改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的 探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法 选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液（改良混合脱钙液组,146例）与传统硝酸类脱钙液（硝酸类脱钙液组,42例）在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果 改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%（143/146）,HE染色效果良好为98.6%（144/146）;硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%（26/42）,HE染色效果良好为54.8%（23/42）。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论 改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。     

Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用

目的：探讨Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用。方法收集200例骨髓活检穿刺组织,选取其中150例采用Jy-Ⅱ脱钙液脱钙,同时选取50例采用5%的硝酸脱钙液脱钙做对照观察,脱钙后分别做HE染色、特殊染色（Go-mori氏网状纤维染色）和免疫组织化学染色（MaxVisionTM法CD38染色）,观察Jy-Ⅱ脱钙液对骨髓活检组织结构的保存及染色情况。结果经Jy-Ⅱ脱钙液脱钙后骨髓活检组织结构保持完整,完整率达98.67%。镜下形态结构清晰,组织结构清晰率达100.00%,染色情况良好,脱钙时间短,为150 min。脱钙完全,效果好。经5%的硝酸脱钙液脱钙后的骨髓活检组织,结构保持不完整,完整率达60.00%,镜下形态结构欠清晰,清晰率达52.00%,染色情况欠佳,脱钙时间长,长达240 min,脱钙不完全,效果欠佳（P〈0.05）。结论 Jy-Ⅱ脱钙液效果明显优于5%的硝酸脱钙液,骨髓活检组织结构保持良好,操作简便,脱钙时间短,在脱钙过程中无需更换脱钙液,HE染色、特殊染色、免疫组化染色效果也较满意,实用性强,不失为一种良好的脱钙液,值得推广     

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。     

不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色效果的对比研究

目的:探讨不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色质量的影响。方法:选用10%乙二胺四乙酸钠(EDTA)、HA S复合酸脱钙液和10%硝酸3种不同的脱钙液,分成A、B、C 3组用于脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20~28℃)不同脱钙液对骨髓组织切片制作的影响。结果:A组脱钙液所制切片染色效果良好,但脱钙速度缓慢,所需时间较长;B组脱钙液脱钙速度快,所制切片染色好;C组脱钙液所制切片的染色强度和对比度均不如前两种脱钙液。结论:在制作骨髓组织切片时,EDTA脱钙液和HA S复合酸脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果,但EDTA脱钙液脱钙周期过长;HA S复合酸脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合于临床速检工作;硝酸脱钙液组染色效果较差。     

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

不同脱钙方式观察牙髓组织切片的效果比较

目的比较乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetra-acetic acid,EDTA)脱钙法和复合酸脱钙法处理的牙齿石蜡切片的牙髓组织学形态特点。方法选用10%EDTA及复合酸(Plank-Rychlo)脱钙液,分别用于牙齿石蜡切片脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20～28℃)2种不同脱钙液对切片制作的影响。结果 EDTA脱钙液处理的石蜡切片牙髓细胞、成牙本质细胞、牙本质小管结构清晰,色泽对比鲜明,但脱钙时间较长;Plank-Rychlo脱钙液脱钙速度相对较快,但染色较EDTA脱钙液稍显模糊。结论在制作牙齿石蜡切片观察牙髓组织学形态时,EDTA脱钙液和Plank-Rychlo脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果。     

骨及钙化组织脱钙法的比较

目的：探讨骨及钙化组织的脱钙方法。方法采用三种不同方法处理相同的骨及钙化组织,甲组先将骨及钙化组织切成薄片,用甲酸氯化铝脱钙固定液彻底脱钙,流水冲洗,碳酸铝饱和溶液中和酸;乙组先用甲酸氯化铝脱钙固定液处理大块骨及钙化组织至彻底脱钙,再将骨及钙化组织切成薄片,碳酸铝饱和溶液中和酸;丙组按传统方法脱钙。三组组织脱钙后均常规制作HE切片,并行CD68和TTF-1免疫组化检测,比较三种方法的脱钙时间、HE染色和免疫组化检测结果。结果甲组脱钙时间短、切片完整、组织结构清晰、染色对比鲜明、长期保存不易褪色、免疫组化阳性信号正常,各项结果均优于乙组和丙组。结论甲酸氯化铝脱钙固定液处理骨及钙化组织,脱钙时间短,切片质量、染色质量、免疫组化质量好,切片长期保存不易褪色,值得推广。     

