骨髓单个核细胞对大鼠脊髓损伤后行为功能影响的研究

目的:通过建立大鼠脊髓半横断模型,观察骨髓单个核细胞(BMMNCs)对大鼠后肢功能及受损脊髓组织中神经营养因子3(NT-3)表达的影响。方法:无菌条件下取大鼠双侧股骨和胫骨骨髓细胞,用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞备用。将104只Wistar大鼠随机分为A组(假手术组),8只;B组(PBS对照组),48只;C组(BMMNCs实验组),48只。大鼠术后1d、3d、5d、7d、14d和21d行BBB评分后,用免疫组织化学技术观察各组大鼠受损脊髓组织中NT-3的表达。结果:各个时间点BBB评分测试表明A组较B、C组分值高(P<0.05);B组分值较C组低(P<0.05)。免疫组织化学技术检测显示各个时间点C组大鼠受损脊髓中NT-3的表达量高于B组(P<0.05),A组与B、C组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:BMMNCs能够促进损伤脊髓组织中NT-3的表达,可能是其修复损伤脊髓,促进脊髓功能恢复的机制之一。     

骨髓单个核细胞和外周血单个核细胞移植治疗外周动脉病的疗效分析

目的 观察自体骨髓单个核细胞(BMMNCs)移植、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的自体外周血单个核细胞(PBMNCs)移植治疗外周动脉病的临床疗效.方法 将69例外周动脉病患者随机分成3组:G-CSF动员的自体PBMNC移植组(PBMNC组)30例,给予G-CSF 600mg/d,皮下注射,连用4d,第5d采集PBMNCs移植至患肢;自体BMMNC移植组(BMMNC组)15例,采集骨髓液500～800 ml,分离BMMNCs移植至患肢;常规内科治疗组(对照组)24例,仅给予常规药物治疗.术后3月随访所有患者,观察评价各项指标.结果 PBMNC组CD34 细胞数[(3.31±1.39)×106 /kg]显著多于BMMNC组[(1.42±0.42)×106 /kg,P＜0.01)].移植后3月时复查,PBMNC组和BMMNC组的静息痛改善率分别为76.67%和73.33%均显著高于对照组16.67%(P＜0.01);PBMNC组的溃疡改善率为40.0%,BMMNC组为42.86%,与对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05);两个移植组之间静息痛改善率和溃疡改善率差异均无统计学意义(P＞0.05).两个移植组术后3月时,最大无痛步行距离(MWD)、踝臂压指数(ABI),经皮氧分压(TcO2)均明显高于治疗前(P＜0.01),对照组治疗前后无差异(P＞0.05).△MWD、△ABI、△TcO2分别指治疗前和治疗后3月时MWD、ABI、TcO2的差值,比较两个移植组[(108.75±66.70)m vs(113.75±63.86)m,(0.082±0.05)vs(0.077±0.051),(10.54±5.90)mm Hg vs(9.63±5.26)mm Hg)]差异均无统计学意义(P＞0.05).PBMNC组和BMMNC组的DSA显效率分别为66.67%和62.50%均显著高于对照组0%(P＜0.01,P＜0.05).两个移植组之间无差异(P＞0.05).结论 自体PBMNC移植和自体BMMNC移植均为治疗外周动脉病安全有效的新方法,两者疗效相当.     

骨髓间充质干细胞和骨髓单个核干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的对比研究

目的观察髓间充质干细胞（MSCs）和骨髓单个核干细胞（BMMNCs）移植对急性心肌梗死后大鼠左心功能的影响及存活情况,比较两种干细胞移植的优劣性。方法雌性Lewis大鼠45只按随机抽签法分3组：对照组、MSCs组、BMMNCs组。结扎前降支制备心肌梗死模型,MSCs组和BMMNCs组均注射等数量（2×10^6）雄性MSCs和BMMNCs,对照组注射等体积的培养基。4周后超声检测左心功能、左心室前壁厚度,免疫原位杂交检测雄性鉴别基因sry片段的表达。结果MSCs组和BMMNCs组与对照组相比：左心室射血分数分别增加22．57％、24．09％（P=0．000）,MSCs组和BMMNCs组之间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;左心室前壁厚度增加（2．6±0．5）mm和（2．5±0．3）mm对（1．8±0．4）mm（P=0．000）;免疫原位杂交显示MSCs组与BMMNCs组sry表达阳性,对照组阴性。阳性细胞的数量相比较,BMMNCs组高于MSCs组（66．50±6．59比46．67±4．64,P=0．000）。结论MSCs和BMMNCs移植均能改善大鼠急性心肌梗死后左心功能,减轻左心室重构;移植4周后在受体心肌内存活干细胞数量BMMNCs优于MSCs。     

