高脂膳食对人肺腺癌细胞SPCA1增殖活性影响的血清生理学研究

目的探讨用血清生理学方法直接在细胞水平上研究高脂膳食对人肺腺癌细胞系SPCA1增殖活性的影响。方法在探讨合适的血清生理学实验条件后,将20只SD雌性大鼠按体重随机分为高脂组和对照组,对照组自由进食普通饲料,高脂组自由进食高脂饲料(猪油∶普通饲料=1∶9),喂养7周后取血分离血清,用大鼠血清代替细胞培养液中小牛血清培养人肺腺癌细胞系SPCA1,用MTT比色法、3HTdR掺入法、流式细胞术检测方法从细胞生长曲线、细胞DNA合成以及细胞周期分布等方面观察高脂膳食喂养的雌性大鼠血清对癌细胞增殖活性的影响。结果(1)加入细胞培养液中血清浓度为15%时,人肺癌细胞生长较好,并且未灭活组好于灭活组。(2)从MTT比色法、3HTdR掺入实验以及流式细胞术结果来看,高脂膳食喂养的大鼠血清(RSTHFD)能促进肺腺癌细胞SPCA1的增殖和癌细胞DNA的合成,并能促使细胞进入活跃的有丝分裂状态。结论(1)用血清生理学方法可以直接在细胞水平上研究膳食因素对人肺腺癌细胞系SPCA1增殖活性的影响。(2)高脂膳食能促进人肺腺癌细胞SPCA1的增殖。     

慢性酒精和高脂膳食对大鼠精子生成的影响

目的观察慢性酒精和高脂膳食摄入对雄性大鼠精子生成的影响。方法清洁级Wistar雄性大鼠80只,按体重随机分为8组。对照组、低剂量酒精组、中剂量酒精组及高剂量酒精组,分别给予蒸馏水和5%、20%、40%的酒精溶液。另设高脂对照组、低剂量酒精加高脂组、中剂量酒精加高脂组及高剂量酒精加高脂组,给予不同浓度的酒精,同时喂饲高脂饲料。12周后处死,测定相关指标。结果高剂量酒精组和高剂量酒精加高脂组大鼠的体重、睾丸重量、精子密度和精子活动度分别显著低于正常对照组和高脂对照组,精子畸形率显著升高,直线运动的精子数显著减少,静止不动的精子数增加(P<0.05)。低剂量酒精组,精子密度高于正常对照组(P<0.05)。各剂量酒精加高脂组大鼠的各项指标与相应的酒精剂量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论高剂量的酒精摄入对雄性大鼠具有明显的生殖毒性,低剂量的酒精可能有助于雄性大鼠的精子生成。高脂膳食摄入对雄性大鼠的精子生成无明显影响,也未表现出与酒精的协同作用。     

钙对高脂膳食大鼠解偶联蛋白基因表达的影响

目的　探讨膳食钙对高脂饮食大鼠白色脂肪组织和骨骼肌解偶联蛋白 2 (uncouplingprotein2 ,UCP2 )基因表达的影响。方法　将雄性Wistar大鼠随机分成 6组 ,每组 9只 ,分别喂以基础饲料A组 (0 5%钙 )、高脂低钙饲料B组 (0 0 8%钙 )、高脂正常钙饲料C组 (0 5%钙 )、高脂高钙饲料D和E组 (1%和 1 5%钙 )和高脂高钙 (1 5%钙 )+维生素D(60 0U % )饲料F组 ,9周后断头取血测血糖、血清胰岛素和瘦素 ,应用RT -PCR方法测定白色脂肪组织和骨路肌UCP2mRNA表达水平。结果　C组体重和体脂含量显著高于其它各组 (P <0 0 1) ,膳食高脂高钙的D、E、F组体重增加的趋势明显降低 ,体重与A组接近 ;C组血糖和胰岛素均有增高趋势 ,C组胰岛素显著高于A、D、E、F组(P <0 0 5) ,但血糖各组无显著性差异 (P >0 0 5)。与A组相比 ,C组血清瘦素水平显著增高 (P <0 0 5) ,D、E、F组血清瘦素有增高趋势 ,但无显著性差异 (P >0 0 5)。高脂高钙的D、E、F组与高脂正常钙的C组相比 ,白色脂肪UCP2mRNA并未增强 ,但骨骼肌UCP2mRNA表达明显增强。高脂低钙的B组白色脂肪UCP2mRNA比C组明显降低。结论　膳食高钙不但可以明显降低体重增加的趋势 ,还可以改善高胰岛素血症 ,促进瘦素分泌和骨骼肌UCP2mRNA的表达 ,有利于肥胖的防治     

