS的关系。方法:采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血再灌注模型,于再灌注后48 h取前脑皮质测定Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶、Mg²⁺-ATP酶、乳酸、NO和NOS水平。结果:与假手术对照组比较,缺血再灌注后48 h脑组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶及Mg²⁺-ATP酶活性均降低,NO含量和NOS活性降低,而乳酸含量无明显变化。与模型对照组比较,芍药苷高、中、低剂量均可不同程度地防止缺血再灌注48 h后Na⁺-K⁺-ATP酶活性的降低,增加Ca²⁺-ATP酶和Mg²⁺-ATP酶活性,增加NO含量,提高NOS活性。结论:芍药苷通过调节脑内能量代谢和NO的生成而发挥抗脑缺血作用。     

玉郎伞黄酮对心肌缺血再灌注损伤心肌组织ATP酶和凋亡蛋白的影响

目的 :研究玉郎伞黄酮(FYLS)对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤(I/R)心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶和凋亡蛋白的影响。 方法 :离体大鼠心脏采用Langendorff法灌流,停灌30 min再灌30 min造成I/R模型。测定心肌组织Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶活性。同时观察药物对缺血再灌注后心肌组织病理形态、凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax表达的影响。 结果 :FYLS高剂量(8×10^-3g ·L^-1)可显著改善缺血-再灌注所致的心功能损伤,增加Na⁺-K⁺-ATP酶、Ca²⁺-ATP酶的活性;与模型组比较,FYLS高剂量组病理结果显示心肌组织受损程度明显减轻(P<0.05),且明显降低心肌Bax蛋白表达(P<0.01),对Bcl-2蛋白表达无明显影响,但能显著增加Bcl-2/Bax的比率(P<0.05)。 结论 :FYLS对I/R具有保护作用,其机制可能与减轻钙超载、下调Bax蛋白表达、增加Bcl-2/Bax的比率有关。     

丹参酮ⅡA对高血压大鼠左心室肌肾素-血管紧张素系统不同成分表达量的影响

目的：探讨丹参酮Ⅱ_A（Tan）对肾性高血压大鼠肥厚左心室肌中肾素-血管紧张素系统（RAS）不同成分表达的影响。方法：建立大鼠两肾一夹型肾血管性高血压模型。实验中,所有大鼠在手术前即被随机分为4组（n=15）：假手术（Sham）组、高血压模型（Model）组、丹参酮Ⅱ_A低、高剂量组。给药组于肾动脉缩窄术后第5周开始分别给予丹参酮Ⅱ_A 35,70 mg·kg^-1·d^-1。术后每周采用标准尾套法检测大鼠血压。给药8周后处死大鼠,分离左心室,用于检测左心室重/体重、心肌胶原含量、心肌RAS不同成分表达量,包括血管紧张素转换酶（ACE）、血管紧张素转换酶2（ACE2）、血管紧张素1型受体（AT₁R）和Mas受体的mRNA表达量,以及心肌血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血管紧张素（1-7）[Ang（1-7）]含量。结果：与假手术组相比,高血压模型组大鼠肥厚左心室中AngⅡ,Ang（1-7）含量（P<0.01）以及ACE,ACE2,AT₁R和Mas mRNA表达量均明显增多（P<0.01）。而应用丹参酮Ⅱ_A治疗则剂量依赖性抑制了肾性高血压大鼠左心室肥厚,减少了心肌AngⅡ含量,ACE,AT₁R mRNA表达量（P<0.01）,并且也进一步提高了心肌Ang（1-7）含量,ACE2和Mas mRNA表达量（P<0.01）。但是,丹参酮Ⅱ_A治疗并不影响高血压大鼠的血压。结论：丹参酮Ⅱ_A治疗可抑制肾性高血压大鼠左室肥厚的发生,其机制可能至少部分与调节心肌组织中肾素-血管紧张素系统（RAS）不同成分的表达相关。     