5％硝酸、10％EDTA用于大鼠尾椎椎间盘组织脱钙处理的效果观察

目的 观察并比较大鼠尾椎椎间盘经5％硝酸或10％EDTA脱钙处理后的病理表现.方法 成年SD雄性大鼠10只,取鼠尾Co6/7-Co9/10椎间盘,Co6/7和Co8/9为硝酸组进行5％硝酸脱钙处理,Co7/8和Co9/10为EDTA组进行10％EDTA脱钙处理.记录脱钙时间,采用HE染色、番红O固绿染色进行组织形态学观察,采用免疫组化染色观察II型胶原蛋白表达.结果 硝酸组脱钙需(18.35±4.71)h,EDTA组需(22.75±6.64)h.硝酸组整体形态保持更好,但是免疫组化染色II型胶原蛋白表达明显减少.EDTA组组织形态保持尚可,纤维环组织变硬变脆,有组织松散紊乱表现,但是II型胶原蛋白表达明显.结论 大鼠尾椎椎间盘经5％硝酸、10％EDTA两种脱钙液处理后,在进行普通病理及结构观察时,5％硝酸具有脱钙时间短,组织形态更完整的优势,但需要进行免疫组化染色时,10％EDTA进行脱钙处理更有优势.可以根据不同的科研需求选择脱钙方法.     

EDTA微波脱钙骨的免疫组化染色

目的：改进传统骨组织的脱钙方法，改善免疫组化效果。方法：采用20％EDTA微波脱钙法对兔骨组织进行脱钙。结果：EDTA微波脱钙法能够更好的保持骨组织结构和组织中的抗原物质，得到更好的免疫组化切片。结论：EDTA微波脱钙法优于传统脱钙法，更适合于骨组织脱钙和免疫组化制片。     

制作骨骼组织切片的新脱钙液

目的 制作人体骨骼组织脱钙及脱钙组织的病理切片.方法 用日常病理技术工作中常用的脱钙液与新的脱钙液对人体不同部位骨骼组织同时进行脱钙处理后,制作的病理切片显微镜下观察.结果 新脱钙液制备的骨骼组织切片完整,染色鲜艳,组织结构清晰;而旧脱钙液制作的骨骼组织切片不平整,染色偏红,切片整体效果不佳.结论 新的脱钙液脱钙速度快,对组织损伤小,切片染色效果好,试剂配制方法简单,值得临床推广应用.     

EDTA微波快速脱钙法

1材料和方法1．1材料固定后松质骨修成0．7cm×0．5cm×0．2cm；惠而浦微波炉AVM600型，功率900W，分七档；5种脱钙液：中性EDTA、PlankRycho液、10％硝酸．水溶液、Thoma’s液、Bouin＇s液。1．2方法微波设定在二档（160w），辐射smin，测量脱钙液温度，间隙Zmin，重复辐射3～4次后，以针顺利刺入骨组织为脱钙的标准。酸性脱钙液脱钙后，用5％硫酸钠水溶液碱化处理，微波辐射二档smin。中性EDTA脱钙无需碱化．常规石蜡制片，HE染色和免疫组化染色。2结果和讨论2．1经EDTA微波辐射脱钙的骨组织，石蜡切片完整，染色鲜艳，组织细胞…     

骨组织电镜脱钙技术在免疫组化中的应用

骨组织的免疫组化一直是病理技术中的一大难题。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，因而骨组织固定、脱钙都是制备标本的重要环节。一些强酸如盐酸、硝酸等虽能快速有效除去骨组织中的钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏；近几年发展的微波辅助EDTA脱钙技术，虽然可实现较好地保护组织抗原性且快速的效果，但操作程序复杂。骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化，其脱钙液与固定液均与其他方法有较大差别，本实验用该方法进行骨组织免疫组化，取得了较理想的效果，现报道如下。     

3种脱钙液对牙体牙周联合切片H-E染色效果的对比

目的对不同脱钙液在牙体牙周联合组织HE染色切片的效果进行比较，并初步探讨了乙二胺四乙酸二钠（EDTA）-微波技术在牙体牙周联合组织切片脱钙过程中的应用。方法取成年健康Beagle犬下颌骨牙体牙周联合组织做为标本，采用10％硝酸溶液、Krinstensen’S液、EDTA-微波辐射3种不同的脱钙方法进行脱钙，在完成组织脱钙后进行H—E染色，并在显微镜下观察组织结构及染色效果。结果EDTA-微波辐射完成组织脱钙约需53h，H—E染色效果良好，牙髓细胞、成牙本质细胞、牙周膜细胞和牙本质小管组织结构清晰；Krinstens—en’s液完成组织脱钙约需1500h，H—E染色效果较好，组织结构较清晰；10％硝酸溶液完成组织脱钙约需360h，H—E染色对比度差，组织结构模糊不清。结论应用EDTA-微波辐射技术能在相对较短的时间内完成牙体牙周联合组织的脱钙，并在H—E染色切片中较好地保存了牙体牙周组织的结构。     

