TLR4在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞释放TNF-α和NO中的作用研究

目的　探求Toll样受体 4(TLR4)在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞系RAW 2 64 .7释放肿瘤坏死因子 α(TNF α)和一氧化氮 (NO)中的作用。方法　①体外培养RAW 2 64 .7,设置处理组 (抗TLR4单克隆抗体组 )、阴性对照组与空白对照组 ,分别给予白念珠菌刺激。②刺激 1h ,3h ,6h ,8h后用酶联免疫吸附试验检测各组分泌的TNF α水平。③刺激 6h后Griess法检测各组产生NO的水平。结果　①刺激 1h后抗体浓度为 2 0 μg/ml处理组分泌的TNF α水平低于阴性对照组 (P <0 .0 5 ) ,3h ,6h ,8h后各浓度处理组TNF α水平均低于阴性对照组 (P均 <0 .0 1) ,且呈浓度依赖性 ;② 6h后各浓度处理组NO水平与阴性对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　TLR4在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞释放TNF α中发挥作用 ,而对NO释放没有直接作用。     

烟曲霉刺激下TLR4对大鼠肺泡巨噬细胞释放TNF-α和IL-1β作用

目的观察在烟曲霉孢子刺激下Toll样受体4(TLR4)介导大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)的水平并分析其意义。方法应用体外培养的Wistar大鼠PAM,设置抗TLR4抗体组(阴性对照组)、单纯烟曲霉孢子组(阳性对照组)、烟曲霉和抗TLR4抗体混合组(实验组),于刺激0.5h,1h和2h后分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组上清中TNF-α和IL-1β的水平。结果0.5h,1h和2h后,实验组抗TLR4单抗浓度为20μg/mL的A3组的TNF-α和IL-1β分别为(120±12.4)PG/ML,(160±13.2)PG/ML,(240±16.6)PG/ML和(18±2.3)PG/ML,(58±4.2)PG/ML,(92±9.4)PG/ML,显著低于阳性对照组(P<0.05),高于阴性对照组(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论TLR4在烟曲霉孢子诱导大鼠PAM释放TNF-α和IL-1β中发挥着重要作用,监测TNF-α、IL-1β水平的动态变化有利于曲霉病的早期发现和防治。     

白癜风患者血清及负压吸引疱疱液一氧化氮及相关细胞因子检测

目的探讨一氧化氮(NO)及其相关因子与白癜风发病的关系及在不同分型、分期中的作用。方法采用硝酸还原酶法和ELISA法分别测定32例白癜风患者血清NO和干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-10、IL-12水平,并与18例正常人对照组相比较;同时以负压吸疱取材检测其中20例患者白斑部位及非白斑部位负压吸引疱疱液NO及细胞因子水平。结果白癜风患者血清NO、IFN-γ水平(57.64±8.35μmol/L、30.82±1.36pg/mL)明显高于(P<0.05)正常人对照组(33.88±4.23μmol/L、26.05±0.60pg/mL),IL-10水平(23.40±12.16pg/mL)明显低于(P<0.05)正常人对照组(84.97±34.48pg/mL)。局限型NO水平及泛发型IFN-γ水平(44.33±9.04μmol/L、36.78±4.28pg/mL)在进展期时明显高于(P <0.05)稳定期(27.83±4.90μmol/L、28.11±0.94pg/mL);局限型白斑处负压吸引疱疱液NO水平(68.18±14.13μmol/L)明显高于(P<0.05)非白斑部位(36.74±13.46μmol/L)。结论白癜风患者血清NO水平增高,白斑部位负压吸引疱疱液NO水平明显高于非白斑部位,提示NO在白癜风发病中具有一定作用。白癜风患者血清IFN-γ水平增高,IL-10水平降低,提示两者可能参与白癜风发病。     

白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系产生肿瘤坏死因子α、活化信号分子p38MAPK 的影响

