慢病毒介导环氧化酶-2的沉默对食管鳞癌细胞增殖的抑制效应

目的制备环氧化酶-2(COX-2)的RNA干扰(RNAi)重组慢病毒(lentivirus),观察COX-2表达沉默对人食管鳞癌(ESCC)细胞增殖的影响。方法将目的基因短发卡RNA(sh RNA)载体与包装载体共转染293T细胞,收集上清液后浓缩纯化、滴度测定、感染ESCC细胞;应用荧光显微镜观察包装效率及感染效率,实时荧光定量PCR及Western blot评价COX-2基因沉默效应,MTS法检测细胞的增殖。结果成功制备了沉默COX-2的重组慢病毒,该病毒感染ESCC细胞后,COX-2 m RNA和蛋白的表达量分别降低了80%和50%左右,细胞的增殖明显减慢。结论慢病毒介导的sh RNA干扰能有效沉默ESCC细胞COX-2基因,COX-2表达沉默抑制ESCC细胞增殖。     

环氧合酶-2与Barrett's 食管和食管腺癌的关系

Barrett's食管(BE)被认为是食管腺癌(EAC)的癌前病变,环氧合酶-2(COX-2)在BE和EAC中表达增加,可能是BE向EAC转化的早期分子事件.COX-2基因多态性研究显示COX-2-1195G→A基因型人群患EAC等消化系统肿瘤的风险增加.COX-2可能通过抑制细胞凋亡和刺激细胞增殖、促进肿瘤血管、淋巴管生成、影响细胞周期进程等多种机制促进EAC的发生、发展.而COX-2抑制剂对BE和EAC的防治作用尚无一致结论,COX-2相关的基因治疗可能有较好的前景.     

COX-2与肿瘤关系的进展

环氧化酶又称为前列腺素内过氧化合成酶，前列腺素H合成酶，是催化花生四烯酸转变为前列腺素的限速酶。哺乳动物的环氧化酶至少有两种形式：COX-1和COX-2，它们都是完整的膜结合蛋白，但在细胞内部的定位不同：COX-1位于内质网．面COX-2位于核膜和内质网（主要为核膜）。功能上也存在差异，COX-1属于结构型基因，在多种正常组织和细胞中表达，维持细胞的正常生理功能；     

环氧化酶-2及其抑制剂与舌癌细胞凋亡的研究进展

近年的研究表明舌癌的发生发展与环氧化酶-2(COX-2)的表达密切相关,而COX-2及其抑制剂可通过影响细胞凋亡、增殖等途径参与癌变过程。深入探讨COX-2及其抑制剂在舌癌细胞凋亡中的作用,不仅可为舌癌的预防提供新途径,对其早期诊断和治疗亦具有重要意义。     

RNA干扰环氧化酶-2抑制人表皮样喉癌细胞系增殖和侵袭的研究

目的构建沉默环氧化酶-2(COX-2)基因重组慢病毒,观察其体外侵袭的抑制作用,从而探讨干扰COX-2抑制喉癌细胞增殖的作用机理,为喉癌的治疗提供新的思路。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2基因在人表皮样喉癌细胞(Hep-2)中的表达情况。利用上海吉凯公司RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体系统,构建针对COX-2基因慢病毒RNAi表达载体。转染Hep-2细胞,干扰COX-2基因的表达,实时定量PCR检测干扰前后基因表达变化。利用生长曲线测定干扰载体转染前后细胞生长速度变化。流式细胞仪检测细胞的生长周期。Boyden侵袭小室法测定体外侵袭力。结果成功构建了COX-2慢病毒RNAi表达载体,并建立了干扰COX-2基因的Hep-2细胞系。实时定量PCR检测COX-2基因在Hep-2细胞系中过表达被显著抑制。生长曲线测定,COX-2基因干扰后细胞增殖明显变慢。流式细胞仪检测细胞的生长周期可见干扰组诱导Hep-2细胞凋亡,转染G0～G1期细胞数量明显上升,S期细胞减少,表明siRNA干扰Hep-2细胞后,细胞由G0～G1期进入到S期受到阻滞,细胞增殖速度下降。体外侵袭实验中,Hep-2-AS侵袭细胞数(31.0±1.8)显著低于Hep-2细胞(104.0±2.6)及Hep-2-P细胞(99.0±2.7),差异有统计学意义(P<0.05)。结论喉癌中过表达的COX-2基因被干扰后表达明显降低并显著抑制细胞的生长速度和侵袭能力。同时验证了COX-2基因RNA干扰在进行抗肿瘤的治疗中潜在的应用前景。     

