硝普钠对HL-60细胞诱导分化作用的观察

我们曾报道了有关外源性一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)诱导HL 6 0细胞凋亡及其分子机制的研究。实验中发现低浓度SNP在体外还可诱导HL 6 0细胞分化,并对细胞分化作用的分子机制进行了实验研究。材料和方法1　主要试剂　外源性NO供体SNP为Sigma公司产品,DNA分析制备试剂盒(DNA Prepkit) [内含透膜剂,RNase和碘化丙锭(PI) ]为美国Beckman Coulter公司产品;突变型P5 3单抗(PAB2 4 0 )、Bcl 2单抗(83 8B)、Bax单抗(4F1 1 )及用于Bcl 2、Bax检测的透膜剂、CD1 1b、CD3 3 、CD1 4 、Fas及同型对照均为法国Immunotech公司产品;C…     

维生素K3和三氧化二砷在诱导白血病细胞凋亡中的协同作用

维生素Ｋ类药物作为止血药在临床应用已有多年。近年来的研究表明 ,维生素Ｋ类药物尚具有一定的抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用[1] 。最近 ,我们观察了维生素Ｋ3(ＶＫ3)对ＨＬ 6 0细胞的凋亡诱导作用及其与三氧化二砷 (Ａｓ2 Ｏ3)的协同作用 ,现将结果报道如下。材料和方法1　主要试剂　Ａｓ2 Ｏ3 购于哈尔滨医科大学附属第一医院 ,ＶＫ3 为无锡第七制药厂产品 ,小牛血清购自杭州四季青生物制品公司 ,ＡｎｎｅｘｉｎＶ/ＰＩ试剂盒购自法国Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ公司。2　细胞培养　ＨＬ 6 0细胞系引自中国科学院上海细胞生物学研…     

肿瘤坏死因子诱导肿瘤细胞凋亡及其调节机制的研究

背景肿瘤坏死因子(TNF)在体外能诱导某些正常细胞和大多数肿瘤细胞株(包括Hela细胞株)凋亡,其凋亡发生机制与细胞周期的关系中尚有许多问题需要探讨.目的研究细胞周期时相对TNF诱导Hela细胞凋亡的影响.设计非随机非对照实验研究.地点和对象实验在广东医学院生物化学与分子生物学研究所完成,对象为重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α,Sigma产品),Hela细胞株引自中国科学院上海细胞生物研究所.干预通过胸腺嘧啶核苷酸(TdR)阻断法阻滞Hela细胞的细胞周期,采用MTT法、流式细胞术和荧光染色分析TdR阻滞细胞和周期化的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性.主要观察指标TNF诱导TdR阻滞和周期化Hela细胞凋亡数.结果TdR阻滞细胞周期较周期化的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性降低.结论TNF诱导Hela细胞凋亡与细胞周期有关.     

三氧化二砷治疗恶性骨肿瘤肺转移的护理

三氧化二砷(As2O3)作为一种化疗药物,除常被用于治疗急性早幼粒细胞白血病外,它还可以用于诱导食管癌[1]、骨肉瘤[2]等实体肿瘤细胞的凋亡.近年来初步临床研究结果也表明,As2O3对部分恶性骨与软组织肿瘤有效.本研究应用As2O3联合其他化疗药物治疗恶性骨与软组织肿瘤肺转移取得了一定疗效,现报道如下.     

化疗药物诱导白血病细胞凋亡对Fas/FasL途径依赖性的研究

化疗药物除通过同各自的靶点直接作用外 ,也可以通过诱导细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞。文献报道化疗药物诱导白血病细胞凋亡与Ｆａｓ/ＦａｓＬ途径有关[1 3 ] ,我们对此进行了研究 ,并探讨化疗药物与ＦａｓＬ联用的疗效及其机制 ,期望为白血病的治疗提供新的线索。材料和方法1　主要试剂　柔红霉素 (ＤＮＲ)、阿糖胞苷 (Ａｒａ Ｃ)、碘化丙锭(ＰＩ)购自Ｓｉｇｍａ公司 ;原位末端标记 (ＴＵＮＥＬ)试剂盒购自博士德公司 ;可溶性Ｆａｓ配体 (ｓＦａｓＬ) ,小鼠抗人Ｆａｓ单抗 (ＩｇＧ1) ,白血病细胞系ＨＬ 6 0、Ｋ5 6 2、Ｕ937由华中科技大学同济…     

