不同剂量γ射线照射后胎儿骨髓CD34+造血干细胞死亡规律

目的 探讨不同剂量γ射线照射后胎儿骨髓CD34^ 造血干细胞的死亡规律。方法 以流式细胞术PE－CD34^ ／FITC－AmnexinV/7AAD三色荧光法、多参数分析了受不同剂量γ射线照射后,不同时间点的胎儿骨髓CD34^ 造血干细胞凋亡、坏死和存活的时效和量效变化特点。结果 受大剂量率γ射线1次5Gy和8Gy照射后,和骨髓CD34^ 造血干细胞的死亡是在照射后为期1周的连续性死亡,既有凋亡又有坏死,但是以凋亡为主;受大剂量率γ射线1次10Gy和12Gy照射后,胎儿骨髓CD34^ 造血干细胞则在受照后当天即大量坏死,在持续1周内全部死亡。结论 受大剂量率γ射线1次照射后,造血干细胞在1周内发生了增殖期死亡而连续性空出所占据的龛位。     

不同剂量γ射线照射后胎儿骨髓CD34~ 造血干细胞死亡规律

目的　探讨不同剂量γ射线照射后胎儿骨髓CD34 造血干细胞的死亡规律。方法　以流式细胞术PE -CD34 FITC AnnexinV 7AAD三色荧光法 ,多参数分析了受不同剂量γ射线照射后 ,不同时间点的胎儿骨髓CD34 造血干细胞凋亡、坏死和存活的时效和量效变化特点。结果　受大剂量率γ射线 1次 5Gy和 8Gy照射后 ,胎儿骨髓CD34 造血干细胞的死亡是在照射后为期 1周的连续性死亡 ,既有凋亡又有坏死 ,但是以凋亡为主 ;受大剂量率γ射线 1次 10Gy和 12Gy照射后 ,胎儿骨髓CD34 造血干细胞则在受照后当天即大量坏死 ,在持续 1周内全部死亡。结论　受大剂量率γ射线 1次照射后 ,造血干细胞在 1周内发生了增殖期死亡而连续性空出所占据的龛位     

γ射线对培养的兔血管平滑肌细胞的抑制作用

目的 观察体外培养的兔动脉平滑肌细胞(SMCs）对7射线照射的剂量效应关系，探讨电离辐射抑制SMCs增殖的细胞生物学机理。方法 静止期SMCs分别给予γ射线2．5，5，10，20及30Gy一次性照射后继续培养4，24或72h。以^3H—TdR掺入法、流式细胞术分析、微核实验和电镜观察γ射线对SMCs的DNA合成、增殖周期和损伤的影响。结果 在2．5Gy以上剂量γ射线一次性照射时，SMCs增殖明显抑制，细胞G0／G1期阻滞，均呈剂量依赖性。2．5Gy以下剂量γ射线照射后24h左右可见细胞凋亡增加，2．5Gy以上剂量7射线照射可使SMCs发生坏死。结论 电离辐射能抑制SMCs增殖，使细胞产生G0／G1期阻滞，并呈剂量依赖关系。SMCs死亡方式与受照射剂量有关。     

小鼠受γ射线全身照射后FL表达变化的研究

目的 FL(fit3 ligand)是一种作用于早期造血细胞的生长因子，为进一步研究FL水平与辐射所致造血损伤的相关性，观察了小鼠受γ射线全身照射后FL的表达变化。方法以^60Coγ射线全身一次性均匀照射所致骨髓型急性放射病小鼠为模型，应用ELISA、流式细胞术、Western blot法检测照射前后小鼠外周血、骨髓、胸腺与脾脏中FL的表达变化。结果 小鼠受2～10Gyγ射线照射后24h，血清中FL浓度即有增加，并且随时间推移FL水平逐渐升高；吸收剂量在2～6Gy之间时，FL的水平随剂量增加而增加。6Gyγ射线照射后24h，外周血白细胞膜表面FL的表达增加，但24h后细胞膜表面FL的表达没有升高。6Gyγ射线照射后24h，骨髓、胸腺和脾脏有核细胞膜表面FL的表达明显升高，总蛋白中FL的水平亦明显增加。结论 辐射后早期小鼠FL可溶性与膜结合型蛋白的水平都有升高，而且辐射后血清中FL的水平与受照剂量及照射后时间存在相关性。     

