多巴胺激活Kv通道抑制胰岛素分泌的电生理机制

目的探讨多巴胺激活电压依赖性钾(Kv)通道抑制葡萄糖刺激胰岛素分泌的电生理机制。方法分离雄性SD大鼠胰岛和β细胞,根据实验使用多巴胺(DA)、D;样受体激动剂(SKF38393)和D;样受体激动剂(Quinpirole)及阻断剂(Eticlopride)进行干预。酶联放射免疫实验测定胰岛素含量;膜片钳电压钳记录β细胞膜上Kv通道电流的变化,电流钳记录动作电位时程的长短;DiBAC4(3)染色观察INS-1细胞膜电位的变化。结果 SKF38393对胰岛素分泌和Kv通道均没有明显影响;Quinpirole明显抑制胰岛素分泌,并且增加Kv通道电流;多巴胺明显抑制胰岛素分泌,增加Kv通道电流,缩短β细胞动作电位时程,且均可被Eticlopride逆转;此外,多巴胺降低INS-1细胞膜电位。结论多巴胺作用于D;样受体,活化Kv通道,缩短动作电位时程,降低β细胞膜电位,从而发挥抑制葡萄糖促进胰岛素分泌的作用。     

IL-1β诱导中脑神经干细胞向多巴胺能神经元分化的研究

在胚鼠中脑曲分离神经干细胞 ,研究 IL-1β对中脑神经干细胞诱导分化为多巴胺神经元的效能 ,运用体外分离、培养小鼠胚胎中的中脑神经经干细胞 ,加入 IL -1β诱导其分化 ,通过巢蛋白 ( Nestin)、神经元特异性烯醇化酶 ( NSE)、胶质纤维酸性蛋白( GFAP)、酪氨酸羟化酶 ( TH)免疫组化鉴定。结果显示 ,小鼠胚胎的腹侧中脑曲部位分离获得了大量未分化、呈球状悬浮生长的细胞 ,且能在有血清的培养基中分化为神经元和神经胶质细胞。经 IL-1β诱导后 ,多巴胺能神经元分化比例达 16%左右。     

酒精和精神兴奋剂依赖的遗传药理学治疗(英文)

遗传药理学使用基因检测的方法预测药物治疗对酒精或阿片类物质依赖患者个体的有效性。酒精和阿片类物质产生强化效应和依赖的共同神经生物学基础是增加β-内啡肽释放。酒精和阿片类物质引起的生理和主观效应都与β-内啡肽和μ阿片受体有密切的关系。纳曲酮治疗是一种对酒精和阿片依赖均有效的治疗方法,其能增加β-内啡肽的基础释放量,从而抑制酒精引起的β-内啡肽进一步释放。纳曲酮在治疗酒精依赖中的作用被认为与μ阿片受体基因(Al18G)的功能性单核苷酸多态性(SNP)有关。具有这种单核苷酸多态性的酒精依赖患者使用纳曲酮治疗后复发率低。这种单核苷酸多态性在中国北方人中较为常见,因此提示了纳曲酮治疗酒精依赖在中国的重要性。另一个与精神活性物质或其他药物依赖相关的重要基因多态性多发生于编码多巴胺β-羟化酶(DβH)基因的启动子区域。这种基因多态性可导致多巴胺β-羟化酶水平降低10 -100倍,使神经元中的多巴胺转化为去甲肾上腺素。多巴胺β-羟化酶水平正常的精神活性物质依赖患者采用多巴胺β-羟化酶抑制剂治疗能明显减少药物滥用,而多巴胺β-羟化酶水平低的患者采用该疗法治疗无效。遗传药理学在改善治疗效果方面有巨大的潜力。我们已经鉴别出能影响药效学和药代动力学因素的基因变异体。这些变异能够指导药物治疗的选择,使酒精和精神活性物质滥用患者得到最优化的治疗,降低戒断后的复吸率。     

升压药 多培沙明(Dopexamine)

化学名 4-(2-[(6-[(2-苯乙基)氨基]己烷基)氨基]乙基)-1,2苯二酚二盐酸盐药效分类升压药开发单位费森药厂上市厂商费森药厂1989年上市药理多培沙明是一种新合成的儿茶酚胺类药物,化学结构与多巴胺相似,有很强的β_2肾上腺素能受体兴奋作用,对多巴胺DA_1和DA_2受体,以及β_1肾上腺素能受体的兴奋作用较弱,尚能抑制神经元对儿茶酚胺的摄取。本品对离体的心血管标本,能显著抑制其神经元对儿茶酚胺的摄取,并能显著扩张动脉血管,降低狗的血压和后负荷,使心率加快,心肌收缩力增强。本品的正性频率作用和正性肌力作用是通过药物间接兴奋β_1肾上腺素能受体,提高压力感受器的反射活性,抑制去甲肾上腺素的再摄取,以及直接兴奋心脏β_2肾上腺素能受体而产生的。多培沙明还     