硫化砷诱导NB4细胞凋亡及细胞周期阻滞的研究

硫化砷(ａｒｓｅｎｉｃｓｕｌｆｉｄｅ,ＡＳ)包括三硫化二砷(Ａｓ2Ｓ3)及四硫化四砷(Ａｓ4Ｓ4)。Ａｓ2Ｓ3是雌黄的主要成分,Ａｓ4Ｓ4是雄黄的主要成分。我所近年应用硫化砷治疗急性早幼粒细胞白血病(ＡＰＬ),取得满意效果[1]。为研究ＡＳ治疗ＡＰＬ的机制,我们以ＮＢ4细胞为体外模型,探讨了ＡＳ对ＡＰＬ的作用,发现ＡＳ能够在体外诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,而二巯基丙醇能够部分抵消ＡＳ对细胞凋亡及细胞周期阻滞的诱导作用。提示ＡＳ是治疗ＡＰＬ的有效药物。材料和方法1　试剂　Ａｓ2Ｓ3购自美国Ａｃｒｏｓ公司,纯度99.99%,溶于ＲＰＭＩ…     

抗氧化剂槲皮素地人白血病HL—60细胞凋亡作用

槲皮素(ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ,Ｑｕｅ)是一种存在于多种植物中的黄酮类化合物,有较强的抗氧化作用[1]。以往的研究结果表明,Ｑｕｅ可抑制多种肿瘤细胞的生长,且可加强某些抗癌药物的抗癌作用[1,2];Ｑｕｅ对白血病细胞的ＤＮＡ合成有抑制作用[3]。因而,Ｑｕｅ被认为是颇具应用前景的抗癌药物或抗癌辅助药物,但Ｑｕｅ的作用机制尚未阐明。我们的研究结果显示,Ｑｕｅ可有效诱导人白血病ＨＬ60细胞发生凋亡,且引发抗凋亡基因ｂｃｌ2的蛋白发生降解。材料和方法1　试剂　Ｑｕｅ、噻唑蓝(ＭＴＴ)及碘化丙锭(ＰＩ)为Ｓｉｇｍａ公司产品,其它常用试剂…     

微波诱导成骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的：以人成骨肉瘤细胞系为研究对象，探讨微波诱导成骨肉瘤细胞凋亡及其适宜作用剂量、作用时间。方法：以微波不同作用剂量和时间，作用于人成骨肉瘤细胞。采用形态学观察，四唑兰显色法．软琼脂集落形成实验，FCM等方法观察微波诱导成骨肉瘤细胞凋亡。结果：寻找到了微波诱导成骨肉瘤细胞凋亡的最佳作用剂量和时间，分别为100W／m^2和1h。结论：微波辐射可诱导成骨肉瘤细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子诱导肿瘤细胞凋亡及其调节机制的研究

背景：肿瘤坏死因子(TNF)在体外能诱导某些正常细胞和大多数肿瘤细胞株(包括Hela细胞株)凋亡，其凋亡发生机制与细胞周期的关系中尚有许多问题需要探讨。目的：研究细胞周期时相对TNF诱导Hela细胞凋亡的影响。设计：非随机非对照实验研究。地点和对象：实验在广东医学院生物化学与分子生物学研究所完成，对象为重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α，Sigma产品)，Hela细胞株引自中国科学院上海细胞生物研究所。干预：通过胸腺嘧啶核苷酸(TdR)阻断法阻滞Hela细胞的细胞周期，采用MTT法、流式细胞术和荧光染色分析TdR阻滞细胞和周期化的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性。主要观察指标：TNF诱导TdR阻滞和周期化Hela细胞凋亡数。结果：TdR阻滞细胞周期较周期化的Hela细胞对TNF诱导凋亡的敏感性降低。结论：TNF诱导Hela细胞凋亡与细胞周期有关。     

HL-60细胞早期凋亡中端粒酶hTERT基因表达的变化

端粒酶活性在正常体细胞(生殖细胞和造血细胞除外)受到严格的抑制,而在98%的永生化细胞系和约90%的包括造血组织肿瘤在内的恶性肿瘤细胞中重新活化,其催化亚基的编码基因为ｈＴＥＲＴ[1,2]。近年来有关端粒酶的研究虽然已经较为深入,但关于药物诱导细胞凋亡过程中端粒酶催化亚基ｈＴＥＲＴ基因表达的研究尚未见报道。我们采用定量逆转录聚合酶链反应(ＲＴＰＣＲ)技术,对足叶乙甙(Ｖｐ16)诱导ＨＬ60细胞出现早期凋亡前后的端粒酶催化亚基ｈＴＥＲＴ的ｍＲＮＡ表达变化进行了探讨。材料和方法1　细胞株　ＨＬ60细胞株源自中国科学院上海细胞生…     

