特异性HLA抗体在肾移植中的临床意义

随着抗体筛选技术的提高 ,特异性HLA抗体与移植后各种排斥反应的关系越来越密切。本文简要介绍HLA抗体的来源、筛选方法和影响抗体产生的因素。通过对近期文献的回顾 ,进一步探讨特异性HLA抗体对移植肾预后的影响。     

肾移植术后监测受者抗HLA抗体的临床意义

目的 监测肾移植受者术后抗HLA抗体水平,探讨新生的抗HLA抗体对移植肾功能的影响.方法 共有384例肾移植受者术后进行了抗HLA抗体的监测,监测时间3～96个月,所有受者术前的抗HLA抗体水平均为阴性.使用莱姆德抗原板,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗HLA抗体,抗HLA抗体水平＞10%为阳性.对术后抗HLA抗体阳性者与阴性者间移植肾功能进行比较,观察新生抗HLA抗体对移植肾功能的影响.结果 术后抗HLA抗体阴性者318例(82.8%);阳性者66例(17.2%),其中抗HLA Ⅰ类抗体阳性者3例,抗HLAⅡ类抗体阳性者61例,抗HLA Ⅰ类和Ⅱ类抗体均为阳性者2例.HLA-DR位点0个抗原错配者92例受者中有7例新生抗HLA抗体,1～2个抗原错配者292例中有59例新生抗HLA抗体,二者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).术后抗HLA抗体阴性者中移植肾功能良好者占87.4%(278/318),抗HLA抗体阳性者中移植肾功能良好者占65.2%(43/66),二者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HLADR位点的抗原错配与肾移植后抗HLA抗体的产生密切相关,而新生抗HLA抗体会造成移植肾功能下降,从而降低移植存活率,肾移植术后监测抗HLA抗体有一定的临床意义.

Abstract：

Objective To detect de novo development of anti-HLA antibodies after renal transplantation, and to investigate their influence on graft function. Methods 384 kidney recipients,who were negative for anti-HLA antibody before transplantation, were monitored for anti-HLA antibodies over a period of 3-96 months, and a sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect anti-HLA antibodies. HLA antibody ＞10 % was defined as positive levels. Results Among 384 recipients tested, 318 recipients (82. 8 %) were negative for anti-HLA antibody after transplantation; 66 recipients (17. 2 %) developed de novo HLA antibodies, 3 recipients with HLA class Ⅰ, 61 with HLA class Ⅱ, 2 with both HLA class Ⅰ and Ⅱ. According to amino acid residue matching, 7 cases developed de novo antibodies among 92 recipients with 0 HLA-DR mismatches,compared with 59 cases among 292 recipients with 1-2 mismatches, which showed significant difference between two groups (P＜0. 01 ). 87. 4 % (278/318) recipients negative for HLA antibodies after transplantation achieved good graft function, in comparison with 65. 2 % (43/66) recipients positive for HLA antibodies (P＜0. 05). Conclusion De novo production of HLA antibodies posttransplantation may be closely associated with HLA-DR mismatch. De novo HLA antibodies posttransplantation might damage graft function and reduce graft survival rate. The detection of de novo development of anti-HLA antibodies after renal transplantation has clinical significance for assessing renal allograft function.     

供者特异性HLA抗体在慢性移植物肾病中的作用

近年来的临床资料提示供者特异性HLA抗体(DSA)在慢性移植物肾病(CAN)的发病中起了重要作用,并提出“慢性体液性排斥反应”的概念,为CAN的诊断和治疗提供了一个新的思路。本文综述了DSA介导的免疫损伤导致CAN的研究进展。     

HLA配型在肾脏移植中的临床意义

环孢素的临床应用效果和常规血清学ＨＬＡ配型的高误差率一度引发了一场关于ＨＬＡ配型临床价值的争论。九十年代ＤＮＡ水平ＨＬＡ配型的发展，近１０万例肾移植临床随访资料分析，再次肯定了ＨＬＡ配型在肾脏移植中的重要意义。理想的配型可以提高移植存活率１０～２０％，半寿期提高一倍以上，并呵显著减少急性排斥和激素冲击的次数；对于再次移植和高危组患者，效果更加明显。     

HLA配型在肾移植中的作用

近年来，许多研究中心的研究结果表明ＨＬＡ配型对肾移植的成功起着重要作用，适当延长冷缺血时间并不影响ＨＬＡ匹配好的肾脏的移植效果，ＨＬＡ匹配得好的分享肾比ＨＬＡ匹配得不好的肾存活期要长。ＨＬＡ配型对移植肾的早期存活和长期存活都有重要的影响。ＨＬＡ配型对肾移植结果的影响受病人的致敏性、供肾的质量、病人的年龄以及病人的人种等因素的影响     

