一起空肠弯曲菌食源性疾病突发事件的流行病学和病原学研究

对空肠弯曲菌所致的食源性疾病事件进行病原学研究及溯源分析,为突发食源性疾病事件的应急处置提供依据.方法 采用现场流行病学调查方法对疫情实施调查,可疑样本先用多重巢式PCR快速筛查22种常见胃肠道病原,锁定目标病原后,将病原菌分离鉴定与实时荧光定量PCR同步检测.对检出的空肠弯曲菌进行PFGE分子分型,用BioNumeries软件进行同源性分析.结果 共有病例91例,采集样本49件.从27件病例样本中分离出15株空肠弯曲菌,PFGE分为2种带型,其中14株带型完全一致,另1株为另一带型,2种带型相似性为66.7%.结合流行病学调查、实验室病原学检测和PFGE分析,判定此次事件为一起空肠弯曲菌引起的食源性疾病暴发事件.结论 传统分离培养检测方法结合FilmArray多重PCR系统、实时荧光定量PCR、PFGE分型技术可快速、准确确定和追溯病原.     

2018—2021年北京市丰台区腹泻病例弯曲菌耐药特征分析

目的 了解北京市丰台区弯曲菌的耐药率和耐药谱,对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌耐药率进行比较分析。方法 采用双孔滤膜法对辖区哨点医院收集的2018—2021年腹泻病例粪便标本进行弯曲菌的分离培养、实时荧光PCR鉴定、全自动生化鉴定及飞行质谱鉴定,采用琼脂稀释法对弯曲菌进行药敏试验,并进行耐药分析。组间计数资料的比较应用χ²检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 共收集粪便标本1 354份,弯曲菌检出率8.12%,其中空肠弯曲菌82.73%,结肠弯曲菌17.27%。弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星和四环素的耐药率最高,均为73.64%,且2019年弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星和四环素的耐药率高于2018年和2021年。空肠弯曲菌对红霉素、阿奇霉素、庆大霉素、链霉素、泰利霉素和克林霉素的耐药率低于结肠弯曲菌。空肠弯曲菌多重耐药率为36.26%,耐药谱以氟喹诺酮类-四环素类-氯霉素类抗生素三重耐药为主。结肠弯曲菌多重耐药率为57.89%,耐药谱以氟喹诺酮类-四环素类-氨基糖甙类-大环内酯类-林可酰胺类抗生素五重耐药为主。结论 北京市丰台区腹泻病例弯曲菌的耐药情况均较为严重,应加强...     

北京市房山区腹泻患者空肠弯曲菌感染及菌株分型耐药特征

目的了解北京市房山区感染性腹泻患者空肠弯曲菌感染及分离株的病原学特征。方法 2017年5—12月,收集2家医院腹泻患者的粪便标本,进行弯曲菌的分离、培养及鉴定。对分离的空肠弯曲菌进行11种抗生素的敏感性检测,并对菌株进行多位点序列分型。结果共检测标本286份,分离到弯曲菌31份,检出率为10.80%;经质谱鉴定28株为空肠弯曲菌,3株为结肠弯曲菌。空肠弯曲菌可分为23种不同的ST型,其中4株为ST22,2株为ST760,2株为ST6500,其他20株分别属于20种ST型别;研究发现3个新的ST型,分别为ST9253、ST9254和ST9255。28株空肠弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星、四环素的耐药率达100.00%,对氟苯尼考的耐药率为39.29%,对红霉素、阿奇霉素、泰利霉素、克林霉素敏感。结论北京市房山区腹泻患者空肠弯曲菌感染率较高,对喹诺酮、氟喹诺酮类、四环素类药物耐药严重,对大环内酯类、酮内酯类和林可酰胺类药物敏感;菌株的ST型呈多样性分布。     

