苯、甲醛致中国仓鼠肺成纤维细胞DNA损伤的联合作用初步探讨

探讨苯、甲醛致体外培养细胞的中国仓鼠肺成纤维细胞DNA损伤的联合作用方式.用正交设计方案,用甲醛(0,0.319 75,0.639 5μg/ml),苯(0,0.392,0.784 mg/ml),甲醛+苯(0.319 75 μg/ml+0.392 mg/ml,0.317 95μg/ml+0.784mg/ml,0.639 5μg/ml+0.392 mg/ml.0.639 5μg/ml+0.784 mg/ml)对中国仓鼠肺成纤维细胞染毒24 h,然后通过细胞凋亡试验、单细胞凝胶电泳和DNA交联试验检测苯、甲醛致细胞DNA损伤的联合作用方式.细胞凋亡试验、单细胞凝胶电泳和DNA交联试验结果经正交实验方差分析,苯与甲醛单独或联合作用于CHL细胞,在剂量设置范围内,随剂量增加细胞凋亡率增加,细胞DNA交联率增加;苯单独作用于CHL细胞,在剂量设置范围内,随剂量增加CHL细胞DNA断裂增加,甲醛单独作用于CHL细胞,在剂量设置范围内,低剂量组细胞DNA断裂高于高剂量组,且与溶剂对照组比较,差异均有统计学意义.此外,结果显示甲醛、苯两因素具交互作用(P＜0.05).苯、甲醛均可以引起体外培养细胞的DNA损伤,而且这种损伤作用具有剂量-效应关系.当苯与甲醛共同作用于体外培养细胞时,其引起的DNA损伤作用在一定浓度范围内具有协同作用.     

苯与甲醛致小鼠睾丸细胞DNA损伤联合作用

目的探讨苯与甲醛致小鼠睾丸细胞DNA联合损伤效应。方法采用单细胞凝胶电泳方法，分别检测苯染毒（剂量为50，200，800mg／kg）、甲醛染毒（剂量分别为0．3，1．2，4．8mg／kg）和苯＋甲醛复合染毒后小鼠睾丸细胞DNA损伤情况。结果在受试剂量范围内，小鼠睾丸细胞彗星率随苯或甲醛染毒剂量增加而增加（P〈0．01），其彗星尾长随苯染毒剂量增加而延长（P〈0．01），随甲醛染毒剂量增加而缩短，尤其高甲醛染毒组（P〈0．01）；复合染毒组中彗星尾长随联合染毒中苯染毒剂量增加而延长（P〈0．01），随联合染毒中甲醛染毒剂量增加而缩短（P〈0．01）。苯＋甲醛联合作用经析因素分析存在相加作用（P〈0.01）。结论苯和甲醛均能彼此增强各自所致的睾丸细胞DNA损伤效应。     

姜黄素对甲醛致A549细胞氧化损伤拮抗作用

目的 探讨姜黄素对甲醛致细胞氧化损伤的拮抗效应。方法 采用A549细胞株作为实验材料,实验设对照组、0.1 mmol/L甲醛染毒组,姜黄素组(0.1 mmol/L甲醛+2.5～20.0 mg/L姜黄素),检测A549细胞中一氧化氮合酶(NOS),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果 甲醛染毒组A549细胞SOD、NOS和GSH-Px活性分别为(21.79±1.13)、(1.88±0.16)与(27.83±0.2)U/mgprot,与对照组比较,SOD、NOS和GSH-Px活性明显下降(P<0.05),MDA含量[(3.87±0.153.87)nmol/mgprot]明显升高(P<0.05)。与甲醛染毒组比较,各姜黄素组GSH-Px活性上升、MDA含量下降(P<0.05),与对照组比较,40 mg/L姜黄素组GSH-Px活性、MDA含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 姜黄素可提高A549细胞抗氧化酶活性,并存在剂量效应关系。     

甲醛和苯联合致雄性小鼠生殖系统毒作用

目的 探讨甲醛和苯对雄性小鼠生殖系统的联合毒作用和机制.方法 108只昆明种雄性小鼠随机分为9组,按3×3析因设计,甲醛和苯染毒剂量分别为0(对照组),5,10 mg/kg和0(对照组),100,400 mg/kg,连续灌胃染毒5 d,35 d后处死,检测睾丸脏器系数、结构和细胞的凋亡及精子活力、畸型,睾丸三磷酸腺苷(ATP)酶活性、Ca²⁺含量和总抗氧化能力(T-AOC).结果 甲醛和苯联合染毒最高剂量组小鼠精子死亡率、畸型率和睾丸细胞凋亡率分别为(18.56±2.83)%,(22.03±1.35)%,(9.76±0.76)%,高于对照组(P<0.01);睾丸组织结构受损,睾丸T-AOC和Na⁺-K⁺-ATP、Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性降低,Ca²⁺含量增加,并呈剂量-效应关系;二者联合毒效应属于相加或协同作用.结论 甲醛和苯可致小鼠睾丸结构损伤,二者联合为相加或协同毒作用.损伤机制可能与睾丸细胞抗氧化能力降低、能量代谢障碍、钙超载有关.     

