云南药用草乌种植发展现状及对策

草乌是重要的中药材,与北方草乌不同的是,云南草乌是以黄草乌或滇南草乌为基源植物.经调查,针对目前云南药用草乌种植优质种源缺乏、良种快速繁殖技术不成熟以及种植规范化程度不高、规模化程度低等问题,提出了以政府为动力、优质种源为核心、GAP为基点、打造知名品牌等发展云南草乌产业的相应思路及对策.     

醋的用量对炮制草乌生物碱类成分的影响

目的：探讨醋的用量对醋制草乌生物碱类成分的影响。方法：采用不同用量的米醋炮制草乌,HPLC法测定炮制品中3种双酯型生物碱和3种单酯型生物碱的含量,比较生草乌、药典法制草乌、不同用量醋制草乌中生物碱的含量差异。结果：醋制草乌可以使双酯型生物碱水解,生物碱含量的变化与醋的用量有一定相关性;醋制草乌中单酯型生物碱的含量明显高于药典法制草乌。结论：醋制草乌可以作为一种新的草乌炮制方法,但应减少临床用量。     

蒙医对草乌炮制的历史沿革与发展现状

草乌为毛茛科植物北乌头(Aconitum kusnezoffii Reichb)的干燥块根,属蒙医常用药材,草乌有大毒,尤以双酯型二萜类生物碱乌头碱(Aconigne)、中乌头碱(Mesaconlfine)、次乌头碱(Hypaconitine)的毒性最强.有强心作用,中毒时出现心率不齐,呼吸麻痹而死亡.蒙医炮制草乌的目的是降低毒性和增强药效.相关古代文献材料中可以看出,蒙医方剂中,草乌一般生用,与大量的诃子配伍使用或以童尿调和,且多数内服方剂中都是草乌和诃子同时入伍,且很多情况下先后排列.随着蒙医药事业的不断发展,蒙医对草乌的炮制也在蒙医自身的实践以及受国内和国际上对草乌的炮制的研究而不断的发展.其炮制方法有其蒙医理论与民族和地区特点,汇总各地炮制方法有诃子水制草乌、干草水制草乌、童尿制草乌、酸奶制草乌、盐水制草乌、清水制草乌、高压蒸草乌、去尖刮皮炮制等.不少学者对用诃子汤炮制草乌,进行深入研究,探索其炮制原理,证明蒙医用诃子炮制草乌以降低毒性足科学的.并且据有关资料显示,对草乌的化学成分、毒性及炮制、药理作用以及作用机理、毒理学等方面的国内外研究颇多.应该充分借鉴和吸收兄弟民族医学及现代医学的研究成果,深入研究草乌,让草乌这一用途厂泛、疗效确切的天然蒙药更充分的服务于人类的健康保健,从而促进蒙医药的发展进程.     

醋的种类对炮制草乌生物碱类成分的影响

目的：探讨醋的种类对醋制草乌生物碱类成分的影响,为筛选炮制辅料用醋提供依据。方法：采用不同类型的米醋炮制草乌,HPLC法测定炮制品中3种双酯型生物碱和3种单酯型生物碱的含量,比较采用不同类型的醋制备的草乌炮制品中生物碱的含量差异。结果：各炮制品中双酯型生物碱的含量：生草乌〉食用乙酸制草乌〉工业乙酸制草乌〉陈醋制草乌≈龙门米醋制草乌〉玫瑰醋制草乌〉药典法制草乌;单酯型生物碱的含量：药典法制草乌〉食用乙酸制草乌〉龙门米醋制草乌≈工业乙酸制草乌〉陈醋制草乌≈玫瑰醋制草乌〉生草乌。结论：醋制草乌可以达到炮制减毒的效果,食用醋比乙酸的减毒效果更佳。     

