烟草表达的粉尘螨Ⅰ类变应原重组蛋白的致敏效果研究

目的探讨烟草表达的粉尘螨Ⅰ类变应原重组蛋白对小鼠的致敏性。方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为PBS阴性对照组、卵白蛋白阳性对照组、原核表达Der f1(pDer f1)组、烟草表达Der f1(tDerf1)组,各组小鼠分别于第0、7、14天腹腔注射,PBS组给予PBS,其余3组分别用卵白蛋白、pDer f1、tDerf1致敏,第21天起连续7 d雾化吸入激发,24 h后处死。通过肺组织病理切片观察小鼠肺部炎症,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行总细胞及分类计数,以ELISA法检测BALF、脾细胞培养上清(SCCS)的特异性细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ和血清中变应原特异性IgE、IgG1及IgG2a抗体浓度。结果 PBS组小鼠肺部未见明显病理改变,卵白蛋白、pDer f1、tDer f1组小鼠肺部出现明显的炎症。tDer f1组小鼠BALF中的细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、抗原特异性细胞因子IL-4、IL-5、IL-17和SCCS中IL-4、IL-5、IL-17均明显高于阴性对照组(P<0.01),而与阳性对照组相比无统计学意义;tDer f1组小鼠BALF和SCCS中IL-2、IFN-γ均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01);卵白蛋白、pDer f1、tDerf1组特异性IgE和IgG1抗体水平均高于PBS组(P<0.01)。结论从烟草中表达的重组Derf1蛋白对小鼠具有致敏作用,其可作为变应原进一步研究。     

CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠血清 IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-25、IL-33的水平变化影响

目的 研究非甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸 (CpG ODN)联合热休克蛋白70(HSP70)/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠肺部炎症、血清IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-25、IL-33水平变化的影响,为联合 CpG ODN -HSP70/CD80 DNA疫苗治疗哮喘提供实验依据。方法 2019年6-9月选用 6~8周龄BALB/c小鼠32只, 卵清蛋白(OVA)加氢氧化铝[Al(OH)₃]佐剂致敏的方法制备小鼠哮喘模型, 随机分成4组,分别为对照组、哮喘组、HSP70/CD80DNA疫苗组及联合疫苗组(CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗组),HE染色观察肺组织病理形态学改变,ELISA法检测血清IL-4、IL-13、IFN-γ和BALF中IL-4、IL-25、IL-33水平变化。结果 肺组织HE染色结果显示HSP70/CD80疫苗联合CpG ODN治疗组小鼠肺组织炎症反应较哮喘组明显减轻,气道周围炎症细胞浸润显著减少。ELISA结果显示与对照组比较,哮喘组血清IL-4及IL-13水平显著增高(P<0.05),血清IFN-γ水平明显下降(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);支气管肺泡灌洗液(BALF)结果显示与对照组比较,哮喘组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著增高(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著下降(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著降低(P<0.05)。结论 CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗能抑制小鼠体内产生IL-4、IL-13、IL-25、IL-33, 增强小鼠体内产生IFN-γ,减轻哮喘小鼠气道炎症。     

CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠血清 IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-25、IL-33的水平变化影响

目的 研究非甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸 (CpG ODN)联合热休克蛋白70(HSP70)/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠肺部炎症、血清IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-25、IL-33水平变化的影响,为联合 CpG ODN -HSP70/CD80 DNA疫苗治疗哮喘提供实验依据。方法 2019年6-9月选用 6~8周龄BALB/c小鼠32只, 卵清蛋白(OVA)加氢氧化铝[Al(OH)₃]佐剂致敏的方法制备小鼠哮喘模型, 随机分成4组,分别为对照组、哮喘组、HSP70/CD80DNA疫苗组及联合疫苗组(CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗组),HE染色观察肺组织病理形态学改变,ELISA法检测血清IL-4、IL-13、IFN-γ和BALF中IL-4、IL-25、IL-33水平变化。结果 肺组织HE染色结果显示HSP70/CD80疫苗联合CpG ODN治疗组小鼠肺组织炎症反应较哮喘组明显减轻,气道周围炎症细胞浸润显著减少。ELISA结果显示与对照组比较,哮喘组血清IL-4及IL-13水平显著增高(P<0.05),血清IFN-γ水平明显下降(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);支气管肺泡灌洗液(BALF)结果显示与对照组比较,哮喘组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著增高(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著下降(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著降低(P<0.05)。结论 CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗能抑制小鼠体内产生IL-4、IL-13、IL-25、IL-33, 增强小鼠体内产生IFN-γ,减轻哮喘小鼠气道炎症。     