甲醛致V79细胞氧化损伤研究

为探讨甲醛的氧化应激损伤效应,采用V79细胞株作为实验材料,以0、50、100、200、400、800、1600 μmol/L的液态甲醛对细胞染毒,1 h后按照试剂盒说明书检测细胞总超氧化物歧化酶(SOD)活力、总一氧化氮合酶(NOS)活力以及丙二醛(MDA)含量.实验表明,液态甲醛可以使V79细胞的总SOD活力和总NOS活力呈现下降趋势,200μmol/L及以上浓度组与对照组相比下降更为显著(P＜0.05),而MDA含量则呈上升趋势,400μmol/L及以上浓度组与对照组相比升高更加明显(P＜0.05).本实验条件下,较高浓度的甲醛可以导致细胞的氧化应激损伤.     

液态甲醛致A549细胞氧化损伤效应分析

目的探讨甲醛的氧化损伤效应。方法采用培养A549细胞株作为实验材料,以不同浓度的液态甲醛（0、50、100、200、400、800、1600μmol/L）对细胞染毒1h后按照试剂盒说明书检测总超氧化物歧化酶（SOD）活力、总一氧化氮合酶（NOS）活力以及丙二醛（MDA）含量。结果400μmol/L及以上浓度甲醛可明显降低V79细胞的总SOD活力和总NOS活力（P〈0.05）,200μmol/L及以上浓度甲醛可明显使MDA含量升高（P〈0.05）。结论甲醛可以抑制A549细胞超氧化物歧化酶和一氧化氮合酶的活性,可使丙二醛含量增多。     

苯、甲醛对原代大鼠肺成纤维细胞联合毒性作用的初步探讨

甲醛共同作用于原代大鼠肺成纤维细胞时,其细胞毒性为相加作用.结论 根据共毒系数法,苯、甲醛各1/2 IC50混合染毒时,苯与甲醛对原代大鼠肺成纤维细胞的联合毒性作用表现为协同作用.     

甲醛和苯联合致小鼠脑细胞DNA损伤作用

近年来,由室内装修引起的室内空气污染问题日趋严重,已成为危害公共健康的重要环境因素之一.甲醛和苯是室内主要挥发性有机物,二者常具有共同污染源,可能对暴露人群产生联合毒性效应.为探讨甲醛和苯联合神经毒性作用,本研究采用单细胞凝胶电泳法和氯化钾-十二烷基磺酸钠(KCL-SDS)沉淀法测定小鼠脑细胞DNA损伤,观察不同浓度甲醛和苯单独及联合吸入染毒致小鼠神经系统毒性作用,为综合评价甲醛和苯的安全性提供科学依据.     

甲醛和苯单独及联合染毒对小鼠神经系统的毒性作用

[目的]研究甲醛和苯单独及联合染毒对小鼠神经系统的毒性作用,为综合评价甲醛和苯的联合毒性提供科学依据。[方法]选用健康清洁级昆明种纯系小鼠60只,随机分为10组,每组6只,雌雄各半,分别是阴性对照组（清洁空气）（GO）;低（1mg／m^3）（G1）、中（3mg／m^3）（G2）、高（5mg／m^3）（G3）剂量甲醛组;低（500mg／m^3）（G4）、中（1500mg／m^3）（G5）、高（2500mg／m^3）（G6）剂量苯组;低（0．5mg／m^3甲醛＋250mg／m^3苯）（G7）、中（1．5mg／m^3甲醛＋750mg／m^3苯）（G8）、高（2．5mg／m^3甲醛＋1250mg／m^3苯）（G9）剂量联合组。采用静式吸入染毒,每天2h,连续染毒14d。染毒结束后,采用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,并测定脑组织的氧化损伤水平。[结果]Morris水迷宫实验结果显示：在定位航行实验中,高剂量甲醛组,中、高剂量苯组和各联合剂量组小鼠逃避潜伏期长于对照组（P〈0．05）;与甲醛、苯单独组比较,中、高剂量联合组逃避潜伏期明显延长（P〈0．05）;在空间探索实验中,与对照组比较,中、高剂量甲醛组和高剂量苯组及各联合剂量组在目标象限游泳时间所占百分比减小（P〈0．05）;与甲醛、苯单独染毒组比较,各联合剂量组在目标象限游泳时间所占百分比均明显减小（P〈0．05）。甲醛和苯单独染毒中、高剂量组及各联合剂量组的SOD活力均低于阴性对照组（P〈0．05）;各剂量甲醛组、高剂量苯组和各联合剂量组MDA含量均高于其阴性对照组（P〈0．05）。与甲醛、苯单独染毒组比较,各联合剂量组SOD活力明显下降（P〈0．05）,MDA含量明显升高（P〈0．05）。[结论]较高剂量甲醛和苯单独染毒对小鼠神经系统有一定毒性作用,甲醛和苯联合染毒对小鼠神经系统的毒性作用大于甲醛、苯单独染毒时的作用,二者联合毒性可能具有协同作用。     

