咬合力增强和减弱对大鼠磨牙牙周支持组织形态学的影响

目的　研究咬合力对牙周组织形态学的影响。方法　用拔牙法建立大鼠咬合力增强和减弱的动物模型 ,并用显微标尺测量牙周膜宽度及牙骨质厚度的动态变化。结果　在成模 1周后 ,咬合力减弱组牙周组织形态发生明显变化 ,而咬合力增强组未见明显变化。在成模 2周及 3周后 ,咬合力减弱组及咬合力增强组的牙周膜宽度与对照组间有显著差异 ( P<0 .0 5 ) ,并且其牙骨质厚度近、远、中侧间有显著性差异 ( P <0 .0 5 )。结论　牙周膜组织形态与受力密切相关 ,在生理条件下的咬合力对维持牙周膜的正常结构具有重要意义     

Clara细胞分泌蛋白在实验性气道炎症中的表达

目的　研究哮喘大鼠气道局部 Clara细胞分泌蛋白 (CCSP) m RNA的表达及作用。方法　用卵白蛋白致敏、激发建立大鼠哮喘模型 ,以逆转录聚合酶链反应、斑点免疫印迹及免疫组化方法分别检测大鼠激发哮喘后3、7和 14天肺组织 CCSP m RNA、支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中 CCSP蛋白水平及细小支气管 Clara细胞比率。结果激发哮喘后大鼠 CCSP m RNA表达减少 (对照为 0 .6 5± 0 .0 5 ,激发 3天、1周及 2周后分别为 0 .5 7± 0 .0 5、0 .5 1±0 .0 4及 0 .5 0± 0 .0 3,P均 <0 .0 1) ,BAL F中 CCSP蛋白含量降低 (对照为 5 9.6 7± 4 .72 ,激发 3天、1周及 2周后分别为 4 9.33± 4 .6 3、4 4 .0 0± 4 .6 3、4 3.5 0± 2 .5 9,P均 <0 .0 1) ,Clara细胞比率下降 (P<0 .0 1或 0 .0 5 )。结论　哮喘大鼠 CCSP m RNA表达减少 ,CCSP水平降低 ,可能通过对磷脂酶 A2的抑制作用的减弱而促进气道炎症     

大鼠肺纤维化模型肺泡上皮钙粘素的表达

目的 :探讨钙粘素 (cadherin)在肺纤维化发病机制中的作用。方法 :SD大鼠 48只随机分为实验组和对照组 ,每组 2 4只。实验组气管内滴入博莱霉素建立肺纤维化模型 ,使用SABC免疫组化方法检测实验组滴药后第1,2和 4周及对照组肺泡上皮钙粘素的表达 ,利用图像分析技术测定阳性表达面积。结果 :对照组钙粘素表达较低 ,阳性表达面积为 (96 8.5± 138.11) μm2 。给予博莱霉素后表达上调 ,实验组第 1,2和 4周阳性表达面积分别为 (20 80 .9± 42 9.0 9) μm2 、(130 9.3± 35 7.0 0 ) μm2 和 (1138.4± 337.2 1) μm2 。实验组阳性表达面积与肺泡炎积分呈正相关(r=0 .786 ,P <0 .0 1)。结论 :钙粘素参与肺纤维化的发病过程 ,其表达与肺泡炎程度正相关     