产金属β-内酰胺酶嗜麦芽寡养单胞菌的研究

目的 探讨嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β-内酰胺酶的酶学特性及分子生物学特征。方法 采用纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株；测定产酶株所产β-内酰胺酶对亚胺培南的稳定性和丝氨酸β-内酰胺酶、金属β-内酰胺酶抑制剂的抑酶保护效应；检测金属β-内酰胺酶的等电点；用PCR法检测金属β-内酰胺酶全基因，并测序。结果 纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株4株，药敏试验显示对多种抗菌药物耐药。酶稳定性试验显示，4株产酶菌产碳青霉烯水解酶。酶抑制试验表明，克拉维酸对这4株菌所产酶无抑酶保护效应，而金属β-内酰胺酶抑制剂EDTA对4株菌所产酶有抑制作用，且酶活性能被ZnCl2复活。等电聚焦显示，2株菌(710、750)产的碳青霉烯水解酶pI为6．6，l株菌(603)的pI为6．2，EDTA抑制试验证实均为金属β-内酰胺酶。PCR结果显示，以4株细菌基因组DNA为模板，用所设计的金属β-内酰胺酶全基因引物进行PCR扩增，2株(750，7lO)扩增结果为阳性，进行序列分析，均为867bp。经GeneBank网上同源性比较．发现与金属酶Ll的编码基因blaS(注册号AJ291672．1)的核苷酸序列同源性均为99％。结论 嗜麦芽寡养单胞菌710和750号产Ll型金属β-内酰胺酶；603号可能产非Ll型金属β-内酰胺酶。     

熊果酸降血糖药理作用及其机制的研究进展

熊果酸对正常的和多种糖尿病模型动物具有降血糖作用。熊果酸是:(1)通过抗氧化和调节免疫功能,保护β-细胞和刺激胰岛素表达和分泌;(2)通过抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)表达和活性,和Ι型11β-羟基甾体脱氢酶(11β-HSD1)活性以及促进过氧化物酶体增殖子激活型受体-α(PPAR-α)的表达和激活,对抗胰岛素抵抗,促进组织细胞摄取和利用葡萄糖,改善脂、糖代谢紊乱;(3)通过抑制α-葡萄糖苷酶活性,延缓肠道吸收葡萄糖,产生降血糖作用。综述熊果酸降血糖药理作用及其机制的文献,对其研究进展作了分析,为抗代谢综合征新药的研发提供参考。     

β-丁香烯代谢产物和结构改造的研究

从β-丁香烯代谢产物中分离得到一种有药理活性的化合物,经光谱分析及化学反应证明其结构为β-丁香酮(8)。根据代谢产物的化学结构以及构-效关系理论,对β-丁香烯进行了结构改造研究,结果得到一种活性较强的半合成产物,为无定形长丝状物,其结构被鉴定为β-丁香烯醇(3)。药理实验表明化合物(8)及(3)对豚鼠离体气管平滑肌均有较强的松弛作用,化合物(3)还能明显抑制组织胺和乙酰胆碱诱发的豚鼠哮喘,其作用持久而毒性低,可望成为一种新型的平喘药物。     

尿酸激活Nrf2-ARE信号通路对帕金森病小鼠的保护作用

目的 探讨尿酸对帕金森病(PD)小鼠的神经保护作用以及对核因子E2相关因子2(Nrf2)的调控作用。方法 雄性C57BL/6J小鼠(6~8周、20~25 g)30只,采用随机数字表法分为三组:对照组(生理盐水)、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)组、尿酸组(尿酸+MPTP),每组各10只。MPTP组小鼠经腹腔注射MPTP(20 mg/kg),每天1次,连续7 d。尿酸组于MPTP给药之前2 h腹腔注射尿酸(250 mg/kg),共13 d(MPTP注射前3 d,MPTP注射同时的7 d,MPTP结束后3 d)。对照组接受0.9%生理盐水代替MPTP和尿酸。在第14天测量各组小鼠的行为和认知功能,处死小鼠获取脑组织,免疫荧光染色测定黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达。实时荧光定量PCR检测Nrf2及下游基因mRNA的表达。免疫组化检测海马白细胞介素-1β(IL-1β)表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和海马IL-1β、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 尿酸能改善PD小鼠的行为学和认知功能,增加黑质TH阳性多巴胺能神经元数目和纹状体多巴胺含量。尿酸增加Nrf2和Nrf2下游基因mRNA的表达,包括γ-GCLC、HO-1和NQO1。尿酸显著提高MPTP处理小鼠黑质区SOD、CAT、GSH含量,降低MDA含量。尿酸抑制海马组织IL-1β蛋白的表达,并降低血清和海马中IL-1β、IL-6和TNF-α水平。结论 尿酸对PD小鼠多巴胺能神经元显示神经保护特性,其机制可能与尿酸通过激活Nrf2-ARE通路及调节神经炎症和氧化应激有关。     

