CD8+T淋巴细胞非细胞毒性抗HIV作用研究进展

细胞免疫在抗病毒感染中发挥着至关重要的作用。人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的细胞免疫反应是由CD8 T淋巴细胞的亚群细胞毒性T细胞(CTL)介导的先天免疫。CTLs一方面通过细胞毒性作用杀伤感染的细胞,另一方面分泌可溶性抗病毒因子(CAF)发挥直接的抗病毒作用,因此成为HIV感染中细胞免疫的重要组成部分。本文就HIV感染这一疾病过程中CD8 T淋巴细胞所发挥的非细胞毒性抗病毒效应作一概述。     

非细胞毒性CD8^＋T细胞应答—控制HIV感染的有效途径

以往一直认为，ＨＩＶ感染者体内的细胞免疫主要是由细胞毒性ＣＤ８＾＋Ｔ细胞介导，导致病毒感染细胞ＣＤ４＾＋细胞的裂解或凋亡。但近年来发现，非细胞毒性ＣＤ８＾＋Ｔ细腻可在不杀伤感染细胞的情况下有效控制ＨＩＶ的感染。     

CD8^＋T淋巴细胞非细胞毒性抗HIV作用研究进展

细胞免疫在抗病毒感染中发挥着至关重要的作用。人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的细胞免疫反应是由CD8^ T淋巴细胞的亚群细胞毒性T细胞(CTL)介导的先天免疫。CIIs一方面通过细胞毒性作用杀伤感染的细胞，另一方面分泌可溶性抗病毒因子(CAF)发挥直接的抗病毒作用，因此成为HIV感染中细胞免疫的重要组成部分。本就HIV感染这一疾病过程中CD8^ T淋巴细胞所发挥的非细胞毒性抗病毒效应作一概述。     

肿瘤环境影响抗感染CD8~+T细胞应答启动的初步研究

目的探讨肿瘤环境下,机体对非肿瘤来源的外来微生物抗原特异性CD8+T细胞应答的变化及其可能机制,为肿瘤患者免疫调节治疗提供理论依据。方法在建立小鼠荷瘤模型的基础上,尾静脉感染李斯特菌(OVA-Listeria Monocytogenes,OVA-LM),观察其生存曲线的变化;在荷瘤后感染小鼠模型中,通过流式胞内细胞因子染色和Pentamer染色技术检测小鼠抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答的变化;通过标记CFSE的OT-Ⅰ细胞过继转移小鼠,观察体内抗原特异性CD8+T细胞增殖和抗原呈递情况;FACS分析荷瘤情况下小鼠脾脏CD11b+Gr-1+细胞及Treg细胞比例和数量变化。结果荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明显缩短;荷瘤小鼠脾脏抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答显著下调;抗原特异性CD8+T细胞增殖速率没有显著变化,但是细胞总数明显下降;荷瘤小鼠脾脏调节性T细胞比例未见明显变化,但CD11b+Gr-1+细胞显著上调。结论荷瘤小鼠抗感染CD8+T细胞免疫反应下降,其脾脏CD11b+Gr-1+细胞显著上调,提示肿瘤环境下脾脏CD11b+Gr-1+细胞升高可能是影响抗感染CD8+T细胞应答的重要因素。     

