短发夹RNA干扰黏着斑激酶对结肠癌多细胞球氟尿嘧啶敏感性的影响

目的 探讨抑制黏着斑激酶(FAK)在结肠癌HT29细胞中的表达能否提高HT29多细胞球对氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性.方法 构建带有短发夹RNA(shRNA)靶向干扰FAK的重组体pGenesil-1-FAK,抑制FAK在HT29中的表达,采用实时定量PCR和Western blotting检测其在单层细胞和多细胞球中的干扰效率.采用血球计数板计数法检测多细胞球在各时间点的增殖速度,流式细胞术检测干扰对5-FU诱导的多细胞球凋亡的影响,CCK-8法检测单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性的变化.结果 用重组体pGenesil-1-FAK靶向干扰FAK能显著抑制单层细胞FAK mRNA,并能抑制单层细胞和多细胞球FAK蛋白的表达.多细胞球的增殖速度并不受FAK shRNA干扰的影响,各组间在各时间点均无显著性差异(P>0.05).流式细胞术结果显示,FAK shR-NA干扰能够使多细胞球的自发凋亡率(16.48%±1.18%)和5-FU诱导的凋亡率(21.50%±2.62%)显著增加(P=0.000、P=0.001),且两者之间差异显著(P=0.003).CCK-8法检测结果显示,FAK shRNA干扰提高了单层细胞和多细胞球对5-FU的敏感性,且两者无显著差异(P>0.05),从而逆转了因三维球体结构产生的多细胞耐药性.结论 FAK靶向RNA干扰虽不影响多细胞球的增殖,但能促进多细胞球凋亡,并增加多细胞球对5-FU的敏感性;FAK可能介导了结肠癌的多细胞耐药.     

黏着斑激酶表达下调对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

结论 FAK shRNA抑制FAK表达能抑制裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体对5-FU的敏感性,有效逆转其多细胞耐药.FAK介导结肠癌多细胞耐药的机制可能与FAK-Akt-NF-κB信号通路的激活有关.     

黏着斑相关非激酶抑制肝癌细胞迁移及分子机制研究

目的用黏着斑激酶(FAK)磷酸化抑制剂黏着斑相关非激酶(FRNK)阻断FAK磷酸化,探讨FAK信号途径在肝癌细胞迁移中的作用、分子机制及FRNK对迁移的抑制效应。方法利用EGFPFRNK质粒转染培养的肝癌HepG2细胞,Transwell小室模型研究对细胞迁移能力的影响,Westernblot法检测FAK和磷酸肌醇3激酶(PI3K)的磷酸化水平,并通过激光共聚焦分析免疫荧光双染后转录因子核因子κB(NFκB)核转位的情况。结果EGFPFRNK重组质粒转染HepG2细胞后,外源性FRNK可显著抑制HepG2细胞的迁移能力,转染组的磷酸化FAK比未转染组下降约50.2%(P<0.01)。PI3K水平也较未转染组降低了39.5%(P<0.05)。代表NFκB核转位的细胞核区与胞质区绿色荧光比值分别为3.495±0.227和1.182±0.106,转染组显著低于未转染组(P<0.01)。结论外源性FRNK可抑制FAK磷酸化,从而降低抑制PI3K和NFκB的活化水平而减少细胞迁移,FAK可能是介导肝癌HepG2细胞迁移的重要信号途径。     