通络醒脑泡腾片对大鼠慢性脑缺血致学习记忆功能损伤的影响

目的：考察通络醒脑泡腾片对慢性脑缺血致学习记忆障碍模型大鼠学习记忆及海马Na⁺-K⁺-ATP酶表达的影响。 方法：采用双侧颈总动脉结扎法（2-VO）制作SD种大鼠慢性脑缺血致学习记忆障碍模型。将造模成功大鼠50只随机分为模型对照组、甲磺酸双氢麦角碱片组（0.7 mg·kg^-1）、通络醒脑泡腾片高、中、低剂量组（7.56,3.78,1.59 g·kg^-1）,另取10只假手术动物作为对照组。10 mL·kg^-1·d^-1连续灌胃90 d。给药第86天进行Morris水迷宫训练,第90天进行学习记忆能力测试;脑组织用10%甲醛固定,常规制片、染色后进行病理形态学观察;采用免疫组化和图像分析技术检测海马区Na⁺-K⁺-ATP酶的表达。 结果：通络醒脑泡腾片各给药组与模型组比较均能显著缩短训练第5天的逃避潜伏期,显著增加第一象限进入次数、经过逃逸平台次数和进入有效区域次数（P<0.05）;病理形态学检测表明,模型组病理积分极显著高于假手术组（P<0.01）,中剂量组较模型组病理积分显著降低（P<0.05）。免疫组织化学检测显示模型组Na⁺-K⁺-ATP酶平均吸光度较假手术组显著降低（P<0.05）,高、中剂量组的平均吸光度较模型组极显著增高（P<0.01）。 结论：通络醒脑泡腾片具有改善慢性脑缺血所致学习记忆障碍模型大鼠学习记忆能力、减轻海马组织病变,促进海马区Na⁺-K⁺-ATP酶表达的作用。     

银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:研究银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法:肾缺血45 min再灌注4 h建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,用银杏叶提取物预处理,测定肾皮质丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性,血浆肌酐和尿素氮的水平,并观察肾脏病理学改变。结果:缺血再灌注损伤后,肾皮质MDA含量升高,SOD,Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性下降;血浆BUN和Cr水平升高;肾组织出现明显的病理改变。银杏叶提取物预处理能降低肾皮质丙二醛含量;提高超氧化物歧化酶、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性;降低血浆肌酐和尿素氮水平;肾组织病理改变明显减轻。结论:银杏叶提取物对大鼠急性肾缺血再灌注损伤具有保护作用。     

复方葛根素对脑缺血损伤保护的实验研究

目的:探讨复方葛根素对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用大鼠大脑中动脉栓塞模型、沙土鼠全脑缺血再灌模型和小鼠脑缺血再灌3种动物模型,研究复方葛根素对脑缺血再灌注脑含水量和梗塞范围、脑卒中指数和脑组织中乳酸(LA)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化脂质(LPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GP_X)、Na⁺-K⁺-ATP酶的影响。结果:复方葛根素能明显降低大脑中动脉大鼠脑含水量,缩小脑梗死面积,改善全脑缺血再灌注沙土鼠运动能力,降低缺血再灌小鼠LA和LPO的含量,提高LDH,GP_X和Na⁺-K⁺-ATP酶的活性。结论:复方葛根素具有抗氧化和保护缺血脑组织的作用。     

参附注射液对戊巴比妥钠致心衰模型心肌细胞膜ATP酶和相关离子的影响

目的: 通过探讨参附注射液对新生大鼠心力衰竭心肌细胞Ca²⁺-ATP酶,Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶、Na⁺-K⁺-ATP酶活性及细胞内Na⁺,Mg²⁺,K⁺,Ca²⁺浓度的影响,揭示参附注射液强心作用的机制。 方法: 通过胰蛋白酶消化法和差速贴壁法获得心肌细胞,经0.8%戊巴比妥钠作用5min后,分别给予1.5, 3, 6 mg·L^-1(5,10,20 mL·L^-1)3个不同浓度的参附注射液,作用1 h,检测心肌细胞Ca²⁺-ATP酶,Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶,Na⁺-K⁺-ATP酶的活性和细胞内Na⁺,Mg²⁺,K⁺,Ca²⁺的浓度。 结果: 参附注射液能增加心衰模型心肌细胞的搏动强度,提高Ca²⁺-ATP酶和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活性,抑制Na⁺-K⁺-ATP酶的活性,降低细胞内K⁺,Ca²⁺的浓度,升高细胞内Na⁺,Mg²⁺的浓度。 结论: 参附注射液对戊巴比妥钠致心衰细胞有明显的保护作用,且作用的发挥与调节心肌细胞Ca²⁺-ATP酶,Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶,Na⁺-K⁺-ATP酶的活性和细胞内Na⁺,Mg²⁺,K⁺,Ca²⁺的浓度有关。     