环氧化酶-2和胰腺-十二指肠同源盒-1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测环氧化酶-2(COX-2)和胰腺-十二指肠同源盒-1(PDX-1)在非小细胞肺癌中的表达,探讨二者与非小细胞肺癌临床病理特征的关系,以期为临床工作提供理论支持。方法应用免疫组织化学技术检测88例非小细胞肺癌及88例正常肺组织中COX-2和PDX-1的表达,探讨COX-2和PDX-1与肿瘤分化程度及淋巴结转移的关系。结果非小细胞肺癌中COX-2和PDX-1表达的阳性率明显高于正常肺组织,COX-2和PDX-1的表达与非小细胞肺癌的分化程度及有无淋巴结转移密切相关,非小细胞肺癌中COX-2和PDX-1的表达呈正相关性。结论非小细胞肺癌中COX-2和PDX-1高表达,二者共同促进肿瘤的发生发展,联合检测COX-2和PDX-1可能与患者的预后有关。     

环氧合酶-2在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及其与细胞增殖和预后的关系

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)中的表达及其与细胞增殖和预后的关系。方法:采用免疫组化SP法检测43例B-NHL和10例良性淋巴结病变组织中COX-2和增殖细胞核抗原的表达。结果:COX-2在B-NHL中的阳性表达率为56%(24/43),明显高于对照组,差异具有显著性(χ2=5.119,P=0.024)。COX-2的表达与B-NHL的临床分期和组织病理学等级具有相关性(χ2=4.800,P=0.028和χ2=9.952,P=0.002)。43例B-NHL的平均增殖指数(MPI)为(41.48±5.10)%;COX-2阳性表达组的MPI[(43.35±4.80)%]显著高于阴性表达组[(37.50±2.90)%],差异具有显著性(t=4.68,P<0.01)。COX-2阴性表达患者其5年生存率要高于COX-2阳性表达患者(χ2=6.056,P=0.014)。Cox模型显示COX-2是一个独立的不良预后指标(P<0.01)。结论:B-NHL中COX-2表达上调。COX-2蛋白可以通过促进B淋巴瘤细胞的增殖而在B-NHL的发生和发展中起着重要作用,并且是B-NHL的一个有用预后指标。     

胃肠疾病中的环氧合酶研究进展

环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是调节前列腺素释放的关键酶,目前已确定和发现的环氧合酶亚型主要是结构型环氧合酶-1(COX-1)与诱导型环氧合酶-2(COX-2).近年来,对COX-1、COX-2的研究方兴未艾.随着认识的深入,对COX-1、COX-2的研究已不仅仅局限在催化产生保护性前列腺素上,其在胃肠疾病中的作用也日益受到重视.该文就COX在胃肠疾病中的不同效应及中医药在其中的预作用进行综述.     

膀胱移行细胞癌组织中MMP-2和COX-2蛋白表达及相互关系

[目的]探讨膀胱移行细胞癌组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2) 和环氧合酶-2(COX-2)的表达和相互关系.[方法]免疫组织化学SABC法检测57例膀胱移行细胞癌组织及12例正常膀胱组织MMP-2及COX-2的蛋白表达情况.[结果]正常膀胱组织中均未见MMP-2和COX-2蛋白表达,膀胱移行细胞癌组织中MMP-2和COX-2蛋白的阳性表达率分别为49.12%和63.16%.两者的阳性表达与肿瘤的病理分级、临床分期显著相关.MMP-2的表达与COX-2的表达密切相关.[结论]MMP-2 、COX-2在膀胱移行细胞癌发展中可能起着重要的作用.并且它们之间可能具有协同作用.     