HLA配型在肾移植中的作用

近年来，许多研究中心的研究结果表明ＨＬＡ配型对肾移植的成功起着重要作用，适当延长冷缺血时间并不影响ＨＬＡ匹配好的肾脏的移植效果，ＨＬＡ匹配得好的分享肾比ＨＬＡ匹配得不好的肾存活期要长，ＨＬＡ配型对移植肾的早期存活和长期存活都有重要的影响，ＨＬＡ配型对肾移植结果的影响受病人的致敏性，供肾的质量，病人的年龄以及病人的人种等因素的影响。     

HLA配型在致敏受者肾移植中的应用研究

目的 探讨人类白细胞抗原（ＨＬＡ）配型在致敏受者肾移植中的临床意义。方法 应用莱姆德细胞板通过补体领事微量细胞毒性试验检测受者的群体反应性抗体（ＰＲＡ）;应用单抗湿板进行供受者ＨＡＬ－Ⅰ类抗原分型;应用微量序列特异性引物（Ｍｉｃｒｏ－ＳＳＰ）进行ＨＡＬ－Ⅱ类基因分型。结果 １７例受者ＰＲＡ阳性率为５．１％￣８０％,平均３７．８９％;按交叉反应组（ＣＲＥＧｓ）配型原则,供受者ＨＬＡＣＲＡＥｓ０．１和     

肾移植术后抗HLA抗体升高对移植肾功能的慢性损害作用

目的 探讨肾移植术后抗HLA抗体升高对移植肾功能的慢性损害作用.方法 采用免疫荧光液相芯片技术检测57例肾移植术后半年以上受者的抗HLA抗体水平,根据抗HLA抗体水平的不同,将受者分为抗HIA抗体(≥10%)阳性组和抗HLA抗体(＜10%)阴性组.再根据阳性组中抗HLA抗体类别的不同,将受者分为抗HLA-Ⅰ类抗体阳性、Ⅱ类抗体阴性(Ⅰ+Ⅱ+)组,抗HLA-Ⅰ类、Ⅱ类抗体均阳性(Ⅰ+Ⅱ+)组和抗HLA-Ⅰ类抗体阴性、Ⅱ类抗体阳性(Ⅰ-Ⅱ+)组.观察和比较各组受者的临床资料和血肌酐(Cr)水平,并进行统计学分析.结果 57例受者中,抗HLA抗体阴性组41例(71.9%),阳性组16例(28.1%);阳性组中,Ⅰ+Ⅱ-组和Ⅰ+Ⅱ+组受者各3例,I-II'组10例.抗HLA抗体阴性组和阳性组受者的肾移植术后时间分别为(4.55±3.16)年和(6.64±3.66)年(P＜0.5),随着术后时间的延长,抗HLA抗体阳性者呈上升趋势.抗HLA抗体阴性组有13例(31.7%)血Cr异常,平均血Cr水平为(92.12±27.52)μmol/L;阳性组有13例(81.3%)血Cr异常,平均血Cr水平为(191.1±119.95)μmaol/L,其中又以Ⅰ+Ⅱ+组的受者血Cr水平最高,为(213.00±165.38)μmol/L,与抗HLA抗体阴性组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抗HLA抗体升高是影响肾移植预后的重要标志物;尤其是抗HLA-Ⅱ类抗体升高对移植肾功能有慢性损害作用.     

肾移植术后抗HLA抗体的检测

肾移植术后抗HLA抗体的产生与急、慢性排斥反应都有直接或间接的关系。及时检测并去除抗HLA抗体可显著提高移植物存活率。本文综述了近年有关抗HLA抗体的研究及进行移植术后常规检测的意义。     

肾移植受者HLA特异性抗体的监测及临床应用

目的：探讨人类白细胞抗原（HLA）群体反应性抗体（PRA）对肾脏移植效果的影响。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）和微量补体依赖性细胞毒试验（CDC）对897例例次肾移植受者的PRA进行动态监测。结果856例初次肾移植受者中术前PRA阳性者121例,占11％,而33例次2次移植和8次3次移植受者术前PRA阳性分别为58％和87％,与初次肾移植受者组比较,PRA阳性受者比例均显著增高（P＜0．001）。PRA阳性组受者肾移植术后排斥发生率为40％,而阴性组受者仅17％,两组比较有显著性（P＜0．01）。PRA阳性组受者的移植物存活率则明显低于阴性组（P＜0．001）,尤其是PRA＞40％的高效敏受者的1、3、5年和7年多移植物存活率与阴性组比较分别下降了24％、38％、57％和56％,均为P＜0．001。ELISA法与CDC法的双盲试验发现,319份受者血清中CDC－PRA的假阳性和假阴性率分别为3．8％和3．1％。结论PRA是预测受者致敏状态的敏感指标,对移植后排斥反应和移植物存活率均有明显影响。     