芍药苷对LPS脑损伤模型小鼠氧化应激和能量代谢的影响

该文主要研究芍药苷(paeoniflorin,Pae)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性脑损伤的保护作用。实验中将雄性Bal b/c小鼠随机分为正常组、模型组、芍药苷低及高剂量组4组。腹腔注射生理盐水或Pae(10,30 mg·kg^-1)每日1次,连续6 d。第7天除正常对照组,其他组给药1 h后腹腔注射LPS(5 mg·kg^-1),建立急性内毒素炎症模型,6 h后制备脑匀浆进行相关指标测定。比色法检测脑组织匀浆中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢(H₂O₂)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na⁺-K⁺-ATP酶以及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力;Western blot法检测脑组织中HO-1,Nrf2蛋白表达水平。研究发现芍药苷可降低LPS脑损伤模型小鼠脂质过氧化物MDA水平,提高脑组织中SOD和GSH-Px活性,提高T-AOC,降低H₂O₂水平;提高SDH、Na⁺-K⁺-ATP酶以及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力。与对照组相比,LPS模型组小鼠脑组织核内Nrf2蛋白水平轻度上调,诱导HO-1蛋白表达增加,芍药苷可明显激活Nrf2的核转位,并且显著上调HO-1蛋白水平。结果提示芍药苷减轻LPS诱导的小鼠急性炎症脑损伤,可能与其抗氧化作用以及改善能量代谢有关。     

齐墩果酸对脾虚水湿内停模型小鼠异常水液代谢的影响

目的 研究齐墩果酸（OA）对脾虚水湿内停模型小鼠的水液代谢功能的影响及其作用机制。方法 将60只SPF级昆明种小鼠随机分为空白组（10只）和造模组（50只）,造模组采用“久居湿地+饮食失节”的方法建立脾虚水湿内停模型。模型复制成功后将造模组小鼠随机分为模型组、自然恢复组和OA低、中、高剂量组,共5组,每组10只。空白组、模型组、自然恢复组给予10 mL·kg^-1·d^-1生理盐水灌胃,OA低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg·kg^-1·d^-1 OA灌胃,持续给药7 d。造模和给药前后观察小鼠的一般体征,测定小鼠体质量,使用烘干法测定小鼠粪便含水率和组织含水量,称量法检测水负荷指数和脏器系数,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测尿D-木糖排泄量、血清胃泌素（GAS）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、白细胞介素-6（IL-6）、抗利尿激素（AVP）、肾髓水通道蛋白1（AQP1）及肝脏Na⁺-K⁺-ATP酶等指标,并将OA与检测指标中的ALB、IL-6、AQP1和Na⁺-K⁺-ATP酶进行分子对接。结果 与空白组比较,模型组小鼠毛发疏松、消瘦、倦怠懒惰、动作迟缓,体质量增长缓慢、自主活动次数减少、粪便含水率和组织含水量增加、水负荷小鼠体质量下降值减少、各脏器系数明显升高（P<0.05,P<0.01）;尿D-木糖排泄量明显减少,血清中GAS、TP、ALB和HDL-C的水平均明显降低,TC、LDL-C、AVP、IL-6的水平均明显升高,肝脏Na⁺-K⁺-ATP酶表达明显降低,肾髓AQP1表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,OA各剂量组的一般体征明显好转,体质量增长加快,自主活动次数增加,粪便含水率和组织含水量降低,水负荷小鼠体质量下降值增加、各脏器系数明显降低（P<0.05,P<0.01）;尿D-木糖排泄量增加,血清中GAS、TP、ALB和HDL-C的水平升高,TC、LDL-C、AVP、IL-6的水平降低,肝脏Na⁺-K⁺-ATP酶表达明显升高,肾髓AQP1表达明显降低（P<0.05,P<0.01）。OA各剂量组的各指标恢复效果均强于自然恢复组。分子对接结果也表明OA与ALB、IL-6、AQP1和Na⁺-K⁺-ATP酶具有较强的结合亲和力。结论 OA能改善脾虚水湿内停小鼠的水液代谢异常,为其潜在临床新用途提供科学依据。     