原因不明不孕患者子宫内膜胰岛素样生长因子-Ⅱ和Ⅰ型受体的表达与性激素的调控

目的 :探讨原因不明不孕患者子宫内膜胰岛素样生长因子 - (IGF- )及其 型受体 (IGF- R)的表达 ,血清性激素的变化与子宫内膜接受性的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术 ,对 34例原因不明不孕患者 (研究组 )和 2 1例正常生育妇女志愿者或男性因素不孕妇女 (对组照 )的黄体中期子宫内膜 ,行 IGF- 及 IGF- R m RNA检测 ,放射免疫法测定同期血清雌二醇 (E2 )、孕酮 (P)水平。结果 :研究组黄体中期子宫内膜IGF- m RNA、IGF- R m RNA表达水平分别为 0 .6 6 2± 0 .371、0 .5 82± 0 .2 5 7,低于对照组 0 .96 1± 0 .389、0 .82 9± 0 .341(均 P<0 .0 5 )。研究组血清 P水平为 (2 3.782± 15 .4 5 9) nmol/ L ,显著低于对照组 (43.14 2± 16 .5 49) nmol/ L(P<0 .0 0 5 ) ,而两组 E2 无显著性差异。相关分析示两组 IGF- m RNA与 IGF- R m RNA均呈正相关 ,r分别为0 .92 3、0 .738(P<0 .0 5 )。两组 P与 IGF- m RNA均呈正相关 ,r分别为 0 .716、0 .5 88(P<0 .0 5 )。两组 P与 IGF- R m RNA均呈正相关 ,r分别为 0 .5 19、0 .5 0 5 (P<0 .0 5 )。结论 :原因不明不孕患者黄体中期孕激素不足可引起子宫内膜 IGF- 及 IGF- R基因表达减弱 ,影响子宫内膜蜕膜化而导致子宫内膜接受性低下 ,     

肝纤维化大鼠星状细胞Smad3、Smad7基因表达差异的研究

通过检测肝纤维化大鼠原代肝星状细胞 (HSC)的 Sm ad3和 Smad7编码基因的表达 ,探讨 HSC活化及转化机制。皮下注射四氯化碳 (CCl4)制备大鼠肝纤维化模型 ,于注射 CCl4后 1、 4、 8周分批分离 HSC并计算 HSC平均得率 ;RT- PCR检测其 Sm ad3、Smad7m RNA的表达变化。结果显示 :1CCl4注射后第 1、 4、 8周大鼠 HSC平均得率分别为 :(3.34± 0 .36 )× 10 7/只、 (4 .2 1± 0 .6 4)× 10 7/只、 (5 .88± 0 .79)× 10 7/只 ,均高于正常大鼠 HSC平均得率(2 .2 3± 0 .19)× 10 7/只 ,组间比较有显著性差异 ,P<0 .0 5。 2与正常对照组相比 ,注射 CCl4后 1、 4、 8周大鼠 HSC中 Sm ad3m RNA表达增加 ,P<0 .0 5。注射 CCl4后 1周 Sm ad7m RNA较正常明显升高 ,P<0 .0 5 ,到第 4周和第 8周表达水平则持续下降 ,P<0 .0 1。提示 Sm ad3和 Smad7在肝纤维化发生、发展中对 HSC的活化及转化起不同的介导作用。     

FQ-RT-PCR法检测脐带血中β与γ珠蛋白mRNA的水平

目的 :探讨新生儿脐带血中 β与 γ珠蛋白 m RNA水平及其意义。方法 :用实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应技术检测 2 3例新生儿脐带血和 2 5例正常对照组外周血中 β与 γ珠蛋白 m RNA水平。结果 :脐带血中 γ/ (β+γ) m RNA比值 [(4 4 .0 8±2 2 .4 1 ) % ]明显高于正常对照组 [(1 .5 5± 4 .1 4 ) % ](P <0 .0 0 1 )。脐带血中胎儿血红蛋白 (Hb F)比值 [(5 8.1 1± 7.1 9) % ]也明显高于正常对照组 [(0 .6 3± 0 .32 ) % ](P <0 .0 0 1 )。结论 :脐带血中 γ/ (β+γ) m RNA及 Hb F水平增高 ,可能说明出生时 γ珠蛋白仍未完全关闭 ,尚有部分表达     