滤膜驱动分离培养法在一起空肠弯曲菌腹泻疫情中的应用

目的应用滤膜驱动分离培养法对一起腹泻疫情的系列样本进行空肠弯曲菌的检测和培养,并对该方法及其增菌效果进行评价。方法收集一起腹泻疫情的18份粪便标本,采用实时荧光PCR方法为疫情定性为空肠弯曲菌感染,应用滤膜驱动分离培养法对粪便标本进行空肠弯曲菌增菌和分离培养,并对增菌效果进行比较分析。结果采用荧光PCR方法检测到18份标本中有11份空肠弯曲菌核酸阳性,阳性率为61.11%(11/18);应用滤膜驱动分离培养法,对18份标本进行空肠弯曲菌的分离和鉴定,共分到8株菌,分离率为44.44%(8/18);其中3份核酸阳性标本,由于菌液含量低,无法用培养方法检出。11份核酸阳性粪便标本经增菌培养后,Ct平均值由原来的27.44变为23.50,增菌效果显著(P0.05)。结论采用滤膜驱动分离培养法对粪便标本尤其是冻融粪便进行空肠弯曲菌的增菌和分离培养,能有效提高菌株的分离率,避免资源浪费,可做为常规监测或大规模样本筛检的可行性检测方法。     

上海市2013-2016年门诊腹泻患者弯曲菌流行特征及耐药研究

目的 了解2013-2016年上海市门诊腹泻患者弯曲菌流行特征及耐药情况。方法 2013-2016年,采用膜过滤法对上海市23家医院肠道门诊腹泻病例粪便肛拭标本开展弯曲菌检测,并用常规生化试验和PCR方法鉴定分离菌株。采用微量肉汤稀释法对弯曲菌进行8种抗菌药物（阿奇霉素、环丙沙星、红霉素、庆大霉素、四环素、萘啶酸、泰利霉素、克林霉素）敏感试验。结果 在10 444例腹泻患者粪便肛拭标本中共分离到179株弯曲菌,检出率为1.7%,其中空肠弯曲菌占94.4%,结肠弯曲菌占5.6%。不同年龄人群弯曲菌检出率存在差异,儿童的检出率比成年人高。4-6月和10-12月是弯曲菌的发病高峰。空肠弯曲菌对环丙沙星、四环素、萘啶酸的耐药率高,为96.4%、83.4%、81.7%,结肠弯曲菌耐药率高于空肠弯曲菌,人源弯曲菌存在多重耐药菌株。结论 弯曲菌是上海市腹泻病门诊重要病原体之一,存在不同年龄人群、不同季节的分布差异。上海市人源弯曲菌对环丙沙星、四环素、萘啶酸的耐药情况严重。     

广西南宁市腹泻人群空肠弯曲菌流行状况调查

目的了解南宁市腹泻人群中空肠弯曲菌的感染流行状况。方法在南宁市对腹泻病例进行流行病学调查并采集粪便标本,进行实验室空弯菌的分离培养、PCR鉴定以及脉冲场凝胶电泳分型（PFGE）分析。结果在775份粪便样品中,3份空肠弯曲菌阳性,平均阳性率0.39%。所有生化结果阳性的菌株其PCR复核鉴定结果均为阳性。3株空肠弯曲菌经Cluster分析后得到3个PFGE带型。结论南宁市存在空肠弯曲菌感染病例,本研究结果为正确评价南宁市腹泻人群弯曲菌的流行状况和制定防控措施提供了科学依据。     

2017—2019年松江区不同来源弯曲菌PFGE及耐药性研究

目的 了解上海市松江区腹泻患者、禽肉类来源弯曲菌的流行状况及耐药情况,探讨不同来源弯曲菌的相关性,为制定针对性预防措施提供科学依据。方法 对来自2017—2019年上海市松江区部分医院就诊的腹泻患者粪便或肛拭子以及来自农贸市场和超市的禽肉类样品进行弯曲菌分离培养和生化鉴定,应用微量肉汤稀释法进行药物敏感性试验,PFGE方法进行分子分型。结果 653份腹泻患者样品中分离出弯曲菌60株,阳性率9.19%,438份禽肉类样品中分离出弯曲菌51株,阳性率11.64%,二者阳性检出率差异无统计学意义（χ2 = 1.730,P＞0.05）。食品和腹泻患者来源的弯曲菌对环丙沙星（90.20%和90.00%）、萘啶酸（94.12%和88.33%）、四环素（88.24%和71.67%）耐药严重,耐药率＞71%。PFGE结果显示同源性大于等于90%的亚型群有24组,共79株弯曲菌,占71.17%。同源性100%的有21组,共63株菌,占56.76%,其中4组出现食品和腹泻患者来源弯曲菌100%同源的情况。结论 上海市松江区禽肉类和腹泻患者弯曲菌检出率较高,多重耐药情况严重,禽肉食品和腹泻患者来源的部分菌株具有100%同源性,提示腹泻患者感染弯曲菌可能与食用被弯曲菌污染的禽肉食品有关,为今后更好地预防弯曲菌相关疾病提供数据支持。     

