甲醛致大鼠肺和肾组织细胞DNA-蛋白质交联及其修复研究

目的为探讨甲醛致生物机体DNA-蛋白质交联(DPC)作用及其修复能力。方法以3月龄SPF级健康成年雄性Wistar大鼠为实验动物分别进行体内(0、0.5、1.0、3.0mg/m3气态甲醛吸入染毒72h)和体外实验(0、25、50、100、150、200μmol/L液态甲醛染毒1h),并进行体内(3.0mg/m3的气态甲醛吸入染毒72h)和体外(75μmol/L的液态甲醛染毒1h)修复实验(修复0、6、12、18和24h)。采用KCl-SDS沉淀法检测大鼠肺、肾组织细胞DPC率。结果体内实验表明,低浓度的气态甲醛(0.5mg/m3)不能明显诱导大鼠肺、肾组织细胞产生DPC,较高浓度的气态甲醛(≥1.0mg/m3)可以产生明显的DPC作用(P<0.05);由3.0mg/m3浓度的气态甲醛使肺、肾组织细胞产生的DPC可在24和18h内得到修复,并可在24h内恢复到空白对照水平。体外实验表明,低浓度的液态甲醛(25μmol/L)不能明显诱导大鼠肺、肾组织细胞产生DPC,较高浓度的液态甲醛(≥50μmol/L)可以产生明显的DPC作用(P<0.05);由75μmol/L浓度的液态甲醛使肺、肾组织细胞产生的DPC可以在1...     

甲醛致V79细胞DNA-蛋白质交联作用及其修复

目的探讨甲醛诱导DNA-蛋白质交联作用及其修复效应。方法采用培养V79细胞株作为实验材料,以不同浓度的液态甲醛(0、50、100、200、400、800、1 600μmol/L)对细胞染毒1 h后检测DPC率,并根据实验结果选取200μmol/L对培养细胞株进行修复实验(修复0、6、12、18、24 h)。采用KCl-SDS沉淀法检测DPC率。结果较高浓度的液态甲醛(≥200μmol/L)可以产生明显的DPC效应(P<0.05);由200μmol/L浓度的液态甲醛诱导V79细胞产生明显的DPC(P<0.05),经过修复可以恢复到空白对照水平(P>0.05)。结论较高浓度的甲醛可以明显诱导DPC形成,甲醛所致的DNA-蛋白质交联可以得到修复。 更多还原     

姜黄素对甲醛致A549细胞DNA-蛋白质交联损伤的拮抗作用

为探讨姜黄素对甲醛致A549细胞DNA-蛋白质交联(DPC)的拮抗效应,采用培养A549细胞株作为实验材料,分为正常对照组、0.1 mmol/L甲醛组、姜黄素拮抗组(2.5、5.0、10.0、20.0 mg/L姜黄素+0.1 mmol/L甲醛组),对细胞染毒4 h后采用氯化钾-十二烷基硫酸钠沉淀法检测DPC率。结果显示,0.1 mmol/L甲醛染毒组DPC率高于对照组(P0.05),各姜黄素拮抗组DPC率均低于0.1 mmol/L甲醛组,但2.5、5.0、10.0 mg/L姜黄素拮抗组的DPC率高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),20.0 mg/L姜黄素拮抗组DPC率与对照组差异无统计学意义(P0.05)。提示较高浓度的姜黄素可以拮抗甲醛所致的DNA-蛋白质交联损伤。     

甲醛致雄性大鼠脑和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨气态甲醛致雄性大鼠脑细胞和睾丸细胞DNA-蛋白质交联（DNA-protein crosslinks,DPC）作用。方法将24只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组,每组6只,分别为0.5、1.0、3.0mg／m。气态甲醛染毒组和阴性对照组。连续动态吸入染毒72h后,应用KCl-SDS沉淀法检测大鼠脑和睾丸组织DNA-蛋白质交联的含量。结果与阴性对照组比较,0.5mg／m^2气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织的DPC系数差异无统计学意义（P〉0.05）,随着甲醛浓度的增加,DPC系数逐渐升高。与阴性对照组比较,1.0、3.0mg／m^3气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织DPC系数升高,差异有统计学意义（P〈0.01）结论低浓度（0.5mg／m^3）的气态甲醛不能引起大鼠脑和睾丸组织产生DPC效应,而较高浓度（1.0、3.0mg／m^3）的气态甲醛可明显诱导其产生DPC效应,造成严重的DNA损伤。     