RNA干扰对HT29细胞PIDD蛋白表达及细胞耐药性影响的研究

目的观察氟尿嘧啶（5-FU）刺激后PIDD蛋白在结肠癌HT29细胞中分布的改变,以及小干扰RNA（siRNA）干扰PIDD蛋白前后,HT29细胞耐药性的变化。方法用siRNA干扰HT29细胞内PIDD蛋白的表达,用5-FU刺激HT-29细胞。West-ern blotting法检测干扰前后细胞PIDD的表达,并比较5-FU刺激后干扰与未干扰HT-29细胞内PIDD在细胞中分布的变化。MTT比色法检测siRNA干扰前后细胞对5-FU的敏感性,并计算各组细胞的IC50值。结果未受5-FU刺激前,PIDD蛋白主要分布于细胞质中;受5-FU刺激后,PIDD蛋白迁移至细胞核。siRNA干扰后细胞中PIDD表达总量有所下降,胞质及胞核中的表达均降低,受5-FU刺激后PIDD的表达也未见升高,迁移至胞核的PIDD也未增加。MTT检测证明5-FU对转染组（PIDD-360转染12h后的HT29细胞）的IC50值为0.23&#177;0.06μg/ml,与正常组（未作处理的HT29细胞,IC50为2.71&#177;0.70μg/ml）和对照组（阴性对照试剂转染12h后的HT29细胞,IC50为2.78&#177;1.03μg/ml）比较显著降低（P〈0.05）。结论经siRNA干扰PIDD蛋白后,HT29细胞的耐药性明显下降,推测其机制与胞核中PIDD降低导致的NF-κB活性降低,细胞凋亡增多有关。     

siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究

目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。     

SKP2表达对食管癌细胞辐射敏感性的影响

目的 探讨S期激酶相关蛋白2(SKP2)高表达和低表达对食管癌细胞辐射敏感性的影响.方法 用Western-blotting方法筛选SKP2低表达和高表达的食管癌细胞系;构建SKP2正义表达载体p-pcDNATM3.1/myc-His A-SKP2和RNA干扰载体SKP2 RNAi,分别转染SKP2低表达和高表达的食管癌细胞系,用5 Gyγ射线照射各组细胞,通过克隆形成实验检测细胞辐射敏感性的差异.结果 SKP2在4种食管癌细胞中的表达水平依次为KYSE510＞KYSE450＞EC9706＞KYSE150.用p-pcDNATM 3.1/myc-His A-SKP2表达载体转染KYSE 150细胞后SKP2表达水平升高,5 Gyγ射线照射后细胞的克隆形成能力显著高于对照组(F=3.53,P＜0.01),表明SKP2高表达可以降低食管癌细胞的辐射敏感性.RNA干扰载体转染KYSE510细胞后SKP2表达水平降低,5 Gyγ射线照射后细胞的克隆形成能力显著低于对照组(F=5.23,P＜0.05),表明敲降SKP2表达可以增加食管癌细胞的辐射敏感性.结论 SKP2表达与食管癌细胞的辐射敏感性密切相关,具体机制还需要进一步研究.     

非受体酪氨酸激酶c-Abl/Arg对细胞微管结构的影响

c—abl／Arg非受体酪氨酸激酶的主要生物学功能是参与细胞增殖分化、细胞周期和细胞凋亡的调控,并在氧化应激和DNA损伤修复过程中发挥重要作用。已有研究发现,绝大多数胞质c—Abl的C端可与F-肌动蛋白细胞骨架结合,因而c—Abl在调节肌动蛋白动态平衡、细胞形态以及细胞迁移等方面有着重要的作用。     

αv整合素沉默对结肠癌多细胞球药物敏感性的影响

目的 应用反转录病毒介导的shRNA沉默αv整合素,探讨后者在结肠癌多细胞球(MCSs)对奥沙利铂耐药中的作用.方法 构建针对αv整合素的反转录病毒质粒,脂质体转染质粒至结肠癌细胞株HT29.采用改良liquid overlay技术培养MCSs;Western blotting检测MCSs中αv整合素蛋白的表达;Cell Counting Kit-8检测梯度浓度(0、5、50、500、5 000μg/L)的奥沙利铂处理后MCSs的存活率.结果测序证实质粒构建成功.Western blotting结果 显示反转录病毒质粒介导的shRNA能有效、特异、稳定地沉默αv整合素基因.沉默αv整合素基因后,MCSs对奥沙利铂的药物敏感性显著增加.奥沙利铂50、500μg/L处理48h后,MCSs的存活率为0.86%±0.05%和0.43%±0.04%,转染反转录病毒的MCSs则下降为0.77%±0.06%和0.30%±0.04%(P<0.05).结论 反转录病毒介导的shRNA能有效沉默αv整合素基因.沉默αv整合素能有效提高结肠癌MCSs对化疗药物奥沙利铂的敏感性.     

