中药对大鼠晶状体老化过程中脂质过氧化和抗氧化能力的干预作用

目的:分析抗氧化中药参乌胶囊(Shenwu capsule,SW)、二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对晶状体老化过程中脂质过氧化及抗氧化能力的影响。方法:雄性SD大鼠96只,分为增龄组及中药干预组,增龄组按月龄不同分为1,3,6,12,18,24共6组,每组10只;中药干预组分为参乌胶囊低剂量[SW(L)]、高剂量[SW(H)]、二苯乙烯苷低剂量[TSG(L)]、高剂量[TSG(H)]4组,分别为10,8,10,8只;药物干预组大鼠均为24mo龄,从21mo龄开始,SW(L),SW(H)组分别给予参乌胶囊0.8g/kg和1.6g/kg灌胃;TSG(L),TSG(H)组分别给予TSG0.03g/kg和0.06g/kg灌胃;老年对照组给予等体积蒸馏水灌胃,每日1次,至24mo,共3mo。处死动物取出眼球,自赤道部切开眼球,完整取出晶状体,采用硫代巴比妥酸比色法与化学发光法检测各组大鼠晶状体组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果:大鼠晶状体GSH含量1,3,6,12,18,24mo龄、SW(L),SW(H),TSG(L),TSG(H)分别为30.5±7.4,33.3±6.1,29.0±3.1,28.6±4.8,22.0±4.2,20.5±3.2,21.9±3.2,23.1±5.1,20.2±4.4,18.8±2.5mg/gpr;增龄组GSH含量F检验P<0.01,GSH含量与月龄负相关(P<0.01),各用药组与24mo龄组GSH含量F检验P>0.05。大鼠晶状体SOD含量1,3,6,12,18,24mo龄、SW(L),SW(H),TSG(L),TSG(H)分别为41.1±2.1,42.3±2.7,38.6±3.0,38.7±5.2,34.1±1.8,31.9±4.9,30.2±3.2,32.7±3.3,29.8±3.3,32.5±6.0μkat/gpr;增龄组SOD含量F检验P<0.01,SOD含量与月龄负相关(P<0.01),各用药组与24mo组SOD含量F检验P>0.05。大鼠晶状体MDA含量1,3,6,12,18,24mo龄、SW(L),SW(H),TSG(L),TSG(H)分别为49.6±4.4,52.2±3.8,53.1±6.4,53.6±4.7,59.8±4.2,62.2±3.9,61.6±2.9,63.6±5.8,58.1±13.6,57.9±7.6nmol/gpr;增龄组MDA含量F检验P<0.01,MDA含量与月龄正相关(P<0.01),各用药组与24mo组MDA含量F检验P>0.05。结论:大鼠晶状体GSH,SOD及MDA随年龄增长分别呈降低、降低、升高趋势,抗氧化能力下降之后抗氧化药物对此无预防作用。     

氢饱和生理盐水对大鼠亚硒酸钠性白内障的抑制作用

目的 初步研究氢饱和生理盐水对SD大鼠亚硒酸钠性白内障的抑制作用.方法 选用7日龄健康SD大鼠68只,随机分为6组,正常对照组、白内障组、氢水预防组、氢水早期治疗组、氢水晚期治疗组和氢水组.白内障组、氢水预防组、氢水早期治疗组和氢水晚期治疗组大鼠12日龄按25 μmol·kg-1体质量单次颈背部皮下注射2 mmol·L-1亚硒酸钠生理盐水.氢水预防组大鼠8～l2日龄腹腔注射氢饱和生理盐水5 mL·kg-1,每天1次,连续5d;氢水早期治疗组大鼠12～ 17日龄,注射处理相同;氢水晚期治疗组大鼠17 ～21日龄;氢水组大鼠8～17日龄进行注射.于26日龄裂隙灯显微镜下观察大鼠晶状体混浊程度,测定晶状体中SOD活性及GSH、MDA含量.结果 正常对照组、氢水组晶状体均透明,白内障组、氢水预防组和氢水晚期治疗组晶状体完全混浊;氢水早期治疗组晶状体混浊程度明显低于白内障组,差异具有统计学意义(x2=30.48,P＜0.05).氢水早期治疗组与白内障组比较,晶状体中SOD活性及GSH含量明显升高(SOD:q=13.13,P＜0.01;GSH:q=11.76,P＜0.01),但白内障组和氢水预防组(SOD:q=1.96,P＞0.05;GSH:q=1.61,P＞0.05;MDA:q =2.74,P＞0.05)及氢水晚期治疗组(SOD:q=1.37,P＞0.05;GSH:q=1.25,P＞0.05;MDA:q=1.11,P＞0.05)之间比较差异均无统计学意义.氢水早期治疗组MDA含量升高不明显,明显低于白内障组(q=10.28,P＜0.01).结论 氢饱和生理盐水可以提高晶状体组织中SOD活性及GSH含量,减少MDA生成,从而减轻晶状体的氧化损伤,对亚硒酸钠性白内障的发生和发展有—定的抑制和延缓作用,但无明显的预防作用,对于已形成的白内障无逆转作用,对晶状体无明显的毒性作用.     