低浓度O3和NO2对小鼠气道炎症单独及联合作用

目的 探讨O3和NO2单独和混合暴露对小鼠气道的损伤和炎症水平影响.方法 将80只清洁级BALB/C小鼠随机分为8组:其中4组为致敏模型组(根据暴露不同分为空气对照组、O2组、NO2组及混合暴露组),另外4组为非致敏组(分组同前).O3暴露浓度采用0.16 mg/m3,NO2为0.30 mg/m3,每天暴露2 h,连续7 d.暴露完成后处死动物进行气管灌洗,取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和细胞因子含量检测.结果 致敏组中,NO2和O3单独和混合暴露后均可导致BALF中性粒细胞比例、IL-6水平明显升高(均为P＜0.05),,其中O3单独暴露和混合暴露还导致IL-2和MDA的明显升高(均为P＜0.05);非致敏组中,只有O3暴露和混合暴露可引起BALF细胞总数、中性粒细胞比例增高和IL-2、IL-6、MDA水平明显升高(均为P＜0.05),且致敏组IL-2和IL-6水平高于相同暴露条件非致敏组(P＜0.05);混合暴露时致敏小鼠气道内细胞总数和MDA明显高于O3或NO2单独暴露(P＜0.05).结论 O3和NO2暴露均会加重致敏小鼠气道炎症,其中O3暴露还会引起非致敏小鼠气道炎症发生,引起炎症反应均是以中性粒细胞增高为主要特征;混合暴露对小鼠气道炎症存在联合作用;相对于非致敏小鼠,致敏小鼠对O3和NO2暴露更敏感.     

γ-维生素E对哮喘小鼠血清及肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞趋化因子的影响

目的 探讨γ-维生素E(γ-T)对哮喘的治疗作用及机制。方法 将40只雄性Balb/c小鼠(4周,18~20 g)随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组及γ-T治疗组。给予小鼠腹腔注射及雾化吸入卵白蛋白建立哮喘气道炎症反应模型,分别给予地塞米松及γ-T,正常组仅给予生理盐水。28 d后处死小鼠,留取血清及肺泡灌洗液。ELISA法测定各组血清及肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的含量。用one-way ANOVA检验组间差异,P＜0.05具有统计学意义。结果 哮喘组小鼠血清及肺泡灌洗液中eotaxin浓度均较正常组升高,地塞米松组及γ-T组均较哮喘组下降。在血清中地塞米松组下降最明显,γ-T组次之,γ-T组与哮喘组,γ-T组与地塞米松组相比差异无统计学意义(P>0.05);在BALF中,γ-T组的eotaxin下降最明显,与哮喘组相比,二者间差异明显(P<0.05);γ-T组与地塞米松组相比,二者差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 γ-T有利于减少哮喘小鼠肺组织eotaxin,γ-T可能是有用的抗哮喘药物。     

自然杀伤细胞在屋尘螨致敏哮喘小鼠发病中的变化

目的探讨自然杀伤T(NKT)细胞在屋尘螨提取液(HDM)致敏哮喘小鼠发病机制中的作用。 方法选择6～8周雌性无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级BALB/C小鼠16只为研究对象,并随机分为研究组(n＝8)和对照组(n＝8)。研究组采用HDM致敏和激发以建立哮喘小鼠模型。对照组采用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)替代HDM进行致敏和激发,建立小鼠模型。小鼠气道反应性测定采用肺阻抗法。支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ含量及血清总免疫球蛋白(Ig)E测定采用酶联免疫法(ELISA)。肺组织T-bet,GATA-3 mRNA表达水平检测采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法。NKT细胞及其成熟细胞比例检测采用流式细胞学技术。 结果研究组小鼠气道反应性明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两组小鼠BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOC)计数比较,差异有统计学意义(P<0.01)。研究组小鼠BALF中IL-4和总IgE水平均显著高于对照组,而IFN-γ水平显著低于对照组,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。研究组小鼠T-bet mRNA水平、NKT及其成熟细胞比例明显低于对照组,而GATA-3 mRNA水平显著高于对照组,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。两组小鼠NKT细胞及其成熟细胞比例与小鼠肺组织T-bet mRNA表达水平呈显著正相关性关系(r＝0.767,P<0.01;r＝0.757,P<0.01),而与GATA-3 mRNA表达水平则呈显著负相关性关系(r＝－0.8871,P<0.01;r＝－0.727,P<0.01)。 结论NKT细胞可能在屋尘螨致敏哮喘小鼠发病机制中起重要作用。     

