透明质酸钠对兔骨关节炎软骨诱导型NO合酶基因表达的影响

目的观察透明质酸钠(Na—HA)关节腔注射对骨关节炎(OA)模型关节软骨中诱导型NO合酶(iNOS) mRNA表达水平的影响。方法16只大耳白兔行单侧前交叉韧带切断术，术后5周将动物随机分为实验组和对照组，实验组关节腔注射1％Na—HA 0.3ml，每周1次，连续5周，对照组则注射等量生理盐水。术后10周处死动物，观察两组股骨内髁关节软骨的大体形态学和组织学病理改变，采用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测软骨iNOS mRNA的表达。结果实验组软骨退变程度较对照组明显减轻，实验组软骨中iNOS mRNA的表达水平与对照组比较差异无统计学意义。结论Na—HA能有效地减轻早期OA关节软骨的退变程度，Na—HA对早期OA软骨中的iNOS的表达没有下调作用。     

壳聚糖膝关节腔内注射疗法对兔骨关节炎关节软骨的影响

目的观察关节内注射羧甲基壳聚糖(CMCTS)对兔骨关节炎(OA)关节软骨退变及软骨基质金属蛋白酶(MMP)-1,-3mRNA表达的影响。方法24只大耳白兔行单侧膝关节前交叉韧带切断术,术后5周将动物随机分为3组,A组关节内注射2%CMCTS0.3ml,每2周1次;B组关节内注射1%透明质酸钠(HA)0.3ml,每周1次;C组关节内不注射药物。术后11周处死动物,观察各组股骨内髁关节软骨的大体变化,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测股骨内髁退变软骨中MMP-1和MMP-3的mRNA表达。结果CMCTS和HA注射组软骨退变程度较不用药组明显减轻,CMCTS注射组软骨MMP-1、MMP-3的mRNA表达明显低于HA注射组和不用药组。HA注射组软骨MMP-1和MMP-3的mRNA表达与不用药组比较,差异没有显著性意义。结论CMCTS能够明显抑制OA软骨MMP-1和MMP-3的mRNA表达,明显减轻软骨退变的程度,CMCTS对早期OA软骨有修复保护作用。     

脱氢表雄酮对兔骨关节炎影响的实验研究

目的观察关节腔内注射脱氢表雄酮(DHEA)对兔骨关节炎的影响,并探讨其作用机制。方法40只新西兰大白兔行单侧前交叉韧带切除术,术后4周随机分为实验组和对照组。实验组关节腔内注射100μmol/L DHEA(DHEA溶于二甲基亚砜),每周1次,连续5周；对照组注射同剂量的二甲基亚砜。术后9周处死兔子,取膝关节行大体和组织病理学检查,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测关节软骨及滑膜中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达。结果大体和组织病理学检查显示实验组软骨和滑膜病变程度轻于对照组。实验组软骨和滑膜中MMP-3 mRNA的表达水平显著低于对照组(均P＜0．05),而TIMP-1 mRNA的表达显著高于对照组(均P＜0．05)。实验组软骨IL-IβmRNA的表达与对照组表达差异无统计学意义(P＞0．05),而滑膜IL-1βmRNA的表达显著低于对照组(P＜0．01)。结论DHEA对兔软骨有修复和保护的作用,减轻滑膜的炎症,能够延缓骨关节炎的进展。下调软骨、滑膜MMP-3和上调软骨、滑膜TIMP-1的表达及下调滑膜IL-1β的表达可能是DHEA对骨关节炎的作用机制。     