小剂量γ射线全身照射对小鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响

目的 探讨小剂量γ射线全身照射后对小鼠中枢神经系统的影响.方法 将50只C57小鼠按随机表法分为健康对照组及0.5和1 Gy照射组.用60Co γ射线全身照射,吸收剂量为0.5和1 Gy,吸收剂量率为19.2 cGy/min,连续照射3d,1次/d,照射后24和48 h取小鼠脑组织并匀浆,用高效液相色谱荧光法(HPLC)测定匀浆上清中氨基酸类神经递质(谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸及甘氨酸)含量.结果 与健康对照组相比,0.5Gyγ射线照射后48 h以及1 Gy照射后24和48 h,小鼠脑内谷氨酸和天冬氨酸含量表达增高(t=- 4.080、- 3.935、-4.416、- 3.630、-4.831和- 4.656,P＜0.05);而0.5Gyγ射线照射后24 h小鼠脑内谷氨酸、天冬氨酸含量无明显改变.各照射组小鼠脑内γ-氨基丁酸和甘氨酸含量与健康对照组比较,差异无统计学意义.结论 小剂量γ射线短期全身照射对小鼠中枢神经系统具有轻度的兴奋作用.     

X射线照射诱导小鼠junB基因的表达

目的探讨整体照射和不同剂量X射线离体照射后小鼠脾细胞和白血病细胞junB基因的表达。方法3Gvx射线小鼠全身照射及不同剂量X射线照射离体脾细胞和白血病细胞，提取RNA，Northern杂交，定量分析junB mRNA。结果3Gyx射线全身照射后，小鼠脾细胞junB基因增强明显并迅速，C3H／He小鼠30min达高峰，BALB／c小鼠60min达高峰；不同剂量X射线照射离体脾细胞和白血病细胞后，junB基因也迅速被诱导，30～60min达峰值，240min逐渐降回假照组水平。结论junB基因是一个辐射敏感基因，照射后立即表达，有可能在信号传递中起重要作用。     

中子和γ射线照射对小鼠骨髓造血细胞死亡方式的探讨

目的探讨中子和γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞的死亡方式及其意义。方法采用不同剂量中子和^60Coγ射线全身照射350只BALB／c小鼠，通过光镜、电镜、流式细胞术、原位末端标记和DNA凝胶电泳等观察造血细胞凋亡与坏死情况。结果中子照射后小鼠骨髓中坏死和凋亡的造血细胞均明显增多，5．5Gy组以坏死为主；而γ射线照射后则以凋亡为主，且呈剂量相关性。凋亡的细胞表现为核染色质浓缩、边移，呈半月型、环状或不规则状，凋亡小体形成，电泳下见DNA梯状图谱。坏死的细胞表现为核肿胀、溶解，线粒体膜、核膜等膜性结构破坏。结论2．5～5．5Gy中子及5．5～12Gy γ射线照射可使骨髓造血细胞死亡方式不同：中子照射见凋亡与坏死并存，5．5Gy组以坏死为主；而γ射线照射则以凋亡为主。     

人巨噬细胞集落刺激因子(hM-CSF)对60C0γ射线照射后小鼠血细胞生成的影响

本文研究了人巨噬细胞集落刺激因子(hM-CSF)对经亚致死剂量⁶⁰COγ射线照射后小鼠血细胞生成的影响。细胞生成的影响。结果显示hM-CSF可刺激照射后小鼠CFU-M和CFU-S的形成,并增加BMC的数量。hM-CSF还可以增加照射小鼠外周血白细胞的总数,且增加的白细胞主要为单核细胞和中性粒细胞。hM-CSF对外周血红细胞和血红蛋白的影响无显著意义.上述结果提示hM-CSF可促进⁶⁰Coγ射线照射小鼠造血功能的恢复。     

造血干细胞移植前全身分次照射的临床研究

目的探讨造血干细胞移植前全身照射的剂量与并发症。方法1999年5月至2005年10月对312例造血干细胞移植病人进行了全身放射治疗的预处理。采用~(60)Coγ射线照射,吸收剂量率为(5.2±1.13)cGy/min,照射总剂量7～12Gy,1次/d,共2d。根据照射总量分为两组:高剂量组(≥10Gy)139例和低剂量组(<10Gy)173例。比较不同剂量组的毒、副作用、造血重建和植活率等。结果高剂量组除胃肠反应和口腔炎发生率高于低剂量组外,其他早期毒、副作用、造血重建和植活率等均与低剂量组差异无统计学意义。结论采用5cGy/min吸收剂量率,照射总剂量7～12Gy,1次/d,共2d,肺中位剂量控制在7.5Gy,是安全、有效的造血干细胞移植全身照射预处理方案。     