L-肉碱对高脂膳食诱导肥胖大鼠体脂含量及血脂水平的影响

[目的]探讨L-肉碱对肥胖大鼠体重、体脂含量及血脂水平的影响。[方法]以高脂饲料诱导大鼠肥胖模型，然后将肥胖大鼠随机分为对照组与125、250、500mg／kg体重3个L-肉碱组，每天1次经口给予，共6周。观察大鼠体重、睾丸 肾脂肪垫合计重量，TC、TG和HDL-C水平的变化。[结果]125、250、500mg／kg剂量组动物的体重与甘油三酯(TG)低于对照组；250、500mg／kg剂量组的睾丸 肾脂肪垫重量低于对照组；500mg／kg剂量组的胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和体脂比低于对照组。[结论]L-肉碱具有改善大鼠肥胖与降低高血脂水平的作用。     

β-葡聚糖干预高脂膳食喂养大鼠脂代谢的作用

<正>β-葡聚糖是一种主要存在于燕麦及大麦中的非淀粉水溶性植物多糖,具有降血脂、降血糖、提高免疫力等多种生理功效[1,2]。本实验旨在研究β-葡聚糖对高脂血症大鼠血脂及脂代谢酶的影     

膳食钙对高脂膳食大鼠血糖、血脂及激素的影响

目的　探讨不同剂量膳食钙对高脂膳食大鼠血糖、血脂及激素水平的影响。方法　将雄性Wistar大鼠随机分成 6组 ,每组 9只 ,分别喂以基础饲料A组 (5 %脂肪 ,0 5 %钙 )、高脂低钙饲料B组 (15 %脂肪 ,0 0 8%钙 )、高脂正常钙饲料C组 (15 %脂肪 0 5 %钙 )、高脂高钙饲料D和E组(15 %脂肪 ,1%和 1 5 %钙 )和高脂高钙 (15 %脂肪 ,1 5 %钙 ) +维生素D(6 0 0IU % )饲料F组。 9周后断头取血测血糖、血脂和血清胰岛素、甲状腺激素、生长激素和血浆神经肽Y。结果　与C组相比 ,其它各组大鼠体重和体脂含量均显著降低 (P <0 0 5 ) ,胆固醇和甘油三酯各组与C组相比显著降低 (P <0 0 5 ) ,高密度脂蛋白各组均无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;C组血糖和胰岛素均增高 ,与C组相比 ,E组胰岛素显著降低 (P <0 0 5 ) ,D、E、F组FT3显著增加 (P <0 0 5 ) ,E、F组神经肽Y(NPY)显著降低 ,其余各组无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,生长激素各组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　高钙膳食可能通过降低血清胆固醇和甘油三酯 ,改善高胰岛素血症 ,降低血浆NPY ,提高血清FT3的水平 ,从而抑制了高脂膳食诱导的肥胖。     

石榴籽油对高脂膳食大鼠血脂的影响

目的 研究石榴籽油对高脂膳食大鼠血脂水平的影响.方法 50只雄性SD大鼠按体重随机分为5组:空白对照组(C)、高脂模型组(HFC)、高脂低石榴籽油组(HFLP)、高脂中石榴籽油组(HFMP)、高脂高石榴籽油组(HFHP),除空白对照组饲以普通饲料外,其余各组饲以高脂饲料并用不同剂量石榴籽油进行干预.结果 4周后,血清TC、TG、LDL-C、AI等指标,高脂模型组均显著高于空白对照组(P<0.05或P<0.01),HDL-C(P<0.05或P<0.01)下降;石榴籽油干预组血清TC、TG、LDL-C、AI等指标均显著低于高脂模型组(P<0.05或P<0.01),而HDL-C升高(P<0.05或P<0.01).结论 石榴籽油可显著抑制高脂膳食大鼠血脂的增高.     