草乌与(生、法)半夏配伍3个毒性成分毒代动力学变化研究

目的:探讨草乌与(生、法)半夏配伍毒代动力学变化。方法:采用雄性SD大鼠48只,随机分为草乌醇提组、草乌与法半夏醇提组、草乌与生半夏醇提组、草乌水提组、草乌与法半夏水提组、草乌与生半夏水提组,分别单次以《中华人民共和国药典》(2015版)中草乌最大剂量给药(0. 06g/kg),设给药前和给药后共13个采血时间点,采用LC-MS/MS检测血浆样品,血药浓度-时间数据经DAS2. 0软件处理计算毒代动力学参数。结果:3个毒性成分的AUC(0-t)变化:乌头碱:与单用醇提草乌相比,醇提草乌与法半夏配伍明显降低;与单用水提草乌相比,与生半夏配伍后增大明显。新乌头碱:与单用醇提草乌相比,在醇提草乌与法半夏配伍明显降低,但与生半夏配伍明显增大;与单用水提草乌相比,水提草乌与生半夏配伍明显增加。次乌头碱:与单用醇提草乌相比,在醇提草乌与法半夏配伍明显降低,水提物的变化与醇提一致。Cmax变化:乌头碱:与单用水提草乌相比,水提草乌与生半夏配伍后显示增大。新乌头碱:与单用醇提草乌相比,醇提草乌与法半夏配伍降低,但与生半夏配伍后增大;与单用水提草乌相比,水提草乌与生半夏配伍后明显增加。次乌头碱:与单用醇提草乌相比,在醇提草乌与法半夏配伍后明显降低。结论:总体可见生半夏可使草乌中双酯型生物碱的吸收程度与速率增加;法半夏可使草乌中双酯型生物碱的吸收程度与速率减小。     

基于UPLC-Q-TOF/MS技术结合序贯代谢法研究诃子汤炮制草乌机理＊

目的 研究诃子汤炮制草乌对草乌多成分体内动态变化过程的影响，从而探讨蒙医诃子汤炮制草乌机理。方法 采用超高效液相色谱-串联飞行时间/质谱（Ultra performance liquid chromatogr time of flight/mass spectrometry，UPLC-Q-TOF/MS）技术和封闭肠环法，收集生草乌、炮制草乌及诃子的肠壁吸收、肠道菌吸收代谢以及肝代谢样品，分别建立大鼠含药血浆指纹图谱，对各个样品所含成分进行对比分析研究。结果 在肠壁吸收研究中检测出生草乌、炮制草乌成分共32种，其中生草乌组、制草乌组共有成分16种、只在生草乌组检测出而未在制草乌组检测到成分8种、只在制草乌组检测出而未在生草乌组检测出成分8种，诃子成分17种。在肠道菌吸收代谢研究中检测出草乌31种成分，其中生草乌、制草乌组共有成分10种、只在生草乌组检测出而未在制草乌组检测到成分7种、只在制草乌组检测到而未在生草乌组检测出成分14种，诃子13种成分。在肝代谢研究中草乌检测出21种成分，其中生草乌组、制草乌组共有成分5种、只在生草乌组检测出而未在制草乌组检测到成分7种、只在制草乌组检测出而未在生草乌组检测出成分9种，诃子11种成分。对已鉴定出成分进行含量对比研究结果显示生草乌组与制草乌组相比较其成分在肠壁吸收中较多在肠道菌及肝中吸收代谢较少，而制草乌与诃子成分在肠道菌及肝代谢中较多，而在肠壁与肝代谢中较少。结论 经过诃子汤炮制草乌可使草乌成分吸收代谢位点发生了变化，使草乌成分在肠壁吸收中变少而肠道菌及肝代谢中变多。由此可知，经诃子汤炮制使草乌成分的吸收变缓慢且代谢变快，因而可有效起到草乌中毒性成分被人体缓慢吸收且快速代谢。由此推断，诃子汤炮制草乌通过以下途径达到减毒目的：一方面避免草乌毒性成分吸收过快而导致血药浓度快速升高导致中毒；另一方面加速代谢毒性成分，进而降低血药浓度而避免中毒。     