目的：探讨白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系（THP-1细胞系）分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）和细胞内信号分子 p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活的影响。方法实时荧光定量 PCR 分析105、106 CFU/ml 灭活白念珠菌及阳性刺激物脂多糖刺激 THP-1细胞1、3、6 h 后 TNF-α mRNA 表达水平变化。40μg/L 地塞米松预先与 THP-1细胞共培养30 min 后,再用106 CFU/ml 白念珠菌、脂多糖刺激6 h 后检测TNF-α mRNA 表达水平。酶联免疫吸附法检测白念珠菌刺激 THP-1细胞24 h 后 TNF-α分泌量。免疫印迹法分析白念珠菌体外作用 THP-1细胞30 min、1 h 后 p38MAPK 和磷酸化 p38MAPK 的水平。结果105 CFU/ml 白念珠菌、106 CFU/ml 白念珠菌、脂多糖刺激 THP-1细胞组以及空白对照组 TNF-α mRNA 表达水平差异有统计学意义（F =110.98,P <0.001）;白念珠菌刺激1、3、6 h 之间差异也有统计学意义（F =701.680,P <0.001）,随培养时间延长,THP-1细胞 TNF-α mRNA 水平增高,呈时间依赖效应。106 CFU/ml 白念珠菌刺激 THP-1细胞后24 h,TNF-α蛋白水平（6385.70±533.99 ng/L）较空白对照组（147.10±0.53 ng/L）明显升高,差异有统计学意义（P <0.01）。106 CFU/ml 白念珠菌作用于 THP-1细胞30、60 min 后磷酸化 p38MAPK 蛋白水平也明显升高。40μg/L地塞米松预先与 THP-1细胞共培养30 min 后,再以106 CFU/ml 白念珠菌刺激6 h 后 TNF-α mRNA 表达水平（3.77±0.62）较未用地塞米松组（208.50±10.50）明显降低,地塞米松可阻断白念珠菌上调 TNF-α mRNA 水平。结论人 THP-1细胞体外与白念珠菌作用后激活信号分子 p38MAPK 并分泌 TNF-α,参与抗念珠菌感染固有免疫反应。     

白念珠菌胞壁溴化十六烷基三甲铵甘露聚糖下调白介素6和8的研究

目的 探讨白念珠菌胞壁溴化十六烷基三甲铵(CTAB)甘露聚糖影响脂多糖诱导人外周血单一核细胞(PBMC)产生的IL-6、IL-8的效应。方法 3种浓度的CTAB甘露聚糖(1.00mg/mL、0.10mg/mL、0.01mg/mL)体外与人PBMC共孵育预刺激24h,然后加入脂多糖(50μg/mL)再孵育24h,收集上清液;在24h、48h时收集3种浓度CTAB甘露聚糖刺激组的上清液;阳性对照为脂多糖(50μg/mL),并设不加刺激剂的空白对照,酶联免疫法检测各组上清液中白介素-6、IL-8(IL-6、8)的含量。结果 在24h、48h3种浓度CTAB甘露聚糖刺激组均未检出IL-6、IL-8;阳性对照脂多糖组IL-6含量为(478.507±24.876)ng/mL,IL-8含量为(529.655±53.279)ng/mL;阴性对照未检出IL-6、IL-8;1.00mg/mLCTAB甘露聚糖+脂多糖组IL-6含量为(85.620±16.058)ng/mL,IL-8为(123.940±20.319)ng/mL;0.10mg/mLCTAB甘露聚糖+脂多糖组IL-6含量为(210.086±27.874)ng/mL,IL-8为(206.798±31.878)ng/mL;0.01mg/mLCTAB甘露聚糖+脂多糖组IL-6含量为(201.387±32.396)ng/mL,IL-8为(203.133±36.012)ng/mL.结论 白念珠菌胞壁CTAB甘露聚糖对脂多糖诱导人PBMC产生IL-6、IL-8具有下调作用。     