脂宁胶囊对高脂大鼠血脂水平的影响

目的探讨脂宁胶囊对高脂饲料饲养大鼠血脂水平的影响。方法将大鼠按基础血清总胆固醇水平将动物随机分为4组:高脂对照组、低、中、高剂量实验组。实验期间,所有大鼠均饲以高脂饲料,低、中、高剂量组分别灌胃给予0.0835、0.1670、0.5010 g/kg.bw剂量的脂宁胶囊,对照组以蒸馏水灌胃,灌胃量1 ml/100 g.bw,连续30 d后,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。结果0.16700、.5010 g/kg.bw剂量可显著降低大鼠血清TC水平(P<0.05),0.0835、0.1670 g/kg.bw剂量可显著降低大鼠血清TG水平(P<0.05),0.1670、0.5010g/kg.bw剂量升高HDL-C水平达4 mg/dl以上。结论脂宁胶囊具有辅助调节血脂作用。     

绿茶多酚影响高脂膳食大鼠心肌HSP90和CAVEOLIN-1表达的实验研究

目的探讨绿茶多酚(GTPs)对高脂膳食大鼠心肌窖蛋白-1(caveolin-1,cav-1)和热休克蛋白(heat shock protein 90,HSP90)表达的影响及可能的心脏保护作用。方法体重80~100g雄性wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、高脂对照组、绿茶多酚干预组(两个剂量组)4组,每组10只。对照组分别自由摄食标准饲料和高脂饲料,绿茶多酚干预组在自由摄食高脂膳食的同时给予不同浓度的绿茶多酚水溶液(0.8 g/L和1.6 g/L)。35 w后将大鼠断头处死并收集全血及心脏组织;采用试剂盒测定血清甘油三酯,胆固醇、血糖、胰岛素和胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数;采用RT-PCR法和Western-blotting法分别测定HSP90和cav-1的m RNA及蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,高脂组体质量、血清甘油三酯、总胆固醇和血糖等指标均显著升高(P0.05),茶多酚干预后有所改善(P0.05);高脂组HSP90 m RNA及蛋白水平降低,caveolin-1 m RNA及蛋白水平升高(P0.05),绿茶多酚干预后HSP90表达升高,cav-1表达降低。结论绿茶多酚可能通过上调HSP90和下调caveolin-1转录及蛋白表达水平,在高脂膳食条件下发挥对心肌的保护作用。     

低糖高脂营养膳食对慢性阻塞性肺疾病急性发作并发呼吸衰竭病人疗效的影响

目的:探讨自配低糖高脂营养膳食对慢性阻塞性肺疾病急性发作(AECOPD)并发呼吸衰竭病人疗效的影响. 方法:将78例COPD急性发作(AECOPD)并发呼吸衰竭进行机械通气病人,随机分为试验组(n=38)和对照组(n=40).两组病人均采用鼻饲肠内营养(EN)治疗,试验组采用自配低糖高脂膳食,对照组采用整蛋白营养制剂(瑞素),具体能量摄入依据病人实际情况而定,分别于营养治疗第1天和治疗后第14天测定病人二氧化碳生成量(VCO2)、氧耗量(VO2)、肺活量(FVC)和1 s用力呼气容积占最大肺活量的比值(FEV1/FVC)、二氧化碳分压(PaCO2)、氧分压(PaO2)、pH值以及第14天脱机成功率、机械通气时间、病死率和营养支持费用等指标.结果:治疗前,两组病人的各项指标测定值无显著性差异(P＞0.05).治疗第14天,两组病人的各项指标均较治疗前有所改善,且差异有显著性统计学意义(P＜0.05).试验组较对照组改善更加明显,差异有显著性统计学意义(P＜0.05). 结论:自配低糖高脂营养膳食对AECOPD并发呼吸衰竭病人有明显的临床治疗效果.     