羧甲基化几丁质降低兔实验性骨关节炎软骨基质金属蛋白酶-1表达的实验研究

目的 观察羧甲基化几丁质(CMC)经关节内注射后对兔前交叉韧带切断(ACLT)骨关节炎模型中软骨退变及软骨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达及分布的影响。方法 20只大白兔行单侧ACLT，随机选取10只作实验组，于术后第1、3、5周分别给予0.3ml 2% CMC关节内注射，另10只于同一时间点给予0．3m1生理盐水关节内注射作对照组。术后第6周处死大白兔，对比两组大白兔股骨髁关节软骨的大体改变和光镜下的病理改变，并用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR)及免疫组织化学的方法检测MMP—1在软骨中的mRNA和蛋白表达。结果 实验组软骨退变的大体评分和光镜下Mankin‘s评分都显著低于对照组，RT—PCR亦显示MMP-1在实验组中的表达明显低于其在对照组中的表达。免疫组织化学显示MMP-1主要表达于软骨表层及中上层，实验组MMP-1表达量亦明显低于对照组．结论 CMC能明显降低骨关节炎(OA)软骨中MMP-1的mRNA和生白表达水平，并明显降低软骨退变的程度，有可能成为防治OA的良好药物。     

高脱乙酰度羧甲基壳聚糖对兔膝骨关节炎软骨诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察高脱乙酰度羧甲基壳聚糖(HD-CMC)经关节腔注射后对兔膝骨关节炎(OA)软骨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA和蛋白表达的影响,探讨其用于OA防治的机制及可能性。方法36只日本大耳白兔,行右侧膝关节前交叉韧带切断术(ACLT),术后随机分为2组,实验组于术后当天开始关节腔内注射2%HD-CMC 0．15mg/kg,每2周给药1次,对照组同一时间点关节腔内注射0．9%生理盐水0．15mg/kg。实验组与对照组于第6周分别随机处死大白兔各9只,剩余大白兔于第12周处死,对比两组大白兔股骨髁关节软骨的大体改变,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学的方法检测iNOS在软骨中的mRNA和蛋白的表达。结果实验组退变软骨的大体评分轻于对照组,NOS的mRNA和蛋白表达水平均低于对照组。结论HD-CMC能够降低OA退变软骨iNOS的表达,并延缓软骨的退行性变,对OA退变软骨具有修复保护作用。     

兔前交叉韧带切断骨关节炎模型软骨MMP-1 MMP-3及诱导型一氧化氮合酶表达的研究

目的观察兔前交叉韧带切断（ACLT）骨关节炎（OA）模型软骨中不同造模时期基质金属蛋白酶（MMP）-1、3及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达，为该模型用于OA防治提供理论依据。方法36只大白兔，随机选择27只，每只均行右侧膝关节腔切开前交叉韧带切断术（ACLT），另9只单纯行右侧膝关节腔切开术作为假手术对照组。术后4、8及12周随机处死实验组大白兔各9只及假手术对照组大白兔3只。对比各组大白兔股骨髁关节软骨的大体改变，用反转录-聚合酶链反应及免疫组织化学的方法检测MMP-1、3及iNOS在软骨中的mRNA和蛋白的表达结果。结果ACLT造模术后4周即开始出现软骨早期退变表现，造模8周软骨退变加重，造模12周出现OA晚期软骨退变表现，不同造模时期的大体评分差异有统计学意义，造模4周MMP-1、3及iNOS表达量明显高于对照组，随着造模时间延长MMP-1、3及iNOS表达量进一步升高，MMP-1、3及iNOS在退变软骨的不同阶段表达分布有各自的特点。结论ACLT模型能够表现OA软骨降解退变的全过程，适宜用于OA防治研究，MMP-1、3及iNOS的高表达在OA软骨退变的病理过程中起着重要的作用，随着造模时间延长、软骨退变的加重，表达量持续升高，适合作为OA防治研究中的评价指标。     