佳木斯市禽畜源弯曲菌耐药性和分子分型

目的了解佳木斯市禽畜源弯曲菌污染情况及耐药性和分子分型,探讨佳木斯市禽源弯曲菌耐药谱和同源性关系,为食源性疾病溯源和预警提供基础数据。方法对2018年3—9月来自佳木斯市各类禽畜类销售市场的随机样品85份,应用驱动增强双孔滤膜法分离弯曲菌,经镜检、生化和荧光聚合酶链式反应(PCR)方法进行鉴定,应用琼脂稀释法对细菌进行7大类11种抗菌药物敏感性检测,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因分型,应用BioNumerics(BN)软件进行聚类分析,比较其同源性。结果 85份样本分离到弯曲菌26株,总分离率为30.59%,全部菌株对萘啶酸抗菌药和环丙沙星耐药率达到100.0%,对四环素抗菌药的耐药率达76.9%,对11种抗菌药物产生了12种耐药谱,42.3%(11/26)出现了多重耐药现象。26株弯曲菌呈现24种PFGE带型,基因型呈现多态性。结论驱动增强双孔滤膜法可有效分离肉类样本中弯曲杆菌,并且弯曲菌分离株对多种抗菌药物产生了显著的耐药性和多态性,应引起社会各部门的高度重视。     

2020年我国20个省份禽肉来源弯曲菌的耐药性及基因组特征分析

目的分析2020年我国20个省份禽肉来源弯曲菌的耐药性及基因组特征。方法收集2020年来自全国零售禽肉制品中的弯曲菌265株(空肠弯曲菌:244株;结肠弯曲菌:21株), 采用琼脂稀释法测定菌株对9种抗生素的耐药表型;对筛选出的38株耐药菌进一步开展全基因组测序, 分析其携带耐药基因、毒力基因、序列型和遗传多样性特征。结果 265株弯曲菌对四环素、萘啶酸和环丙沙星的耐药率最高(84%～100%), 多重耐药率达53.2%;其中结肠弯曲菌对红霉素、阿奇霉素、泰利霉素、庆大霉素、克林霉素的耐药率高于空肠弯曲菌(均P<0.05)。38株弯曲菌基因组中β-内酰胺类(100%, 38/38)、喹诺酮类(94.7%, 36/38)、四环素类(81.6%, 31/38)和氨基糖苷类(50%, 19/38)抗生素耐药基因携带率较高;空肠弯曲菌携带毒力基因种类和数量要明显多于结肠弯曲菌;20株测序空肠弯曲菌共获得19个序列型, 18株测序结肠弯曲菌共获得17个序列型, 共发现5个新的序列型, 菌株表现出较高的遗传多样性。结论我国禽肉来源弯曲菌耐药现象较为严重, 耐药和毒力基因在弯曲菌中分布广泛, ...     