CD8+ T细胞对HIV-1合成表位的免疫主导应答研究

目的研究CD8^＋ T细胞对人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）表位的免疫主导应答。方法分别采用酶联免疫斑点技术（ELtSPOT）和羧乙基锗倍半氧化物（CFSE）标记流式分析技术，以覆盖HIV-1 Env、Pol、Gag、Vif、Nef、Tat区的701个重叠肽段组成的34个肽段库及其部分单肽段作为刺激表位，对一例感染HIV-1的长期不进展者（LTNP）的外周血单个核细胞（PBMC）中CD8^＋ T细胞的了γ-干扰素（IFN-γ）分泌细胞频率和细胞增殖率进行了测定研究。结果HIV-1 Gag区域肽段诱导产生的CD8^＋ T细胞的IFN-γ分泌细胞频率最高，Nef、Tat、Vif区域依次顺减，Env和Pol区域不能诱导产生显著性应答；在IFN-γ ELISPOT实验中，肽段和相应肽段库刺激产生的结果一致；CD8^＋ T细胞在单肽段刺激下，用ELISPOT技术测定的IFN-γ分泌细胞频率和CFSE标记流式分析技术测定的细胞增殖率显示出较好的相关性。结论CD8^＋ T细胞能特异性识别某些HIV-1抗原表位，诱导出免疫主导应答；当进行HIV-1特异性CD8^＋ T细胞反应增殖测定和免疫主导应答研究时，ELISPOT是值得称道的标准实验，同时，推荐一种新颖的CFSE标记流式分析技术。     

CD8+调节性T细胞及其应用的研究进展

CD8+T淋巴细胞的亚群不仅具有细胞毒性作用,还能调节机体的免疫反应.具有免疫抑制作用的CD8+调节性T细胞(Tr)能有效阻断过强的免疫应答,维持机体的免疫稳态.随着医学科学的不断发展,近年来对CD8+Tr的分型、作用机制及其参与调节自体免疫、器官移植耐受、肿瘤免疫和感染免疫应答等方面的研究取得了巨大进展.     

HIV-1感染者CD4+CD25nt/hiCD127lo调节性T细胞PD-1表达水平与疾病进展的关系

目的:阐明HIV-1感染者外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)表面PD-1的表达水平与疾病进展的关系.方法:选取108名未经治疗的不同进展期的HIV-1感染者和27名健康人对照, 采集静脉血, 用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离获得PBMC, 加入PerCP-CD4抗体、 FITC-CD25抗体、 PE-CD127抗体和APC-PD-1抗体, 经细胞表面四色染色、流式细胞术(FCM)分析Treg表面PD-1的表达;另将50 L全血加入Trucount绝对计数管, 采用Multitest CD3/CD8/CD45/CD4试剂盒检测CD4+T细胞绝对数;分离静脉血血浆, NucliSens EasyQ测定血浆HIV-1病毒载量;实验数据采用SPSS14.0 统计学软件分析处理.结果:HIV-1感染者Treg表面PD-1表达水平显著高于健康人(5.33%±2.24% vs 1.72%±0.65%, P<0.01);AIDS期(7.87%±2.23%)明显高于进展期(5.21%±1.72%, P<0.05)和新近感染者(3.22%±1.01%, P<0.05);HIV-1感染者Treg表面PD-1表达水平与血浆中的HIV-1病毒载量和CD4+T细胞绝对数密切相关.结论:首次证实HIV-1感染者外周血中Treg表面PD-1表达增加, 且表达水平与病程进展相关.该结果为进一步揭示HIV-1感染中Treg的效应机制、探索新的免疫治疗方案提供了理论及实验依据.     

CD8+T细胞应答在慢性乙肝肝损伤中的作用和机制

CD8⁺T细胞应答在慢性乙肝感染中具有至关重要的地位。有缺陷的HBV特异性CD8⁺T细胞应答常常导致感染控制不力,而旁观者CD8⁺T细胞应答和肝内浸润则可能通过抗原不依赖的方式促进肝细胞发生损伤。肝血窦内的血小板聚集促进CD8⁺T细胞锚定于肝内,使CD8⁺T细胞在肝内缓慢爬行,识别抗原,导致肝细胞特异性或非特异性损伤。本文综述了近来肝内HBV特异性和旁观者CD8⁺T细胞应答在慢性乙肝相关肝损伤发生中的研究进展。     

记忆CD8+T细胞亚群在感染和肿瘤免疫应答中的作用

在初次免疫应答的过程中,当抗原被清除以后,大多数效应T细胞凋亡,只有少数细胞存活并分化成稳定、长寿的记忆细胞。与初始T细胞相比,当再次接触同一抗原时,记忆T细胞能够介导快速、强烈、有效的免疫应答[1-3]。记忆细胞高表达抗凋亡分子并以非抗原依赖的方式增殖来维持记忆细胞     