X射线胸部照射对小鼠精子发生的影响

目的:探讨X射线胸部照射对雄性成年小鼠精子发生的影响。方法:将24只健康雄性成年C57BL/6小鼠(6~8周龄)按照随机数表法分为X射线照射组(Radiation)和假照射组(Sham),每组12只。胸部照射面积为1.5 cm × 2 cm,剂量率3.04 Gy/min,8 Gy/d,连续照射3 d,总剂量24 Gy,...     

β和γ射线照射肿瘤细胞的生物效应比较

目的 比较低剂量率β射线和高剂量率γ射线照射诱发肿瘤细胞生物效应特点。方法采用^32Pβ射线和^60Coγ射线照射人宫颈癌HeLa细胞系，用台盼蓝排除法和X-gal衰老细胞染色法比较两种照射肿瘤细胞死亡方式的差异。结果 ^32Pβ射线(0．375cGy/min)和^60Coγ射线(206cGy/min)照射HeLa细胞后72h的结果表明，低剂量率β射线抑制细胞增殖为渐进性，使多数的细胞在一个或几个细胞倍增周期后死亡，以增殖性死亡为主；高剂量率γ射线对细胞的抑制作用直接、迅速，细胞坏死比例高，增殖性死亡(衰老)比例低于持续低剂量照射方式。结论 不同的辐射方式对细胞的杀伤方式不同，了解其放射生物学机理有助于临床治疗方案的选择。     

γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响

目的观察γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响。方法取正常分娩的新生儿脐带血,体外肝素抗凝,应用常规密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(MNC),计数并调整细胞浓度。Gamma Cell 1000数控细胞照射仪体外照射脐血MNC细胞,吸收剂量率3.72 Gy/min。①采用3H-TdR掺入法测量脐血淋巴细胞增殖:取已分离的单个核细胞,调至细胞浓度1×106个/ml,接受0.248、0.496、0.992、1.984、3.9685、.952、7.936和15.872 Gyγ射线照射。照射后继续培养56 h后加3H-TdR(3.7×107Bq/孔)再培养8 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数(计数/min)。②采用3H-TdR释放法检测脐血NK细胞活性:取传代培养24~48 h的K562细胞为靶细胞,调整浓度1×106个/ml,加入3H-TdR(3.7×108Bq/ml)孵育6 h,洗涤2次去除游离的3H-TdR,再制备成5×105个/ml备用。脐血单个核细胞调整细胞浓度为1×107个/ml作为效应细胞(效靶比20∶1),给以上述不同剂量γ射线照射。将效应细胞与制备好的靶细胞继续培养18 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数。结果在γ射线对脐血淋巴细胞增殖活性影响的研究中,0.248~15.872 Gyγ射线照射显著降低淋巴细胞增殖能力,增殖活性抑制程度与辐射剂量呈正相关(r=0.839,P<0.05);3.968 Gyγ射线照射组增殖活性仅为对照组的30.86%(P<0.01),SI=7.8,其中3.968~15.872 Gyγ射线照射未发现其明显的增殖活性。而γ射线对脐血NK细胞活性的影响的观察中发现0.248~1.984 Gyγ射线照射可引起脐血NK细胞活性显著增高(P<0.01);3.968 Gyγ射线照射保持NK细胞活性,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);5.952~15.872 Gyγ射线可引起脐血淋巴细胞NK细胞活性显著降低(P<0.01)。结论3.968 Gyγ射线照射完全抑制脐血淋巴细胞增殖的同时仍呈现脐血NK细胞抗肿瘤活性。因此,在进行供者淋巴细胞输注或混合脐血移植时,应用3.968 Gyγ射线照射淋巴细胞,再进行过继性细胞免疫治疗可能降低移植物抗宿主病效应,同时不影响移植物抗白血病效应;混合脐血移植时增强移植物抗白血病效应。     

培养小鼠骨髓细胞半同系移植研究的补充材料

用体外培养不同时间的C57BL/6雄性小鼠骨髓细胞移植到受致死剂量γ线照射的DBF_1雌性小鼠,记录受照射小鼠30天和60天的活存率,并分析造血和免疫功能的主要指标.对部分长期活存小鼠(60～110天)的骨髓细胞和淋巴细胞的染色体核型作细致观察,了解移植进去的造血细胞是否已被植入,结果表明移植培养骨髓细胞的受照射小鼠活存率远较照射对照组为高,造血与免疫功能明显地重建,这无疑是由于移植骨髓在照射动物中形成稳定的辐射嵌合体所致.     