抑癌候选基因NDRG2在膀胱肿瘤中的表达研究

目的 探讨N-myc下游调节基因(NDRG2)在膀胱正常组织和膀胱肿瘤组织中的表达情况,以及NDRG2的表达与膀胱肿瘤病理分级和临床分期的关系.方法 应用免疫组化SP法检测52例膀胱癌、10例膀胱乳头状肿瘤及10例膀胱正常组织石蜡标本中NDRG2表达情况,并进行相关临床病理分析.结果 NDRG2在正常膀胱组织阳性表达率为80.0％ (8/10),在膀胱肿瘤组织中阳性表达率为40.3％ (25/62),两者比较差异有统计学意义(x2=3.98,P＜0.05);NDRG2的阳性表达与膀胱肿瘤病理分级呈负相关(r=-0.288,P＜0.05),与C-myc表达呈负相关(r=-0.436,P＜0.01),与p53表达呈正相关(r=0.717,P＜0.01).结论 NDRG2基因在膀胱肿瘤组织中的表达水平随恶性程度的增高而降低,提示该基因可能对膀胱肿瘤病理分级和临床分期有一定的指导意义.     

人肺腺癌组织的血清蛋白质组学研究

目的采用以肿瘤免疫学与蛋白质组学研究技术有机地结合为基础的血清蛋白质组学研究体系(SERPA)筛选肺腺癌相关抗原。方法应用SERPA对4例人肺腺癌组织进行研究,分析肺腺癌组织总蛋白分别与肺腺癌患者的自身血清以及正常对照血清反应的W estern b lot图谱,识别鉴定差异反应的蛋白质。结果获得了分辨率较高的人肺腺癌组织与患者的自身血清以及正常对照血清的W estern b lot图谱,共识别27±5个差异反应的蛋白质。对其中的部分差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析,鉴定出一些与细胞生长增殖、细胞代谢、细胞周期调控、信号转导等有关的肺腺癌相关抗原。结论本研究为进一步筛选用于肺腺癌诊断、治疗和预后评估的肺腺癌分子标志物奠定了坚实的基础。     

多西紫杉醇和腺病毒介导NDRG2基因对人前列腺癌细胞株DU145的协同作用

目的 观察携带NDRG2基因的腺病毒(Ad-NDRG2)与多西紫杉醇(DT)联合给药对人前列腺癌细胞株DU145的抗肿瘤增效作用.方法 以Ad-NDRG2感染体外培养的DU145细胞,采用Western-blot方法检测CyclinD1、CyclinE、NDRG2蛋白表达水平的变化.流式细胞仪检测和MTT试验分析Ad-NDRG2给药后DU145细胞对DT敏感性的变化.建立裸鼠移植瘤模型,观察Ad-NDRG2与DT联合给药的体内抗肿瘤作用.结果 Ad-NDRG2感染后,DU145细胞中NDRG2表达明显增加,而CyclinD1和CyclinE表达水平降低.Ad-NDRG2协同10-7 mol/L以上浓度DT作用48h,可增强对DU145细胞的生长抑制作用(抑制率=41.8％,t=4.18,P＜0.01),增强诱导凋亡作用(凋亡率=32.4％,x2=11.66,P＜0.05),并且使DT所致的G2/M期细胞比例由50.2％变为23.6％,部分逆转了其G2/M期阻滞.动物实验表明:DT组、Ad-NDRG2组、Ad-NDRG2与DT联合给药组其移植瘤的抑瘤率分别为30.7％、28.2％和55.8％,两药相互作用指数(CDI)为0.89.结论 腺病毒介导NDRG2基因感染细胞后,增加了人前列腺癌DU145细胞在体内及体外对多西紫杉醇的敏感性.     