紫外线照射对皮肤细胞因子分泌功能的影响

目的观察紫外线( Ultraviolet, UV)对体外培养的角质形成细胞株( HaCaT细胞)细胞因子分泌的影响. 方法 UV照射佛泊脂和脂多糖( PMA/LPS)刺激的 HaCaT细胞,用 ELISA法检测细胞培养上清液中细胞因子 IL 1α ,IL 2,IL 6和 IL 8的含量. 结果 正常 HaCaT细胞有 IL 1α ,IL 2,IL 6和 IL 8的自发性分泌. PMA和 LPS刺激 HaCaT细胞,其 IL 1α分泌量下降( P< 0.05), IL 6和 IL 8分泌量明显增加( P< 0.01).正常 HaCaT细胞经 UV照射, IL 1α ,IL 2,IL 6的分泌无明显变化( P >0.05), IL 8分泌量升高( P< 0.05). PMA和 LPS刺激的 HaCaT细胞经 UV照射,其 IL 1α ,IL 6和 IL 8的分泌量明显增加( P< 0.01). 结论 UV对不同状态下 HaCaT细胞的作用是不同的.     

COX-2和HER-2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究COX-2和HER-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测了68例非小细胞肺癌组织中COX-2和HER-2的表达水平,分析两者与临床病理参数之间的关系以及分析两者之间的相互关系。结果非小细胞肺癌中COX-2阳性表达率为54/68(79.41%),COX-2的高表达与病理类型及TNM分期相关(P<0.05);HER-2阳性表达率为26/68(38.24%),HER-2的表达与年龄相关(P<0.05)。HER-2与COX-2的表达强度之间呈显著正相关(r=0.2486,P=0.041)。HER-2阳性/COX-2高表达的NSCLC临床分期晚、淋巴结转移率高。结论COX-2在NSCLC中高水平表达并与HER-2密切相关,检测COX-2与HER-2的表达对NSCLC预后的判断可能具有重要价值。     

人前列腺癌细胞转移潜能与环氧化酶-2的表达及患者预后的相关性

目的:探讨人前列腺癌细胞转移潜能与其环氧化酶-2(COX-2)表达之间的关系,及环氧化酶-2与前列腺癌患者预后的关系。方法:用运免疫组化及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测两种不同转移潜能人前列腺癌细胞PC3及PC3M中COX-2mRNA及其蛋白的表达以及在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激下两者的表达是否有所变化。结果:PC3细胞在无TNF-α刺激时,检测不到COX-2mRNA的表达,其蛋白表达也为阴性,而在TNF-α刺激4h后,COX-2mRNA及其蛋白的表达均为阳性。而在PC3M细胞中无TNF-α刺激时,COX-2mRNA及其蛋白的表达已为阳性,在TNF-α刺激4h后,COX-2mRNA及其蛋白的表达均有增强。结论:COX-2可能在前列腺癌的发生发展中起着重要的作用,抑制COX-2的表达,或许能够降低前列腺癌的恶性程度甚至能够阻止其发生。这对前列腺癌患者生存期内创造良好的生活质量及前列腺癌的防治提供有力的理论依据。     

构建人 COX-2反义核酸真核表达载体对膀胱癌 T24细胞株COX-2表达的作用

【目的】构建人环氧化酶-2（COX-2）反义核酸真核表达载体,探讨其抑制膀胱癌 T24细胞COX-2表达的作用。【方法】经PCR法从含人COX-2基因的质粒中扩增其cDNA ,通过限制性内切酶克隆于 T载体EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ位点之间,并将其反向插入pcDNA3．1中获得重组质粒。应用脂质体介导将其导入T24膀胱癌细胞中,经过G418筛后进行流式细胞术、间接免疫荧光染色和RT-PCR鉴定。【结果】核酸测序和限制性内切酶消化证实重组COX-2反义核酸真核表达质粒 pcDNA3．1/COX-2 as是正确的,经鉴定转导 pcD-NA3/COX-2 as的T24细胞中环氧化酶-2的表达明显抑制。【结论】成功构建人COX-2反义核酸真核表达载体并获得环氧化酶-2基因表达持续下调的膀胱癌细胞株T24-AS。     