PDGFR-β抑制剂细胞筛选模型的构建及应用

目的建立针对以血小板衍生生长因子受体-β(plate-let-derived growth factor receptor-β,PDGFR-β)为靶标的特异及灵敏的细胞模型体系,用于酪氨酸激酶受体(receptor tyro-sine kinase,RTK)抑制剂的筛选和研究。方法构建人的PDGFR-β真核表达载体pcDNA3.1-PDGFR-β,将其转染至NIH 3T3细胞,获得稳定转染的细胞克隆,并对其进行功能学鉴定及应用;应用瞬时转染PDGFR-β的HeLa细胞,建立PDGF依赖性的受体磷酸化细胞模型。结果在无血清培养条件下,稳定转染人PDGFR-β的NIH 3T3细胞获得了PDGF依赖性的细胞增殖特征;HeLa细胞经瞬时转染PDG-FR-β后,可以检测出明显的PDGF依赖性的受体酪氨酸磷酸化。通过应用已知PDGFR-β抑制剂及自行合成化合物,确证了以上细胞模型具有机制针对性特征。结论所构建并确证的细胞模型具有特异性和灵敏性,适用于较高通量的PDGFR-β和其它RTK抑制化合物的体外筛选与研究。     

抗帕金森病新药brasofensine硫酸盐

brasofensine硫酸盐(NS-2214)为多巴胺重吸收抑制剂,用于治疗帕金森病已进入期临床试验。brasofensine硫酸盐的化学名为:(E)-(1R,2R,3S,5S)-3-(3,4-二氯苯基)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-羰基醛-OWTBZ〗-甲基肟硫酸盐(1:1)。　　目前,对多巴胺重吸收抑制剂用于治疗神经性疾病和精神性紊乱的可能性的兴趣不断增长。正常情况下,释放于突触间隙并作用于突触后多巴胺受体的多巴胺在完成其正常生理功能后会在突触前末端处经重吸收机制被清除。抑制这种重吸收会增强多巴胺的正常生理功能。可卡因具有抑制多巴胺重吸收的性质,因此,有关研…     

吗啡、MK-801对电刺激隐神经引起大鼠ACG多巴胺含量增高的影响

目的研究皮下注射吗啡、静脉注射N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体拮抗剂5-甲基二氢丙环庚烯马来酸(MK-801)对电刺激隐神经(saphenous nerve,SN)引起大鼠扣带回前部(anterior cingulate gyrus,ACG)多巴胺含量增高的影响,以及MK-801对吗啡作用的影响。方法应用高效液相色谱-电化学检测技术进行实验研究。结果电刺激SN引起ACG多巴胺含量显著增高;皮下注射吗啡抑制电刺激SN引起的ACG多巴胺含量的显著增高;静脉注射MK-801能够拮抗电刺激SN引起的ACG多巴胺含量的显著增高,并且能够增强吗啡抑制电刺激SN引起的ACG多巴胺含量的显著增高。结论 SN传导的伤害性信息能够到达ACG,激活ACG多巴胺能神经元,释放多巴胺,谷氨酸NMDA受体参与此过程;吗啡抑制ACG多巴胺能神经元的活动;MK-801增强吗啡的抑制作用。     

帕金森病小鼠和大鼠模型黑质纹状体中胆绿素还原酶B的表达

目的探讨胆绿素还原酶B(biliverdin-Ⅸβreductase,BVRB)在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phe-nyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)帕金森小鼠模型和6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)帕金森大鼠模型黑质-纹状体内的表达。方法通过高效液相色谱的方法检测纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量,通过免疫印迹的方法检测黑质纹状体内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达,以确认模型的成功建立。对黑质纹状体BVRB的表达进行免疫印迹分析。结果与正常对照组相比,MPTP小鼠及6-OHDA大鼠模型纹状体内多巴胺及其代谢产物的含量均明显下降(P<0.01),黑质纹状体内TH表达水平也明显下降(P<0.05),而黑质纹状体BVRB的表达水平在两种模型中均明显增高(P<0.05)。结论黑质纹状体BVRB的高表达可能与帕金森病的氧化应激机制相关。     