应激大鼠下丘脑血管紧张素原mRNA的表达

目的　观察应激时大鼠下丘脑血管紧张素原 m RNA表达及血管紧张素 含量的变化 .方法　雄性大鼠 48只随机分为 3组 ,游泳组予以 4℃～ 6℃冷水游泳刺激 ;电击组予以0 .5～ 2 Hz,6 0～ 10 0 V足底电刺激 ,每日 2次 ,每次 2 h,持续1wk;对照组不予任何刺激 .用原位杂交技术及放免分析法检测不同应激时大鼠下丘脑血管紧张素原 (Ang) m RNA的表达及血管紧张素 (Ang )含量的变化 .结果　应激大鼠下丘脑 Ang m RNA阳性表达面积百分比与积分吸光度均显著增高 .游泳组 (2 .48± 0 .40 ) %与 (0 .75± 0 .0 9) ,电击组 (2 .94± 0 .82 ) %与 (1.83± 0 .41) vs对照组 (0 .2 0± 0 .0 4) %与 (0 .2 4± 0 .12 ) ,P<0 .0 1;Ang 含量也显著增高 .游泳组 (141±6 7) ng· g- 1 ,电击组 (84± 2 5 ) ng· g- 1 vs对照组 (5 6± 16 ) ng· g- 1 ,P<0 .0 1,P<0 .0 5 ,且 Ang m RNA表达增高率 (12 16± 196 ) %和 (144 1± 40 2 ) % ,超过了 Ang 含量的增高率(2 95± 118) %和 (149± 44 ) % ,P<0 .0 1.结论　应激时下丘脑肾素 -血管紧张素系统 (RAS)被显著激活 ,进一步支持局部RAS参与了应激反应的观点 .     

咬合力丧失对大鼠牙周组织中iNOS表达的影响

目的:研究咬合力丧失后诱导型一氧化氮合酶(iNOS)影响牙周组织改建的分子机制.方法:选用Wistar大鼠建立咬合力丧失的动物模型,按照拔牙后的各时间段不同随机分8组,采用HE、免疫组化染色法,观察牙周细胞中iNOS的表达.结果:光镜下观察到实验组的牙周组织较正常改建明显.免疫组化染色结果:阳性物质iNOS在牙周膜中的表达实验组较对照组有显著增强,尤其是第2 d和第3周组(P＜0.01).结论:咬合力丧失促使牙周组织中iNOS的表达发生变化,提示iNOS很有可能是影响牙周组织改建的一个重要因素.     

复方中药对肝硬化大鼠I型胶原mRNA表达的影响

目的　探讨中药对肝硬化大鼠肝组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法　采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)测定大鼠肝组织Ⅰ型胶原mRNA表达水平。结果　治疗组大鼠肝组织Ⅰ型胶原mRNA表达 ( 0 70 9± 0 12 5 )显著低于模型组( 1 0 15± 0 14 5 ) ,P <0 0 5。与对照组 ( 0 696± 0 164)相比无显著差异。结论　复方中药能显著降低肝硬化大鼠Ⅰ型胶原mRNA的表达     

洛沙坦对慢性低氧大鼠肺动脉胶原和AT1受体表达的影响

目的　观察血管紧张素 受体拮抗剂洛沙坦对低氧大鼠肺动脉胶原和 1型血管紧张素 受体(AT1)的影响。方法　将 30只雄性 SD大鼠随机分为正常对照组、低氧组和低氧 +洛沙坦组 ,以常压低氧 3周复制肺动脉高压模型 ,治疗组经洛沙坦治疗两周 ,采用免疫组化法观察三组大鼠肺小动脉管壁 、 型胶原和 AT1受体表达的变化。结果　低氧组肺小动脉管壁的 型胶原染色强度 (1.5 2 0 2± 0 .0 6 9)与对照组 (1.132 4± 0 .0 71)相比 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,治疗组 型胶原染色强度 (1.16 37± 0 .0 6 2 )与低氧组比较 ,差异也有显著性 (P<0 .0 1)。三组间 型胶原和 AT1受体染色强度均无明显变化 (P>0 .0 5 )。结论　洛沙坦可减少肺小动脉管壁 型胶原的表达 ,可能为其降低低氧性肺动脉高压的作用机制之一。     