HLA配型对群体反应性抗体阳性的肾移植受者人/肾存活率的影响

目的探讨HLA交叉反应组（CREGs）配型对群体反应性抗体（PRA）阳性肾移植受者人／肾存活率的影响。方法应用美国莱姆德公司LAT1240、LM720R、SSP2LB试剂，准确检测112例PRA阳性肾移植受者体内PRA的水平及其抗体的特异性，评估其致敏状态，应用CREGs配型标准选择最匹配的供者。结果112例受者中，HLA-Ⅰ类抗体阳性43例，Ⅱ类抗体阳性39例，Ⅰ、Ⅱ类抗体均为阳性30例；HLA配型0～5个位点错配数分别为6、39、38、21、7、1例，术后移植肾发生加速性排斥反应2例、急性排斥反应18例、慢性排斥反应5例、移植肾功能延迟恢复（DGF）4例，因排斥反应导致移植肾切除1例，死亡13例（其中移植肾带功能死亡5例）。目前人存活99例，肾存活96例，5年、3年和1年肾存活率分别为86．21％、86．96％和91．96％。结论运用CREGs配型原则，能使供、受者间的HLA相配率显著提高，可减少PRA对肾移植的不良影响，提高PRA阳性受者的人／肾存活率。     

肾移植受者抗HLA抗体监测的临床意义

目的探讨动态监测肾移植受者抗HLA抗体的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对1517例肾移植受者进行手术前、后血清群体反应性抗体(panel reactive antibody,PRA)强度动态监测,对PRA阳性受体进一步行抗HLA抗体分型并进行随访,观察PRA水平对移植物长期存活和移植肾功能的影响。结果1517例中,术前PRA阴性者1336例,阳性者181例。术前PRA阳性受者和阴性受者的移植物功能延迟恢复(DGF)发生率分别为34.8%、11.9%,两组比较差异有统计学意义(P0.01)。术前PRA阳性受者的移植肾1、3、5、8年存活率分别为94%、85%、73%和63%,术前PRA阴性受者相应为96%、87%、72%和65%,两组比较差异均无统计学意义(P0.05)。移植前及移植6个月后PRA均为阴性的265例受者中,血清肌酐水平异常者仅占19.6%,而术后PRA转为阳性的57例受者中,血清肌酐异常者高达61%,两者比较差异有统计学意义(P0.01);移植前PRA阳性的53例受者中,有24例移植后PRA转为阴性,术后血清肌酐全部正常。结论术前筛查PRA可科学评估肾移植患者的体液致敏状态,为致敏患者选配合适供者;术后监测PRA可及时了解移植肾的免疫状态,有利于防治排斥反应。     

HLA配型与肾移植术后早期急性排斥反应的关系

目的 研究ＨＬＡ配型与尸体肾移植术后早期急性排斥反应的关系。方法 将２６２例尸体肾移植受者按ＨＬＡ配型的误配率（ＭＭ）进行分组,统计各组术后１～２个月内急性排斥反应的发生次数。结果 当ＭＭ〉３时,若接受的器官ＨＬＡ抗原／基因为可接受性,术后急性排斥反应的发生率为１６．４％;若供体器官ＨＬＡ抗原／基因具免疫原性,则急性排斥反应的发生率为３３．１％,两者比较,Ｐ〈０．０５。结论 供受者间ＨＬＡ配型越好     

等候肾移植者群体反应性抗体的变化及HLA致敏途径对其的影响

目的 探讨等候肾移植者群体反应性抗体(PRA)阳性率的变化及HLA致敏途径对其的影响.方法 对1991年1月至2010年12月间来自51个肾移植中心的8926例等候肾移植者10 555例次血液样本PRA检测的结果进行分析.1991～1998年组采用补体依赖的细胞毒性试验技术检测PRA; 1999～2010年组采用酶联免疫吸附试验技术检测PRA.搜集患者的临床资料,分析输血、妊娠和移植对PRA阳性率的影响.结果 8926例中PRA阳性者为1324例(14.83％),其中1991-1998年的PRA平均阳性率为18.17％ (513/2823),1999 2010年的结果为13.29％(811/6103),差异有统计学意义(P＜0.01).1324例PRA阳性者中,PRA为1％～30％者占71.83％;PRA≥30％者占28.17％.既往有血液成分输血史者的PRA阳性率为31.77％,无输血史者的PRA阳性率为1.21％,差异有统计学意义(P＜0.01).女性患者中,有妊娠史者的PRA阳性率为24.64％;无妊娠史者的PRA阳性率为7.19％,差异有统计学意义(P＜0.01).初次移植者的PRA阳性率为13.35％,既往有肾移植经历的受者的PRA阳性率为40.62％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 近20年大多数PRA阳性者其PRA＜30％.输血和肾移植史是导致PRA阳性的重要影响因素;妊娠史是PRA阳性的关联因素.     