诃子草乌配伍与诃子制草乌水煎液中生物碱含量的比较——诃子制草乌炮制原理探讨Ⅱ

目的:对生草乌、诃子制草乌水煎液及草乌诃子共煎液中生物碱含量进行比较验证蒙医理论"诃子可解乌头毒"。方法:采用HPLC测定生草乌水煎液、诃子制草乌水煎液及诃子草乌共煎液中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱以及苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱的含量。色谱条件以乙腈-四氢呋喃(25∶15)为流动相A,以0.1 mol.L-1醋酸铵溶液(每1 000 mL加冰醋酸0.5 mL)为流动相B。结果:双酯型生物碱的含量为诃子草乌共煎液>诃子汤制草乌煎液>生草乌煎液;单酯型生物碱的含量为生草乌煎液>诃子草乌共煎液>诃子汤制草乌煎液。结论:诃子可以使草乌中双酯型生物碱缓慢水解,诃子制草乌的毒性低于诃子草乌配伍。     

诃子对草乌毒性生物碱含量影响的研究进展

目的从诃子汤制草乌及诃子草乌配对共煎两方面,综述诃子对草乌毒性生物碱含量影响的研究现状,并提出今后诃子解草乌毒的研究方向。方法检索中国知网、万方和维普数据库,收集20年来诃子炮制草乌与诃子草乌共煎的相关文献并进行整理分析。结果获得相关文献26篇,经整理分析发现此类研究集中在对诃子炮制草乌减毒的原理、工艺、方法和诃子与草乌配对共煎的减毒原理、配伍比例等方面。结论随着研究的深入,今后诃子鞣质对草乌各类生物碱的影响规律需深入挖掘,诃子炮制草乌的工艺需进行规范统一,诃子草乌共煎减毒存效的比例规律需研究探讨。     

诃子中的鞣质成分对诃子汤制草乌的影响 ——诃子制草乌炮制原理探讨Ⅰ

目的:探讨诃子中的鞣质成分对诃子汤制草乌中生物碱类成分的影响,解析蒙药诃子制草乌的炮制原理。方法:采用HPLC测定诃子汤制草乌、清水制草乌、去鞣诃子汤制草乌中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱以及苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱的含量。结果:各炮制品中双酯型生物碱的含量:诃子汤制草乌(0.692 5%)>清水制草乌(0.565 7%)>去鞣诃子汤制草乌(0.493 8%);单酯型生物碱的含量:诃子汤制草乌(0.110 1%)>去鞣诃子汤制草乌(0.0833%)>清水制草乌(0.076 8%)。结论:鞣质可抑制生物碱类成分的溶出,使其缓慢水解进而达到降低毒性的作用。     

蒙药诃子汤制草乌总生物碱对乳大鼠心肌细胞的毒性作用研究

目的 探讨蒙药诃子汤炮制草乌总生物碱对心肌细胞的毒性作用.方法 制备乳大鼠原代心肌细胞,胎盘蓝染色法检测心肌细胞存活率,免疫组织化学染色法鉴定心肌细胞.制备的原代细胞培养3-4d,分别加入诃子汤制草乌、生草乌总生物碱0.5、0.25、0.125、0.0625 mg/mL培养30、60 min,MTT法检测心肌细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,Hoechst33528荧光染色法检测细胞核凋亡率.结果 诃子汤制草乌总生物碱、生草乌总生物碱在与心肌细胞共同孵育30 min、60 min时均能降低心肌细胞活力,细胞LDH漏出率增加,发生细胞凋亡;诃子汤制草乌总生物碱所致的心肌细胞毒性作用弱于生草乌总生物碱.结论 经诃子汤炮制的草乌总生物碱对心肌细胞的毒性作用明显低于生草乌总生物碱,表明采用诃子汤炮制确能降低草乌的心肌毒性.     