阿魏酸钠对体外培养人真皮中成纤维细胞EGF表达的影响

目的观察中药当归活性成分阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对人真皮成纤维细胞(fibroblast,FB)中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)表达的影响。方法体外培养人真皮FB,用MTT法检测10μmol/L,30μmol/L,60μmol/L,125μmol/L,250μmol/L,500μmol/L和1 000μmol/L等不同浓度SF对FB增殖的影响;并用ELISA法分别重点观察SF 125μmol/L,250μmol/L和500μmol/L于24h,48h和72h时细胞上清液中EGF含量(pg/mg protein)。结果 10μmol/L,30μmol/L,60μmol/L,125μmol/L,250μmol/L和500μmol/L等不同浓度SF对FB增殖无明显影响(P>0.05),1 000μmol/L时细胞增殖显著性降低(P<0.05)。125μmol/L组24h,48h与72h EGF含量分别为548.23±137.28,589.25±120.28和654.28±132.10;250μmol/L组24h,48h和72h分别为589.65±157.29,701.27±193.47,745.23±129.43;500μmol/L组24h,48h和72h分别为757.24±111.47,903.24±134.12和950.76±129.28。125,250μmol/L组72h与24h比较明显升高(P<0.05),与48h比较无明显差异(P>0.05);500μmol/L组72h与48h比较明显升高(P<0.05),与24h比较显著性升高(P<0.01)。此外,125μmol/L和250μmol/L组24h与对照组比较无明显差异(P>0.05),500μmol/L组则显著性升高(P<0.01)。125μmol/L组48h与对照组比较无明显差异(P>0.05),250μmol/L,500μmol/L组较对照组显著性升高(P<0.01)。125μmol/L,250μmol/L和500μmol/L组72h时较对照组均显著性升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。对照组不同时间比较无明显差异(P>0.05)。结论 当归活性成分SF能增强人体真皮成纤维细胞EGF的表达,且具有显著的剂量依赖性及时间依赖性。     

真菌病

20050871 TLR4在白念珠菌刺激小鼠巨噬细胞释放TNF-α和NO中的作用研究/陈兴平(华中科大同济医学院附属同济医院皮肤科),熊瑛,黄朝卫//中国皮肤性病学杂志.-2004,18(12).-711-713     

抗原致敏树突状细胞抗小鼠白念珠菌系统感染的实验研究

目的研究不同形态白念珠菌致敏的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)对免疫抑制小鼠白念珠菌系统感染的免疫保护作用及所对应的细胞因子改变。方法孢子相和菌丝相白念珠菌在体外分别致敏小鼠骨髓来源的DC(BM-DC),测定混合培养上清IL-12水平;尾静脉回输免疫抑制小鼠体内后,ELISA法测定各组小鼠脾IFN-γ及IL-4水平,并检测肾携菌量。结果DC孢子致敏组上清IL-12水平(380.2±104.13)pg/mL明显高于DC菌丝致敏组和对照组(P<0.05);而DC菌丝致敏组(74.79±23.47)pg/mL与单纯DC培养组上清IL-12水平(19.71±9.21)pg/mL差异无统计学意义(P>0.05)。孢子致敏DC、菌丝致敏DC分别过继免疫小鼠后,前者脾脏IFN-γ水平(269.43±17.34)pg/g明显高于其他组(P<0.05),IL-4水平(6.23±0.37)pg/g则明显低于其他对照组(P<0.05);荷菌一周后孢子致敏DC回输组小鼠肾携菌量(3.58±2.32)×102CFUs与健康小鼠荷菌组比较无统计学意义(P>0.05);其他各组间肾携菌量比较则有统计学意义(P<0.05)。结论尾静脉回输白念珠菌孢子体外致敏的小鼠骨髓来源DC可有效诱导免疫抑制小鼠抗白念珠菌保护性免疫。     