酸枣仁汤对老年慢性快动眼睡眠剥夺模型大鼠中枢下丘脑线粒体损伤及细胞凋亡的影响

目的 探讨酸枣仁汤对线粒体介导的神经细胞凋亡的影响。方法 将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、舒乐安定组（0.18 mg·kg^-1·d^-1），酸枣仁汤低、高剂量组（6.48，12.96 g·kg^-1·d^-1），除正常组外，其余各组均皮下注射D-半乳糖，于末次给药后进行多平台水环境睡眠剥夺，造模结束后各组开始灌胃给药，连续给药7 d。采用透射电镜观察中枢下丘脑线粒体形态，采用分光光度法检测检测中枢下丘脑中Na⁺-K⁺-三磷酸腺苷（ATP）酶，Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测中枢下丘脑细胞色素C（Cyt C），B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白表达水平的改变。结果 正常组线粒体未见明显病理改变，大小适中，形态多呈椭圆或梭形，嵴排列较整齐。与正常组比较，模型组线粒体形态异常，线粒体发生明显肿胀并且伴有空泡化，出现了“髓鞘样”，嵴发生断裂且数量减少；与模型组比较，舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组线粒体损伤减轻，空泡化现象减少，部分嵴断裂，并未出现明显肿胀，其中酸枣仁汤高剂量组改善较为明显。与正常组比较，模型组Na⁺-K⁺-ATP，Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性显著降低（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P<0.01），Cyt C，Bax，Caspase-3蛋白表达水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组Na⁺-K⁺-ATP，Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性均显著升高（P<0.01），舒乐安定组、酸枣仁汤高剂量组Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P<0.01），Cyt C，Bax，Caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01），酸枣仁汤低剂量组Na⁺-K⁺-ATP酶活性显著升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05），Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论 酸枣仁汤可以改善下丘脑神经细胞线粒体功能，抑制神经细胞凋亡。     

银杏叶提取物对运动大鼠肌膜Na+,K+-ATP酶活性的影响

 目的为研究银杏叶提取物(EGb761)对大鼠大强度跑台运动及其肌膜Na⁺,K⁺-ATP酶活性的影响。方法采用大强度上坡跑大鼠运动模型,测定运动力竭时间、Na⁺,K⁺-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、谷胱甘肽含量、总抗氧化能力、丙二醛(MDA)水平。结果EGb761可以提高大鼠大强度运动至力竭的时间,并使单次定量运动后即刻白肌肌膜总抗氧化能力(TAOC)和谷胱甘肽含量(GSH)升高、MDA水平下降。结论EGb761可能通过直接和间接途径清除大强度常规训练时产生的自由基,保护肌膜Na⁺,K⁺-ATP酶,提高训练效果,延长运动时间;明显提高单次定量运动后即刻GSH,TAOC,降低肌膜MDA水平。     

壮腰健肾丸对肾虚多尿大鼠膀胱组织中P2X1与P2X3mRNA表达的影响

为了探讨壮腰健肾丸的缩尿作用及机制,该实验采用皮下注射150 mg·kg^-1剂量的D-半乳糖诱导亚急性衰老模型,并将其分为模型组、缩泉丸组(1.17 g·kg^-1·d^-1)、壮腰健肾丸高、中、低剂量组(2.39,1.20,0.60 g·kg^-1·d^-1),另取正常动物设为空白组,连续给药8周。选用代谢笼法测量大鼠24 h尿量及水负荷5 h尿量;采用全自动生化仪检测尿中Na⁺,Cl^-,K⁺浓度;应用ELISA法测定血清中醛固酮(aldosterone,ALD)、抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)的含量;采用RT-PCR检测大鼠膀胱组织中P2X₁与P2X₃ mRNA表达量的变化情况。结果显示壮腰健肾丸高、中剂量组对肾虚多尿大鼠24 h尿量及水负荷后5 h内尿量均显著下调(P<0.05,P<0.01);对尿中Na⁺和Cl^-浓度均显著降低(P<0.01);血浆中ALD,ADH含量显著性升高(P<0.05,P<0.01);膀胱组织中P2X₁与P2X₃ mRNA表达量显著下调(P<0.01);壮腰健肾丸低剂量组尿中Na⁺和Cl^-浓度均显著降低(P<0.01)。结果说明壮腰健肾丸可能是通过下调肾虚多尿大鼠膀胱组织中P2X₁与P2X₃ mRNA表达量从而发挥缩尿的作用。     