腺病毒介导BDNF基因转染对大鼠视神经损伤后视网膜中SOD、MDA水平的影响

目的:腺病毒介导脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)转染对大鼠视神经损伤后视网膜中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。方法:建立大鼠视神经夹挫伤模型,随机分为BDNF腺病毒组、lac-Z腺病毒组和生理盐水组,将药物经玻璃体途径注射入大鼠眼内,并设正常大鼠对照。观察各组不同时间视网膜组织中MDA和SOD的含量变化。结果:正常SD大鼠视网膜组织MDA的含量为(5.21±1.32)nmol/ml,SOD的含量为(1751.57±180.55)U/g·pro。大鼠视神经夹伤后MDA含量升高,SOD含量降低。BDNF腺病毒组视网膜MDA含量为(6.67±1.36)nmol/ml(3d)、(5.72±1.66)nmol/ml(7d)、(5.54±1.03)nmol/ml(14d)and(5.33±1.45)nmol/ml(21d),低于两损伤对照组,而SOD含量为(158.55±173.39)U/g·pro(3d)、(161.24±184.57)U/g·pro(7d)、(1694.49±184.30)U/g·pro(14d)和(1721.75±179.86)U/g·pro(21d),高于两损伤对照组。在3 d、1 wk和2 wk时有显著统计学差异(P<0.05),两对照组间在各时间点均无统计学差异。结论:腺病毒介导BDNF转染对视神经损伤后视网膜损伤具有早期防护作用,其作用可能与BDNF刺激局部的SOD含量增加有关。眼科学报 2002;18:249-252.     

热处理对STZ诱导糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞生物学特性的影响

目的 研究热处理对链脲佐菌素(streptozotoein,STZ)诱导的大鼠糖尿病性白内障的晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)生物学特性的影响.方法 将30只SD大鼠随机分为3组A组为空白对照组,B组为STZ组,C组为热处理STZ组.每周用裂隙灯观察晶状体的变化,在实验6周后分别摘取眼球,取出晶状体.采用免疫组化技术检测热休克蛋白(heat shock protein,HSP)在各组LEC中的表达;运用考马斯亮兰与呈色法测定各组可溶性蛋白的浓度;呈色法测OD值,检测各组MDA、SOD及GSH的含量.结果 B、C组晶状体的混浊情况差异具有统计学意义(P＜0.05),B组混浊程度明显高于C组,A、C组差异不显著.C组HSP70的表达高于B组,差异具有统计学意义(P＜0.05);B组HSP70的表达高于A组,差异具有统计学意义(P＜0.05).B组可溶性蛋白含量明显低于A、C组,差异有统计学意义(P＜0.05),而A、C组差异不显著.A、B组晶状体MDA、SOD、GSH的含量均低于C组,差异具有统计学意义(P＜0.05);A、B组之间差异不显著.结论 热处理可以提高HSP70的表达,并可能对STZ诱导糖尿病性白内障大鼠的晶状体上皮细胞具有保护作用.     

雌雄激素对去势雌鼠晶状体氧化代谢的影响

背景流行病学调查表明绝经期妇女白内障的发病率高于同龄男性,雌激素替代治疗可延缓白内障的发展,但雄激素在白内障发病中的作用尚不明确。目的研究雌雄激素对去势雌鼠晶状体抗氧化能力的影响。方法56只清洁级Wistar雌鼠随机分为正常对照组、假手术组、去势组、雌二醇点眼组、雌二醇注射组、睾丸酮点眼组、睾丸酮注射组,每组8只大鼠。除正常对照组及假手术组外,其余组雌鼠均行卵巢切除术,应用性激素大鼠于去势后5个月分别应用质量分数0．01％苯甲酸雌二醇注射液和2．5％丙酸睾丸酮点双眼及苯甲酸雌二醇注射液（200μg／kg）、丙酸睾丸酮（3．75mg／kg）肌内注射,共6周。假手术组仅切开腹腔后再缝合。用药后每周裂隙灯下观察大鼠晶状体混浊情况。分别于术前、术后5个月和用药后6周采集动物心脏血,评估大鼠血清中雌激素、雄激素质量浓度的变化,比较各组晶状体中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、水溶性蛋白（WSP）的含量。结果各组大鼠去势前后均未见到晶状体混浊。假手术组大鼠血清雌二醇质量浓度在手术前后及用药前后与正常对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。去势组和各用药组大鼠去势后5个月血清雌二醇质量浓度均明显低于正常对照组和假手术组（P〈0．01）。注射雌二醇、睾丸酮6周后大鼠血清雌二醇水平较同时间点去势组升高,差异均有统计学意义（P〈0．01）;雌二醇注射组大鼠晶状体SOD活性、晶状体中GSH和WSP水平雌二醇点眼组和去势组大鼠明显增加,而晶状体中的MDA水平明显下降,差异均有统计学意义（P〈0．01）;睾丸酮注射组晶状体中S01）活性和GSH水平较去势组下降,差异均有统计学意义（P〈0．05）,而2组MDA、WSP水平差异均无统计学意义。结论雌激素可增强去势鼠晶状体的抗氧化能力,而雄激素可能加速去势雌鼠晶状体氧化损伤的发展。     