雌激素对白念珠菌诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3表达的影响

目的:确定雌激素对白念珠菌诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3炎性体基因表达的影响。方法:体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,将其分为5组:空白对照组、白念珠菌组、白念珠菌+10~(-10)mol/L17β-雌二醇组、白念珠菌+10~(-9)mol/L 17β-雌二醇组和白念珠菌+10~(-8)mol/L17β-雌二醇组。荧光定量PCR检测细胞内NLRP3 mRNA表达;Western Blot检测细胞内NF-κBp65和caspase-1p20的活性;酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。结果:巨噬细胞在白念珠菌的刺激下,与空白对照组比较细胞内NLRP3 mRNA的表达、NF-κB和caspase-1p20活性和细胞培养上清液中的IL-1β含量均明显升高(P0.01);加入雌激素干预后,随着雌激素浓度的增高,细胞内NLRP3 mRNA表达、NF-κB和caspase-1p20活性、细胞培养上清液中的IL-1β含量明显低于对照组(P0.01)。结论:雌激素可能通过抑制NF-κB活性抑制白念珠菌诱导的NLRP3表达、caspase-1的活化和IL-1β的分泌。     

重组白介素18抗小鼠系统性白念珠菌感染的研究

目的 探讨重组白介素18在抗小鼠系统性白念珠菌感染中的作用。方法 建立环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠系统性白念珠菌感染动物模型，设置对照组（单纯白念珠菌感染组）与处理组（白念珠菌感染前注射重组白介素18）。用平皿稀释法检测肾脏、脾脏组织菌落形成单位（cfu）数目；制作肾、脾脏组织病理学标本，评估其病理学分级；并通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测脾脏干扰素γ分泌水平。结果 感染后2，3，7天，处理组肾脏cfu分别为4.996 ± 0.063，4.765 ± 0.188，3.985 ± 0.133，对照组肾脏cfu分别为5.786 ± 0.110，6.097 ± 0.079，5.996 ± 0.082，处理组显著低于对照组（P < 0.01）；脾脏组织cfu值也低于对照组，但两组差异无统计学意义（P > 0.05）。肾脏组织病理学评分处理组低于对照组，处理组较对照组感染程度减轻，差异有统计学意义（P < 0.05）；脾脏组织病理学评分处理组也低于对照组，但差异无统计学意义（P > 0.05）。同时检测脾脏干扰素γ分泌水平，感染后2，3，7天，处理组分别为73.529 ± 6.070，92.181 ± 7.820，108.564 ± 9.802 pg/mL，对照组分别为40.511 ± 4.456，59.414 ± 5.041，64.455 ± 5.272 pg/mL，处理组明显高于对照组，差异具有统计学意义（P < 0.01）。结论 重组白介素18在小鼠系统性白念珠菌感染中具有保护作用。     

TGF-β1对巨噬细胞抗白念珠菌活性影响的实验研究

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）对巨噬细胞（MΦ）抗白念珠菌活性的影响及其影响机制。方法：分离纯化小鼠腹腔巨噬细胞，与不同浓度重组人TGF-晶（rhTGF-晶）共同培养24h，收集上清，酶联免疫法测定TNF—α浓度，Griess反应法测定NO的活性；收集培养后的细胞与一定浓度的白念珠菌共同培养4h后，检测每毫升中白念珠菌菌落形成单位（cfu／mL）。结果：rhTGF-β1在10n/mL及100ng／mL时，对MΦ抗白念珠菌活性具有明显抑制作用（P〈0．05），而其在0．1ng／mL-100ng/mL时对MΦ产生TNF—α具有明显抑制作用（P〈0．05）；rhTGF-β1在1ng／mL-100ng／mL时，对MΦ产生NO具有明显促进作用（P〈0．05）。结论：rhTGF-β1可以抑制MΦ的抗白念珠菌活性，这种抑制作用可能与rhTGF-β1抑制MΦ的杀伤活性和影响MΦ的分泌功能有关。     