冠状动脉旁路移植术后影响静脉移植物内膜增生因素的实验研究

目的　研究静脉移植物内膜增生机理 ,为预防静脉移植物内膜增生寻找合理有效的途径。方法　 2 4只新西兰大白兔随机分为手术组和对照组。应用半定量方法分别于术后 2周、4周检测转化生长因子 β(TGF β)、胶原Ⅰ、胶原Ⅲ和血管紧张素Ⅱ受体 1(AT1R)mRNA表达水平。 结果　手术组各检测指标在各时点均明显高于对照组 (P <0 0 1)。术后 2周时 ,TGF β(4 0 5± 0 4 9vs 2 0 5±0 2 6 ) ;AT1R(18 2 3± 1 32vs 4 6 1± 0 5 3)、胶原Ⅰ (1 80± 0 17vs 0 90± 0 18)、胶原Ⅲ (7 0 5± 0 6 8vs2 80± 0 17)各基因表达水平最高。结论　TGF β、AT1R在内膜增生中可能发挥着重要作用。持续的动脉压力作用是导致TGF β、AT1R大量表达的主要因素 ,并由此导致胶原纤维的大量合成和沉积。     

Graves眼病外周血单核细胞糖皮质激素受体表达类型

目的　研究甲状腺功能正常型 Graves眼病患者外周血单核细胞糖皮质激素受体表达类型变化。方法　用半定量 RT- PCR方法检测患者及正常对照组外周血单个核细胞 h GRα/ GRβm RNA比值 ,同时检测两组晨 8:0 0血浆总皮质醇水平。结果　两组的 h GRα/ GRβ m RNA比值分别为 7.5 8± 5 .42和 14.6 5± 8.30 ,两组间比较有统计学差异 (P<0 .0 5 ) ;皮质醇分别为 30 4.2 3± 92 .0 6和 313.73± 111.0 5 ,两组间比较无统计学差异 (P<0 .0 5 )。h GRα/ GRβ m RNA与血浆总皮质醇水平之间无相关关系。结论　 h GRα/ GRβ m RNA可能在 Graves眼病发病中起着一定作用     

腹腔感染时SOCS－3和GHR mRNA表达的变化与生长激素拮抗

目的 :探讨腹腔感染时细胞因子信号抑制因子 - 3(SOCS- 3)和生长激素受体 (GHR) m RN A表达的变化与生长激素拮抗的关系。　方法 :应用 RT- PCR方法测定对照组及腹腔感染组大鼠肝组织 SOCS- 3、GHR及 IGF- m RNA的表达 ;应用放射免疫法测定两组血浆中生长激素 (GH )的浓度。　结果 :腹腔感染组血浆中 GH的浓度较正常组明显升高 ,分别为 (0 .843± 0 .17) ng/ m l和 (0 .6 14± 0 .138) ng/ m l,差异显著 (P<0 .0 5 ) ;腹腔感染组大鼠肝组织 GHR m RNA的表达较正常组下降 5 7.2 % ;对照组大鼠肝组织微弱表达 SOCS- 3m RNA;腹腔感染组则表达明显增强 ,达 312 .8% ;腹腔感染组大鼠肝组织 IGF- I m RNA的表达明显下降 ,较对照组下降 45 .3%。　结论 :腹腔感染时 SOCS- 3m RNA的表达升高和 GHR m RNA的表达下降 ,可能促进了生长激素的拮抗     

TGF和bFGF对牙周膜细胞ALP活性及Fn合成的影响

目的探讨转化生长因子α,β(TGFα,β)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜(PDL)细胞碱性磷酸酶(ALP)活性及纤维结合蛋白(Fn)合成的影响。方法体外培养人PDL细胞,与一定浓度的TGFα,β或bFGF作用后,用ELISA法检测Fn含量,用酶动力学方法检测ALP活性。结果TGFα使PDL细胞合成Fn的水平(0.937±0.036)比对照组(0.687±0.023)增加了136.4%(P<0.05),TGFβ使Fn的水平(2.885±0.052)明显提高(P<0.001),bFGF组(0.738±0.041)则没有明显影响(P>0.05)。与对照组(2.431±0.051)相比,TGFβ(1.748±0.042)可抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.05),bFGF(1.138±0.046)显著抑制PDL细胞的ALP活性(P<0.01),TGFα(0.331±0.022)的抑制作用更强(P<0.01)。结论TGFα,β和bFGF可能通过调节PDL细胞的ALP活性和合成Fn的水平,发挥PDL细胞在牙周组织的再生中的作用。     