双龙方与自体骨髓单个核细胞经心导管移植对中国小型猪心肌梗死的影响

目的：研究中药双龙方与自体骨髓单个核细胞经心导管移植对中国小型猪心肌梗死的影响。方法：利用心导管技术建立中国小型猪冠状动脉栓塞心肌梗死模型，建立经心导管冠状动脉内骨髓单个核细胞移植的新方法，通过心电图、定量组织学、超声心动图、心肌酶及生化检查、心肌小血管密度、梗死区内骨髓单个核细胞观察等综合评价双龙方、自体骨髓单个核细胞经心导管移植及两者合用的疗效。结果：双龙方与自体骨髓单个核细胞经心导管移植可减小心肌梗死范围，超声心动图检查显示心功能明显改善，并可增加心肌梗死区小血管密度，对心肌酶及生化指标亦有不同程度改善作用。自体骨髓单个核细胞移植及合用双龙方后均有助于心肌侧枝循环的建立，心肌供血明显改善。自体骨髓单个核细胞可在移植区内存活，并部分分化为心肌细胞及心肌小血管，补充了心肌细胞的数量。结论：双龙方与自体骨髓单个核细胞移植对中国小型猪心肌梗死有明确的治疗作用。     

自制微导管自体骨髓单个核细胞移植治疗急性心肌梗死

用自制的微导管给予冠脉内骨髓单个核细胞(BM-MNCs)移植(bone marrow stem cells hearttransplantation BMT),观察对急性心肌梗死患者心肌梗死面积及心功能的疗效。将24例首次心梗的患者随机分为2组,经皮冠脉介入治疗(PCI)组(n=12)给急症PCI及常规药物治疗,BMT组(n=12),急症PCI同时经自制的微导管给予自体BM-MNCs冠脉移植,分别于出院前、3月、6月时用Tei指数评价心功能,铊201(201Tl)静息再分布显像观察心梗面积。结果:3月时2组患者Tei指数均降低(3月vs出院前,移植组0.45±0.09 vs0.67±0.12,P<0.05;对照组:0.55±0.08 vs 0.67±0.06,P<0.05),移植组较对照组更明显(0.45±0.09 vs0.55±0.08,P<0.05),至6月时无明显变化;3月时移植组心梗面积较出院前明显减少(15.10±3.34 vs22.95±5.94,P<0.05),至6月时无明显变化。与对照组相比均显著减少(3月:15.10±3.34 vs 19.85±4.09;6月:13.70±3.10 vs 17.66±4.70,P均<0.05)。结论:自制的微导管给予冠脉内BM-MNCs移植治疗AMI能减小心肌梗死的范围,改善心功能。     

自体骨髓单个核细胞移植对扩张型心肌病患者生活质量影响的研究

目的本研究采用组间对照，综合评价自体骨髓单个核细胞移植对扩张型心肌病患者生活质量的影响。方法应用SF-36量表；通过电话随访和当面访谈的方式，随机对45例治疗组患者和47例对照组患者进行了至少半年的生活质量随访问卷调查。结果扩张型心肌病治疗组总体健康状况（GH）、躯体功能角色受限（RP）以及心理健康（MH）等3个方面的评分分别为（63.0 21.5）、（26.7 14.2）、（83.1 15.2），而对照组分别为（47.9 24.8）、（15.6 10.4）、（69.7 20.6），均存在统计学差异（P〈0.05）。结论自体骨髓单个核细胞冠状动脉内移植对扩张型心肌病患者生活质量的改善有一定疗效。     