C型凝集素1受体参与人中性粒细胞体外杀伤白念珠菌活性的实验研究

【摘要】 目的 探讨人中性粒细胞能否通过C型凝集素1受体（dectin-1）识别白念珠菌细胞壁不溶性β葡聚糖来介导体外杀伤白念珠菌的活性。 方法 100 mg/L β葡聚糖体外作用于中性粒细胞1、6、24 h后,实时荧光定量逆转录PCR分析dectin-1和Toll样受体2 mRNA表达水平。100 mg/L β葡聚糖体外分别刺激中性粒细胞15 min、2 h、6 h,或先用dectin-1抑制剂昆布多糖100 mg/L和50 mg/L预处理30 min后,再予100 mg/L β葡聚糖刺激2 h,微量培养板荧光分析法检测中性粒细胞H2O2释放水平。昆布多糖预处理的中性粒细胞与白念珠菌体外共培养后,检测菌落形成单位（CFU）。结果 β葡聚糖作用中性粒细胞1、6、24 h后,dectin-1 mRNA水平分别为2.8195 ± 0.1669、5.4859 ± 0.7244、3.6041 ± 0.5372,均明显高于空白对照组（均P < 0.01）。β葡聚糖刺激中性粒细胞15 min后H2O2水平为（64.55 ± 15.67） μmol/L,2 h时为（290.34 ± 30.56） μmol/L,6 h时为（208.54 ± 26.88） μmol/L,与空白对照组（22.05 ± 3.99） μmol/L比较,差异均有统计学意义（均P < 0.01）;100 mg/L和50 mg/L昆布多糖预处理组分别为（80.45 ± 22.41） μmol/L和（130.42 ± 44.55） μmol/L,与β葡聚糖刺激组相比,分别降低了73%和45%,差异均有统计学意义（P < 0.01）。昆布多糖能明显抑制中性粒细胞体外杀伤白念珠菌的活性（均P < 0.01）。 结论 Dectin-1参与人中性粒细胞分泌H2O2以及对白念珠菌杀灭活性,为过继性粒细胞转输治疗系统性念珠菌感染提供初步依据。 【关键词】 念珠菌,白色; 中性白细胞; β葡聚糖类; 外源凝集素类,C型; 过氧化氢     

砷剂对角质形成细胞生长和IL-8、TNF-α分泌的影响

目的研究不同浓度砷剂对角质形成细胞生长和IL-8、TNF-α分泌的影响。方法以体外培养的角质形成细胞株为对象,不同浓度砷剂处理细胞后,用MTT比色分析法反映细胞增殖的变化。ELISA方法测定细胞上清中IL-8分泌,用L929细胞检测上清TNF-α的生物活性。结果0.5～5μmol/L三氧化二砷对角质形成细胞株HaCaT细胞有明显抑制作用,并呈剂量依赖关系。在0.001μmol/L至0.015μmol/L药物浓度范围内,同对照组相比细胞增殖加快;未药物处理的对照组HaCaT细胞可分泌一定水平的IL-8和TNF-α,低浓度砷剂(0.001～0.015μmol/L)可刺激其分泌增加。结论低浓度砷剂可促进角质形成细胞株HaCaT细胞的生长,但高浓度能抑制增殖和影响细胞活性。并在一定浓度范围刺激IL-8和TNF-α的合成分泌,可能在砷相关皮肤病的发病机制中具有重要意义。     

窄谱中波紫外线治疗对寻常性银屑病患者血清TNF-α,IL-10水平的影响

目的探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗对寻常性银屑病患者血清TNF-α和IL-10水平的影响。方法 42例银屑病患者采用NB-UVB照射治疗,3次/周,共治疗6周,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定患者治疗前后血清TNF-α和IL-10含量的变化情况,并与20例正常人对照。结果银屑病患者治疗有效率为80.95%,正常人血清TNF-α和IL-10浓度分别为(0.58±1.17)ng/mL和(16.91±4.58)pg/mL;银屑病患者治疗前后TNF-α浓度分别为(41.56±8.23)ng/mL和(12.40±7.21)ng/mL,治疗前后TNF-α水平比较,差异有统计学意义(P<0.01);银屑病患者治疗前后IL-10浓度分别为(7.45±2.32)pg/mL和(11.64±3.42)pg/mL,治疗前后IL-10水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NB-UVB照射治疗银屑病患者有效,可能与抑制银屑病患者血清TNF-α水平,提高IL-10水平有关。     