Research on Allergenicity of Major Allergen Group Ⅰ from Dermatophagoides farinae Expressed in Tobacco

目的 探讨烟草表达的粉尘螨Ⅰ类变应原重组蛋白对小鼠的致敏性.方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为PBS阴性对照组、卵白蛋白阳性对照组、原核表达Der f1(pDer f1)组、烟草表达Der f1(tDerf1)组,各组小鼠分别于第0、7、14天腹腔注射,PBS组给予PBS,其余3组分别用卵白蛋白、pDer f1、tDerf1致敏,第21天起连续7d雾化吸入激发,24h后处死.通过肺组织病理切片观察小鼠肺部炎症,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行总细胞及分类计数,以ELISA法检测BALF、脾细胞培养上清(SCCS)的特异性细胞因子IL-2、IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ和血清中变应原特异性IgE、IgG1及IgG2a抗体浓度.结果 PBS组小鼠肺部未见明显病理改变,卵白蛋白、pDer f1、tDer f1组小鼠肺部出现明显的炎症.tDer f1组小鼠BALF中的细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、抗原特异性细胞因子IL-4、IL-5、IL-17和SCCS中IL-4、IL-5、IL-17均明显高于阴性对照组(P＜0.01),而与阳性对照组相比无统计学意义;tDer f1组小鼠BALF和SCCS中IL-2、IFN-γ均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);卵白蛋白、pDer f1、tDerf1组特异性IgE和IgG1抗体水平均高于PBS组(P＜0.01).结论 从烟草中表达的重组Derf1蛋白对小鼠具有致敏作用,其可作为变应原进一步研究.     

早期气道接触细菌抗原对大鼠哮喘模型影响

目的 了解早期气道接触细菌抗原对辅助性T淋巴细胞1/2(Th1/Th2)平衡以及大鼠成年后哮喘气道炎症的影响,研究哮喘的发病机制.方法 将新生SD大鼠随机分为3个细菌抗原组、哮喘组及对照组,细菌抗原组大鼠分别于出生后第1、3、5、7 d鼻咽部给予107、106、105灭活肺炎链球菌10μL,哮喘组及对照组大鼠则给予磷酸盐缓冲液(PBS)10μL;大鼠饲养至成年后造模,观察各组大鼠肺组织病理、支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞分类、血清中白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)、卵蛋白-IgE含量.结果 肺组织病理显示,早期接触灭活细菌的大鼠气道炎症较重;107、106抗原组大鼠BALF中淋巴细胞百分比为(32.94±13.62)%、(29.50±8.92)%,与哮喘组比较明显增多(P＜0.05);107抗原组大鼠血清中卵蛋白-IgE水平(0.33±0.07)较哮喘组明显升高(P＜0.01),IFN-γ水平为(11.93±2.74)pg/mL,较哮喘组明显下降(P＜0.05).结论 早期气道接触细菌抗原可加重Th1/Th2失衡以及大鼠成年后哮喘气道炎症.     

藻酸盐在铜绿假单胞菌肺部感染中的致病作用及与细胞因子的关系

目的研究铜绿假单胞菌藻酸盐的致病作用及其与细胞因子的关系. 方法用柱层析法从粘液型铜绿假单胞菌株PT-1252提纯藻酸盐并用它来免疫小鼠;用酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中的抗藻酸盐抗体滴度;免疫后的小鼠被雾化吸入PT-1252菌株造成肺部感染;取小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)作细胞计数和分类;用ELISA法测定小鼠血清中的白介素(IL)2、4、10、12及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的浓度. 结果免疫组小鼠在吸入铜绿假单胞菌后的第3、7天,血清中的抗藻酸盐抗体较对照组有显著增高,BALF中细胞总数在第1、3、7天,淋巴细胞数在第1、3天,中性粒细胞在第3、7天较对照组有显著升高;病理切片显示免疫组小鼠气道周围有较显著的炎症反应;免疫组小鼠血清IL-12浓度在第7天较对照组显著升高. 结论被藻酸盐免疫过的小鼠在吸入铜绿假单胞菌后,铜绿假单胞菌藻酸盐作为一种抗原物质,介导了抗原抗体反应,从而引起了较强的气道局部炎症反应,这种反应可能与IL-12有关.     