γ射线与微波复合作用对小鼠造血系统功能及形态学的影响

目的探讨γ射线和微波复合照射对造血系统的损伤特点及规律,为进一步研究其损伤机制提供理论和实验基础。方法216只雄性昆明小鼠随机分为对照组、γ射线照射组（5．5Gy,简称射线组）、微波照射组（50mW／cm^2,简称微波组）及γ射线与微波复合照射组（5．5Gy＋50mW／cm^2,简称复合组）。^60Co γ射线（剂量率为91．1cGy／min）全身一次性照射后立即进行微波全身辐照（S波段,平均功率密度为50mW／cm^2）5min。分别于照射后6h及1、3、7、14、28、90、180天活杀取材,观察胸骨骨髓组织学变化,并采股静脉血行常规检测,同时对复合照射后6h及第1、3、7天的胸骨骨髓进行超微结构观察。结果组织学观察发现无论γ射线还是复合照射均可导致骨髓组织经历典型的凋亡坏死、空虚、再生修复及恢复4个阶段的病理改变,但复合组的病变重于射线组,恢复也更为迟缓。外周血象检查发现小鼠经γ射线及复合照射后白细胞、红细胞、血小板数和血红蛋白含量均呈进行性下降,于照射后期逐渐恢复,但复合组比射线组下降更明显,恢复也更缓慢。超微结构观察发现复合照射后骨髓造血细胞出现明显的变性、凋亡及坏死等改变,以照射后6h最明显。结论一定剂量的γ射线和一定强度的微波复合照射可严重损伤小鼠造血系统,表现为骨髓组织发生明显的形态学改变和功能障碍,其损伤效应主要以γ射线为主,微波在一定程度上加重了γ射线的损伤。     

不同LET射线及其联合照射下淋巴母细胞微核率的剂量效应

目的 探讨在α粒子、γ射线以及联合照射下淋巴母细胞微核率的剂量效应.方法 以HMy2.CIR淋巴母细胞为对象,分别以不同剂量的α粒子和γ射线进行照射,以及先以0.025 ～0.500 Gy的α粒子照射后即刻以不同剂量的γ射线进行照射,用胞质分裂阻断法检测淋巴细胞微核,建立不同照射条件下淋巴母细胞微核率的剂量-效应曲线.结果 对于γ射线照射,微核率剂量-效应符合线性平方模型Y=c+αD+ βD2.对于α粒子照射,当照射剂量＜0.250 Gy时,细胞微核率随剂量的增加呈线性增加,当其剂量进一步增加时,微核率剂量-效应曲线呈现下弓型,可以采用反映辐射旁效应的BaD模型Y=c +αD +σ[1 -exp(-δD)]exp(-βD)进行很好地拟合.对于联合照射,当α粒子剂量较低时,微核率的剂量效应与γ射线照射时的相似;但当α粒子剂量较大时,微核率的剂量-效应更接近于α粒子照射.同时,0.2、0.5 Gyα粒子联合γ射线照射引起的微核率显著高于它们单独照射时的微核率之和(=5.22 ～ 11.86,P＜0.05).结论 α粒子照射具有与γ射线不同的辐射损伤规律,辐射旁效应可能在其中发挥了重要作用,而联合照射则可以引起细胞损伤的协同增强.     

大鼠~(60)Coγ射线全身和局部屏蔽照射后外周血T_μ与T_γ淋巴细胞的改变

本文用细胞化学方法研究了大鼠~(60)Coγ射线照射后外周血T_μ和T_γ淋巴细胞的改变.辐射剂量分别为4.5和8.5Gy.研究结果指出,大鼠经~(60)Coγ射线全身与局部屏蔽照射4.5和8.5Gy后1、5、10及28天,外周血T_γ淋巴细胞百分数在骨髓严重损伤阶段明显增加,而T_μ淋巴细胞百分数则显著下降,以后随着损伤过程的逐渐减轻,T_γ淋巴细胞百分数的增高与T_μ淋巴细胞百分数的下降也逐渐减弱,最后在基本恢复阶段T_μ和T_γ淋巴细胞百分数基本接近对照水平.文中着重讨论了照射大鼠骨髓造血损伤过程中形态学改变与外周血T_μ和T_γ淋巴细胞改变间的关系.     