维生素K3诱导MR2细胞凋亡及其与三氧化二砷联合作用的体外研究

近年来 ,已有研究发现 ,维生素K3(VK3)对某些实体肿瘤和白血病细胞有诱导凋亡作用[1 ] ,然而其作用机制不十分清楚。我们在证实VK3对MR2细胞具有诱导凋亡作用的同时 ,观察其与三氧化二砷 (As2 O3)的联合作用 ,并进一步探讨VK3可能的作用机制。材料和方法1　主要试剂　VK3(亚硫酸氢钠甲萘醌 )注射剂购于无锡市第七制药厂。As2 O3购于美国Sigma公司。MDA试剂盒、谷胱甘肽 (GSH)试剂盒及超氧化物歧化酶 (SOD)检测试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。VK3使用时以RPMI 16 4 0溶解稀释 ,配制成所需浓度。 1.0mol LAs2 O3经NaOH溶…     

富铁对HL-60细胞增殖及化疗药物诱导其凋亡的影响

铁是细胞生长所必需的元素之一 ,是细胞代谢酶的必需成分 ,同时 ,铁还可激活催化ＤＮＡ合成的核糖核酸还原酶。动物实验表明富铁饲料可促进肿瘤的生长[1,2 ] ,肝癌细胞在富铁的培养基中生长更快 ,细胞团更大[3 ] 。因而 ,研究富铁对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响 ,对防止医源性铁过多和肿瘤治疗有重要的意义。新近我们探讨了富铁对白血病细胞株ＨＬ 6 0的增殖及对化疗药物诱导凋亡作用的影响 ,现报道如下。材料和方法1　细胞株　白血病细胞株ＨＬ 6 0引自华西医科大学细胞分子生物学实验室。2　细胞培养　ＨＬ 6 0细胞培养于含体积分数为 10 %灭…     

40 kV/m电磁脉冲辐照后大鼠海马区细胞凋亡研究

细胞凋亡是由基因控制的细胞自主的有序的死亡[1]。在以往的实验中,我们发现电磁脉冲(ＥＭＰ)对小鼠脑内儿茶酚胺类物质含量有影响[2],并且ＥＭＰ辐照后小鼠的学习、记忆能力也有改变(另文报道),但对ＥＭＰ辐照后动物海马细胞凋亡的研究尚未见文献报道,为进一步探讨ＥＭＰ...     

缺血性脑损伤中的细胞凋亡

近 10年研究表明 ,脑缺血时 ,除神经元坏死外 ,还有另外一种细胞死亡的形式——细胞凋亡 ,可能在缺血性脑损伤的病理过程中起重要作用。1　细胞凋亡概述　　细胞凋亡又称程序性细胞死亡 (programmed cell death,PCD) ,是美国病理学家 Kerr等 1972年提出的。细胞凋亡主要是指有核细胞在一定条件下 ,细胞表面分子接触到诱导因子刺激 ,并将信号传入细胞内部 ,通过启动其自身内部遗传机制 ,形成由基因控制的细胞主动死亡过程 [1 ] ,与坏死(necrosis)在形态学、生物化学及分子生物机制等方面有本质差别。细胞凋亡的形态学特征是 :1细胞表面皱缩…     

苦参碱诱导骨肉瘤细胞凋亡的实验研究

目的：探讨苦参碱对人骨肉瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法：将不同浓度的苦参碱作用于培养的OS732骨肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪和DNA凝胶电泳、电子显微镜技术观察检测细胞凋亡，研究分析其对骨肉瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。结果：苦参碱浓度为0．5、1．0、1．5g／l时，细胞毒性指数分别为12．1％、21．6％、39．5％；流式细胞术示骨肉瘤细胞的凋亡率分别为9．8％、16．9％、25．5％；DNA电泳见DNA“梯形”图谱；电镜显示细胞的凋亡形态。结论：苦参碱能显著抑制OS732细胞增殖、促进其凋亡。     

Rituximab体外直接诱导Daudi细胞凋亡

抗ＣＤ2 0 抗体Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ(中文商品名美罗华 )是第一个应用于临床的抗肿瘤单克隆抗体 (单抗 ) ,目前主要用于治疗低度恶性Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤及滤泡性淋巴瘤 ,总有效率约5 0 % [1 ] 。目前认为美罗华抗淋巴瘤的机制主要是通过抗体依赖的细胞介导性细胞毒作用 (ＡＤＣＣ)及补体介导的细胞毒作用 (ＣＤＣ)。对美罗华是否可以直接杀伤淋巴瘤细胞报道不一。我们用激光共聚焦技术及流式细胞术观察了美罗华在体外对Ｂｕｒｋｉｔｔ淋巴瘤细胞系Ｄａｕｄｉ细胞的诱导凋亡作用。材料和方法1　细胞培养　Ｄａｕｄｉ细胞由美国Ａｌａｂａｍ…     