影响子代哮喘发生的小鼠孕期多环芳烃暴露模型的构建

目的建立小鼠孕期暴露于多环芳烃混合物的模型,明确多环芳烃是否加重子代哮喘小鼠肺部气道炎症反应。方法采用滴鼻方式对怀孕小鼠进行多环芳烃混合物暴露,并用超高效液相色谱串联质谱法测定孕鼠尿液中多环芳烃羟基代谢物1-羟基芘(1-OHP)的含量;对子代小鼠用致敏原卵清蛋白(OVA)致敏,通过观察子代小鼠肺组织病理形态学变化,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞的数量,测定BALF中炎症相关细胞因子IL-4以及血清中卵清蛋白特异性IgE抗体的表达。结果多环芳烃暴露孕鼠尿中1-OHP含量为8.28μmol/mol肌酐,验证了多环芳烃孕期暴露的有效性。与对照组子代小鼠相比,哮喘组和多环芳烃暴露哮喘组BALF中炎性细胞明显增多,支气管局部黏膜上皮受损脱落,管壁各层充血及水肿,周围大量炎性细胞浸润,气道壁杯状细胞增生,BALF中IL-4以及血清中总Ig E明显增高。结论通过滴鼻给药的方法成功构建了影响子代哮喘发生的小鼠孕期多环芳烃暴露模型。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的观察CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）对哮喘大鼠气道炎症的影响。方法将卵白蛋白（OVA）免疫耐受大鼠CD4^＋CD25^＋Treg细胞过继转移给哮喘大鼠,然后观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞计数及分类,ELISA检测BALF中IL-4、IL-5和IFN-1及血清OVA特异性IgE含量,HE染色观察肺组织的病理改变。结果与哮喘组比较,过继转移CD4^＋CD25^＋Treg细胞后哮喘大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞和淋巴细胞百分率降低（P〈0．05）,嗜酸性粒细胞（Eos）百分率明显降低（P〈0．01）;BALF中IL4和IL-5含量明显降低,IFN-1含量明显升高,血清OVA特异性IgE含量明显降低（P〈0．05）;气道炎症明显减轻。结论过继转移OVA免疫耐受大鼠CD4^＋CD25^＋Treg细胞可以明显抑制哮喘的慢性气道炎症。     

复方甘草酸苷对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的探讨复方甘草酸苷对哮喘大鼠气道炎症的影响及其机制。方法40只SPF级Wistar大鼠随机分成健康对照组（Ⅰ组）、哮喘模型组（Ⅱ组）、复方甘草酸苷哮喘治疗组（Ⅲ组）、哮喘治疗阴性对照组（Ⅳ组）,10只／组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组大鼠用卵清蛋白（OVA）氢氧化铝混合液腹腔注射致敏和OVA超声雾化吸入激发建立哮喘大鼠模型,Ⅲ组大鼠每次激发前1h腹腔注射复方甘草酸苷200μg,Ⅳ组大鼠每次激发前用等体积生理盐水代替复方甘草酸苷腹腔注射,Ⅰ组大鼠腹腔注射用等体积生理盐水代替OVA氢氧化铝混合液,超声雾化吸入用等体积生理盐水代替OVA。所有大鼠在末次激发后6h取中心静脉血2ml测定IgE含量,取左肺支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞计数与分类,并测定BALF中细胞因子IL4、IL-5、IL-13及IFN-γ含量。结果Ⅱ组静脉血IgE含量及BALF中中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数和IL-4、IL-5、IL-13含量显著高于Ⅰ组和Ⅲ组（P〈0．01）,IFN-γ含量显著低于Ⅰ组和Ⅲ组（P〈0．01）;Ⅱ组与Ⅳ组各项指标差异均无统计学意义（P〉0．05）;Ⅲ组与Ⅰ组相比,IgE含量及中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞计数和IL4、IL-5及IL-13含量升高,单核巨噬细胞计数和IFN-γ含量降低,但均无统计学意义（P〉0．05）。结论复方甘草酸苷可能通过调节Th1／Th2细胞因子平衡,来抑制Th2细胞免疫学效应,促进Th1细胞免疫学效应,从而减轻气道炎症,降低气道高反应性。     