MicroRNAs、uPA及MMP-3在骨关节炎患者滑膜组织中的表达及相关性

目的比较MicroRNAs、uPA及MMP-3在骨关节炎(OA)患者与正常关节滑膜中的表达差异,了解其在OA滑膜病变中的作用。方法采用实时定量PCR技术检测miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3在33例OA患者与28例正常关节滑膜中的表达水平,并分析其相关关系。结果 OA组miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3相对表达量分别为(1.63±0.93)、(0.94±0.60)、(3.52±1.79)和(4.91±1.86),非OA组miR-27a、miR-140、uPA和MMP-3相对表达量分别为(3.34±1.68)、(2.55±1.12)、(1.16±0.65)和(0.84±0.57),组间比较显示miR-27a、miR-140的表达OA组显著低于对照组(P<0.01),而uPA和MMP-3表达OA组明显高于对照组(P<0.01);OA组内各因子之间相关分析显示,miR-27a和uPA呈显著相关关系,相关系数为r=-0.699(P<0.01),miR-140和MMP-3呈显著相关关系,相关系数为r=-0.598(P<0.01);uPA和MMP-3之间也呈相关关系,相关系数为r=0.444(P<0.05)。结论 miRNA-27a、miRNA-140在OA患者滑膜中低表达,二者与在滑膜中呈现高表达的uPA和MMP-3分别呈现显著负相关关系,共同作用于OA滑膜和软骨退变过程。     

透明质酸钠关节腔内注射对兔软骨的保护作用及对过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达的影响

目的 观察关节腔内注射透明质酸钠(Na-HA)对骨关节炎(OA)软骨的保护作用及对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)mRNA表达的影响,探讨Na-HA治疗OA的机制.方法 48只大耳白兔随机分为A、B、C 3组,每组16只,A组为正常对照组,B、C两组行单膝前交叉韧带切断术,术后第5周开始,B组关节腔内注射0.3 ml生理盐水;C组注射等量的高分子量1%Na-HA,每周1次,连续5周.术后11周处死动物,比较各组股骨内髁关节软骨的大体变化,苏木素-伊红(HE)染色观察股骨内髁软骨的病理变化,番红O染色观察软骨基质的改变,采用实时定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)方法检测软骨PPAR-γ mRNA的表达水平.结果 大体评分显示B组软骨退变的程度明显重于A组和C组(P＜0.05);HE染色与A、C两组比较,B组软骨明显溃疡形成;番红O染色平均灰度值B组软骨基质染色明显高于A、c两组(P＜0.05);B组软骨PPAR-γ mRNA表达量明显高于A、C两组(P＜0.05);A、C两组大体评分和PPAR-γ mRNA表达量差异无统计学意义.结论 关节腔注射Na-HA可以抑制软骨PPAR-γmRNA表达,减轻软骨退变的程度,可能是其治疗骨关节炎的机制之一.     

滑膜组织在脐带间充质干细胞治疗骨关节炎中的作用及机制

目的 探讨骨关节炎(OA)兔滑膜的改变及脐带间充质干细胞(UC-MSCs)对OA的治疗作用及相关机制。方法 选取健康成年新西兰大白兔15只,分为对照组、OA模型组、UC-MSCs干预组3组,每组各5只。OA造模成功后给予干预组关节腔内注射UC-MSCs,干预4周后观察关节影像学改变及病理学改变;取各组滑膜组织通过免疫组化方法检测滑膜组织IL-6、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)等炎症因子的水平及细胞外信号调节激酶(ERK)等表达水平,并采用Western blot方法检测滑膜组织IL-6、MMP-13、ERK、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)蛋白等表达水平。结果 磁共振检查显示,与对照组相比,OA模型组兔膝关节滑膜明显增厚,关节腔积液明显增多;UC-MSCs干预组关节滑膜增厚、关节腔积液均较OA模型组明显改善。病理学观察显示,OA模型组关节滑膜炎性细胞较对照组明显增多,滑膜增生、水肿明显,UC-MSCs干预组较OA模型组滑膜炎性细胞浸润减轻,滑膜增生、水肿明显减轻。免疫组化结果显示,OA模型组兔滑膜IL-6、MMP-13、ERK水平较对照组明显升高(P<0.05)。UC-MSC...     