血清髓鞘碱性蛋白对颅脑损伤程度及预后价值的判断

目的探讨急性颅脑损伤患者检测血清髓鞘碱性蛋白(MBP)的浓度及动态变化,对颅脑损伤的诊断分型、评估伤情和判断预后的临床价值。方法采用放射免法分析,对185例急性颅脑损伤患者病例组及50名健康体检人群对照组血清MBP浓度进行检测,于伤后24 h,3 d、7 d、10 d MBP的浓度进行动态检测和观察。结果患者组伤后24 h血清MBP浓度显著增高,与对照组差异有统计学意义(P<0.001),与GCS评分呈负相关关系(r=-0.6661,P<0.05),动态检测血清MBP浓度显示重度颅脑损伤患者虽经积极救治,血清MBP浓度持续升高,提示预后不佳,反之则预后相对较好。结论检测颅脑损伤后患者血清MBP浓度可以直接反映脑细胞损害程度,是一项较为敏感的生化指标,特别是动态检测血清MBP浓度对判断颅脑损伤后伤情评估、疗效观察及预后具有一定的临床意义。     

双龙方与自体骨髓单个核细胞经心导管移植，对中国小型猪心肌梗死的影响

评价干细胞移植对冠心病的疗效的实验研究．必须有一个可靠的动物模型和合理的移植方法。目前常用的心肌缺血损伤模型为结扎冠状动脉，在一定程度上可以模拟心肌缺血，但毕竟与冠心病的病理状态不同。常用的移植方法是将干细胞直接注射到受损的心肌，或通过心导管利用螺旋注射器经心内膜将干细胞多点注射到缺血心肌，注射移植往。     

慢性高原病患者骨髓单个核细胞Caspase-3表达研究

目的:探讨慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)患者骨髓单个核细胞(BMMNCs) caspase-3 mRNA表达的变化及作用.方法:采用RT-PCR法检测CMS患者BMMNCs caspase -3 mRNA表达水平.同时以16例骨科单纯骨折患者为对照.结果:①CMS组caspas...     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓半切损伤的修复作用

目的：观察骨髓间充质千细胞（MSC）移植对脊髓半切损伤大鼠运动功能的修复作用。方法：20只成年D大鼠随机分为移植组（n=10）和对照组（n=10），均进行脊髓半切损伤。伤后1周，移植组于伤处移植大鼠MSC，而对照组仅注射等量PBS。分别于移植后1天、1周、2周、3周、4周用BBB评分观测大鼠的运动功能，并于移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果：移植后1周两组动物运动功能恢复无明显差异。移植后2周、3周、4周，与对照组比较，移植组显著提高运动功能。移植后4周，移植组损伤脊髓的结构修复明显优于对照组。结论：脊髓半切损伤大鼠经MSC移植后能明显改善其运动功能和神经形态，MSC移植对脊髓半切损伤大鼠有治疗作用。     

鞘内移植骨髓基质细胞对兔脊髓缺血/再灌注损伤早期水通道蛋白-4表达的影响

目的探讨鞘内移植骨髓基质细胞(BMSCs)对兔脊髓缺血/再灌注损伤早期水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响。方法日本大耳白兔72只,随机分为3组:假手术组(S组)、脊髓缺血/再灌注损伤组(I/R组)和BMSCs移植组(M组)。I/R组和M组阻断肾动脉下腹主动脉30 min建立脊髓缺血/再灌注损伤模型,S组暴露肾动脉下腹主动脉,但不阻断。损伤前2天蛛网膜下腔置管,M组注入1×108BM-SCs,I/R组注入等容量PBS。分别于再灌注损伤后4 h和24h进行神经功能评分,干湿重法测定脊髓组织含水量,测定血管外伊文思蓝含量示踪血脊髓屏障通透性变化,免疫组化和免疫印迹法检测脊髓组织中AQP-4表达情况。结果与S组比较,I/R组神经运动功能评分降低,脊髓组织含水量和伊文思蓝含量增加,AQP-4表达增加(P<0.05)。与I/R组比较,M组神经运动功能评分增高,脊髓组织含水量和伊文思蓝含量降低,血脊髓屏障AQP-4表达减少(P<0.05)。结论 BMSCs移植可抑制脊髓损伤早期AQP-4的表达,进而减轻脊髓水肿和脊髓缺血/再灌注损伤。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠急性脊髓损伤后继发性脊髓损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠脊髓急性损伤后继发性脊髓损伤的保护机制.方法 成年SD大鼠18只随机均分成单纯椎板切除(对照组)、急性脊髓损伤(损伤组)和急性脊髓损伤后NAC治疗(治疗组)三组.用30 g力量动脉瘤夹从两侧夹闭脊髓30 s建立脊髓损伤模型.治疗组术后15 min、1、2和3d分别予NAC 150 mg/kg腹腔注射;对照组和损伤组腹腔注射等量生理盐水.所有动物于术后3d处死取材,用凝胶电泳迁移率分析和免疫组化检测脊髓组织中核因子κB(NF-κB),ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6表达.结果 损伤组脊髓组织中NF-κB、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均比对照组升高(P＜0.05),治疗组脊髓组织中各因子水平均比损伤组显著降低(P＜0.05).结论 NAC可以通过抑制大鼠急性脊髓损伤后NF-κB的活性,进一步下调TNF-α、IL-1β和IL-6的表达,从而减轻继发性炎症反应所导致的脊髓损伤.     