LncRNA MIR503HG通过调控miR-224-5pCHSY1表达对结肠癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨长链非编码RNA微小RNA-503宿主基因（LncRNA MIR503HG）通过调控miRNA-224-5p硫酸软骨素合酶1（miR-224-5pCHSY1）的表达对结肠癌细胞放射敏感性的影响。 方法 选取2019年3月至2022年1月火箭军特色医学中心收治的48例结肠癌患者为组织样本获取对象,进行回顾性分析,其中男性28例、女性20例,年龄（57.43±5.28）岁。根据放疗后的病灶情况将患者分为放射抵抗组（23例）和放射敏感组（25例）。采用实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测2组患者结肠癌组织及各细胞株（CCD841、COLO320、SW480、RKO、HCT116）中LncRNA MIR503HG、miR-224-5pCHSY1的表达情况;构建放射抵抗的结肠癌细胞株HCT116R,将HCT116R细胞株分为过表达LncRNA MIR503HG（MIR503HG）组及其阴性对照组（mimiC-NC）、miR-224-5pCHSY1抑制组（anti-miR-224-5p）及其阴性对照组（anti-miR-NC）、过表达LncRNA MIR503HG+过表达miR-224-5pCHSY1组（MIR503HG+miR-224-5p）、过表达LncRNA MIR503HG+阴性对照组（MIR503HG+miR-NC）;通过双荧光素酶报告验证LncRNA MIR503HG与miR-224-5pCHSY1的靶向作用;检测各组细胞的存活分数（SF）和凋亡率。两组间数据的比较使用t检验。 结果 与放射敏感组相比,放射抵抗组结肠癌组织中LncRNA MIR503HG的相对表达量明显降低（1.40±0.36对0.72±0.17）,miR-224-5pCHSY1的相对表达量明显升高（1.06±0.25对1.54±0.27）,且差异均有统计学意义（t=8.247、6.529,均P<0.05）。CCD841、COLO320、SW480、RKO、HCT116及HCT116R各细胞株LncRNA MIR503HG的相对表达量分别为2.38±0.06、1.03±0.05、0.87±0.03、0.86±0.02、0.77±0.04、0.54±0.09,miR-224-5pCHSY1的相对表达量分别为0.38±0.06、0.56±0.01、0.59±0.02、0.59±0.05、0.63±0.04、0.82±0.06,与正常细胞株CCD841相比,结肠癌细胞株COLO320、SW480、RKO、HCT116的LncRNA MIR503HG相对表达量均明显降低（t=2.061、1.665、4.058、6.201,均P<0.05）,miR-224-5pCHSY1的相对表达量均明显增加（t=1.238、1.930、2.037、1.742,均P<0.05）。与HCT116细胞株相比,HCT116R的LncRNA MIR503HG相对表达量明显降低[（0.77±0.04）对（0.54±0.09）],miR-224-5pCHSY1的相对表达量明显增加[（0.63±0.04）对（0.82±0.06）],差异均有统计学意义（t=1.267、2.370,均P<0.05）。在照射剂量分别为4、6、8 Gy时,MIR503HG组的HCT116R细胞SF明显低于mimic-NC组[（7.25±1.11）%对（11.34±2.65）%、（2.85±0.58）%对（6.08±1.10）%、（0.58±0.05）%对（3.08±0.84）%],且差异均有统计学意义（t=1.064、1.937、2.650,均P<0.05）。过表达LncRNA MIR503HG后,MIR503HG组HCT116R的放射增敏比（SER）为1.399。mimic-NC组、MIR503HG组、mimic-NC+4 Gy组、MIR503HG+4 Gy组的细胞凋亡率分别为（8.10±0.23）%、（18.44±1.57）%、（17.33±2.35）%、（29.83±1.89）%,与mimic-NC组相比,MIR503HG组、mimic-NC+4 Gy组HCT116R细胞的凋亡率均明显升高,且差异均有统计学意义（t=2.003、1.475,均P<0.05）。