细胞凋亡及其信号转导、凋亡抵抗与恶性肿瘤

细胞凋亡(apoptosis)源于希波哥拉得词语,指秋叶凋落而言.早在100多年前Carl Vogt就已发现,1972年Kerr和Wyllie提出了在形态上与坏死细胞的死亡不同,而称为细胞凋亡.近年的研究证实,凋亡与肿瘤的发生、发展、消退等存在密切的关系,其中,肿瘤细胞凋亡调控失调导致的细胞凋亡抵抗(resistance to apoptosis)是肿瘤发生的主要原因之一.细胞凋亡可被多种生理、病理刺激所诱发,是细胞对所处环境某些特定信息的一种应答反应,涉及细胞信号转导及调控.化疗主要是通过诱导细胞凋亡实现,因而这种凋亡抵抗机制在肿瘤耐药中起重要作用[1].凋亡抵抗也促进肿瘤逃脱机体的免疫监视.细胞凋亡信号转导和凋亡抵抗分子机制的阐明已成为肿瘤研究领域中的一个非常重要的课题,对通过调控细胞凋亡治疗肿瘤具有重要意义.现就细胞凋亡、细胞凋亡信号转导、凋亡抵抗和恶性肿瘤的关系综述如下.     

强恒磁场对大鼠移植癌细胞凋亡的影响

研究表明 ,癌细胞凋亡在肿瘤的发生发展中具有重要作用 ,促进癌细胞凋亡可以抑制肿瘤的生长。本研究通过强恒磁场诱导癌细胞凋亡的观察 ,从分子生物学水平上观察强恒磁场对肿瘤杀伤的作用机制。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　ＳＤ大鼠 80只 ,雄性 ,体质量 (2 5 0± 10 ) ｇ ,为封闭群动物。1.1.2　Ｗａｌｋｅｒ 2 5 6癌细胞株 ,引自上海医药工业研究所。1.1.3　 1.5Ｔ核磁共振成像系统 ,西门子公司产品。1.2　方法1.2 .1　Ｗａｌｋｅｒ 2 5 6腹水型移植癌模型复制 :Ｗａｌｋｅｒ 2 5 6瘤株复制按文献方法进行[1] ,复活后镜下计数存活细胞 ,…     

顺铂诱导人骨肉瘤细胞凋亡及其分子机制的初步研究

目的　研究顺铂 (c DDP)对人骨肉瘤细胞的生物学效应及其作用机制。方法　骨肉瘤细胞经 c DDP处理后 ,用台盼蓝技术法检测 c DDP的 IC50 ,采用流式细胞仪、DAPI荧光染色、TUNEL 及 DNA电泳检测细胞凋亡。结果　c DDP在一定浓度范围内以浓度依赖的方式抑制骨肉瘤细胞生长 ,其 IC50 为 1.0 5 μg/ ml± 0 .2 5 μg/ ml。 0 .5～ 2 .0 μg/ mlc DDP处理骨肉瘤细胞后 ,流式细胞仪检测出凋亡峰 ,流式细胞光度计下可见明显的凋亡细胞形态特征 ,琼脂糖凝胶电泳出现 DNA梯形条带。结论　c DDP在体外可诱导骨肉瘤细胞凋亡 ,这种诱导细胞凋亡的能力是 c DDP疗效的基础 ,在对骨肉瘤的治疗中有着巨大的潜力。     

检测白血病细胞凋亡的二苯胺法

现有细胞凋亡的定量方法操作复杂且需贵重试剂或仪器。定性方法又难以精细研究细胞凋亡这一现象。我们参照 Mangan等 [1]的方法 ,建立一种以二苯胺 (DPA)法测定 DNA片段率来分析细胞凋亡的简单方法 ,并以此方法分析白血病细胞株 HL- 60受抗癌药物鬼臼乙叉甙 (Etoposide)诱导时的凋亡情况。材料和方法一、细胞HL- 60细胞株 (本院血液病研究室提供 ) ,常规RPMI 1 640培养基 (Gbico产品 )培养 ,隔天换液 ,实验选用对数生长期的细胞 ,将细胞浓度调整至 1 0 6/ml,加入以二甲基亚砜 (DMSO)溶解的鬼臼乙叉甙(Sigma产品 ) ,最终浓度分别为 …