雌激素影响急性大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的相关性实验研究

目的 在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,观察不同时间点雌激素对脊髓胶质细胞,神经元凋亡的影响,以期为临床急性脊髓损伤的治疗提供理论依据.方法 健康成年大鼠72只,随机分为两组,其中单纯损伤组(单纯打击损伤)36只,雌激素组(手术加雌激素)36只.脊髓损伤动物模型的制备:用自制Allen打击器25gcm致伤力撞击脊髓,制成脊髓损伤动物模型.雌激素组每日肌注雌激素(100μg/kg)直至处死,单纯损伤组仍每日肌注生理盐水0.5ml直至处死.组织切片的制备:脊髓损伤后1d、3d、5d、8d、14d、21d共6个时间段分批处死动物.4%多聚甲醛心肌灌注固定24h,切取每只大鼠T5～T13节段脊髓组织,常规制成切片,给于Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记.检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的情况.脊髓损伤后2周给予Gale评分及斜板维持试验.结果 Bcl-2蛋白检测:在脊髓损伤后的第1天,脊髓组织即开始较高表达Bcl-2蛋白.单纯损伤组Bcl-2高峰发生在损伤后3天,而雌激素组伤后8天达到高峰,此时Bcl-2蛋白不仅表达在神经细胞中,更多的在胶质细胞中大量表达,且此状态一直维持到伤后14天才开始下降,伤后21天仅少量表达(P＜0.05).TUNEL原位标记检测:单纯损伤组24小时已出现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3～8天达到高峰,此后逐渐回落,但21天时仍有阳性细胞,应用雌激素治疗后,凋亡细胞明显减少(P＜0.05).脊髓损伤后2周Gale评分及斜板维持率雌激素组优于单纯损伤组(P＜0.01).结论 雌激素在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白的表达,清除氧自由基,抗氧化作用能够抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复.所以脊髓损伤后早期应用雌激素配合其它药物阻止神经细胞和胶质细胞的凋亡可能有助于减轻脊髓损伤的损害程度,促进脊髓神经功能的恢复,为SCI的治疗提供一个新的途径.     

自体骨髓干细胞治疗脊髓损伤的围手术期护理

目的:探讨自体骨髓干细胞(BMSC)治疗脊髓损伤的围手术期护理.方法:对16例患者术前做好心理、饮食、药物护理,完善各项评估和检查;术中做好配合工作;术后严密观察生命体征,预防感染、给氧,体位摆放和康复功能锻炼.结果:16例患者均获不同程度的恢复,未发生护理并发症.结论:科学的围手术期护理是提高手术成功率、减少并发症的重要保证.     

依达拉奉对实验性急性脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的观察依达拉奉（MCI-186）对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响。方法选择SD雄性大鼠40只,随机分成对照组和MCI-186组,均采用改良的Allen打击（WD）法制成150gcf（克厘米势能）中度急性脊髓损伤模型,术后实验组给予MCI-186,3mg/kg对照组给予等量生理盐水。分别于术后6h、12h、24h、72h、7d处死动物取材,采用流式细胞仪检测损伤段脊髓细胞凋亡的情况。结果对照组和MCI-186组均发现凋亡细胞,均在1d达到高峰,但MCI-186组凋亡细胞比率显著低于对照组（P〈0．05）。结论MCI-186通过有效地清除氧自由基,可明显抑制急性脊髓损伤后的脂质过氧化反应及降低神经细胞的凋亡,从而达到保护其神经组织的作用。