不纯泊松分布法在6 MV X射线局部照射剂量估算中的应用

目的从离体和活体两方面探索不纯泊松分布法估算6MV X射线局部受照射剂量和受照射份额的适用性。方法2、4Gy6MV X射线离体照射健康人外周血，受照射份额为20％、50％和80％模拟局部照射；选择2、3Gy6MV X射线局部放射治疗的肿瘤病人，观察首次放射治疗前、后24h外周血淋巴细胞染色体畸变，采用不纯泊松分布法，估算受照射剂量和份额。结果2Gv离体照射50％、80％份额和4Gy照射20％、50％、80％份额的淋巴细胞双着丝粒 环(dic r)畸变呈过分散分布，受照射剂量和份额估算值与实际值基本吻合。单次2Gy盆腔照射、受照射局部红骨髓比例大于20％或3Gy全颅照射放射治疗病人的外周血淋巴细胞dic r畸变呈过分散分布，估算的受照射份额与受照射局部红骨髓比例相接近，较大剂量3Gy放疗时估算的受照射剂量较为准确。患者局部放射治疗后与放射治疗前离体模拟的实验结果都显示较好的一致性。结论采用不纯泊松分布法可以比较准确的估算离体和活体局部受照射剂量和份额，适用于照射剂量较高和照射份额不是太小的低LET射线，受照射局部红骨髓占全身的比例可大致反映局部照射的份额。     

大剂量rhG-CSF早期单次给药对60Co γ射线照射小鼠的治疗作用

目的观察大剂量rhG-CSF早期单次给药对60Coγ射线照射小鼠的治疗作用,为细胞因子治疗急性放射病提供实验依据。方法雄性C57小鼠,经8.0Gy60Coγ射线全身照射后于0.5、24h各皮下注射一次不同剂量rhG-CSF(2、1mg/kg和0.5mg/kg),观察致死剂量照射小鼠的30d存活率及平均生存时间。小鼠经6.0Gy60Coγ射线全身照射后,通过不同给药方案及不同剂量rhG-CSF早期干预,观察亚致死剂量照射小鼠的外周血象和骨髓有核细胞数的变化。结果大剂量rhG-CSF早期干预明显提高致死剂量照射小鼠的30d存活率,延长受照射小鼠的平均生存时间。照射后0.5h单次给予大剂量rhG-CSF(1mg/kg)为最佳给药方案。大剂量rhG-CSF早期单次给药可以明显改善6.0Gy照射小鼠外周血中白细胞、红细胞、血小板及骨髓有核细胞的恢复。结论大剂量rhG-CSF早期单次给药对60Coγ射线照射小鼠有良好的治疗作用。     

出生前注入氚水和γ射线照射诱发大鼠脑细胞缺失的相对生物效应研究

对两组妊娠11天的大鼠分别注入氚水(HTO)和以¹⁸⁷CsY射线连续照射, 以仔鼠出生后18天时大脑皮质锥体细胞数的变化为生物终点, 观察两种辐射的剂量效应曲线, 并将两者比较, 求出氚的RBE值。结果表明，在两种射线照射下，仔鼠大脑锥体细胞数皆随剂量增加而减少(P＜0.01).仔鼠受β和137Csγ射线照射,吸收剂量范围分别为0.012～1.32Gy,大脑锥体细胞缺失率Y与计量D均可拟合成对数直线回归方程,Y_β=27.1+8.3LgD和Y_p=18.5+13.9LgD.氚吸收剂量为1.7～0.17Gy时RBE值为3.4～8.5.     

中子-γ射线混合照射对小鼠骨髓DNA合成的影响

以小鼠的致死效应和某些造血系统指标为观察终点的工作证明:中子-γ混合射线的相对生物效应(RBE)与中子和γ射线的比例有关。在混合照射总剂量中增加中子的份额将导致RBE值的增加。一般认为,DNA是细胞中辐射敏感部位,或者说DNA是射线作用的靶分子。作为辐射敏感组织的骨髓,受照射后其DNA