骨组织制片中改良脱钙液与传统脱钙液的比较

目的探讨改良脱钙液与传统脱钙液脱钙能力的差异和对HE染色的影响。方法选取36例手术切除的新鲜骨标本,分别使用改良的脱钙液和传统的脱钙液脱钙,比较脱钙效果和HE染色效果。结果改良脱钙液组脱钙时间短于传统脱钙液组(P<0.01);改良脱钙液组切片质量良好率高于传统脱钙液组(P<0.05);改良脱钙液组染色效果良好率高于传统脱钙液组(P<0.01)。结论改良脱钙液脱钙彻底,组织清晰结构完整性更好。     

"低温微波-硝酸快速脱钙"技术研究及应用

目的 探讨低温微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法 根据实验条件分为4组：①低温(10℃)微波硝酸；②室温(20℃)微波硝酸；③室温(20℃)硝酸，硝酸脱钙液的浓度分别是5％、8％、10％和13％；④10％乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)脱钙液。应用免疫组织化学LSAB染色，光镜观察免疫组化染色结果。结果 以硝酸作为脱钙剂时，①组和④组的阳性细胞相近，均显著高于②、③组，经8％和10％硝酸脱钙的免疫组化染色阳性细胞明显多于5％和13％的硝酸。低温微波硝酸快速脱钙技术能显著缩短脱钙时间。结论 低温微波．硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

人工骨成骨模型免疫组织化学染色方法的构建

目的以大鼠单纯胫骨骨折后加入骨粉复合物为模型,观察乙二胺四乙酸(EDTA)-2Na脱钙和混合酸脱钙后免疫组织化学检测的效果。方法将骨粉复合物放置于大鼠左侧胫骨的骨块缺损中建立人工骨成骨模型,将模型分为两组(每组标本10例),实验组用EDTA-2Na脱钙,对照组采取混合酸脱钙后分别观察两组的免疫组织化学检测效果。结果EDTA脱钙组骨小梁结构保存完整,阳性表达较多。混合酸脱钙后,骨结构破坏较多,抗原破坏较严重,阳性表达明显减少。结论EDTA脱钙优于传统的脱钙方法,更适合于骨组织脱钙和免疫组织学化制片。     

骨髓活检组织制片方法的改进

骨髓活检组织在病理切片中常出现染色模糊和细胞固缩的现象,对骨髓组织造血细胞的辨认,造成一定的困难,甚至导致误诊或漏诊,实践中我们发现除了与染色方法有关外,主要与脱钙剂/固定剂关系密切.经过反复实验,我们采用骨髓活检标本经Bouin固定液固定,甲酸混合液脱钙,甲醛-冰醋酸-酒精混合液(简称F.A.A混合液)再固定的方法,获得了良好的制片效果,配合使用微波技术,明显缩短了脱钙时间,现介绍如下.     

临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较

目的 比较几种骨组织的脱钙溶液与脱钙方法 的效果,获得快捷、简便、适用于临床病理检验的脱钙技术.方法 考察在常温、恒温、搅拌状态下,几种常用的脱钙液对猪干骨中段脱钙、染色效果.结果 40℃恒温搅拌条件下,盐酸一氯化钠脱钙液(脱钙液I)、高浓度盐酸-甲酸-氯化钠脱钙液(脱钙液Ⅳ)、低浓度盐酸-甲酸-氧化钠脱钙液(脱钙液Ⅶ)、Plank-Rycho脱钙液(脱钙液Ⅸ),都具有脱钙时间短、组织损伤小、不影响染色效果.结论 恒温搅拌条件下,脱钙液I是最适合于临床病理检验的脱钙溶液.     

骨组织病理制片三种脱钙液的比较

目的比较三种文献报道的改良脱钙液的效果,获得简单、便捷、适用于临床病理制片的脱钙液。方法考察在常温及37℃恒温条件下,三种改良脱钙液对骨组织的脱钙及染色效果。结果常温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为72h左右,组织结构损伤小,改良脱钙液Ⅰ、Ⅲ染色效果佳;37℃恒温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为8—14h,改良脱钙液Ⅰ镜下组织结构破坏,改良脱钙液Ⅱ组织结构破坏且染色效果不佳,改良脱钙液Ⅲ组织结构损伤小,染色效果佳。结论37℃恒温条件下,改良脱钙液Ⅲ是较适合于临床病理制片的脱钙溶液。     

应用微波辐射脱钙技术改善骨组织免疫组化染色效果

应用微波辐射EDTA脱钙技术，革新传统的强酸脱钙法，缩短了脱钙时间，达到了完全保存骨组织形态结构及抗原物质的传统方法难以达到目的，增哟了免疫组化染色效果。