与anti-miR-NC组相比,anti-miR-224-5p组MIR503HG-Wt的荧光素酶活性明显增加（1.02±0.20对1.60±0.25）,且差异有统计学意义（t=5.366,P<0.05）;miR-224-5pCHSY1与LncRNA MIR503HG结合位点突变后,与anti-miR-NC组相比,anti-miR-224-5p组MIR503HG-Mut的活性无明显变化（0.97±0.25对1.00±0.22）,2组间的差异无统计学意义（t=0.291,P>0.05）。与mimic-NC组相比,MIR503HG组miR-224-5pCHSY1的表达水平明显降低（1.97±0.13对1.12±0.12）,差异有统计学意义（t=3.915,P<0.05）。与anti-miR-NC组相比,anti-miR-224-5p组中miR-224-5pCHSY1的表达水平明显降低（1.99±0.19对0.92±0.18）,差异有统计学意义（t=2.664,P<0.05）。在照射剂量分别为4、6、8 Gy时,anti-miR-224-5p组HCT116R细胞的SF均明显低于anti-miR-NC组[（0.59±0.08）%对（0.79±0.12）%、（0.39±0.06）%对（0.67±0.07）%、（0.19±0.04）%对（0.52±0.04）%],且差异均有统计学意义（t=1.281、2.034、2.911,均P<0.05）。抑制表达miR-224-5pCHSY1后,anti-miR-224-5p组HCT116R细胞的SER为1.403。anti-miR-NC组、anti-miR-224-5p组、anti-miR-NC+4 Gy组、anti-miR-224-5p+4 Gy组的细胞凋亡率分别为（5.08±0.78）%、（14.48±1.21）%、（13.89±1.36）%、（23.64±1.03）%,与anti-miR-NC组相比,anti-miR-224-5p组与anti-miR-NC+4 Gy组的细胞凋亡率均明显增加,且差异有统计学意义（t=2.067、1.934,均P<0.05）;与anti-miR-NC+4 Gy组相比,anti-miR-224-5p+4 Gy组的细胞凋亡率明显增加,差异均有统计学意义（t=4.026,P<0.05）。照射剂量为4 Gy时,mimic-NC组、MIR503HG组、MIR503HG+miR-NC组、MIR503HG+miR-224-5p组的SF分别为（0.82±0.17）%、（0.53±0.12）%、（0.54±0.11）%、（0.78±0.15）%,照射剂量为6 Gy时,分别为（0.66±0.13）%、（0.38±0.09）%、（0.35±0.08）%、（0.57±0.10）%,照射剂量为8 Gy时,分别为（0.49±0.10）%、（0.15±0.06）%、（0.13±0.05）%、（0.43±0.11）%,与mimic-NC组相比,照射剂量≥4 Gy时,MIR503HG组HCT116R细胞的SF明显降低（t=1.609、1.533、1.927,均P<0.05）,MIR503HG+miR-NC组HCT116R细胞的SF明显降低（t=1.294、1.490、1.825,均P<0.05）;与MIR503HG+miR-NC组相比,照射剂量≥4 Gy时,MIR503HG+miR-224-5p组HCT116R细胞的SF明显增加,且差异均有统计学意义（t=1.573、1.204、1.937,均P<0.05）,过表达miR-224-5pCHSY1后,MIR503HG+miR-224-5p组HCT116R细胞的SER为0.825,相比MIR503HG组明显降低。mimic-NC组、MIR503HG组、MIR503HG+miR-NC组、MIR503HG+miR-224-5p组的细胞凋亡率分别为（11.61±2.10）%、（24.97±0.91）%、（24.81±1.27）%、（16.15±1.10）%,与mimic-NC组比较,MIR503HG组和MIR503HG+miR-NC组HCT116R的细胞凋亡率明显增高,且差异有统计学意义（t=2.304、2.159,均P<0.05）;与MIR503HG+miR-NC组比较,MIR503HG+miR-224-5p组HCT116R的细胞凋亡率明显降低,且差异有统计学意义（t=2.067,P<0.05）。 结论 过表达LncRNA MIR503HG可通过抑制miR-224-5pCHSY1表达增加结肠癌细胞的放射敏感性。     