鸡胴体中空肠弯曲菌的分离鉴定及分子分型研究北大核心CSCD

目的对5省份屠宰场鸡胴体中分离的空肠弯曲菌进行鉴定和分子分型,为建立空肠弯曲菌食物中毒的追踪溯源数据库提供科学数据。方法采用生化和分子生物学方法筛检和鉴定鸡专项监测网报送的鸡胴体中分离株。利用属特异16S rRNA基因和种特异的MapA、CeuE基因引物,建立多重PCR反应,鉴定空肠弯曲菌;参照国际认可的PFGE方法,选用内切酶SmaⅠ和KpnⅠ分别进行单酶切,并利用BioNumerics软件对分离株的电泳指纹图谱进行聚类分析,所得结果收入溯源数据库。结果对81株屠宰场鸡胴体分离株进行生化和PCR鉴定,确证72株为空肠弯曲菌,9株为结肠弯曲菌;脉冲场凝胶电泳分子分型结果表明,这72株空肠弯曲菌共产生48种带型。通过聚类分析,按照63.9%相似度将这些菌株分为A^M共13个群。每群包含1~11个带型,72株菌的带型分布具有完全地域同源性,即同一带型的菌株均来自同一省份。结论采用SmaⅠ和KpnⅠ单酶切进行PFGE分型,结合聚类分析,可提高PFGE分型的分辨率,增加菌株分型的准确性和溯源的可信性。     

深圳市罗湖区禽畜肉中空肠弯曲菌的流行状况及分子分型

目的 了解深圳罗湖区市售不同肉类来源的空肠弯曲菌流行分布状况及分子分型结果。方法 采集2016年—2021年4月、6月、10月深圳市罗湖区各大超市、农贸市场生禽肉及生畜肉样品共280份作为研究对象,采用双孔滤膜法对空肠弯曲菌进行分离培养及荧光PCR法鉴定,通过脉冲场凝胶电泳对目标菌进行分子分型。结果 2016年—2021年280份食品样本共有52份样本中检出空肠弯曲菌,阳性率为18.57%,其中136份生禽肉类样本中有49份检出空肠弯曲菌,阳性率为36.03%;144份生畜肉类样本中有3份检出空肠弯曲菌,阳性率为2.08%,生禽肉类的阳性率高于生畜肉类（χ2=53.30,P<0.01）。62株菌株PFGE分子分型得到57种带型。结论 罗湖区生禽肉和生畜肉均存在空肠弯曲菌污染的风险,其中禽肉类污染高于畜肉类,PFGE分子分型溯源结果显示菌株污染来源呈现多态性。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检测广州地区感染性腹泻病原菌

目的了解广州地区感染性腹泻细菌性病原谱和流行特征,为本地区细菌性腹泻防治提供依据。方法收集2012年11月-2013年5月本院腹泻患者的粪便标本300份,首先按照传染病监测技术平台的要求用肠道病原菌选择平板分离培养,再利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪鉴定腹泻病原菌。结果 300份腹泻病人粪便中共分离到7个菌属67株致病菌,检出率22.33%。67株病原菌中居首位的是沙门菌,占44.78%(30/67),其次为弯曲菌,占28.36%(24/67)和气单胞菌,占14.93%(10/67)。病原菌的检出率随着气温的变化而变化。沙门菌是成人组和儿童组最常见的腹泻病原菌,空肠弯曲菌仅在儿童组中检出,两者检出率差异有统计学意义(P0.05),性别间检出率差异无统计学意义(P0.05)。结论除沙门菌之外,人和动物共患的弯曲菌和气单胞菌是重要的腹泻病原菌之一,建议在儿童腹泻中开展弯曲菌的检测。     

鸡胴体中空肠弯曲菌的分离鉴定及分子分型研究

目的对5省份屠宰场鸡胴体中分离的空肠弯曲菌进行鉴定和分子分型,为建立空肠弯曲菌食物中毒的追踪溯源数据库提供科学数据。方法采用生化和分子生物学方法筛检和鉴定鸡专项监测网报送的鸡胴体中分离株。利用属特异16S rRNA基因和种特异的MapA、CeuE基因引物,建立多重PCR反应,鉴定空肠弯曲菌;参照国际认可的PFGE方法,选用内切酶SmaⅠ和KpnⅠ分别进行单酶切,并利用BioNumerics软件对分离株的电泳指纹图谱进行聚类分析,所得结果收入溯源数据库。结果对81株屠宰场鸡胴体分离株进行生化和PCR鉴定,确证72株为空肠弯曲菌,9株为结肠弯曲菌;脉冲场凝胶电泳分子分型结果表明,这72株空肠弯曲菌共产生48种带型。通过聚类分析,按照63.9%相似度将这些菌株分为A~M共13个群。每群包含1~11个带型,72株菌的带型分布具有完全地域同源性,即同一带型的菌株均来自同一省份。结论采用SmaⅠ和KpnⅠ单酶切进行PFGE分型,结合聚类分析,可提高PFGE分型的分辨率,增加菌株分型的准确性和溯源的可信性。     