毛钩藤碱对6-羟基多巴胺诱导的帕金森病模型大鼠神经保护作用及机制研究

目的 探讨毛钩藤碱对帕金森病(Parkinson′s disease, PD)模型大鼠的神经保护作用及机制。方法 采用右侧中脑黑质致密部注射6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)制备大鼠PD模型,将建模成功的PD大鼠随机分为模型组、美多芭组、毛钩藤碱低剂量和高剂量组,同时设置正常对照组,每组12只。给予相应药物灌胃干预,每天1次,连续1个月。采用旋转试验、转棒试验和Morris水迷宫试验检测大鼠行为学变化;HE染色法观察大鼠右侧中脑黑质病理学变化;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠右侧纹状体中多巴胺(dopamine, DA)水平;免疫组化法检测大鼠右侧中脑黑质中多巴胺能神经元标志物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达;ELISA法检测大鼠右侧中脑黑质IL-6、IL-1β和TNF-α水平;Western blot检测大鼠右侧中脑黑质中NF-κB p65、NF-κB抑制因子α(IκBα)、p-IκBα等蛋白表达水平。结果 毛钩藤碱能显著改善PD大鼠行为学障碍及中脑黑质损伤,升高纹状体DA含量及中脑黑质中TH阳性神经元数量和Iκ...     

认知辅佐药沙普蝶呤盐酸盐(Sapropterin Dihydrochloride)

6R-L-赤-四氢生物蝶呤(6R-BH4)是酪氨酸羟化酶(酪氨酸3-氨基氧合酶)的天然辅因子,又是儿茶酚胺类(如多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素)的限速酶。而且,6R-BH4既是色氨酸羟化酶(色氨酸5-单氧合酶)的辅因子,又是5-羟色胺(5-HT)生物合成的限速酶。鉴于脑内6R-BH4浓度比酪氨酸羟化酶和色氨酸羟化酶的K_m值(米氏常数)低,故认为6R-BH4的组织水平在调节上述酶类的活性起重要作用。     

6-羟基多巴胺通过CaMKII调节Cav1.3对大鼠黑质多巴胺能神经元的损伤研究

目的探讨Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶II(CaMKII)和Cav1.3在6-羟基多巴胺处理大鼠原代黑质多巴胺能神经元损伤中的作用。方法取出生24 h内大鼠黑质多巴胺能神经元进行原代培养,12d后分别进行加药处理。使用免疫印迹法、免疫共沉淀法检测6-羟基多巴胺对神经元CaMKII活性和Cav1.3表达情况、Cav1.3-CaMKII复合体形成情况。采用MTT法、siRNA敲减技术检测6-羟基多巴胺对大鼠原代多巴胺神经元细胞死亡情况的影响。结果 6-羟基多巴胺处理组Cav1.3表达水平和p-CaMKII水平明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。6-羟基多巴胺处理组Cav1.3-CaMKII复合体水平明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。6-羟基多巴胺处理组p-CaMKII和Cav1.3水平显著高于对照组(P0.05),而KN能明显抑制6-羟基多巴胺引起的p-CaMKII和Cav1.3增加,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。SiCav1.3能抑制50%以上Cav1.3表达,抑制Cav1.3和CaMKII,改善6-羟基多巴胺引起的细胞损伤,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论 6-羟基多巴胺处理大鼠原代多巴胺神经元引起的细胞损伤与Cav1.3和CaMKII表达和活性增加相关,CaMKII通过与Cav1.3形成复合体来直接调节Cav1.3的功能,抑制Cav1.3和Ca MKII可改善6-羟基多巴胺导致的细胞损伤。     