125 I-NT类似物与人结肠癌细胞HT29体外结合特性研究

目的设计神经紧张肽(NT)C端六肽NT(8-13)类似物NT2Lys-Arg-Pro-Tyr-Tle-Leu,并研究高比活度125I-NT2与人结肠癌细胞HT29体外结合特性.方法采用氯胺T法对NT2进行125I标记,用Sep-Pak柱纯化,以高效液相色谱法(HPLC)检测标记产物.通过125I-NT2与HT29细胞体外结合实验条件的选择,确定细胞量、保温温度和时间,并在选定条件下进行体外受体饱和实验,研究其亲和特性.结果①125I-NT2标记率为76%,放化纯＞98%,比活度为9.71×1012Bq/mmol.②125I-NT2与HT29细胞结合具有饱和性,在细胞量、保温温度和时间分别为106个、25℃和1 h条件下,平衡解离常数(Kd)为(0.745±0.418)nmol/L,最大结合容量(Bmax)为(0.103±0.060)pmol/106 cell.结论NT2与HT29细胞具有较高的亲和力,在人结肠癌显像中具有潜在的应用前景.     

RNA干涉抑制NIH3T3细胞中外源PC-1基因表达

目的：获得能有效抑制PC—1基因表达的RNAi靶标，用RNAi技术研究PC-1基因表达在前列腺癌中的作用。方法：用DNA重组技术构建了可表达短发夹RNA的重组质粒，将重组质粒与表达PC-1-EGFP融合蛋白的质粒共转染NIH3T3细胞，通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达差异，从5个候选靶标中初筛出最合适的RNAi靶标，再通过RT—PCR和Western印迹从mRNA水平和蛋白质水平检测该RNAi靶标抑制PC-1基因表达的效果。结果：利用RNA干涉有效靶点抑制了NIH3T3细胞中外源PC-I基因表达。结论：这一策略适合大量筛选：RNAi有效靶标序列，其结果为研究RNAi技术降低PC-1基因的表达对前列腺癌细胞的影响奠定了基础。     

RGDS四肽对肝星状细胞增殖、胶原合成及FAK mRNA表达的影响

目的 研究精-甘-天冬-丝氨酸（RGDS）四肽对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和胶原合成的抑制作用以及对黏着斑激酶（FAK）的影响。方法 以不同剂量的RGDS干预纤维黏连蛋白（FN）刺激的HSC,通过甲苯胺蓝染色测定细胞黏附率,^3H-胸腺嘧啶（^3H-TdR）、^3H-脯氨酸（^3H-Pro）掺入法测定HSC增殖及胶原合成能力,RT-PCR检测FAKmRNA的变化。结果 与单纯FN组相比较,不同剂量（25mg/L、50mg／L和100mg／L）的RGDS作用于HSC48h及100mg／L的RGDS作用于HSC不同时间（12h、24h和48h）后,HSC的增殖明显受抑,胶原合成能力降低,同时FAK mRNA表达水平也下降。结论 RGDS能够抑制FN与HSC黏附,并抑制HSC增殖及胶原合成。FAK的下调可能是RGDS抑制HSC增殖及胶原合成的分子机制之一。     

人瘢痕组织中黏着斑激酶及桩蛋白的变化

目的 探讨人体不同时期瘢痕组织中黏着斑成分桩蛋白及黏着斑激酶（FAK）的变化。方法 用免疫组织化学方法检测30例3～12个月人的瘢痕组织的FAK及桩蛋白的表达。结果 FAK和桩蛋白在3个月和6个月的瘢痕组织中较正常皮肤表达明显增加，12个月的瘢痕皮肤FAK和桩蛋白的表达与正常皮肤比较，差异无统计学意义。结论 在细胞外基质（ECM）的成分、结构或机械性质以及细胞内骨架不同的情况下，黏着斑的成分表达不同，ECM、整合素、黏着斑复合物传导不同的信号，可能造成细胞功能不同的变化。     

Load-sensitive adhesion factor expression in the elderly with skiing: relation to fiber type and muscle strength

We hypothesized that 12 weeks of downhill skiing mitigates the functional deficits of knee extensor muscles in elderly subjects due to the specific recruitment of fast motor units during forceful turns on the slope. Downhill skiing led to a 1.4-fold increase in the mean cross-sectional area of slow (P=0.04)- and fast (P=0.08)-type muscle fibers. Fold changes in the expression of the structural component of focal adhesions, gamma-vinculin, were correlated with alterations in concentric force (r=0.64). Hypertrophy of fast fibers was more pronounced in women than in men (1.7 vs 1.1). Gender-specific structural-functional adjustments of knee extensor muscles and attached patellar tendon were reflected by altered expression of pro- vs de-adhesive proteins and a number of correlations. The de-adhesive protein tenascin-C was selectively increased in women compared with men (1.7 vs 1.1) while the content of the adhesive collagen XII was specifically reduced in women. The pro-adhesive focal adhesion kinase showed a specific increase in men compared with women (1.9 vs 1.1). Our findings indicate that quantitatively matched adaptations in slow and fast motor units of extensor muscle underlie the preventive effect of skiing against sarcopenia and support that hypertrophy and reinforcement of fiber adhesion operate in the improvement of muscle strength.     