环氧化酶-2在胃溃疡和胃癌的表达及与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)在幽门螺杆菌(Hp)感染与非感染性胃溃疡及胃癌的表达。方法选择绵阳市404医院消化内科2011年2月-2012年2月的门诊及住院患者,用免疫组织化学方法检测196例经胃镜和组织病理学检查明确为胃溃疡(病理分型:肠上皮化生、异型增生)、胃癌及正常胃黏膜者的胃黏膜COX-2蛋白的表达,比较各病理分类之间及Hp感染与非感染之间COX-2蛋白表达的差异。结果胃溃疡(肠上皮化生、异型增生)、胃癌组的炎症细胞、腺上皮细胞、癌细胞及极少量正常黏膜上皮细胞中有COX-2表达。从正常胃黏膜-胃溃疡(肠上皮化生、异型增生)-胃癌COX-2的阳性表达有逐渐增强的趋势(P<0.05)。Hp阳性组COX-2的阳性表达高于Hp阴性组(P<0.05),胃癌组COX-2的阳性表达高于胃溃疡组(P<0.05)。结论 COX-2在胃癌的表达高于胃溃疡。Hp感染可诱导COX-2过度表达。     

siRNA沉默胰腺癌BXPC-3细胞中Her-2/neu基因对COX-2表达水平及细胞增殖、凋亡、侵袭力的影响

目的分析胰腺癌BXPC-3细胞中原癌基因人表皮生长因子受体-2(Her-2/neu)基因siRNA沉默对环氧合酶-2(COX-2)表达水平及其对细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法通过Western blot法与实时荧光定量PCR法对正常胰腺细胞株和胰腺癌BXPC-3细胞中的COX-2、Her-2/neu蛋白及其mRNA表达进行检测。建立Her-2/neu基因siRNA慢病毒表达载体并对BXPC-3细胞进行转染,其中转染Her-2/neu siRNA慢病毒载体为观察组,转染NC-GFP-LV为阴性对照组,未转染的细胞为空白对照组。分别采用CCK-8法、流式细胞分析仪和细胞实验技术(Transwell实验)分析Her-2/neu基因siRNA沉默对细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。结果 COX-2、Her-2/neu蛋白及其mRNA在胰腺癌BXPC-3细胞中的表达水平明显高于正常胰腺HPDE6C7细胞的表达(P0.01)。观察组COX-2、Her-2/neu蛋白及其mRNA表达水平明显下调,较阴性对照组与空白对照组表达水平均明显降低(P0.01),而阴性对照组与空白对照组表达水平的比较,并无显著差异(P0.05)。Her-2/neu基因siRNA沉默可明显减弱细胞增殖和侵袭力,增加细胞凋亡率。结论 COX-2、Her-2/neu蛋白及其mRNA在胰腺癌BXPC-3细胞中均呈现高表达,且Her-2/neu基因siRNA沉默可明显阻滞细胞增殖及侵袭,导致细胞凋亡。     

环氧化酶-2的研究进展

环氧化酶（cyclooxygenase,COX） 是前列腺素（PGs）合成过程中一种重要的限速酶,可将花生四烯酸代谢成各种PGs产物,从而维持机体各种病理生理过程.机体内存在二种类型的COX,即COX-1和COX-2.COX-1主要分布于胃、肾、血小板和内皮细胞,参与维持正常生理功能的作用.COX-2是不同于COX-1基因结构的一种诱导型酶,其表达受细胞内外各种剌激因素所诱导.COX-2与炎症、细胞有丝分裂和特异性信号转导有关。     