他克莫司对HaCaT细胞核因子-κB和糖皮质激素受体表达的影响

目的 探讨他克莫司对TNF-α刺激的HacaT细胞核因子-κB(NF-κB)表达的影响,以及对HaCaT细胞糖皮质激素受体(GR)α和β表达的影响.方法 采用Western印迹和免疫荧光-激光共聚焦显微镜技术观察:①以TNF-α(10μg/L)单独或TNF-α(10μg/L)与他克莫司(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)同时作用HaCaT细胞,在24h和48h分别观察胞核NF-κB的表达;②以他克莫司(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)作用HaCaT细胞,在12h、24h和36h分别观察GRα和GRβ的表达.结果 未处理组HaCaT细胞的胞核有NF-κB(p65)蛋白的表达,灰度值比值为0.4988±0.03506;TNF-α作用24h和48h后,HaCaT细胞胞核NF-κB(p65)表达随时间延长而增强,灰度值比值分别为0.73±0.0316和0.8925±0.0171,与未处理组相比较.差异均有统计学意义(P<0.05).TNF-α与10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6mol/L他克莫司同时作用组HaCaT细胞胞核NF-κB表达灰度值比值分别为0.6825±0.0263、0.6200±0.0163和0.5575±0.0299,NF-κB表达随他克莫司浓度增加而减弱,后两组与TNF-α单独作用组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).各浓度他克莫司作用24h和48h的NF-κB表达差异均无统计学意义(P>0.05).与未处理组相比,不同浓度他克莫司作用HaCaT细胞后,各时相点GRα和GRβ的表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论 他克莫司能以浓度依赖方式抑制TNF-α刺激的角质形成细胞胞核NF-κB的表达,不影响角质形成细胞GRα和GRβ的表达.     

山苍子油抗念珠菌的敏感性及作用机理的电镜研究

目的应用美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)推荐的微量法测定山苍子油(Liseacubebaoil)对5种医学重要念珠菌的最小抑菌浓度,并在电镜下观察山苍子油作用后,耐唑类药物的克柔念珠菌(Candidakrusei)超微结构的改变,探讨其作用机制,从而为耐唑类药物的抗念珠菌中药开发提供依据。方法参照NCCLS(NCCLS-M27-T文件)推荐的抗真菌药物敏感试验方案微量稀释法检测5种念珠菌标准菌株,并以氟康唑作为质控药物。电镜下观察山苍子油作用前后克柔念珠菌超微结构的改变。结果山苍子油对5种标准菌株的最小抑菌浓度(MIC)分别为:白念珠菌(14.14±3.64)μg/mL,热带念珠菌(23.22±2.85)μg/mL,光滑念珠菌(31.24±2.88)μg/mL,近平滑念珠菌(76.19±4.40)μg/mL,克柔念珠菌(28.30±2.54)μg/mL。电镜观察发现,氟康唑处理组克柔念珠菌结构完整,其细胞壁、细胞膜结构清晰;山苍子油处理组见克柔念珠菌细胞壁溶解破坏,细胞膜连续性破坏,细胞器肿胀溶解乃至坏死溶解。结论山苍子油不仅对白念珠菌有抗菌作用,对其他致病菌种,特别是耐唑类药物的菌种如克柔念珠菌也有着类似的抗菌作用。山苍子油可能通过破坏克柔念珠菌的细胞壁、细胞膜的结构而抗真菌。     