甲醛与苯对小鼠遗传毒性联合作用的研究

目的探讨甲醛和苯对小鼠遗传毒性的联合作用。方法将健康昆明种小鼠随机分为阴性对照组、甲醛组、苯组、联合组、阳性对照组,进行小鼠骨髓细胞微核试验及精子畸形试验。结果苯组、甲醛组和甲醛、苯联合组小鼠骨髓细胞微核率分别为（13．5±1．27）‰、（11．9±0．99）‰、（25．5±1．58）‰及精子畸形率分别为（101．2±4．22）‰、（94．8±3．71）‰、（167．2±3．78）‰,均明显高于各自的阴性对照组（P〈0．01）。析因分析表明,甲醛和苯联合染毒致小鼠骨髓细胞微核率及精子畸形率交互作用显著（P〈0．01）。结论析因分析量效曲线随染毒剂量增大而远离,甲醛及苯联合染毒对小鼠遗传毒性有协同作用。     

甲醛和三氯乙烯联合染毒对小鼠肾脏的氧化损伤作用

［目的］ 探究甲醛和三氯乙烯联合染毒对小鼠肾脏的氧化损伤作用。 ［方法］ 共108 只清洁级昆明种小鼠,按3×3 析因设计随机平均分为9 组：对照组（清洁空气）、甲醛低（1 mg/m3）、甲醛高（5 mg/m3）、三氯乙烯低（1 000 mg/m3）、三氯乙烯高（5 000 mg/m3）、甲醛低＋ 三氯乙烯低（1 mg/m3＋1 000 mg/m3）、甲醛低＋ 三氯乙烯高（1 mg/m3＋5 000 mg/m3）、甲醛高＋ 三氯乙烯低（5 mg/m3＋1 000 mg/m3）、甲醛高＋ 三氯乙烯高（5 mg/m3＋5 000 mg/m3）剂量组,每组12 只,雌雄各半。采用静式吸入染毒,每天2 h,连续14 d。染毒结束后测定肾组织总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量。［结果］ 小鼠肾组织T-AOC、SOD和GSH随染毒剂量升高而明显降低,MDA含量则明显上升,差异均有统计学意义（P 〈0.05）。其中,联合染毒对雌性小鼠T-AOC的影响存在一定交互作用,具有统计学意义（P 〈 0.05）,其他各指标的交互作用并不显著。 ［结论］ 甲醛和三氯乙烯吸入染毒对小鼠肾脏均具有氧化损伤作用,二者联合可能存在一定的交互作用。     

氧化剂致CHL细胞DNA损伤及酪醇的保护作用

目的 检测阿霉素、重铬酸钾和过氧化氢所致中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)DNA的损伤效应及酪醇对真核细胞DNA氧化损伤的保护作用.方法 CHL细胞用不同浓度化学物作用一定时间后(阿霉素:1.25h;重铬酸钾:1.75h;过氧化氢:2.5min),收获细胞用单细胞凝胶电泳技术检测DNA链断裂情况;CHL细胞先用不同浓度酪醇作用1.58h,再加入0.4mmol/L过氧化氢共同培养25min,然后用单细胞凝胶电泳技术测定DNA链断裂情况,分析酪醇的抗氧化损伤作用.结果 0.1μmol/L阿霉素、0.1mmol/L重铬酸钾及0.1mmol/L过氧化氢作用一定时间后,均可引起DNA链断裂,随着各组处理物浓度的增加,DNA迁移长度和拖尾细胞百分率也相应增加,两者剂量反应关系明显.10μg/ml、20μg/ml酪醇的预处理可使过氧化氢染毒细胞的拖尾百分率和DNA迁移长度显着降低.结论 阿霉素、重铬酸钾和过氧化氢均是强烈的DNA链断裂剂;酪醇对真核细胞DNA氧化损伤具有抑制作用.     