重组粉尘螨Ⅱ类变应原致敏小鼠肺部变应性炎症模型的建立

目的探讨以重组粉尘螨Ⅱ类变应原(rDerf2)建立小鼠肺部变应性炎症模型的方法。方法将30只6～8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠,随机分为PBS组(阴性对照组)、卵清蛋白(OVA)组(阳性对照组)和rDerf2组(实验组)。实验组分别于第0、7、14天用rDerf2对小鼠腹腔进行注射致敏;再于第21天开始,连续7d进行雾化激发;对照组分别用PBS和OVA代替。最后一次雾化激发后24h内处死动物,观察肺组织病理变化、支气管肺泡灌洗液(BLAF)中的白细胞计数及分类,用ELISA测定BLAF和脾细胞培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-17和IFN-γ的含量及血清中IgG1、IgE抗体水平变化。结果实验组和阳性对照组BALB/c小鼠肺组织呈现明显的炎症性病理改变;rDerf2组的BALF中白细胞总数〔(17.39±1.03)×106/L〕及嗜酸性粒细胞(EOS)〔(1.61±0.03)×106/L〕计数,均明显高于PBS组(P<0.01);BALF中IL-4〔(78.92±9.06)pg/ml〕、IL-17〔(201.63±31.26)pg/ml〕与PBS组比较呈明显的高水平表达(P<0.01);而IL-2〔(8.29±1.27)pg/ml〕和IFN-γ〔(51.04±15.85)pg/ml〕的含量则显著下降(P<0.01);上述指标在脾细胞培养上清中出现类似的变化。rDerf2组血清中IgE〔(37.63±6.57)IU/ml〕、IgG1〔(16.68±2.90)μg/ml〕的含量表现为Th2型反应增强趋势;但OVA组和rDerf2组间所有指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论用rDerf2腹腔注射致敏后再雾化激发的方式能够成功构建小鼠肺部变应性炎症模型。     

慢性支气管炎大鼠IL-8水平与炎症细胞变化特点的探讨

目的 探讨慢性支气管炎的气道炎症特点及IL-8在其发病中的作用。方法 以脂多糖(LPS)气管内注入法复制慢性支气管炎大鼠模型。对各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和分类。用酶联免疫标记法测定各组大鼠血清及肺组织匀菜液中IL-8水平，并观察其支气管肺组织病理形态学变化。结果 模型组BALF中白细胞总数及中性粒细胞数较正常组显著增高。模型组血清和肺组织匀浆液IL-8水平较正常组显著增高。结论 中性粒细胞和IL-8共同参与了慢支气道炎症反应。     

乙酰半胱氨酸对肥胖哮喘小鼠气道炎症和重建的作用

目的探讨乙酰半胱氨酸对哮喘气道炎症和重建的影响。方法60只雌性C57／6J小鼠按随机数字表法分为哮喘组（A组）,肥胖哮喘组（B组）,治疗组（C组）,对照组（D组）,每组15只。经腹腔注射与雾化吸入卵蛋白（OVA）制作慢性哮喘模型,高脂饮食制造肥胖模型。计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类,ELISA法测定肺组织匀浆中IL-6和8-异前列腺素F2α（8-iso-PGF2α）水平,肺组织切片观察各组小鼠病理变化,并测定气管壁面积（WAt）、气管平滑肌面积（WAm）、管腔基底膜周长（Pbm）。结果,A组、B组小鼠BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞比例、肺组织IL-6水以及病理切片中气管壁厚度（WAt／Pbm）、气管平滑肌厚度（WAm／Pbm）均较D组明显增加,且B组IL-6和WAt／Pbm较A组进一步增加（P〈0．05）。C组小鼠BALF中白细胞总数、IL-6和WAt／Pbm均较B组明显下降（P〈0．05）。四组小鼠肺组织匀浆8-iso—PGF2α水平按D组、C组、A组、B组依次升高,各组差异有统计学意义（F=101．8,P〈0．01）。Pearson相关分析表明,8-iso—PGF2α水平与肺组织IL-6水平和WAt／Pbm和呈正相关（r=0．817、0．737,P〈0．01）。结论乙酰半胱氨酸能够通过抑制氧化应激反应,抑制哮喘小鼠的气道炎症和气道重建。     

Age-related differences in pulmonary inflammatory responses to JP-8 jet fuel aerosol inhalation