莪术挥发油体外抗念珠菌活性的研究

目的:研究莪术挥发油体外抗念珠菌的活性。方法:采用微量稀释法以莪术挥发油对62株念珠菌进行体外药敏实验,测定其最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MFC),同时以氟康唑及两性霉素B作为质控药物。结果:莪术挥发油对念珠菌属的平均MIC值为(760.87±376.56)μg/mL,其中对白念珠菌MIC和MFC值均为(734.13±379.36)μg/mL;对光滑念珠菌的MIC、MFC均为(833.59±415.07)μg/mL;对克柔念珠菌的MIC、MFC均为(1082.59±405.07)μg/mL;对热带念珠菌的MIC、MFC均为(606.25±207.53)μg/mL;对近平滑念珠菌的MIC、MFC均为(568.36±218.76)μg/mL;对季也蒙念珠菌的MIC、MFC均为757.81μg/mL。结论:莪术挥发油在体外对临床常见6种念珠菌均有不同程度的抑制作用,并且对各菌种的抑制作用无显著性差异(P>0.05);莪术挥发油抗念珠菌的作用方式可能为杀菌;NCCLS-M27-A方案可用于对中药抗念珠菌活性的评价。     

咪唑斯汀对致敏小鼠脾淋巴细胞释放LTB_4和IL-5的抑制作用

目的　观察咪唑斯汀对卵蛋白(OVA)致敏的小鼠脾淋巴细胞释放白三烯B4 (LTB4)和白介素5 (IL 5)的影响。方法　实验第1天及第15天给小鼠腹腔注射OVA,构建致敏动物模型,分离实验小鼠脾淋巴细胞进行培养,以不同浓度咪唑斯汀及对照药物预处理,加入OVA再次刺激,采用竞争酶联免疫吸附法(CompetitiveELISA)检测培养细胞上清液中LTB4及IL 5水平。结果　致敏组小鼠脾淋巴细胞培养上清液中LTB4和IL 5水平分别为1 1 1. 0 6±1 5. 9 8pg/ml和333. 54±24. 76pg/ml,较正常组小鼠显著升高(P<0. 01)。1. 0μmol/L和10μmol/L的咪唑斯汀可显著抑制致敏小鼠脾淋巴细胞产生LTB4和IL 5。对照药物为1. 0μmol/L的地塞米松,对LTB4和IL 5的释放均具显著抑制效应;而10μmol/L的扑尔敏及氯雷他定对LTB4和IL 5的抑制不明显。结论　咪唑斯汀对致敏小鼠脾淋巴细胞LTB4和IL 5的释放具有剂量依赖性的抑制作用。     

实验性小鼠系统性念球菌病TNFα水平的测定

本文通过测定小鼠脾细胞在感染不同时间产生TNFα水平来探讨宿主在急性系统性念珠菌病中的保护机制。以致死量（106个细胞／ml）白念珠菌从尾静脉感染小鼠，用放射免疫法检测感染后3天和6天，小鼠脾细胞与刀豆蛋白A（ConA，10μg／ml）孵育上清液中TNFα含量，同时用平皿稀释法测定感染小鼠肾脏菌落形成单位（CFU），并计算感染小鼠平均存活时间（MST）。结果表明，感染后3天和6天，TNFα含量分别为306±73pg／ml和218±60pg／ml，均明显高于对照组（P＜0．01）；CFU分别为（4．41±1．16）×103／ml和（28．4±8．70）×103／ml；MST为9．17天。结果提示TNFα可能参与了抗白念珠菌感染的早期免疫反应，对机体起保护作用。     

寻常性银屑病患者血清α肿瘤坏死因子水平及生物学活性检测与相关性研究

目的:研究血清中α肿瘤坏死因子(TNF-琢)与寻常性银屑病的相关性。方法:收集症状典型的32例寻常性银屑病患者的血清标本,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中TNF-α浓度,应用L929细胞检测血清中TNF-α的生物学活性,并与患者的病情、病程、年龄等因素进行相关性分析,同时与正常人的血清检测结果进行对比分析。结果:正常人血清中TNF-α浓度及生物学活性分别为(3.1±6.3)pg/mL及7.9%±5.6%;银屑病患者血清中TNF-α浓度及生物学活性分别为(45.3±86.2)pg/mL及61.8%±10.5%。银屑病患者皮损面积及严重度指数(PASI)的总分与血清中TNF-α浓度及生物学活性均呈正相关。结论:血清中TNF-α水平及其生物学活性与寻常性银屑病关系密切。