复方参七汤在人结肠癌细胞株裸鼠肝转移中的应用

目的 :建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型 ,研究复方参七汤对裸鼠肝转移的影响。方法 :对 2 4只BAL B/ C裸鼠 ,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌 (低分化腺癌 )细胞悬液 (L s174 t) 0 .1ml,含细胞数 1× 10 6个 ,切除脾脏 ,分成实验组和对照组各 12只。实验组每天喂以含 0 .6 ml/ 2 0 g体重复方参七汤颗粒饲料 ,对照组裸鼠喂以颗粒饲料 ,记录裸鼠体重、神志、摄食。喂养 3周后 ,抽取各组裸鼠心脏血后处死 ,观察腹腔内肿瘤生长情况 ,检查肝转移癌灶数目 ,挖出各个癌结节并称重。标本作病理组织学检查 ,同时采用免疫组化 (SP)方法检测肿瘤转移抑制基因 nm2 3H1- NDPK表达 ;采用巢式逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法 ,检测裸鼠血中 CK2 0 m RNA表达。结果 :(1)建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型 ,肝转移率 10 0 %。病理组织学证实肝转移癌细胞具有人结肠癌 (低分化腺癌 )特征。 (2 )实验组裸鼠实验前后体重增长 4 .12± 0 .5 3g,明显高于对照组 3.2 1± 0 .5 9g(P<0 .0 5 )。 (3)实验组裸鼠肝转移癌结节的数目 2 .4 2± 0 .99个 ,明显低于对照组 4 .17± 1.99个 (P<0 .0 5 )。(4 )实验组裸鼠肝转移癌重 6 3.6 7± 2 1.2 9m g,明显低于对照组 94 .32± 37.86 m g(P<0 .0 5 )。 (5 )实验组裸鼠肝转移癌重 /肝重     

银屑病患者血中糖皮质激素及其受体mRNA的测定及其意义

目的　研究银屑病患者体内糖皮质激素水平及其受体基因表达的变化 .方法　用酶免疫法测定了 2 2例银屑病患者、15例临床治愈的银屑病患者和 2 0例正常人对照组血清糖皮质激素水平 ,用 RT- PCR方法检测 12例银屑病患者和10例正常人对照血白细胞糖皮质激素受体 m RNA的表达水平 .结果　银屑病患者组血清糖皮质激素水平 (0 .5 8± 0 .0 7μmol· L- 1 )高于银屑病临床治愈组 (0 .49± 0 .11μmol· L- 1 )和正常对照组 (0 .48± 0 .10 μmol· L- 1 ) ,差异有极显著性(P<0 .0 1) ,银屑病患者组血白细胞糖皮质激素受体 m RNA表达明显低于正常对照组 (P<0 .0 1) .结论　银屑病患者体内糖皮质激素浓度不低于正常水平 ;银屑病患者组血白细胞糖皮质激素受体 m RNA表达低于正常水平 ,提示银屑病患者体内促肾上腺皮质激素释放激素 -糖皮质激素 -糖皮质激素受体系统平衡失调 ,可能与银屑病的发病有一定关系     

哇巴因与地高辛对大鼠肝脏钠泵A亚单位基因表达的影响

目的　观察哇巴因与地高辛对大鼠肝脏钠泵基因表达的影响 .方法　分别给大鼠注射哇巴因 (2 0 μg· kg- 1·d- 1 )、地高辛 (32 μg·kg- 1·d- 1 )和生理盐水 (1m L· kg- 1·d- 1 ) ,观察给药后 6wk大鼠血压的动态变化 ;并分别应用分子生物学 RT- PCR及免疫组织化学技术 ,探讨各组大鼠肝脏钠泵 α1 ,α2 及 α3 亚单位 m RNA及蛋白水平基因表达的改变 .结果　给予哇巴因 2 wk后大鼠血压开始升高 ,至 6 wk时明显高于生理盐水组 (17.7± 1.2 ) vs(15 .4± 1.1) k Pa,P<0 .0 1) ,而实验过程中地高辛组血压与对照组比较差异不明显 .无论是在 m RNA水平还是在蛋白水平 ,哇巴因对大鼠肝脏钠泵α1 亚单位表达无影响 ,而地高辛使α1 亚单位表达增强 ;两组大鼠 α2 亚单位表达均无改变 ;哇巴因使 α3 亚单位蛋白水平表达减弱 ,而 m RNA水平增强 ,地高辛组大鼠肝脏钠泵 α3 亚单位无论在 m RNA水平及蛋白水平表达均增强 .结论　哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 ,为进一步揭示内源性哇巴因生理与病理作用以及洋地黄类药物药理与毒理作用的分子机制提供了理论及实验依据     