一起空肠弯曲菌引起的食源性疾病事件的病原学检测结果分析

目的 对绍兴市某学校一起空肠弯曲菌引起的食源性疾病事件进行病原学研究，为食源性疾病突发事件的应急处置提供依据。方法 采集该事件患者肛拭子、食堂工作人员肛拭子、留样食品样品和环境样品共46份，采用快速多重病原基因检测系统筛查病原体，锁定目标病原后，将病原菌分离鉴定与实时荧光PCR同步检测，采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)探究菌株同源性，采用琼脂稀释法检测菌株耐药情况。结果 采集的46份样品中，分离鉴定出空肠弯曲菌4份，均来自患者。PFGE聚类分析结果显示，4株空肠弯曲菌同源性为100.0%。药敏结果显示，4株菌对萘啶酸、环丙沙星、氟苯尼考和四环素4种抗生素均耐药。结论 这是绍兴市首次由空肠弯曲菌感染引起的食源性聚集疫情，建议加强学校食堂卫生管理、在校学生和教职员工的健康教育，养成良好的卫生习惯。     

温州市禽肉中空肠弯曲菌检测结果及耐药性分析

目的了解温州市农贸市场禽肉中空肠弯曲菌污染现状及耐药情况,为禽肉类食品安全风险评估、弯曲菌病防控和临床用药提供依据。方法于2018年2月—2019年10月从温州市鹿城区、龙湾区、瓯海区、瑞安市、苍南县、平阳县和文成县7个县(市、区)的农贸市场采集禽肉样品。采用双孔滤膜法检测空肠弯曲菌,并进行药敏试验。结果共采集样品200份,检出空肠弯曲菌66份,检出率为33.00%。鸡肉中检出空肠弯曲菌45份,检出率为34.09%;鸭肉中检出空肠弯曲菌21份,检出率为30.88%,不同样品空肠弯曲菌检出率差异无统计学意义(P0.05)。鹿城区、平阳县和苍南县空肠弯曲菌检出率最高,均为35.00%,不同采样地区空肠弯曲菌检出率差异无统计学意义(P0.05)。多重耐药38株,多重耐药率为57.58%,以萘啶酸、四环素和环丙沙星耐药率较高,分别为84.85%、83.33%和80.30%。结论温州市农贸市场禽肉空肠弯曲菌污染较重,且对萘啶酸、四环素、环丙沙星等多种抗生素有显著耐药性。     

济南市鸡源空肠弯曲菌的流行特征及病原毒力、耐药性分析

目的 了解济南市市售肉鸡中空肠弯曲菌的污染情况、分离株的分子分型特征及其耐药性和毒力基因携带情况。方法 采用滤膜法于2015—2018年对济南市农贸市场售卖的98份现杀活鸡整禽中的空肠弯曲菌进行分离培养;利用脉冲场凝胶电泳和多位点序列分型对分离株进行分子分型;用商品化药敏板测试分离株对11种八类药物的敏感性;通过PCR对5种毒力相关基因进行筛查分析。结果 济南市市售肉鸡中空肠弯曲菌的检出率为26.5%（26/98）;PFGE分型的结果显示,济南市肉鸡来源26株空肠弯曲菌共有16种带型,带型的相似度在53.9%～100%之间;MLST分型的结果显示,26株空肠弯曲菌可分为19种ST型,其中新发现型别占比为47.4%（9/19）。药敏测试的结果显示,空肠弯曲菌对治疗首选药物喹诺酮类抗生素环丙沙星和萘啶酸的耐药率高达92.3%和100%;分离株五种毒力基因:cadF、cdtB、iamA、flaA和virBII的携带率为分别为100%、100%、92.3%、69.2%和19.2%。结论 济南市市售肉鸡中存在一定程度的空肠弯曲菌污染,分离株存在遗传多样性,耐药情况比较严重,且携带有毒力基因的菌株的比例较高,因此应加强空肠弯曲菌感染监测。     