莱菔硫烷对人小细胞肺癌NCI—H446细胞增殖、侵袭以及MMP-9活性的影响

目的探讨莱菔硫烷（sulforaphane,SFN）对人小细胞肺癌NCI—H446细胞增殖、侵袭以及基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinase-9,MMP-9）活性的影响。方法体外培养NCI—H446细胞,用0、25、50、100txmol／LSFN处理24～72h后,MTT法检测细胞的增殖情况;小室侵袭实验分析细胞的侵袭力改变,明胶酶谱实验检测MMP-9的酶活性变化。结果经25、50、100Ixmol／LSFN处理24～72h后,NCI．H446生长均能受到不同程度抑制。其中72h后,25、50、100μmol／LSFN组NCI．H446细胞的抑制率分别为（11．1±2．26）％,（25．2±3．24）％和（44．6±4．2）％,与溶剂对照组相比差异具有统计学意义（t=10．685,8．417,5．264,P〈0．05）。25、50、100μmol／LSFN作用NCI—H446细胞24h后,NCI—H446细胞穿膜数分别为（48．6±1．84）％,（35．4±2．22）％和（27．8±1．36）％,与溶剂对照组[（68．4±2．21）％]相比差异具有统计学意义（t=6．341,5．562,4．925,P〈0．05）。明胶酶谱实验显示,25、50、100ixmol／LSFN处理后,MMP-9活性的灰度值分别为764±18．4,685±14．74和638±21．54,与对照组相比（822±12．53）,差异有统计学意义（t=4．971,7．582,11．235,P〈0．05）。结论SFN对肺癌NCI—H446细胞生长、侵袭力及MMP-9的活性具有抑制作用。     

血清基质金属蛋白酶7与膀胱癌的诊断及预后关系分析

目的探讨血清基质金属蛋白酶7（matrix metalloproteinase-7,MMP-7）检测在膀胱癌诊断和预后中的意义。方法选取77例膀胱癌患者和65例健康体检人群为研究对象。用ELISA方法测定血清MMP-7的水平。结果膀胱癌组血清MMP-7水平高于正常对照组[3．1（0-32．1）ng／ml vs 1．0（0.2-2．6）ng／ml,X^2=9．29,P=0．0023];膀胱癌患者血清MMP-7水平与淋巴结转移（X^2=10．49,P〈0．01）和病理分期（X^2=4．55,P=0．033）有关。血清MMP-7水平的ROC曲线下面积为0．810,诊断膀胱癌的灵敏度为83．6％,特异度为77．4％。高MMP-7水平的膀胱癌患者的生存率显著低于低MMP-7水平的膀胱癌患者（X^2=3．88,P=0．0488）。结论MMP-7可能与膀胱癌的发生、发展和转移有关,血清MMP-7是膀胱癌的良好的诊断与预后指标。     

大黄素对膀胱癌细胞BIU87增殖和凋亡的影响

目的探讨大黄素对人膀胱癌细胞BIU87生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用甲基噻唑（MTT）比色法测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对在体外培养BIU87细胞增殖的影响,同时应用流式细胞仪检测细胞增殖周期的变化,免疫组化SP法检测细胞内bcl-2和caspase-3蛋白的表达水平。结果在一定范围内,大黄素的浓度（10—80μg/ml）越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高[分别为（9．84±21．13）％、（18．32±22．14）％、（29．73±1．42）％、（42．13±2．36）％],与对照组[（2．01±20．92）％]相比,差异均有统计学意义（F=531．85,P〈0．01）;大黄素可在G0／G1期阻滞人膀胱癌细胞BIU87的增殖,使S期细胞比率降低[分别为（33．27±1．26）％、（29．17±1．39）％、（16．94±0．86）％、（10．85±1．47）％],与对照组[（35．45±0．38）％]相比,差异均有统计学意义（F=524．64,P〈0．01）。大黄素作用48h后,BIU87细胞中bel-2蛋白表达下降（灰度值分别为122．65±2．12、131．37±1．62、134．81±1．36、145．55±2．01）,easpase-3蛋白表达上调（灰度值分别为135．26±1．41、130．22±1．74、126．11±1．77、118．36±1．53）,呈浓度依赖性,与对照组（灰度值分别为108．42±3．73、149．35±1．82）相比,差异均有统计学意义（F=216．23、224．83,P〈0．01）。结论大黄素在体外能抑制人膀胱癌细胞株BIU87的生长、诱导细胞凋亡,其作用与下调bcl-2蛋白表达、上调easpase一3蛋白表达和阻滞细胞周期于Go／G．期有关。     