Our previous studies have demonstrated that JP-8 jet fuel aerosol inhalation induced lung injury and dysfunction. To further examine JP-8 jet fuel-induced inflammatory mechanisms, a total of 40 male C57BL/6 mice (young, 3.5 months; adult, 12 months; half in each age group) were randomly assigned to the exposure or control groups. Mice were nose-only exposed to room air or atmospheres of 1000 mg/m3 JP-8 jet fuel for 1 h/day for 7 days. Lung injury was assessed by pulmonary mechanics, respiratory permeability, lavaged cell profile, and chemical mediators in bronchoalveolar lavage fluid (BALF). The young and adult mice exposed to JP-8 jet fuel had similar values with regards to increased lung dynamic compliance, lung permeability, BALF cell count, and decreased PGE2. However, there were several different responses between the young-versus-adult mice with respect to BALF cell differential, TNF-alpha, and 8-iso-PGF2,, levels after exposure to JP-8 jet fuel. These data suggest that JP-8 jet fuel may have different inflammatory mechanisms leading to lung injury and dysfunction in the younger-versus-adult mice.     

改良型甲苯二异氰酸酯哮喘小鼠模型的建立

目的采用气管滴注方式进行甲苯二异氰酸酯(toluene-diisocyanate,TDI)激发给药,改进TDI哮喘小鼠模型建立方法,并对模型的建立进行评价。方法将20只SPF级健康雌性BALB/c小鼠随机分为TDI组和溶剂对照组,每组10只。TDI组小鼠第1、8天于耳背分别涂抹20μl 0.3%TDI致敏,第15天采用气管滴注法给予20μl 0.01%TDI进行激发,溶剂对照组给予等量溶剂(丙酮与橄榄油混合物)。激发结束后,观察各组小鼠的行为学改变。致敏实验后每组取6只小鼠收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并进行炎细胞计数分类,以ELISA法检测BALF上清中白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)含量;以HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果激发结束后,TDI组小鼠均出现呼吸急促、点头呼吸、弓背、前肢缩抬等行为学改变,溶剂对照组未出现上述症状。TDI组小鼠BALF中白细胞总数、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞数目均高于溶剂对照组,且嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞百分比高于溶剂对照组,BALF中细胞因子IL-4、IFN-γ含量高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。HE染色可见TDI组小鼠肺组织内支气管管壁破坏明显,管腔增厚,支气管管腔内及肺泡腔内有大量的炎细胞浸润,而溶剂对照组未见明显病理变化。结论采用气管滴注方式进行TDI激发给药,可成功建立TDI哮喘小鼠模型。     

槐杞黄联合孟鲁司特钠干预对哮喘大鼠气道炎症以及IL-17表达的影响

目的探讨槐杞黄辅助孟鲁司特钠治疗哮喘的作用机制。方法取40只雄性Spra—gue—Dawley（SD）大鼠随机分为对照组（Control）、模型组（Model）、孟鲁司特钠组（MK）、槐杞黄组（H）、孟鲁司特钠＋槐杞黄组（MK＋H）,每组8只。除对照组外,其他各组建立哮喘模型。各药物干预组每天分别予以孟鲁司特钠、槐杞黄、孟鲁司特钠＋槐杞黄灌胃处理。取右肺上叶组织行病理学检查,分析气道炎症,免疫组化方法测定肺组织IL-17表达,计数BALF细胞总数和细胞分类,ELISA方法测定血浆及BALF上清液中IL-17的浓度。结果建模成功后（1）模型组支气管周围炎症细胞浸润程度较对照组显著增强（P〈0．05）;（2）各药物干预组支气管周围炎症细胞浸润程度较模型组明显减轻（P〈0．05）;（3）MK＋H组与MK组比较,支气管周围炎性细胞浸润程度明显减轻（P〈0．05）,IL-17蛋白表达量（11．60±1．58）明显下降（P〈0．05）,BALF细胞总数以及血浆和BALF中IL-17浓度均降低（P〈0．05）;（4）血浆与BALF中IL-17浓度及肺组织IL-17表达量呈正相关（P〈0．05）。结论槐杞黄颗粒联合孟鲁司特钠干预哮喘大鼠能进一步降低血浆及BALF中IL—17浓度,下凋肺组织IL—17蛋白的表达量,抑制气道炎症,其抗炎作用可能是通过下调IL-17来实现。