病毒载量和T淋巴细胞计数在HIV感染者临床治疗疗效观察中的应用

目的 研究病毒载量检测和CD4^ 计数在评价人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者疗效中的应用效果。方法 对HIV感染者临床病例73例进行了实验室和临床观察，其中包括6例鸡尾酒治疗病例、36例中药试验性治疗病例及31例未进行治疗的感染者。主要实验室指标包括血浆病毒载量及T淋巴细胞亚群计数。结果 在进行治疗后3个月时联合治疗组的病毒载量明显低于其他两组，并且在其后保持在很低的水平，CD4^ 计数水平明显高于其他两组并在其后持续升高。在整个观察期间，中药治疗组的病毒载量检测和CD4^ 计数水平与未治疗组差异无显著性，但在临床症状观察中中药治疗组较未治疗组有明显改善。结论 病毒载量检测和CD4^ 计数试验是评价抗HIV治疗疗效的有效方法。     

医源性HIV感染者CD8+细胞非细胞毒性HIV抑制作用的研究

目的 观察医源性HIV感染者CD8+细胞非细胞毒性HIV抑制反应(CNAR),并比较CNAR与CD4细胞计数的关系.方法 免疫磁珠法分离HIV感染者的CD8+细胞,按2:1,1:1,0.5:1和0.25:1的比例,与体外急性感染的CD4+细胞混合培养,测定培养物上清中逆转录酶活性,与阴性对照比较计算病毒抑制率.结果 CNAR活性达到80%病毒抑制率时,CD4<300个/μl组的平均CD8与CD4比例为2.4:1,CD4>300个/μl组的平均CD8与CD4比例为1.3:1,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 HIV感染者的CNAR活性与其CIM细胞计数相关,CD4>300的个体较CD4<300的个体有着更显著的抑制HIV复制的能力.     

CD4/CD8 ratio,comorbidities, and aging in treated HIV infected individuals on viral suppression

The progression of the human immunodeficiency virus (HIV) infection to acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) can be efficiently interrupted by antiretroviral therapy (ART). However, even successfully treated HIV-infected individuals are prone to develop non-AIDS-related diseases that affect the metabolism and several organs and systems. Biomarkers that predict the occurrence of comorbidities may help develop preventive measures. Current research shows that CD4⁺ T cell counts and viral load do not predict the development of non-AIDS-related diseases. The CD4/CD8 ratio has been indicated as a suitable marker of persistent immune dysfunction and the occurrence of non-AIDS-related events in treated HIV-positive patients. In this study, we explored the relationship between CD4/CD8 ratios, comorbidities, and aging in ART-treated HIV patients on viral suppression. We collected and evaluated data from 352 HIV-positive adults who were virologically suppressed (<40 copies/mL) on ART and with CD4 counts above 350 cells/mm³. The median age for participants was 46 years, 218 individuals had at least one comorbidity, and 239 had inverted CD4/CD8 ratios (<1). Current CD4/CD8 ratios were predicted by baseline CD4/CD8 ratios and nadir CD4 counts. Despite the high rates of inverted CD4/CD8 ratios and prevalence of comorbidities, no association between them was observed. The prevalence of comorbidities was significantly higher in older individuals, though aging alone did not explain the rate of all individual comorbidities. Low CD4/CD8 ratios were linked to neurocognitive disorders, suggesting that persistent T cell dysfunction contributes to neurocognitive decline.     

Dichotomy of two CD8+ lymphocyte subsets in HIV infection. Depletion of CD8+ CD3- and expansion of CD8+ CD3+ subsets: consequence on the CD4/CD8 ratio.