姜黄素对人胃癌BGC-823细胞增殖及MMP-9、COX-2mRNA表达的影响

目的 研究姜黄素在体外对人胃癌细胞BGC-823生长增殖的影响及其抗肿瘤的相关分子机制.方法 体外培养人胃癌BGC-823,MTT法检测姜黄素在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算IC50值;RT-PCR法检测其对COX-2、MMP-9 mRNA表达的影响.结果 MTF结果显示:相同干预浓度姜黄素抑制人胃癌细胞增殖,其24、48、72 h的IC50分别为:(62.192±7.802) μmol/L、(46.365±8.991) μmol/L和(45.503±9.126) μmol/L; RT-PCR结果显示:正常对照组及姜黄素干预组的人胃癌细胞BGC-823MMP-9 mRNA灰度值分别为:0.704±0.045,0.147 ±0.052(P＜0.05);COX-2 mRNA灰度值分别为:0.721 ±0.060,0.190±0.027(P＜0.05).结论 姜黄素抗肿瘤机制可能通过抑制COX-2及MMP-9 mRNA的表达来抑制胃癌细胞增殖.     

茶氨酸对人肺癌A549细胞株作用机制的研究

目的观察茶氨酸在体内外对肺癌A549细胞株生长的抑制、凋亡效应、抗肿瘤生成及抗血管生成作用。方法观察茶氨酸对肺癌A549细胞生长的影响,通过FCM检测茶氨酸对肺癌细胞凋亡的作用,以及茶氨酸在裸鼠移植瘤模型上对瘤体生长的抑制作用,免疫组化法检测肿瘤组织中CD34和血管内皮生长因子（VEGF）表达,观察茶氨酸对肺癌生长的抑制作用。结果茶氨酸显著抑制A549肺癌细胞生长,具有时间依赖性和浓度依赖性。茶氨酸使A549细胞出现明显凋亡,凋亡率17．8％。茶氨酸组治疗2周后,移植瘤瘤体体积变化和瘤体重量变化差异均有统计学意义,抑瘤率为47．2％。茶氨酸组瘤体组织中VEGF的表达与PBS组比较差异有统计学意义,瘤体组织中CD34标记的微血管密度（MVD）降低,因此,茶氨酸显著抑制肿瘤血管形成。结论茶氨酸通过促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤生长及抑制肿瘤血管生成的作用。     

Caveolin-1过表达抑制宫颈鳞癌Hela细胞的体外生长研究

Objective To investigate the effects of caveolin-1 overexpressing on the growth of cervical squamous cell cancer Hela cell line. Methods Eukaryotic expression vector of human caveolin-1 gene was introduced into Hela cells by Lipofectamine. The clones stably overexpressed caveolin-1 were identiffed by RT-PCR, immunofluorescence cell staining techniques and Westernblotting. Cells proliferation viabihty was tested by MTT assay, and flow cytometry was used to assay the cell cycle and apoptosis, and the relative phosphorylation level of extracellular regulated protein kinases (Erk1/2) were detected by Westernblotting. Results The clones stably overexpressed caveolin-1 were obtained. Compared with the parental Hela cells, the tranfected cells exhibited a slower rate of growth. FAGS analysis results revealed that overexpression of caveolin-1 resulted in the cell cycle arrest in the G0/G1 [ ( 68. 04 ± 2. 57 ) % vs ( 53.41 ±1.01)%] phase and increased the apoptotic cell fraction[ (19. 18 ±2.20)% vs (5.63 ±0.55)%, P <0. 05 ]. Western blotting results showed that overexpression of caveolin-1 reduced the phosphorylation of Erk1/2(0.28 ±0.05 vs 0.81 ±0.07, P <0.05). Conclusions Overexpression of caveolin-1 suppressed the growth of Hela cells and induced apoptosis, down-regulation of Erk1/2 phosphorylation might be involved in its mechanism.