肝豆扶木汤通过JNK信号通路对Wilson病肝纤维化小鼠的干预作用

目的 研究肝豆扶木汤（GDFMD）对Wilson病肝纤维化小鼠的肝脏保护作用及其可能作用机制。方法 将50只纯合型TX^J小鼠,随机分为5组,每组各10只,另外选取10只野生型小鼠作为正常组。GDFMD高、中、低剂量组分别予以13.92、6.96、3.48 g·kg^-1,青霉胺组0.1 g·kg^-1,模型组及正常组使用等量0.9%氯化钠溶液灌胃,每天1次,连续给药4周。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量变化。采用相应试剂盒检测肝组织线粒体腺嘌呤核苷三磷酸（ATP）含量,Na⁺-K⁺-ATP酶活性。苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察小鼠肝组织病理形态学改变及透射电镜观察肝组织超微结构变化。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路中JNK及其磷酸化蛋白,胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达情况。结果 与正常组比较,模型组MDA含量明显升高,SOD活性明显下降（P<0.05）;与模型组比较,GDFMD高、中、低剂量组及青霉胺组可显著升高SOD活性（P<0.01）,明显降低MDA含量（P<0.05,P<0.01）。与正常组比较,模型组ATP含量和Na⁺-K⁺-ATP酶活力明显降低（P<0.05）;与模型组比较,GDFMD中、高剂量组及青霉胺组可明显提高ATP含量和Na⁺-K⁺-ATP酶活力（P<0.05,P<0.01）。肝组织病理形态结果表明,模型组可见大量肝细胞变性坏死,炎性细胞浸润,肝小叶结构不清,胶原纤维沉积;透射电镜显示模型组肝组织线粒体数量明显减少,线粒体局部损害显著,可见线粒体嵴断裂或者消失。用药干预后可见肝组织病理形态及线粒体结构有不同程度的恢复。Western blot结果提示,与正常组比较,模型组肝组织p-JNK、p-JNK/JNK、Caspase-3、Bax表达水平明显上调,Bcl-2表达明显下调（P<0.05）;GDFMD中、高剂量组及青霉胺组p-JNK、p-JNK/JNK、Caspase-3、Bax表达水平显著下调,Bcl-2表达显著上调（P<0.01）。结论 GDFMD可以减轻TX^J肝纤维化小鼠氧化应激损伤,恢复线粒体功能,其机制可能与调控JNK信号通路及其下游因子表达,抑制细胞凋亡有关。     

丹酚酸B对脑缺血小鼠脑能荷和三磷酸腺苷酶活性的影响

目的：从脑缺血小鼠脑组织高能磷酸含量和三磷酸腺苷(ATP)酶活性探讨丹酚酸B对脑水肿的影响。方法：将NIH小鼠分为假手术组、缺血组、丹酚酸B治疗组和尼莫地平对照组,复制脑缺血模型。丹酚酸B组尾静脉注射丹酚酸B(22.5 mg·kg^-1)；尼莫地平组尾静脉注射尼莫地平(0.03 mg·kg^-1)；假手术组和缺血组尾静脉注射等量的生理盐水,30 min后阻断双侧颈总动脉,观察缺血30 min脑组织ATP、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)和磷酸肌酸(PCr)的含量并计算能荷(EC)值；同时测定Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性以及脑含水量。结果：与缺血组比较,丹酚酸B组脑组织ATP,ADP,PCr含量和能荷值显著升高(P<0.01)；Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性显著增强(P<0.01)；而脑含水量则明显降低(P<0.05)。结论：丹酚酸B减轻脑缺血小鼠脑含水量的作用机制,可能与其提高高能磷酸含量和增强ATP酶活性有关。     