粘着斑激酶在大鼠组织及血管再狭窄和动脉粥样硬化血管中的表达

 目的研究粘着斑激酶在不同年龄大鼠各组织中的分布以及在血管再狭窄和动脉粥样硬化血管中的表达.方法应用Western blot技术研究粘着斑激酶在不同年龄大鼠各组织中的分布以及在血管内皮剥脱术后再狭窄和动脉粥样硬化血管中的表达.结果粘着斑激酶在1月龄幼年大鼠各组织中的表达较成年大鼠明显升高;在血管内皮剥脱术后3,7,14天粘着斑激酶表达逐渐升高,21天有所下降,但仍高于对照组;粘着斑激酶在动脉粥样硬化血管中的表达较对照组升高.结论粘着斑激酶可能参与胚胎发育后各组织的发育调节;粘着斑激酶可能参与血管成形术后再狭窄及动脉硬化的病理过程,粘着斑激酶表达的上调可能在血管成形术后再狭窄及动脉硬化的发病过程中起重要作用.     

利用RNAi技术抑制ARPC2基因表达的研究

目的 构建pSUPER-ARPC2表达载体,并在真核细胞中进行表达,验证ARPC2基因表达是否受到抑制。方法 设计特异性针对ARPC2基因的寡核苷酸序列,退火后利用常规酶切、连接方法将其重组至pSUPER basic载体中。对阳性克隆进行酶切和测序鉴定后,转染HEK293细胞,利用RT-PCR和Western blot检测ARPC2基因的表达情况。结果 构建的pSUPER-ARPC2载体导入HEK293细胞时,ARPC2基因的表达受到抑制,蛋白合成减少。结论 成功构建了ARPC2的RNAi表达载体,并证实其能对ARPC2基因的表达产生抑制作用,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。     

siRNA干扰明胶酶对人肾小管细胞ICAM-1表达的影响

目的 利用小干扰RNA(siRNA)抑制人肾小管上皮细胞(HKC)的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9,即明胶酶A和B的表达,观察其对胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 培养人肾小管上皮细胞,以100nmol/L佛波醇酯(PMA)刺激18h,脂质体转染抑制MMP-2或MMP-9表达的siRNA或无关siRNA.提取细胞总RNA或胞浆蛋白,利用Real-Time PCR、Western blot或免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术检测MMP-2、MMP-9或ICAM-1的表达情况.结果 特异性的siRNA能有效抑制HKC中MMP-2、MMP-9的mRNA和蛋白表达;免疫荧光结果显示经PMA刺激后HKC的ICAM-1表达上调,同时MMP-9-siRNA转染组人肾小管细胞的ICAM-1蛋白表达水比其他实验组高(P＜0.05).结论 抑制肾小管上皮细胞MMP-9的表达可使ICAM-1表达上调,提示除了细胞外基质降解途径外,MMP-9还可通过炎症途径影响肾脏纤维化进程.     

喉癌放疗敏感性与 p53和Bcl-2基因综合表达的关系

目的 根据喉癌细胞自身生物学特性,探讨Ｂｃｌ－２和Ｐ５３基因综合表达与放射治疗敏感性的相互关系。方法 应用抗Ｂｃｌ－２和Ｐ５３基因蛋白单克隆抗体,采用ＤＡＣＯ ＣＳＡ Ｓｙｓｔｅｍ法染色技术,对两组共７０例喉鳞癌组织标本进行了免疫组织化学染色分析,将Ｂｃｌ－２和Ｐ５３基因表达分子个级别,诮Ｇｒａｍｅｒ修正）列胶系数（Ｃ）进行检验,探讨各自及综合表达强度与喉癌放疗敏感性的基因表达强度与放射敏感性之间