神经节苷脂GM1对Aβ_(1-42)诱导的AD小鼠学习记忆能力及神经细胞凋亡的影响

目的考察鹿茸中单唾液酸四己糖神经节苷脂(monosialotetrahexosylganglioside,GM1)对Aβ_(1-42)诱导的阿尔茨海默症(alzheimer’s disease,AD)小鼠病理模型的学习记忆能力以及淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)、淀粉样蛋白(Aβ)、细胞凋亡的影响。方法实验动物随机分成6组,每组8只。侧脑室注射Aβ_(1-42)制备AD模型,采用GM1腹腔给药,应用自主活动检测小鼠运动能力,应用水迷宫、Y迷宫、新物体识别实验检测小鼠空间记忆及学习能力,应用试剂盒检测APP、 Aβ、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)以及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(caspase-9)水平。结果 GM1给药组与模型组相比,GM1小鼠Y迷宫的自发交替率增加,水迷宫的逃避潜伏期逐渐变短;并且降低APP、Aβ、caspase-3、caspase-9的积累。结论 GM1能明显改善AD小鼠学习记忆能力,其机制可能与降低APP、Aβ水平以及抑制神经细胞凋亡有关。     

半夏化学成分的分离与鉴定

目的研究半夏乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分,对其中的化学成分进行分离鉴定。方法采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱以及制备型高效液相色谱等手段进行分离纯化,通过理化性质和各种波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果从半夏的乙酸乙酯萃取部分分离得到10个化合物,分别鉴定为环-(苯丙氨酸-酪氨酸)[cyclo-(Phe-Tyr),1]、环-(亮氨酸-酪氨酸)[cyclo-(Leu-Tyr),2]、尿嘧啶脱氧核苷(2′-deoxyuridine,3)、(+)异落叶松脂醇9-O-β-D-葡萄糖苷[(+)isolaricires-inol9-O-β-D-glucopyranoside,4]、(+)异落叶松脂醇[(+)isolariciresinol,5]、尿嘧啶(uracil,6)、没食子酸(gallic acid,7)、尿苷(uridine,8)、腺苷(adenosine,9)、环-(缬氨酸-酪氨酸)[cyclo-(Val-Tyr),10]。结论化合物1、3、4为首次从半夏属植物中分离得到,化合物2、7、10为首次从半夏中分离得到。     

胰岛素样生长因子-1受体和胰岛素受体双重抑制剂类抗癌药Linsitinib

胰岛素样生长因子-1(IGF-Ⅰ)受体是一种跨膜受体酪氨酸激酶,与许多人类肿瘤的发生发展密切相关,由胞外α亚单位和含跨膜及胞内区部分的β亚单位构成,其中α亚单位负责与IGF-Ⅰ和-Ⅱ等可溶性IGF-Ⅰ受体配体结合,而β亚单位则发挥胞内受体酪氨酸激酶作用.与配体结合后,IGF-Ⅰ受体的同源二聚体和IGF-Ⅰ受体-受体酪氨酸激酶的异源二聚体便自身磷酸化,并激活下游PI3K/Akt/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和Ras/有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路,最终抑制细胞凋亡,促进细胞生长和迁移,导致肿瘤的生长和转移.     

多巴胺对大鼠胰岛素分泌的影响及机制研究

目的研究多巴胺(dopamine,DA)对大鼠胰岛素分泌的影响及可能机制。方法♂SD大鼠的胰腺经过胶原酶P消化、Histopaque 1077梯度离心后得到纯化的胰岛,DispaseⅡ将胰岛消化为单个细胞。应用胰岛素分泌实验来验证DA对胰岛素分泌的作用,通过膜片钳技术和钙成像技术记录β细胞内向性钙电流、动作电位时程和细胞内Ca~(2+)浓度,研究DA对大鼠胰岛素分泌的作用机制。结果在2.8 mmol·L~(-1)的葡萄糖中,DA对胰岛素的分泌没有产生明显的影响;在16.7 mmol·L~(-1)的葡萄糖中,DA呈浓度依赖性抑制胰岛素的分泌。DA干预后,抑制了胰岛β细胞上内向性钙电流,缩短动作电位时程,减少了细胞内Ca~(2+)浓度。结论 DA通过抑制β细胞上内向性钙电流,进而缩短了动作电位的时程,降低细胞内Ca~(2+)浓度,最终抑制胰岛素的分泌。     

β-丁香烯代谢产物和结构改造的研究

从β-丁香烯代谢产物中分离得到一种有药理活性的化合物,经光谱分析及化学反应证明其结构为β-丁香酮(8)。根据代谢产物的化学结构以及构-效关系理论,对β-丁香烯进行了结构改造研究,结果得到一种活性较强的半合成产物,为无定形长丝状物,其结构被鉴定为β-丁香烯醇(3)。药理实验表明化合物(8)及(3)对豚鼠离体气管平滑肌均有较强的松弛作用,化合物(3)还能明显抑制组织胺和乙酰胆碱诱发的豚鼠哮喘,其作用持久而毒性低,可望成为一种新型的平喘药物。