HLA配型在肾移植中的临床应用

目的：探讨ＨＬＡ配型在肾移植中的临床应用价值。方法：采用单克隆抗体一步法和顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）,对７８例肾移植受者进行随机性ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、ＤＲ位点配型。结果：能配上２个以上位点者有５９例,占７５．６％。供受者之间２￣３个位点错配与４￣５个位点错配,在移植肾功能延迟恢复及肌酐恢复正常所需时间上,均有显著的统计学差异。结论：ＨＬＡ配型具有快速、准确的特点,能为肾移植受者选择     

PRA、HLA配型技术在肾移植中的应用

目的 探讨群体反应性抗体（ＰＲＡ）、ＨＬＡ配型技术对肾移植近远期效果的影响。方法对等待肾移植的１０２０例患者采用ＰＲＡ测定、ＨＬＡ组织配型,ＰＲＡ阴性或阳性者均经血浆置换,ＨＬＡ抗原３～６个位点相合为第一组;未采用ＰＲＡ、ＨＬＡ组织配型的４２３例患者为第二组。观察两组肾移植术后免疫指标的变化,近期急性排斥反应发生率以及ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、ＤＲ位点对长期存活的影响。结果 第一组肾移植术后环孢素Ａ（ＣｓＡ     

肾移植术后特异性HLA抗体对急性排斥的影响

目的评价肾移植术后特异性HLA抗体对移植肾急性排斥的影响.方法采用前瞻性队列研究,通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测136例肾移植患者围手术期特异性HLA抗体水平,随访观察HLA抗体对急性排斥的影响.结果术后HLA抗体阳性组急性排斥发生率高于阴性组(32.65%vs13.79%,P=0.000).按照HLA-Ⅰ类和Ⅱ类抗体水平分组后,移植肾无排斥存活率依次为HLA-Ⅰ-/Ⅱ-组＞HLA-Ⅰ-/Ⅱ+组＞HLA-Ⅰ+/Ⅱ-组＞HLA-Ⅰ+/Ⅱ+组(P=0.03).结论术后特异性HLA抗体可能是引起移植肾急性排斥的原因之一,HLA-Ⅰ类抗体与急性排斥关系较为密切.     

肾移植长期存活受者致敏状态的检测及其临床意义

目的 检测肾移植长期存活受者的致敏状态,并分析其与移植肾功能的关系。方法 在定期随访的肾移植受者中,选取存活３年以上的受者６６例,其中肾功能正常者４６例,慢性肾功能减退者２０例,用Ｌａｍｂｄａ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｔｒａｙ（ＬＡＴ）酶联免疫试剂盒检测血清中的可溶性抗ＨＬＡ抗体,分析抗体的类型和特异性、致敏与肾功能及移植后时间的关系。结果 肾功能正常组轻度、中度、高度致敏分别为９例、０例、２例,肾功能减     

ELISA法和LABScreen法检测HLA抗体结果的差异

目的 比较ELISA法和LABScreen法检测HLA抗体结果的差异性,并分析两者对移植肾排斥的影响.方法 选取2008年11月至2009年12月期间在本科做肾移植和随访发现肌酐异常并且有肾穿记录怀疑移植肾排斥或者临界改变的患者,用莱姆德抗原板(LAT)和混合抗原板(LAT-MIX)通过ELISA方法检测HLA抗体,并与LABScreen技术检测的HLA抗体结果比较,研究两种方法对肾移植排斥检测结果的差异.结果 共277例患者被纳入研究,其中新移植230例,随访47例,术前HLA抗体阳性病例ELISA法为27例(9.7％),LABScreen法为145例(52.3％).其中ELISA法阴性而LABScreen法阳性的病例为118例(42.6％),ELISA法阳性的病例LABScreen法均阳性.未出现LABScreen法阴性而ELISA法阳性的病例,LABScreen法阳性而ELISA阴性的118个病例中,术后出现移植肾排斥的病例为41例(34.7％).两者均阴性的132个病例中,出现术后移植肾排斥的病例为24例(18.2％)(P=0.003).排斥组术后两周HLA抗体荧光强度不低于术前的占31％,而在非排斥组,术后两周HLA抗体荧光强度不低于术前的比例仅占12.8％ (P＜ 0.01).结论 LABScreen法在对HLA抗体检出率及敏感性上远高于ELISA法,并与移植肾排斥密切相关.