盘状结构域受体2与软骨破坏程度的相关研究

目的 观察盘状结构域受体(DDR)2和基质金属蛋白酶(MMP)-13在膝骨关节炎(OA)大鼠不同时期软骨及滑膜中的表达,探讨DDR2与关节软骨破坏之间的关系.方法 采用改良膝关节腔内注射木瓜蛋白酶法制作OA大鼠模型,从蛋白水平检测造模后不同病理阶段关节软骨及滑膜中DDR2和MMP-13的表达规律和分布特点.结果 DDR2在各模型组关节软骨及滑膜中的表达较健康组增高(P＜0.01),并且各组中软骨表达高于相应滑膜,MMP-13表达呈现与DDR2相同的特点,二者相关系数r=0.93(P＜0.01).结论 初步证明"DDR2-MMP-13-软骨破坏"途径在OA病理过程中起重要作用.软骨和滑膜DDR2的表达升高共同促进软骨退变.     

Levels of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitors of metalloproteinase-1 in gastric cancer

AIM:To evaluate the levels of preoperative serum matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) in gastric cancer.METHODS:One hundred gastric cancer patients who underwent gastrectomy were enrolled in this study.The serum concentrations of MMP-1 and TIMP-1 in these patients and in fifty healthy controls were determined using an enzyme-linked immunosorbent assay.RESULTS:Higher serum MMP-1 and TIMP-1 levels were observed in patients than in controls (P < 0.001).Serum M...     

Expression of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in ulcerative colitis

INTRODUCTION Ulcerative colitis (UC) is a chronic, non-specific inflammatory disease of the colonic mucosa with unknown etiology and pathogenesis. Pathologically, it is characterized by ulceration in the mucosal and submucosal areas, and degradation of ex…     

Plasma matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 as biomarkers of ulcerative colitis activity

AIM: Overexpression of mucosal metalloproteinases (MMP) has been demonstrated recently in inflammatory bowel disease. Their activity can be counterbalanced by the tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP). The aim of this study was to evaluate the effect of ulcerative colitis (UC) on MMP-1 and TIMP-1 plasma concentrations, as two possible biomarkers of the disease activity. METHODS: MMP-1 and TIMP-1 plasma concentrations were measured with an enzyme immunoassay in 16 patients with endoscopically confirmed active UC. RESULTS: Plasma concentrations of both MMP-1 (13.7 +/- 0.2 ng/ml) and TIMP-1 (799 +/- 140 ng/ml) were significantly elevated in UC patients in comparison to healthy controls (11.9 +/- 0.9 ng/ml and 220 +/- 7 ng/ml respectively). There was no correlation between TIMP-1 and MMP-1 concentrations (r=-0.02). TIMP-1 levels revealed significant positive correlations with scored endoscopic degree of mucosal injury, disease activity index and clinical activity index values as well as C-reactive protein concentration. There was no correlation between MMP-1 and laboratory, clinical or endoscopic indices of the disease activity. CONCLUSION: These results confirm the role of both MMP-1 and TIMP-1 in the pathogenesis of ulcerative colitis. However only TIMP-1 can be useful as a biomarker of the disease activity, demonstrating association with clinical and endoscopic pictures.     

基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制物-1在IgA肾病肾组织中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）／金属蛋白酶组织抑制物－1（TIMP－1）系统在IgA肾病肾组织中的表达及其对IgA肾病的进展的影响。方法 采用免疫组织化学和原位杂交技术,分别在蛋白质和基因水平检测38例IgA肾病患者肾组织中的MMP－9和TIMP－1的变化。结果 MMP－9在正常肾脏肾小球的脏层上皮细胞和内皮细胞有少量表达,在肾小管上皮细胞和间质血管壁也有少量表达;在IgA肾病中,MMP－9在系膜增殖性肾小球和间质血管壁的表达均明显增多（P＜0．001）,而在硬化肾小球内的表达则明显减少,肾小管细胞的MMP－9表达无明显变化。TIMP－1在正常肾组织中不能检出,在IgA肾病患者具有系膜增殖性病变的肾小球中有微量表达,在增殖在很重但尚未完全硬化的肾小球内表达增多,在肾小管间质表达最为明显（P＜0．001）,其主要见于肾小管细胞、间质细胞和血管内皮细胞。肾组织中的TIMP－1表达与血清肌酐水平呈显著相关（P＜0．05）,与肾小管间质的纤维化和炎细胞浸润程度亦明显相关（P值均＜0．01）。肾小球中的MMP－9表达与尿蛋白无明显相关性,但与血清肌酐水平呈显著负相关（P＜0．05）。结论 MMP－9和TIMP－1的异常表达可能是影响IgA肾病进展的因素之一。     

