黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC对坐骨神经缺损后大鼠运动功能的修复作用

目的 探讨黄芪皂甙Ⅳ联合脂肪源性干细胞（ADSC）对大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复的影响.方法 将40只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组各10只,4组均采用化学萃取脱细胞方法制备大鼠缺损脱细胞神经支架（ARSN）.ARSN组注入等剂量DMEM于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ组注入等剂量DMEM于ARSN,并于术前5 min及术后12、24 h腹腔注射黄芪皂甙Ⅳ（20 mg/kg）;ADSC组注入等剂量ADSC（1×10^6/mL）于ARSN;黄芪皂甙Ⅳ＋ADSC组同时采用黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组的方法.用各组的神经移植体桥接长1 cm坐骨神经两断端间的缺损造模,术后8周取材.检测各组坐骨神经功能指数（SFI）、神经电生理参数（神经传导速度、潜伏期、波幅）及胫前肌湿重比率.结果 与ARSN组比较,黄芪皂甙Ⅳ组、ADSC组和黄芪皂甙Ⅳ＋ADSC组术后各时点SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高（P均＜0.05）;与黄芪皂甙Ⅳ组比较,黄芪皂甙Ⅳ＋ADSC组术后56 d SFI增高,神经传导速度增快,潜伏期缩短,波幅增大,胫前肌湿重比率增高（P均＜0.05）.结论 黄芪皂甙Ⅳ联合ADSC移植能促进大鼠神经再生和运动功能恢复,其作用优于单独应用黄芪皂甙Ⅳ或ADSC.     

神经干细胞移植及人参川芎嗪注射液干预对脑梗死大鼠BDNF蛋白表达的影响

目的观察神经干细胞(NSCs)移植及人参川芎嗪注射液联合干预对脑梗死大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法体外培养神经干细胞,健康SD大鼠60只,制作大鼠脑梗死模型(MCAQ),随机分为脑梗死组、NSCs移植组和联合组。免疫荧光法检测各组梗死侧BrdU标记NSCs的数目及迁移趋势;于移植前及移植后1周、2周、3周观察大鼠神经功能的变化;于移植后2周采用逆转录PCR反应法检测大鼠脑梗死组织中BDNF基因的表达水平,采用Western Blot法检测大鼠脑梗死组织中BDNF蛋白的表达水平。结果免疫荧光法检测结果显示,BrdU标记NSCs的数目较脑梗死组及NSCs移植组增多,差异有统计学意义(P0.05)。BBB行为学评分观察神经功能变化显示,移植前各组大鼠的神经学功能评分差异无统计学意义,移植后1周、2周、3周,联合组的神经功能恢复明显优于脑梗死组及NSCs移植组,差异有统计学意义(P0.05);逆转录PCR检测结果显示,移植后2周,联合组BDNF基因的表达水平明显高于脑梗死组及NSCs移植组,Western Blot法检测结果显示,联合组BDNF蛋白的表达水平明显高于脑梗死组及NSCs移植组,差异有统计学意义(P0.05)。结论神经干细胞移植及人参川芎嗪注射液联合干预能够促进脑梗死大鼠BDNF基因与蛋白的表达,改善脑梗死大鼠的神经功能。     

激活素A对新生大鼠缺血缺氧后脑组织巢蛋白表达的影响

目的探讨激活素A对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)脑组织巢蛋白的表达变化。方法将7日龄Wistar大鼠120只随机分为3组,假手术组、缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型组和激活素A治疗组,每组各40只。每组根据处死的时间不同又分为5个亚组:6h组、24h组、3d组、7d组、14d组,每亚组各8只。HE染色观察神经细胞形态变化,采用免疫组化的方法测定巢蛋白的表达。结果HIBD组缺氧缺血侧大脑组织巢蛋白活性逐渐增高,3d显著增高,7d达高蜂,然后逐渐下降,14d仍有少量表达;与HIBD模型组各时间点相比,激活素A治疗组各时间点脑组织巢蛋白表达明显增高(P0.01)。结论激活素A治疗增高缺氧缺血后巢蛋白的表达,对缺氧缺血性脑损伤有保护作用。     