基于cAMP/PKA/PGC1α信号通路探讨恒古骨伤愈合剂改善肌筋膜疼痛综合征大鼠能量代谢的作用机制

目的 采用系统生物学预测结合整体动物实验验证的研究方法，从能量代谢角度揭示恒古骨伤愈合剂（OK）干预大鼠肌筋膜疼痛综合征（MPS）的作用机制。方法 首先通过系统生物学方法预测OK-MPS关键靶标及其相关的分子机制，筛选核心网络靶标。其次对网络预测靶标进行动物实验验证，具体为60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、OK低、中、高剂量组（0.66、1.31、2.63 mL·kg^-1），塞来昔布组（21 mg·kg^-1），连续8周通过打击结合离心运动法建立MPS模型，除造模2 d外均进行OK或塞来昔布干预，模型建立完成后连续给药2周。苏木素-伊红染色观察激痛点肌肉组织病理学改变情况；酶联免疫吸附测定法检测血清和/或激痛点肌肉组织中Na⁺-K⁺-ATP酶（Na⁺-K⁺-ATPase）、Ca²⁺泵（Ca²⁺ATPase）、Ca²⁺、乳酸脱氢酶（LDH）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A（PKA）的含量/活性；免疫组化法检测MPS大鼠激痛点中PKA、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC1α）蛋白表达水平；蛋白免疫印迹法检测MPS大鼠激痛点中PKA、PGC1α和线粒体转录因子A（TFAM）的蛋白表达。结果 网络预测结果提示OK作用于MPS发生、发展相关的“能量代谢”关键靶标，可能参与cAMP/PKA/PGC1α信号通路的激活。实验验证结果显示，与正常组比较，MPS大鼠激痛点肌肉组织出现挛缩结节、肌纤维排列紊乱，血清和/或激痛点肌肉组织中Na⁺-K⁺-ATPase、Ca²⁺ATPase、SOD活性、Ca²⁺、GSH含量均显著降低（P<0.01），LDH活性及MDA含量均显著升高（P<0.01），cAMP、PKA、PGC1α、TFAM蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）；与模型组比较，OK可改善MPS大鼠激痛点肌纤维组织病理形态改变，且OK干预后，MPS大鼠血清和/或激痛点肌肉组织中Na⁺-K⁺-ATPase、Ca²⁺ATPase、SOD活性、Ca²⁺、GSH含量明显升高（P<0.05，P<0.01），LDH活性和MDA含量明显降低（P<0.05，P<0.01），cAMP、PKA、PGC1α、TFAM蛋白表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论 OK干预大鼠MPS机制可能与其有效激活cAMP/PKA/PGC1α通路，促进肌细胞线粒体能量代谢和激痛点肌纤维损伤修复有关。     

大豆苷元对压力负荷性心肌肥厚大鼠心室重构的影响

目的：研究大豆苷元(daidzein,DD)对压力负荷性心肌肥厚大鼠心室重构的保护作用及其机制。方法：采用腹主动脉缩窄法制备大鼠心肌肥厚模型。分假手术组、模型组、DD(30,60,120 mg·kg_-1)治疗组；4周后处死大鼠,测量大鼠全心质量指数(HW/BW)和左室质量指数(LVW/BW即LVI),测定左室心肌纤维直径(MD),检测左室心肌组织羟脯氨酸(Hyp)、一氧化氮(NO)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量和一氧化氮合酶(NOS),Na₊-K₊-ATPase,Ca₂₊-ATPase活性；检测血浆AngⅡ含量。结果：与模型组比较DD能显著提高心肌组织NO含量和结构型NOS(cNOS),Na₊-K₊-ATPase,Ca₂₊-ATPase活性；降低心肌组织诱生型NOS(iNOS)活性；抑制血浆及心肌组织AngⅡ和胶原的产生；减轻心脏质量参数(HW/BW,LVI)及MD。结论：DD对压力负荷性心肌肥厚大鼠心室重构具有保护作用；其机制与升高NO含量、抑制AngⅡ产生有关。     

醋制降低甘遂乙酸乙酯部位致小鼠肝脏氧化损伤机制研究

目的: 研究甘遂醋制降低乙酸乙酯部位对小鼠肝脏损伤的作用机制. 方法: 以ICR正常小鼠为研究对象,灌胃给予甘遂与醋甘遂乙酸乙酯部位,取小鼠血清和肝匀浆测定谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD),Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量.取肝脏组织进行HE染色,光镜观察其组织形态学改变. 结果: 病理切片结果表明,与空白对照组比较,甘遂各剂量组肝组织损伤显著增高(P<0.01).与甘遂组比较,醋甘遂各剂量组肝组织损伤显著降低(P<0.01).与对照组相比,甘遂高、中、低剂量组小鼠血清中和肝组织中AST,ALT,LDH酶活力均明显增高 (P<0.01, P<0.001),小鼠血清中和肝组织中SOD活力和GSH含量显著降低(P<0.01,P<0.001),MDA含量显著升高(P<0.001),肝组织中Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力(P<0.01)显著降低,且呈一定的剂量相关性.与甘遂各剂量组相比,醋甘遂高、中、低剂量组明显降低小鼠肝组织中AST,ALT,LDH酶活力(P<0.05, P<0.001),显著提高小鼠血清中和肝组织中SOD活力(P<0.001)和GSH含量,显著降低MDA含量(P<0.01),显著增加肝组织中Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活力,且呈一定的剂量相关性. 结论: 醋制能明显降低甘遂对肝脏的氧化损伤,其机制可能为通过降低甘遂对肝组织细胞膜通透性的影响及减轻氧化损伤而实现.     