甲醛致人血淋巴细胞DNA-蛋白质交联作用的定量研究

目的　探讨甲醛致 DNA-蛋白质的交联作用以及交联的检测方法。方法　以人血淋巴细胞为材料 ,设定 0、0 .0 0 5、0 .0 2 5、0 .1 2 5、0 .6 2 5 mmol/ L 五个甲醛浓度梯度 ,采用 KCl- SDS沉淀法来检测染毒后细胞中 DNA-蛋白质交联的含量。结果　甲醛浓度在 0、0 .0 0 5、0 .0 2 5 mm ol/ L 时 ,交联现象不明显或不能诱导DPC(P>0 .0 5 ) ;在 0 .1 2 5、0 .6 2 5 mm ol/ L 时交联程度显著增加 (P<0 .0 1 ) ,并有较好的剂量 -效应关系。结论　在低浓度时 ,甲醛诱导 DNA-蛋白质交联现象不明显或不诱导该现象 ,在高浓度时可显著诱导交联现象。KCl- SDS沉淀法检测 DNA-蛋白质交联的含量是有效的     

甲醛致大鼠离体骨髓细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的检测经不同浓度甲醛染毒后所致大鼠骨髓细胞的DNA-蛋白质交联程度。方法采用KCl-SDS沉淀法检测液态甲醛所致DNA-蛋白质交联（DPC）效应。结果低浓度的甲醛（10μmol／L和50μmol／L）能引起DNA-蛋白质的交联;较高浓度的甲醛（250μmol／L和1250μmol／L）可以产生明显的DNA-蛋白质交联作用（P〈0．01）。结论甲醛可造成骨髓细胞DNA-蛋白质交联,而DPC可以对细胞产生严重的遗传毒性,这可能是甲醛导致白血病的分子机制之一。     

甲醛暴露的医学生口腔黏膜细胞的DNA-蛋白质交联

目的研究医学生上解剖课甲醛暴露后对口腔黏膜DNA鄄蛋白质交联(DPC)的影响。方法以37名(男20名,女17名)正在上解剖课程的医学院学生和40名(男20名,女20名)同年级理学院的学生为研究对象。取口腔黏膜上皮细胞,应用改良的SDS鄄KCl沉淀法,测定口腔黏膜细胞DNA鄄蛋白质交联率。结果两组学生性别和年龄构成差异无统计学意义。解剖实验室空气甲醛浓度范围在0.42～1.57mg/m3之间。医学院学生口腔黏膜细胞DNA鄄蛋白质交联率(25.72%±6.48%)高于对照组(22.88%±5.34%),P<0.05。其中医学院女生DNA鄄蛋白质交联率(27.72%±5.76%)明显高于对照组女生(22.29%±4.20%),P<0.01。结论医学生解剖课甲醛暴露可导致口腔黏膜细胞DNA鄄蛋白质交联率增高。女性对气态甲醛暴露可能较男性敏感。     

甲醛致小鼠肺DNA蛋白质交联和DNA断裂效应的研究

目的 研究甲醛致小鼠肺DNA-蛋白质的交联（DNA-protein crosslinks．DPC）和致DNA的断裂作用。方法以小鼠肺为材料,经体外染毒后．采用KCl-SDS沉淀法和单细胞凝胶电泳法检测液态甲醛染毒后肺部提取细胞中DNA-蛋白质交联物的含量及DNA的断裂效应。结果KCl-SDS沉淀法,低浓度的液态甲醛（5μM,25μM）不能引起DNA-蛋白质的交联（P〉0．05）,较高浓度（125μM．625μM）可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用（125μM,p〈0．05;625μM．P〈0．01）。而单细胞凝胶电泳法显示甲醛在低浓度（5μM,25μM）时可以引起DNA链的断裂（P〈0．01）．在较高浓度（125μM,625μM）时可以引起交联作用（P〈0．01）。结论甲醛在较高浓度时可以导致明显的DNA-蛋白质交联作用．而在〈25μM时以DNA断裂为主。     

液态甲醛致A549细胞氧化损伤效应分析

目的探讨甲醛的氧化损伤效应。方法采用培养A549细胞株作为实验材料,以不同浓度的液态甲醛（0、50、100、200、400、800、1600μmol/L）对细胞染毒1h后按照试剂盒说明书检测总超氧化物歧化酶（SOD）活力、总一氧化氮合酶（NOS）活力以及丙二醛（MDA）含量。结果400μmol/L及以上浓度甲醛可明显降低V79细胞的总SOD活力和总NOS活力（P〈0.05）,200μmol/L及以上浓度甲醛可明显使MDA含量升高（P〈0.05）。结论甲醛可以抑制A549细胞超氧化物歧化酶和一氧化氮合酶的活性,可使丙二醛含量增多。     