神经干细胞侧脑室内移植对脑瘫鼠的治疗效果

目的探讨脑瘫鼠模型采用侧脑室内神经干细胞(NSCs)移植治疗的效果。方法准备60只7日龄健康、SPF级Wistar大鼠,随机选取12只作为正常组(等量生理盐水处理),其余48只建立脑瘫鼠模型,选取24只建模成功脑瘫鼠随机分为模型组(等量生理盐水处理)和NSCs组(侧脑室内NSCs移植治疗),对比42日龄后各组大鼠的神经行为学检测结果、脑室旁白质中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)含量差异。结果 42日龄时,模型组大鼠的Morris水迷宫逃避潜伏时间、脑室旁白质中GFAP阳性细胞数显著高于NSCs组和正常组大鼠,差异具有统计学意义(P0.05);NSCs组大鼠的Morris水迷宫逃避潜伏时间、脑室旁白质中GFAP阳性细胞数显著的高于正常组大鼠,差异具有统计学意义(P0.05);42日龄时,模型组大鼠的斜坡实验时间显著长于NSCs组和正常组大鼠,悬吊试验和旷场试验评分显著低于NSCs组和正常组大鼠,差异具有统计学意义(P0.05);NSCs组大鼠斜坡实验时间显著长于正常组大鼠,悬吊试验和旷场试验评分显著低于正常组大鼠,差异具有统计学意义(P0.05)。结论脑瘫鼠模型采用侧脑室内NSCs移植治疗能够显著改善神经行为及学习能力。     

二氢睾酮联合脂肪源性干细胞对小鼠坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子及其受体TrkB表达的影响

目的探讨二氢睾酮(DHT)与脂肪源性干细胞(ADSC)联合应用对小鼠脱细胞同种异体神经支架移植坐骨神经缺损后脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体Trk B的表达和功能恢复的影响。方法 30只成年C57BL/6小鼠随机分为脱细胞神经支架(ANA)组、ADSC组和DHT+ADSC组。坐骨神经功能指数(SFI)、电生理和胫前肌湿重比方法检测神经运动功能的恢复,Western印迹检测神经移植体内BDNF及其受体Trk B的蛋白表达。NF200免疫荧光法检测神经支架中轴突表达,并示踪PKH26标记的移植ADSC。结果与ADSC组比较,DHT+ADSC组神经移植体内BDNF和Trk B蛋白相对表达明显增高,NF200表达增强,PKH-26标记的ADSC数量显著增高(P0.05)。与ANA组比较,ADSC组和DHT+ADSC组电生理波幅明显增高、神经传导速度明显增快、延迟期明显缩短、胫前肌湿重比率明显增高,其中DHT+ADSC组神经恢复作用显著优于ADSC组(P0.05),而且DHT+ADSC组SFI明显高于ANA组和ADSC组(P0.05)。结论 DHT联合ADSC移植对小鼠脱细胞异体神经支架修复坐骨神经缺损后轴突再生和功能恢复的作用优于ADSC组,其机制可能与促进神经移植体内BDNF及其受体Trk B表达,进而促进移植的ADSC存活有关。     

阿米舒必利联合度洛西汀对老年慢性精神分裂症患者认知功能和神经电生理的影响

目的探讨阿米舒必利联合度洛西汀对老年慢性精神分裂症患者认知功能、神经电生理的影响。方法选择精神分裂症患者110例,按照随机数字表法分为观察组55例,对照组55例。对照组给予阿米舒必利治疗,观察组给予阿米舒必利联合度洛西汀治疗,治疗8周后观察2组治疗效果、认知功能、神经电生理、神经因子水平等情况,评估治疗前和治疗后第2、4、8周阳性和阴性症状量表(PANSS)评分。结果观察组总有效率明显高于对照组(87.3%vs 72.7%,P=0.044)。2组治疗后第2、4、8周总分、阳性症状、阴性症状和一般临床精神病理评分较治疗前明显降低,且观察组各指标较对照组明显降低(P0.05)。2组治疗后P300潜伏期明显缩短,波幅明显增高,N2-P3潜伏期明显延长,波幅明显增高,且观察组改善较对照组明显(P0.05,P0.01)。观察组治疗后连线测验、数字划消时间、STROOP测验、逆行WMS-Ⅲ空间广度测验、定步调连续加法任务测验、木块图明显优于对照组(P0.05,P0.01)。结论阿米舒必利联合度洛西汀对老年慢性精神分裂症患者的治疗效果较好,可有效改善患者症状,从而减轻脑神经损伤。     

转TrkC基因神经干细胞移植联合NT-3治疗脊髓缺血再灌注损伤中MAP-2表达的变化

目的研究转酪氨酸激酶C(tyrosine kinase C,Trk C)基因神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植联合神经营养素(neurotrophin,NT)-3局部应用对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的治疗作用及微管相关蛋白-2(microtubule associated protein-2,MAP-2)表达的变化。方法 90只Wistar大鼠,雌雄不拘,清洁级,300~350 g,随机分为6组(每组15只),分别为正常对照组(A组)、缺血再灌注损伤模型组(B组)、NSCs移植组(C组)、NSCs移植+NT-3局部使用组(D组)、转Trk C基因NSCs移植组(E组)和转Trk C基因NSCs移植+NT-3局部使用组(F组)。于左锁骨下动脉末梢处予降主动脉缠胶带法建立脊髓缺血损伤模型,50 min后,阻断的降主动脉被解除。术后第1天进行细胞移植。各组大鼠分别于细胞移植后6 h、24 h及48 h进行脊髓运动功能评分。术后24 h、1周,分别处死7和8只大鼠,迅速取出脊髓标本,苏木素-伊红、NISSLE染色观察神经元形态学变化,免疫组织化学法观察MAP-2的表达变化,实时定量聚合酶链反应法检测MAP-2 m RNA的表达变化。结果与缺血模型组(B、C、D、E组)和其他移植处理组相比,F组大鼠脊髓运动功能恢复情况最佳,脊髓神经元核溶解程度较轻,神经元结构相对完整,数量也较多,MAP-2表达增加;与对照组(A组)和缺血模型组(B组)相比,各移植处理组MAP-2 m RNA表达均有不同程度的增加,并且,F组MAP-2 m RNA表达增加最为明显,与其他各组相比,差异具有统计学意义(P0.01)。结论在局部给予的NT-3作用下,转Trk C基因NSCs对脊髓缺血再灌注损伤具有较好的治疗作用,其可能的机制是通过上调MAP-2的表达实现的。     