参芦、根总皂甙对小鼠不同脏器组织ATP酶活性的影响

参芦和根中的总皂甙对正常小鼠心、肝、脑、肾和脾组织匀浆中的Mg²⁺-ATP酶均有抑制作用,对Na⁺-K⁺-ATP酶却有激活作用,尤以参芦总皂甙的作用更为显著。证明它们对不同组织的能量代谢均有一定的影响。     

基于“肺主行水”理论探究小青龙汤调节肺水转运蛋白的作用机制

目的 观察小青龙汤及其方元对于肺水转运蛋白的调节作用，初步阐释“肺主行水”的生物学内涵，并从该角度探索其作用机制。方法 根据经方的组方规律，将小青龙汤（11.22 g·kg^-1）拆分为桂枝甘草（2.70 g·kg^-1）、芍药甘草（2.70 g·kg^-1）、姜辛味（3.90 g·kg^-1）、半夏麻黄（3.27 g·kg^-1） 4个方元。通过“形寒+饮冷+冷水浴”法建立寒饮蕴肺证大鼠病理模型，给予小青龙汤及其方元进行干预。肺功能分析系统测定大鼠用力肺活量（FVC）、功能残气量（FRC）、平均呼气中期流量（MMEF）、吸气时间（tI）和呼气时间（tE）等参数；苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肺组织病理形态学改变；免疫组化法（IHC）检测大鼠肺组织中水通道蛋白（AQP）1、AQP5、上皮细胞钠通道α亚单位（α-ENaC）和钠钾泵（Na⁺-K⁺-ATPase）表达；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肺组织中环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A（PKA）和cAMP反应元件结合蛋白（CREB）mRNA分子表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织中cAMP、PKA、CREB和磷酸化（p）-CREB蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠FVC、FRC和MMEF功能显著下降（P<0.01），tI与tE时间明显延长（P<0.05，P<0.01）；肺组织中TNF-α含量显著升高（P<0.01）；肺组织中cAMP、PKA、CREB mRNA及蛋白表达显著降低（P<0.01）；肺组织中AQP5及α-ENaC表达明显减少；大鼠肺泡腔内充满水肿液，周围组织充血，炎性细胞浸润，支气管黏膜上皮黏连。与模型组比较，小青龙汤及其方元组可以明显增强模型大鼠FVC、FRC与MMEF功能（P<0.05，P<0.01），部分方元组可缩短tI与tE时间（P<0.05，P<0.01）；小青龙汤组、桂枝甘草组及半夏麻黄组肺组织TNF-α的含量显著下调（P<0.01）；小青龙汤组cAMP、PKA和CREB的mRNA的表达显著上调（P<0.01），桂枝甘草组、姜辛味组及半夏麻黄组显著上调cAMP和PKA的mRNA表达（P<0.01）；小青龙汤组、桂枝甘草组、姜辛味组及半夏麻黄组显著上调cAMP、PKA和CREB的蛋白表达（P<0.01），芍药甘草组明显上调CREB蛋白的表达（P<0.05）；小青龙汤可以上调AQP5和α-ENaC的阳性表达，桂枝甘草组可以上调α-ENaC的阳性表达；小青龙汤及其方元各组可以减少模型大鼠肺组织水肿，炎性细胞浸润明显减少，支气管黏膜黏连程度减轻。结论 小青龙汤及其方元可以通过提高肺水转运相关蛋白AQP1、AQP5和α-ENaC的表达，减轻寒饮蕴肺证大鼠病理模型中肺水肿，抑制肺部炎症状态，改善大鼠肺功能，从而恢复肺脏的生理功能，cAMP/PKA信号通路可能参与了该过程，Na⁺-K⁺-ATPase在肺水转运调节中可能发挥了辅助作用，从肺水转运相关蛋白角度初步阐释“肺主行水”的内涵具有一定的客观依据。