超排卵时卵巢对促性腺激素的反应与颗粒细胞促卵泡激素受体的表达

目的 :探讨促排卵周期卵巢对促性腺激素反应性与颗粒细胞促卵泡激素受体 (FSHR)表达的关系。方法 :根据取卵时卵泡发育数不同 ,将卵巢对促排卵药物的反应分为低反应型 (卵泡数≤ 3个 )、中反应型 (卵泡数 4～13个 )和高反应型 (卵泡数≥ 14个 ) ,分别为 11例、15例和 13例。采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)测定 3种反应类型的卵泡颗粒细胞 FSHR m RNA的表达量。结果 :低反应型 FSHR m RNA表达量显著低于中、高反应型 (相对积分值分别为 0 .5 4± 0 .0 7、0 .90± 0 .17和 1.2 0± 0 .4 5 ,P<0 .0 5 )。结论 :卵巢对促性腺激素的反应与颗粒细胞FSHR m RNA的表达量高低有关。     

白血病抑制因子在原发不孕症患者子宫内膜的表达

目的 :探讨白血病抑制因子 ( LIF)在子宫内膜的表达与原发不孕症的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术 ,检测 30例原发不孕症患者 (观察组 )和 2 0例对照组患者分泌中晚期子宫内膜 LIF m RNA的表达。结果 :对照组患者分泌中晚期子宫内膜 LIF m RNA的表达水平为 1 .872± 0 .431 ,观察组为 0 .42 6± 0 .1 0 8,两组相比 ,差异有显著性 ( P<0 .0 0 1 )。结论 :LIF表达的减少或缺失 ,可能是原发不孕症的原因之一     

地塞米松调节基质金属蛋白酶-2对哮喘大鼠气道重建的影响

目的　观察地塞米松对气道重建的影响 ,并探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )与金属蛋白酶组织抑制物 - 1(TIMP- 1)间的平衡在其中的作用。方法　 30只雄性 Wistar大鼠随机分为哮喘组、地塞米松组和对照组 ,每组10只。动物处死后行支气管肺泡灌洗 ,收集灌洗液作细胞学检查。肺组织作病理切片 ,HE染色 ,采用计算机图象分析技术测定支气管基底膜周径 (Pbm ) ,总管壁面积 (WAt) ,内壁面积 (WAi) ,平滑肌面积 (WAm )等反映气道壁厚度的指标。半定量逆转录聚合酶连反应 (RT- PCR)技术分析肺组织中 MMP- 2与 TIMP- 1m RNA的表达。结果　 1哮喘组 WAt/ Pbm,WAi/ Pbm及 WAm / Pbm (分别为 2 5 .3± 2 .1μm2 /μm ,2 0 .4± 2 .3μm2 /μm ,4 .2± 2 .0μm2 /μm )与对照组 (2 0 .8± 1.3μm2 / μm,15 .3± 2 .1μm2 / μm,3.1± 1.1μm2 / μm)比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,对照组与地塞米松组 (2 1.3± 2 .4 μm2 / μm,14 .2± 2 .5 μm2 / μm,3.2± 1.0 μm2 / μm)比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。2哮喘组的MMP- 2及 TIMP- 1m RNA水平 (0 .6 8± 0 .14 ,0 .5 6± 0 .10 )与对照组 (0 .14± 0 .0 3,0 .11± 0 .0 5 )比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,哮喘组与地塞米松组 (0 .37± 0 .11,0 .31± 0 .10 )