In order to highlight the underlying mechanism(s) of the CD8 lymphocyte expansion in the HIV infection, two distinct CD8 subsets were analysed: T CD8bright+ CD3+ with MHC-restricted activity, and non-T CD8dim+ CD3-, which performs natural killer (NK) activity. It consists of a cross-sectional study including 168 HIV-infected patients (74 CDC stage II, 48 CDC stage III and 46 CDC stage IV) compared among them and to 60 healthy individuals. We observed an expansion of CD8+ CD3+ cells which masks a depletion of CD8+ CD3-. The comparative study showed that the expansion of the CD8+ CD3+ is relatively higher than that of total CD8+ lymphocytes and that the depletion of the CD8+ CD3- subset is severe, begins early and remains constant through the HIV progression. The comparison of CD4/CD8 and CD4/CD8+ CD3+ ratios showed that the latter could possibly be a better indicator in the HIV infection. The mechanism of inverted CD4/CD8 ratio in healthy individuals was also clarified. The CD8+ CD3+, CD8+ CD3- and CD4/CD8+ CD3+ parameters would be more specific markers than total CD8 and CD4/CD8 ratio especially in therapy trials.     

Characterization of virus-specific CD8(+) effector T cells in the course of HIV-1 infection: longitudinal analyses in slow and rapid progressors

Studies in humans have provided evidence that CD8(+) T cells exhibit distinct phenotypical and functional properties dependent on virus specificity. It is not known how these T-cell phenotypes develop over the course of infection. Dynamics and properties of T cells specific for human immunodeficiency virus (HIV), cytomegalovirus (CMV), and Epstein-Barr virus (EBV) in HIV infection were investigated in relation to viral load. In rapid progressors, HIV-specific CD8(+) T cells were less differentiated early in infection and did not develop a more differentiated phenotype. In slow progressors, perforin expression of HIV-specific CD8(+) T cells slightly increased over time. HIV and EBV loads were detectable in all individuals, while CMV load could not be detected. Thus, in individuals with progressive HIV infection, HIV-specific T cells are less differentiated already early in infection. This apparent block in differentiation may be partly caused by chronic viremia or lack of CD4(+) T-cell help.     

存放温度及时间对于HIV/AIDS患者外周血CD4+、CD8+细胞测定结果的影响

目的　研究HIV AIDS患者外周血CD4 、CD8 淋巴细胞数在不同条件下 (时间、温度和处理过程 )的变化。方法　选取HIV AIDS患者 34例 ,用流式细胞术检测在 4℃条件下放置不同时间(2、2 4、4 8、72h)的外周血CD4 、CD8 细胞数的变化 ,对经过处理的外周血 (处理过的血样 )CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较 ;对室温条件下放置不同时间 (2、2 4、4 8、72h)处理过的血样CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较。结果　在 4℃时 ,全血放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义(P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数放置 72h时则差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;处理过的样品放置 72hCD4 细胞计数差异才有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 2 4h时差异就有显著意义 (P <0 0 5 )。在室温时 ,处理过血样放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 4 8h则差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　抗凝全血在 4℃放置 4 8h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。处理过血样在室温放置 2 4h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。 2 4～4 8h虽然CD4 淋巴细胞没有变化 ,但CD8 淋巴细胞却发生明显的变化 ,两者比例必然发生变化。     