甲醛对大鼠组织细胞DNA的损伤作用

目的探讨甲醛对大鼠肝、肾、肺组织细胞DNA损伤作用。方法将24只健康SD大鼠随机分为6组,用蒸馏水及不同剂量（10、20、30、40mg／kg）的甲醛溶液和环磷酰胺经腹腔染毒阴性对照组、染毒组和阳性对照组大鼠,第2天处理动物后,取肝、肾、肺组织用单细胞凝胶电泳实验观察其细胞DNA损伤水平。结果甲醛对大鼠的肝、肾、肺组织细胞DNA具有损伤作用,染毒剂量和损伤呈现一定的剂量一反应关系。随着甲醛染毒浓度的升高,肾、肺、肝细胞拖尾率增加,头尾比降低。结论甲醛可引起大鼠的肝、肾、肺组织细胞DNA损伤,从而进一步证实甲醛具有遗传毒性。     

甲醛吸入对小鼠脾脏和胸腺的氧化性损伤

[目的]探讨甲醛（formaldehyde,FA）对小鼠免疫系统损伤的可能毒作用机制.[方法]选用健康昆明种纯系小鼠30只,随机分成5组（即阴性对照组、1 mg/m^3、3 mg/m^3、5 mg/m^3染毒组和阳性对照组）,每组6只,用静式吸入方式染毒,每天2 h.于染毒14 d后,测定小鼠脾脏、胸腺中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性和丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）含量.[结果]随FA染毒剂量的增高,小鼠脾脏和胸腺的相对重量呈明显下降趋势,除1 mg/m^3组脾脏系数外,其他各组与阴性对照组比较差异均有显著性（P＜0.05或P＜0.001）;小鼠脾脏和胸腺的SOD活性,除1 mg/m^3组胸腺SOD活性外,其他各组与阴性对照组比较差异均具有显著性（P＜0.05或P＜0.001）,并且有明显剂量-效应关系;MDA含量各染毒组均显著高于阴性对照组（P＜0.05或P＜0.001）.[结论]FA可通过引起小鼠脾脏和胸腺的脂质过氧化损伤而导致免疫功能低下,过氧化损伤可能是FA引起小鼠免疫损伤的机制之一.     

甲醛和苯联合吸入致雄性小鼠骨髓细胞的遗传毒性

[目的]研究甲醛和苯联合吸入染毒对雄性小鼠骨髓细胞的遗传毒性作用。为评价甲醛和苯的安全性提供科学依据。[方法]60只健康清洁级昆明种纯系雄性小鼠,随机分为10组,每组6只。各组分别为阴性对照组（清洁空气）,甲醛低（1．0mg／m^3）、中（3．0mg／m^3）、高（5．0mg／m^3）剂量组;苯低（500．0mg／m^3）、中（1500．0mg／m^3）、高（2500．0mg／m^3）剂量组,联合染毒低（0．5mg／m^3甲醛＋250．0mg／m^3苯）、中（1．5mg／m^3甲醛＋750．0mg／m^3苯）、高（2．5mg／m^3甲醛＋1250．0mg／m^3苯）剂量组。采用静式吸入染毒,每天2h,连续14d。染毒结束次日处死小鼠,采用微核试验和单细胞凝胶电泳试验（彗星试验）检测甲醛和苯单独或联合染毒致骨髓细胞的遗传毒性。[结果]与阴性对照组相比,甲醛、苯单独及联合染毒各剂量组均呈现骨髓细胞微核率升高、彗星尾部DNA含量增多、尾距增大（P〈0．05）。与相应单独染毒组相比,联合染毒各剂量组骨髓细胞微核率明显升高（P〈0．05）;联合染毒低、中剂量组彗星尾部DNA含量增多、尾距增大（P〈0．05）;联合染毒高剂量组彗星尾部DNA含量和尾距高于甲醛高剂量染毒组（P〈0．05）,与苯高剂量染毒组比较,其差异无统计学意义。[结论]甲醛和苯联合吸入染毒对雄性小鼠骨髓细胞的遗传损伤作用大干甲醛、苯单独染毒时的作用,二者对雄性小鼠骨髓细胞的联合遗传毒性作用可能具有协同作用。     