基质金属蛋白酶—1,反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒？…

目的 观察基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）,反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对大鼠肝纤维经的影响。方法 运用重组ＤＮＡ技术,构建大鼠ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１,真核细胞表达质粒,经脂质包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠纤维化模型体内,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果 ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１表达质粒均可促进肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原的降解（Ｐ〈０．０５－Ｐ〈０．０１）,且作     

Expression of matrix metalloproteinase-13 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in acute liver injury

BACKGROUND/AIMS: Matrix metalloproteinase-13, one of the principal neutral proteinases capable of cleaving native fibrillar collagens, is important in the degradation and remodeling of extracellular matrix. However, its precise expression in liver injury has not been characterized. We examined the kinetics of the expression of matrix metalloproteinase-13 and one of its specific inhibitors, tissue inhibitor of metalloproteinase-1, in acute liver injury in rats. METHODS: Acute liver injury was induced by administration of carbon tetrachloride or two different doses of D-galactosamine hydrochloride in Wistar rats. Hepatic matrix metalloproteinase-13 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 mRNA levels were then examined by Northern blotting. RESULTS: All rats survived after liver injury induced by carbon tetrachloride or low doses of D-galactosamine hydrochloride. However, rats died 5 days after induction of liver injury by high doses of D-galactosamine hydrochloride. In carbon tetrachloride-induced liver injury, matrix metalloproteinase-13 mRNA was transiently increased between 6 h and 1 day after injury. Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 mRNA expression was increased between 6 h and 3 days after the peak of matrix metalloproteinase-13 expression. Similar patterns of matrix metalloproteinase-13 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression were observed in low-dose D-galactosamine hydrochloride-induced liver injury. In contrast, in high-dose D-galactosamine hydrochloride-induced liver injury, tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression peaked before matrix metalloproteinase-13 expression, which was increased 2 days after injury. Both mRNA levels continued to increase until death. CONCLUSIONS: Transient expression of matrix metalloproteinase-13, followed by that of tissue inhibitor of metalloproteinase-1, was observed during recovery from acute liver injury induced by carbon tetrachloride and low-dose D-galactosamine hydrochloride. In contrast, disordered expression of matrix metalloproteinase-13 was observed in fatal liver injury caused by high-dose D-galactosamine hydrochloride. These results indicate that matrix metalloproteinase13 plays an important role in the early phase of recovery from liver injury.     

金属蛋白酶-9及其抑制物-1在实验性心动过速性心肌病中的变化

目的观察心动过速性心肌病(TIC)时金属蛋白酶(MMP)-9及其抑制剂(TIMP)-1的变化。方法对11只犬采用快速右房起搏建立TIC模型组,6只犬作假手术组(对照组)。应用超声心动图和心导管检查测量在窦性心律下的血流动力学数据。应用电子显微镜观察左室组织的超微结构改变。MMP-9及TIMP-1的相对变化通过免疫印迹法获得。结果8周后,与对照组相比,TIC组犬左室舒张末期容积及收缩末期容积均显著增加(P<0.05);左室射血分数在起搏1周后显著减小(P<0.05)。左室压力最大上升速率显著下降,最大下降速率绝对值显著下降(P<0.05和0.001),左室舒张末期压显著增大,左室松弛时间常数明显延长(P<0.05),二尖瓣血流频谱A波峰值流速和E波峰值流速均显著减小。心肌细胞超微结构发生变化,同时MMP-9增加,TIMP-1减少。结论快速右房起搏可制造TIC模型,TIC时MMP-9增加,TIMP-1减少。