神经干细胞与雪旺细胞共移植对大鼠臂丛神经根性撕脱伤的疗效

目的研究神经干细胞(NSCs)与雪旺细胞共移植对臂丛神经根性撕脱伤大鼠的治疗作用。方法随机将Wistar大鼠分为4组,A组(颈神经根撕脱组)、B组(颈神经根撕脱后定期回植组)、C组(颈神经根撕脱后定期回植并NSCs移植组)、D组〔颈神经根撕脱后定期回植并NSCs+雪旺细胞(SCs)共移植组〕;于术后不同时间点观察大鼠患肢功能恢复情况、神经电生理检测及相应脊髓损伤节段脊髓前角运动神经元存活率的检测。结果术后4²0 w时,B、C、D组大鼠患肢屈肘功能较A组有明显改善;A组神经-肌肉诱发电位潜伏期明显高于B、C、D组,而复合肌肉动作电位则低于B、C、D组,各组诱发电位潜伏期比较:B组>C组>D组;各组脊髓前角运动神经元存活率比较:D组>C组>B组>A组,组间两两比较有显著性差异(P<0.05)。结论神经根回植术联合细胞移植可以加强神经元的保护作用,在大鼠体内,移植的SCs可以存活并持续为NSCs提供保护、支持及营养等作用,还能够促进NSCs向神经元样细胞方向分化。     

嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植对阿尔茨海默病大鼠的治疗作用

目的探讨嗅成鞘细胞(OECs)对神经干细胞(NSCs)移植治疗大鼠阿尔茨海默病(AD)的影响。方法 SD大鼠双侧海马注射Aβ1～40,建立AD大鼠模型。实验动物分为4组:NSCs移植组、NSCs与OECs移植组、AD模型组、正常对照组,每组30只。从SD胎鼠(孕16～18 d)取材,在体外分别培养和共培养OECs与NSCs,并将共培养的OECs与NSCs移植于AD大鼠大脑;观察各组大鼠行为学、移植细胞存活、迁移和分化以及宿主脑海马突触素表达的变化。结果①行为学测试:NSCs与OECs移植组潜伏期明显缩短、过平台次数明显增加,与NSCs移植组、AD模型组有显著性差异(P<0.05)。②根据标记跟踪,植入的NSCs与OECs大量存活,从注射部位分别向两侧海马区及其周围皮质迁移。③免疫荧光检测:植入NSCs能在AD脑内分化为神经元、神经胶质细胞以及少量胆碱能神经元,NSCs与OECs移植组分化为神经元的分化率13.97%,与NSCs移植组8.35%差异显著(P<0.05)。④海马突触素表达:NSCs与OECs移植组IA值最高,与NSCs移植组、AD模型组有显著性差异(P<0.05)。结论嗅成鞘细胞通过改善植入神经干细胞在AD脑内的存活、迁移和分化能力以及与宿主脑的联系,提高NSCs移植治疗大鼠AD的效果。     

神经节苷脂联合参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的探讨神经节苷脂(GM1)联合参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的神经保护作用。方法将新生7d SD乳鼠90只随机分为假手术组、缺血缺氧组(HIBD组)、缺血缺氧+GM1干预组(GM1组)、缺血缺氧+参附干预组(参附组)及缺血缺氧+GM1及参附干预组(合用组)。在给药后不同时间点,采用免疫组化法半定量测定脑组织中Bcl-2及Bax含量。结果假手术组海马CA1区可见少量Bcl-2及Bax表达;HIBD后该区Bcl-2及Bax表达均增加,且Bax表达较明显;分别应用GM1、参附注射液治疗后该区Bcl-2表达进一步增加,而Bax蛋白水平下降;联合应用两种药物治疗后该区Bcl-2表达增加、Bax表达下降的趋势更为明显。结论新生大鼠脑缺氧缺血后腹腔注射神经节苷脂或参附注射液均可不同程度减轻大鼠脑损伤,两种药物联合应用对其脑损伤的改善作用更为明显。