白藜芦醇对大鼠糖尿病性白内障抗氧化损伤的保护作用

目的探讨白藜芦醇对糖尿病性白内障大鼠抗氧化损伤的保护作用。方法 90只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和白藜芦醇治疗组,每组各30只。模型组及白藜芦醇治疗组采用链脲佐菌素诱发糖尿病,白藜芦醇治疗组按400mg.kg-1体质量给予白藜芦醇灌胃,灌注后4周、8周、12周观察3组大鼠晶状体混浊度的变化情况;同时检测晶状体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathi-one peroxidase,GSH-PX)及过氧化氢酶(catalase,CAT)的变化;采用RT-PCR检测晶状体中铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn superoxide dismutase,CuZnSOD)mRNA表达水平。结果正常对照组大鼠晶状体始终透明。灌注后12周白藜芦醇治疗组晶状体混浊度高于正常对照组(χ2=8.26,P<0.05),但与糖尿病模型组相比明显减轻(χ2=14.72,P<0.05)。糖尿病模型组大鼠晶状体中SOD、GSH-PX以及CAT活性分别为:(10.39±1.25)U·mg-1、(24.36±1.05)U·mg-1、(1.62±0.24)U·mg-1,明显低于正常对照组的(40.16±1.87)U·mg-1、(67.86±1.24)U·mg-1、(5.57±1.54)U·mg-1。与糖尿病模型组相比,白藜芦醇能增强SOD、GSH-PX和CAT活性,分别为(29.06±1.33)U·mg-1、(47.58±2.35)U·mg-1、(3.26±0.47)U·mg-1。此外,白藜芦醇还能上调糖尿病大鼠晶状体内CuZnSODmRNA的表达(P<0.05)。结论白藜芦醇能增加晶状体抗氧化酶活力,能从多个环节发挥对糖尿病白内障的抗氧化作用,从而延缓白内障的发生和发展。     

刺五加联合尼莫地平对兔实验性急性青光眼视网膜MDA,SOD,GSH含量的影响

目的:探讨中药刺五加(acathopanaxsenticosu,sAS)和钙通道阻滞剂尼莫地平(nimodipine)对青光眼视网膜中丙二醛(maleicdialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathion,eGSH)含量的影响。方法:通过前房平衡盐溶液持续灌注建立日本大耳白兔双眼实验性急性青光眼模型,动态测定青光眼兔眼视网膜中MDA,SOD,GSH的动态变化。然后,将实验兔随机分为刺五加组、尼莫地平组、联合用药组和生理盐水组,每组5只,分别于高眼压结束前2￣3min静脉注射药物。高眼压结束后24h处死动物,测定视网膜组织中MDA,SOD,GSH的变化。结果:高眼压后兔视网膜组织中MDA含量增高,SOD活性下降和GSH含量下降。使用药物后,AS组,尼莫地平组,联合用药组的MDA含量分别为7.015±0.344,8.021±0.385,6.561±0.228nmol/mgprot,而生理盐水组为9.009±0.276nmol/mgprot,两者相比,用药后MDA含量明显下降(P<0.01);SOD活性在上述用药组中分别为69.898±2.089,61.416±2.369,74.491±3.254u/mgprot,同生理盐水组50.732±2.880U/mgprot相比,活性上升(P<0.01);GSH含量在上述用药组中分别为60.354±1.625,58.548±1.953,61.938±1.814mg/gprot,较生理盐水组的54.360±1.585mg/gprot亦有明显增加(P<0.01)。结论:实验性青光眼兔眼自由基产生增多;刺五加和尼莫地平能够抑制视网膜自由基的产生,提高视网膜的抗氧化能力,有望临床用于青光眼视神经保护的治疗。     