子宫内膜细胞的原代培养及COX-2的表达

目的对异位子宫内膜细胞进行培养检测环氧化酶-2（COX-2）的表达，探讨其在子宫内膜异位症（EM）发病机制中的作用。方法培养12例异位子宫内膜细胞和15例正常子宫内膜细胞并通过鉴定，用免疫荧光检测COX-2在异位子宫内膜细胞和正常子宫内膜细胞的表达。结果体外培养的异位子宫内膜细胞和正常子宫内膜细胞在形态上无明显的区别，相比正常子宫内膜细胞，COX-2在异位子宫内膜细胞中的表达是明显增高的。结论对COX-2的深入研究以期为EM的诊治提供实验基础和新的方法。     

生存素基因在子宫内膜异位症中的表达及促性腺激素释放激素激动剂、环氧合酶-2抑制剂对其表达的影响

目的 探讨生存素(survivin)基因在子宫内膜异位症(FMs)发病机制中的作用.方法 检测生存素在正常与异位子宫内膜组织中的表达;观察促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)、环氧合酶-2(COX-2)抑制剂对体外培养的EMs异位内膜细胞及正常子宫内膜细胞中survivin基因mRNA表达的调节作用及对体外培养的异位内膜凋亡率的影响.结果 ①EMs异位组、在位组survivin mRNA的表达明显强于对照组(均P<0.05),且无周期性变化.②GnRHa可呈浓度依赖性下调体外培养的异位内膜细胞及正常子宫内膜细胞中survivin mRNA的表达,COX-2抑制剂亦呈浓度依赖性下调体外培养的异位内膜细胞及正常子宫内膜细胞中survivln mRNA的表达,GnRHa100μL加COX-2抑制荆40 μmol/L可以促进体外培养的异位内膜细胞凋亡(P<0.05),二者无明显协同作用(P>0.05)结论 ①异位内膜细胞高表达survivin,对凋亡的敏感性低,使异位灶存活并发展;②GnRHa、COX-2抑制剂可通过抑制survivin的表达来促进体外培养的EMs异位内膜细胞的凋亡.     

人前列腺癌细胞转移潜能与环氧化酶-2的表达及患者预后的相关性

目的：探讨人前列腺癌细胞转移潜能与其环氧化酶-2(COX-2)表达之间的关系，及环氧化酶-2与前列腺癌患者预后的关系。方法：用运免疫组化及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测两种不同转移潜能人前列腺癌细胞PC3及PC3M中COX-2 mRNA及其蛋白的表达以及在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激下两者的表达是否有所变化。结果：PC3细胞在无TNF-α刺激时，检测不到COX-2 mRNA的表达，其蛋白表达也为阴性，而在TNF-α刺激4h后，COX-2 mRNA及其蛋白的表达均为阳性。而在PC3M细胞中无TNF-α刺激时，COX-2 mRNA及其蛋白的表达已为阳性，在TNF-α刺激4h后，COX-2 mRNA及其蛋白的表达均有增强。结论：COX-2可能在前列腺癌的发生发展中起着重要的作用，抑制COX-2的表达；或许能够降低前列腺癌的恶性程度甚至能够阻止其发生。这对前列腺癌患者生存期内创造良好的生活质量及前列腺癌的防治提供有力的理论依据。     

环氧化酶-2在骨巨细胞瘤中的表达及其临床意义

环氧化酶（COX）是花生四烯酸转化为前列腺素和血栓烷的关键酶，其有环氧化酶-1（COX-1）和环氧化酶-2（COX-2）两种异构酶。近年来研究表明，COX-2不仅在炎症过程中发挥重要作用，而且对细胞生长、血管生成等也产生影响，同时COX-2在多种恶性肿瘤中表达上调．参与肿瘤的发生、发展。本研究应用免疫组化的方法检测54例骨巨细胞瘤组织中COX-2的表达情况，并研究表达结果与骨巨细胞瘤的肿瘤分期和肿瘤复发、转移的关系，从而了解COX-2与骨巨细胞瘤的发生、发展及预后的相关性。[第一段]