辽宁省首次在分割禽肉中分离出2株空肠弯曲菌

目的 2018年辽宁省食品污染和有害因素风险监测项目中首次在分割禽肉中分离出2株空肠弯曲菌。方法对6份分割禽肉进行选择性增菌后,采用直接滤膜法进行分离培养。对滤过的可疑菌落进行纯培养后,采用VITEK全自动生化鉴定系统及弯曲菌特异性微量生化补充试验联合多重PCR技术进行鉴定。结果从6份分割禽肉中(4份鸡肉、2份鸭肉)分离出2株空肠弯曲菌,并通过弯曲菌多重PCR技术进行鉴定,2株菌均证实为空肠弯曲菌。结论通过选择性增菌后直接滤膜法联合多重PCR技术,可以精准快速检测食源性弯曲菌污染,有助于从根本上预防控制弯曲菌引发的疾病。     

南通市鸡源空肠弯曲菌监测结果及耐药性分析

目的了解南通市鸡源空肠弯曲菌流行及耐药性状况,为制定鸡空肠弯曲菌病防治措施提供基础数据。方法采用荧光定量PCR技术检测标本中的空肠弯曲菌,参照GB/T 4789.9—2008的方法进行空肠弯曲菌分离鉴定,运用琼脂扩散法检测分离株的耐药性。结果 415份粪便样品中,57份空肠弯曲菌阳性,总阳性率为13.73%。其中苗鸡粪便、成年鸡肛拭子、鸡场环境样本的阳性率分别为6.49%、21.24%、7.35%,成年鸡肛拭子空肠弯曲菌的阳性率显著高于苗鸡粪便和鸡场环境样品,差异有统计学意义(P0.01)。46株空肠弯曲菌分离株对临床常用8大类19种抗生素耐药率在80%以上的有10种,分别为头孢拉定、头孢哌酮、头孢克罗、诺氟沙星、环丙沙星、左旋氧氟沙星、萘啶酸、复方新诺明、四环素、强力霉素。耐药菌株的耐药谱主要集中在10耐、11耐、12耐和14耐,达86.96%。结论南通市鸡源空肠弯曲菌检测阳性率较高,存在鸡源空肠弯曲菌病流行隐患;空肠弯曲菌分离株对多种抗生素产生了显著的耐药性,应引起社会各部门的高度重视。     

一起空肠弯曲菌导致急性胃肠炎暴发事件的病原特征分析

目的 对一起急性胃肠炎暴发事件进行实验室检测分析。方法 对暴发事件中采集的病例粪便标本、厨师粪便标本、环境涂抹、食品原材料等样本进行实时荧光定量PCR检测和细菌分离培养分析。对分离菌株进行PFGE分型分析并对病例分离株进行抗生素敏感性检测和全基因组测序分析。结果 4例病例粪便标本空肠弯曲菌核酸检测阳性,其中1例未服用抗生素的病例分离到空肠弯曲菌;从4份生鸡样本中获得12个空肠弯曲菌单菌落和7个结肠弯曲菌单菌落。病例分离株对萘啶酸、环丙沙星、氯霉素、氟苯尼考和四环素耐药;基因组测序分析确定该菌株为ST10075型,并确定其染色体上含有cmeABCR、tetO/M和blaOXA-61等耐药元件,而23S rRNA的2 074和2 075位点均未发生突变,gyrA基因的257位点发生了C-T的突变。结论 实验室检测结果表明空肠弯曲菌的感染可能是导致此次急性胃肠炎暴发的主要病原。     

一起学校其它感染性腹泻病突发公共卫生事件的调查

目的 调查一起学校腹泻疫情发生的原因,以制定相应的防控措施。 方法 开展病例调查和流行病学调查,结合实验室检测,采用描述性流行病学方法分析疫情的流行特征。 结果 此次疫情共发生病例36例,罹患率为15.65%,其中4例为教师,教师罹患率为17.39%。病例表现以腹泻为主。实验室检测结果5份病例标本中4份检出空肠弯曲菌阳性。 结论 推断此次事件是由空肠弯曲菌引起的疫情,通过积极的防控措施疫情得到及时控制。