姜黄素对大鼠硒性白内障的影响

背景姜黄素能清除机体中产生的自由基和超氧负离子,从而抑制脂质过氧化反应。研究证实姜黄素具有抗晶状体氧化损伤的作用,但其对年龄相关性白内障的作用尚不清楚。目的观察姜黄素对实验性大鼠硒性白内障的影响。方法选用12日龄健康SD大鼠30只,按随机数字表法将其随机分为空白对照组、模型对照组、姜黄素组,每组10只。除空白对照组外,模型对照组和姜黄素组大鼠均采用皮下注射亚硒酸钠的方法建立硒性白内障模型,并于造模的同时,给予姜黄素组大鼠质量分数0．005％姜黄素灌胃,每131次,共2周。于实验开始后第4、7、10、14天在裂隙灯显微镜下观察各组大鼠晶状体的混浊程度并进行评分。在实验结束后摘出大鼠晶状体,用生化测定法测定晶状体中丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性。结果空白对照组大鼠晶状体在整个实验过程中保持透明。与模型对照组大鼠比较,姜黄素组大鼠Ⅲ、Ⅳ、V级晶状体混浊的时间明显延迟,差异均有统计学意义（P〈0．05）。实验结束时,3个组MDA含量及SOD、GSH—Px活性的总体比较差异均有统计学意义（MDA：F=215．42,P〈0．01;SOD：F=46．83,P〈0．01;GSH—Px：F=44．29,P〈0．01）。模型对照组、姜黄素组晶状体中SOD的活性明显低于空白对照组,差异均有统计学意义（P〈0．05）,但姜黄素组SOD活性明显高于模型对照组（P〈0．05）;模型对照组和姜黄素组晶状体中MDA含量均高于空白对照组（P〈0．01）,姜黄素组中MDA含量较模型对照组低（P〈0．01）;模型对照组GSH—Px活性较空白对照组显著下降（P〈0．01）,姜黄素组GSH—Px活性较模型对照组高（P〈0．01）。结论姜黄素能显著延缓大鼠硒性白内障的形成过程,但不能抑制硒性白内障的发生发展。姜黄素延缓大鼠硒性白内障形成的机制可能为提高大鼠晶状体的抗氧化能力。     

番茄红素对紫外线诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的：探讨番茄红素对紫外线诱导的人晶状体上皮细胞(hulan lens epithelial cells,HLEC)氧化损伤的保护作用及可能机制。
　　方法：HLEC传代培养,分为阴性对照组、氧化损伤组、番茄红素低剂量组和番茄红素高剂量组, MTT比色法检测细胞存活率,电子显微镜观察细胞形态学改变,DCFH-DA荧光探针检测胞内ROS变化,分光光度计检测上清液中超氧化物歧化酶( superoxide dislutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH )活性及丙二醛( lalondialdehyde,MDA)的含量。
　　结果：番茄红素能明显抑制紫外线诱导的细胞活性的下降,减少紫外线所致HLEC内ROS的生成,引起HLEC内SOD和GSH-Px水平的升高及MDA水平的下降。
　　结论：番茄红素通过提高细胞内SOD和GSH-Px含量,降低细胞内MDA含量,发挥其较强的抗氧化作用,从而为其用于白内障防治提供可靠的实验依据。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠视网膜保护作用研究

目的:观察α-硫辛酸(α-lipoicacid,α-LA)对糖尿病大鼠视网膜保护作用及相关机制。方法:链脲佐菌素ip制备糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组(DM组),α-LA治疗组,同时设立正常对照组(NC组)。治疗组ip给予α-LA100mg/kg,1次/d。12wk时测定血糖,以及各组大鼠血清丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及还原型谷胱甘肽(GSH)含量,制备视网膜消化铺片,检测视网膜微血管形态改变,免疫组织化学方法检测视网膜NF-κB蛋白表达变化。结果:与NC组相比,糖尿病大鼠血清MDA含量明显升高,SOD活性、GSH含量降低(P<0.05),视网膜微血管周细胞、内皮细胞减少,无细胞毛细血管数目明显增多,视网膜NF-κB蛋白表达显著增强;与DM组相比,α-LA组大鼠MDA含量明显降低(P<0.05),SOD活性、GSH含量明显升高(P<0.05),视网膜微血管周细胞、内皮细胞数目增多,无细胞毛细血管数目减少,视网膜NF-κB蛋白表达明显减弱(P<0.01)。结论:α-LA可通过抑制氧化应激及视网膜NF-κB活化,对糖尿病视网膜病变起到一定保护作用。