较低剂量甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤的时相特征及机制

目的观察较低剂量甲醛(formaldehyde,FA,浓度为40μmol/L)诱导人脐静脉内皮细胞损伤时相特征及一氧化氮(NO)含量变化的时相规律,分析甲醛在诱导内皮细胞损伤中的作用机制。方法将人脐静脉内皮细胞(HU-VEC-12株)与甲醛浓度为40μmol/L的DMEM培养基孵育。分别处理一定时间后(0,4,12,24,48,72h)H-E染色-光学显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定细胞的活性;丙酮酸二硝基苯腙比色-分光光度法检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)浓度;硝酸还原酶法测定培养液中NO浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的蛋白表达;RT-PCR法测定eNOS和i NOS的mRNA表达。结果较低浓度甲醛呈时间依赖性地促进细胞LDH漏出,以及内皮细胞上清液MDA和NO的产生;降低eNOS的活性,抑制eNOS在蛋白和基因水平的表达;增加i NOS活性,促进i N-OS在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导HUVEC-12细胞损伤,机制可能与其抑制eNOS的活性及表达,诱导i NOS的活性及表达,增加病理性NO产生,从而导致内皮细胞损伤。     

氯化镍诱导DNA－蛋白质交联物的体内研究

用氯化镍对大鼠腹腔注射染毒，以敏感的￣（１２５）Ｉ－后标记新技术检测了血白细胞（ＷＢＣ）和肺组织ＤＮＡ－蛋白质交联（ＤＰＣ）的形成情况。结果显示氯化镍急性染毒后引起ＷＢＣ和肺ＤＰＣ明显升高并有剂量反应关系；小量多次染毒的结果也与１次染毒相一致。表明ＤＰＣ能反映镍化合物对ＷＢＣ和肺器官的遗传毒性，可作为毒作用分子生物标记。结果中还发现白细胞ＤＰＣ的升高较明显并与肺ＤＰＣ有相关性。提示白细胞ＤＰＣ可作为靶器官的替代物反映镍对靶器官的遗传损害。     

甲醛对机体氧化损伤效应影响的研究进展

甲醛的毒性研究一直是环境卫生领域研究的热点,它可以通过引起组织活性氧增加、脂质过氧化等途径引起机体的氧化损伤效应,导致脂质过氧化产物丙二醛含量的增加,降低机体不同组织、器官中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活力及谷胱甘肽的含量,并存在剂量-效应关系。笔者从甲醛在体内的氧化作用机制及对氧化系统的毒性效应方面,综述了近几年国内外关于甲醛对机体氧化系统损伤效应的研究,以便深入探讨甲醛对人体健康的损害,从而保护人群的身体健康。     

Induced Oxidative Stress and Cell Death in the A549 Lung Adenocarcinoma Cell Line by Ionizing Radiation Is Enhanced by Supplementation With Docosahexaenoic Acid

Both ionizing radiation and docosahexaenoic acid (DHA), an n-3 polyunsaturated fatty acid (PUFA), have been shown to inhibit tumor cell growth at least in part by increasing oxidative stress. In this study, the effects of ionizing radiation, DHA, or a combination of the two on cell proliferation, anchorage-independent growth, apoptosis, and lipid peroxidation in A549 lung adenocarcinoma cells were examined. In this study, significant decreases in cell proliferation and colony formation were noted for ionizing radiation or DHA treatments, whereas a combination of the two showed significant reductions over either treatment alone. Conversely, lipid peroxidation and apoptotic cell death showed significant increases with ionizing radiation and DHA treatments, whereas cells receiving both treatments demonstrated further significant increases. Moreover, addition of vitamin E, an antioxidant, was able to completely reverse lipid peroxidation and cell death due to ionizing radiation and partially reverse these changes in DHA treatments. Finally, the preferential incorporation of DHA into lung and xenograft compared to liver tissue is demonstrated in an in vivo model. These findings confirm the potential of DHA supplementation to enhance the treatment of lung cancer using ionizing radiation by increasing oxidative stress and enhancing tumor cell death.     

甲醛、苯酚致职业性接触性皮炎1例报告

我们在临床工作中接诊1例甲醛、苯酚致接触性皮炎患者.现将病例诊治情况报告如下. 患者男,51岁,某化工塑料厂运输班职工,工龄25 a.主要从事本企业生产酚醛树脂的化工原料甲醛、苯酚槽罐运输车的押运工作,同时承担上述液体化学品的放料、卸料工作.由于槽车管道密封不严,经常出现液体原料渗漏现象,工作过程中,加上橡胶手套容易渗漏,患者皮肤经常接触甲醛、苯酚液体.