久效磷致大鼠皮肤成纤维细胞凋亡及氧化损伤的作用

目的 研究久效磷对体外培养的大鼠皮肤成纤维细胞凋亡及氧化损伤作用的影响。方法 取4只3日龄清洁级SD大鼠的背部皮肤,以组织块法培养大鼠皮肤成纤维细胞,正常传代。取第4代成纤维细胞,调整细胞密度为1.0×106/瓶,当细胞至亚融合状态,分别加入0（对照）、0.01、0.1、1μg/L的久效磷溶液培养6、12、24 h。采...     

甲醛对小鼠的免疫毒性及氧化损伤的研究

目的 探讨甲醛对小鼠脾脏、胸腺T细胞亚群CD3、CD4、CD8含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量的影响.方法 将昆明种小鼠随机分成5组(即阴性对照组,1、3、5 mg/m3染毒组和阳性对照组),每组6只.染毒组用静式吸入染毒方式染毒,每天染毒2 h,持续14 d.阴性对照组在同样的染毒柜中吸入过滤的新鲜空气,处理时间与染毒组相同.阳性对照组从第8天开始,每日按40 mg/kg体重腹腔注射环磷酰胺(CP),连续7 d,测定脾脏、胸腺中T细胞亚群CD3、CD4、CD8含量、SOD活力、MDA含量.结果 随甲醛染毒剂量的增高,小鼠脾脏、胸腺CD3、CD4、CD8含量呈明显下降趋势,CD4/CD8随染毒剂量的升高而明显增大.除1 mg/m3染毒组小鼠脾脏CD3、CD4含量及3 mg/m3染毒组CD4含量外,其他染毒组CD3、CD4、CD8含量与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05或P＜0.01),并且CD3、CD4、CD8阳性细胞数与甲醛染毒剂量间有明显的剂量-反应关系(r值分别为0.771、0.660、0.914,均P＜0.01).除1 mg/m3染毒组小鼠胸腺CD3、CD4、CD8含量外,其他染毒组CD3、CD4、CD8含量与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),并且CD3、CD4、CD8阳性细胞数与甲醛染毒剂量间有明显的剂量-反应关系(r值分别为0.881、0.763、0.969,均P＜0.01),与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).除1 mg/m3组小鼠胸腺SOD活力与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)外,其他染毒组小鼠脾脏和胸腺的SOD活力与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);各染毒组小鼠胸腺和脾脏MDA含量均显著高于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).各染毒组小鼠脾脏和胸腺T细胞亚群含量分别与其脾脏和胸腺的SOD活力成正相关(P＜0.01),与MDA含量成负相关(P＜0.01).结论 甲醛可引起小鼠脾脏、胸腺T细胞亚群CD3、CD4、CD8损伤和脾脏、胸腺脂质过氧化损伤;脂质过氧化损伤可能是甲醛导致免疫损伤的作用机制之一.     

甲醛-苯联合染毒对小鼠的致突变作用

目的探讨甲醛、苯对小鼠的联合致突变作用。方法采用昆明种小鼠64只,分阴性对照组、甲醛组、苯组、联合组、阳性对照组,进行小鼠骨髓细胞微核试验及精子畸形试验。结果甲醛组、苯组小鼠骨髓细胞微核率及精子畸形率均明显高于各自的阴性对照组(P<0.01);甲醛和苯联合染毒诱发小鼠骨髓细胞微核率为14.1‰,精子畸形率为16.26%,二者单独染毒所引发的骨髓细胞微核率之和为13.6‰,精子畸形率之和为16.74%,与联合染毒所引发的骨髓细胞微核率(14.1‰)和精子畸形率(16.26%)基本相同。结论甲醛和苯联合染毒对小鼠骨髓细胞及精子的致突变作用属于相加作用。     

甲醛对机体氧化损伤效应影响的研究进展

甲醛的毒性研究一直是环境卫生领域研究的热点,它可以通过引起组织活性氧增加、脂质过氧化等途径引起机体的氧化损伤效应,导致脂质过氧化产物丙二醛含量的增加,降低机体不同组织、器官中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活力及谷胱甘肽的含量,并存在剂量-效应关系。笔者从甲醛在体内的氧化作用机制及对氧化系统的毒性效应方面,综述了近几年国内外关于甲醛对机体氧化系统损伤效应的研究,以便深入探讨甲醛对人体健康的损害,从而保护人群的身体健康。