NK相关抗原在HIV/AIDS患者CD8+T淋巴细胞上的表达

目的　探讨NK相关抗原CD5 6、CD16在HIV AIDS患者CD8 T淋巴细胞上的表达。方法　取外周血细胞 ,用标记荧光的抗体进行染色 ,以CD8强阳 淋巴细胞为门 ,用流式细胞仪分析CD8 T淋巴细胞上CD5 6、CD16的表达。结果　HIV AIDS患者CD8 T淋巴细胞表达CD5 6 、CD5 6 CD16 - 、CD5 6 CD16 均明显低于HIV抗体阴性健康对照组 (P <0 .0 5 ) ;经高效抗逆转录病毒疗法 (HAART)治疗后CD8 T淋巴细胞表达的CD5 6 、CD5 6 CD16 - 、CD5 6 CD16 呈逐渐升高趋势。HIV AIDS患者表达CD5 6 CD16 - 的CD8 T淋巴细胞亚群绝对数与CD4 T淋巴细胞绝对数呈正相关 ,r=0 .393,P <0 .0 5 ;表达CD5 6 - CD16 的CD8 T淋巴细胞百分数与CD4 T细胞绝对数呈负相关 ,r=- 0 .32 4 ,P <0 .0 5。结论　表达CD5 6的CD8 T淋巴细胞在HIV AIDS患者中明显缺失 ,HAART治疗可恢复缺失。CD8 T淋巴细胞上CD5 6的表达是HIV感染中值得关注的重要指标之一 ,对评价抗病毒疗效具有指导意义。     

HIV感染后胃黏膜CD4+、CD8+T细胞数量分布及CD38表达的改变

目的 研究不同感染阶段HIV感染者胃黏膜中CD4+和CD8+T细胞数量和分布情况,及免疫细胞激活状态的改变.方法 有胃黏膜组织活检标本的HIV感染者42例,其中有明确临床分期诊断的36例,另选非HIV感染者胃黏膜组织活检标本10例为对照,利用免疫组织化学方法检测研究对象胃黏膜活检组织中CD4、CD8及CD38的表达,以图像分析系统分析其差异.结果 (1)AIDS患者胃黏膜中CD4+T细胞与对照组和无症状者相比,均显著减少(P(0.01),无症状者多数淋巴滤泡中仍有一定量CD4+T细胞,间质中多呈不均匀聚集分布,统计学与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05);(2)HIV感染者胃黏膜内CD8+T细胞普遍噬腺体和黏膜上皮,部分病例胃黏膜内CD8+T细胞局部过度增生,与对照组相比,CD8+T细胞在感染者胃黏膜中显著增多(P<0.01),无症状者与AIDS患者CD8+T细胞差异无统计学意义(P>0.05);(3)在HIV感染者胃黏膜内,CD38阳性细胞主要分布于黏膜表层至浅1/3～2/3层,与对照组相比,HIV感染者胃黏膜中CD38表达增强(P<0.01),无症状者与MDS患者CD38表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 HIV感染者胃黏膜中CD4+T细胞的数量和分布与疾病进展有密切联系,HIV对CD4+T细胞的感染和破坏导致黏膜免疫系统功能异常,可能是胃黏膜内CD8+T细胞数量增加,CD38表达增强的重要原因之一.     

HIV gag‐specific immune response mediated by double negative (CD3+CD4−CD8−) T cells in HIV‐exposed seronegative individuals

Double negative (DN) T cells are CD3⁺, CD4^?, CD8^? cells with either T‐cell receptors (TCR) αβ or TCR γδ whose importance on protection against HIV infection is unknown. Since HIV‐exposed seronegative individuals correspond to an ideal group in whom correlates of protection are expected, the role of these cells was studied in 13 HIV‐serodiscordant couples in a stable relationship and reporting unprotected sexual intercourses. HIV‐specific immune responses mediated by DN T‐cells were evaluated by measuring intracellular IFNγ and MIP1β (CCL4) production in response to HIV‐Gag peptides. Thirty‐five healthy controls not exposed to HIV were tested similarly and used to define a threshold for positive responses. Interestingly, Gag‐specific DN T‐cell responses were found in 3/13 (23%) HIV‐exposed seronegative individuals (Group A), involving both DN/αβ⁺ and DN/γδ⁺ T‐cells through MIP1β and IFNγ production. 4/13 (30%) of partners infected with HIV (Group B) also showed Gag‐specific responses but were mediated exclusively by DN/γδ⁺ T‐cells, mainly through IFNγ production. DN T‐cells in Group A individuals can display differential HIV‐specific immune responses, which might contribute to the low susceptibility to infection with HIV shown by individuals in Group A. J. Med. Virol. 85:200–209, 2013. © 2012 Wiley Periodicals, Inc.