应用UPLC-Orbitrap-MS分析草乌及其不同炮制品化学成分差异

草乌是有毒药之一,需经过炮制后方能使用。中药中草乌常用的炮制方法为水煮至内无白心,口尝微有麻舌感,蒙古族药中常用诃子制草乌,2种方法均能减毒。该实验利用UPLC-Orbitrap-MS对生草乌、药典法制草乌、诃子制草乌进行分析,比较炮制前后化学成分变化,为阐明诃子制草乌炮制减毒原理提供依据。通过比对生草乌与各炮制品的正负离子模式离子流出峰分析草乌炮制前后成分变化情况,并以化合物炮制前后离子峰面积比为炮制前后变化指数,将草乌主要活性成分经2种炮制方法炮制后的含量变化趋势进行对比,发现生草乌经药典法炮制后,新增14-O-anisoylneoline,dehydro-mesaconitine等14种成分,同时N-demethyl-mesaconitine,aconitine消失,且双酯型生物碱含量明显减少,单酯型和醇胺型生物碱含量明显增加,说明药典法制草乌是通过降低主要毒性成分双酯型生物碱的含量来减毒的;草乌经诃子汤炮制后,原草乌中含有的生物碱类化学成分变化较小,新增gallic acid,chebulic acid,shikimic acid等9种诃子中含有的化学成分,猜测诃子制草乌的减毒机制可能与诃子中化学成分有关。该研究结论表明药典法制草乌与诃子制草乌中化学成分有质的不同,二者具有不同的减毒原理。     

蒙中药草乌生物碱的测定和提取工艺及化学成分研究

本文通过查阅国内外近几年相关文献,对蒙药草乌和中药草乌化学成分的研究进展,包括对化学成分测定方法及成分研究、草乌生物碱的含量及含量变化研究、草乌生物碱提取分离研究、草乌化学成分研究等方面进行综述,为草乌有效物质基础研究和草乌质量控制研究提供基础。     

黄草乌及其炮制品的毒性和镇痛作用研究

目的:比较黄草乌和其炮制品的毒性效应/镇痛效应。方法:采用HPLC法测定黄草乌和其炮制品滇乌碱、8-去乙酰滇乌碱的含量;采用Bliss法分别测定黄草乌及其炮制品对小鼠半数致死量(LD_(50))或测定其最大给药剂量;小鼠连续7 d灌胃黄草乌及其炮制品,末次给药1 h后观察小鼠Ⅱ导联心电图变化(心率失常发生率、心率变化);通过热板法和醋酸扭体法观察黄草乌及其炮制品镇痛作用。结果:黄草乌中滇乌碱的含量为264.19μg/g,制黄草乌中8-去乙酰滇乌碱的含量为574.25μg/g;黄草乌的LD_(50)为生药2.09 g/kg,黄草乌炮制品的最大给药量为生药18.0 g/kg。在生药1.0 g/kg相同剂量下灌胃给药,黄草乌组小鼠的心律失常发生率为100%,制黄草乌组小鼠的心律失常发生率为26.7%。与空白对照组比较,黄草乌组及制黄草乌组小鼠心律失常发生率都具有显著性差异(P0.01或P0.05),黄草乌组及制黄草乌组小鼠的平均心率也具有显著性差异(P0.05或P0.01)。黄草乌及其炮制品均具有镇痛作用(P0.05或P0.01),且两者镇痛作用无显著差异。结论:黄草乌毒性较大,炮制后的黄草乌毒性明显降低,炮制后的黄草乌镇痛效果并未降低,炮制对黄草乌具有减毒存效作用。     

草乌不同药用部位的急性毒性实验研究△

目的：评价草乌不同药用部位的急性毒性。方法：以草乌不同药用部位水煎醇提取液,经一次性灌胃予昆明种小鼠,并观察14d内小鼠的毒性反应及死亡情况。结果：生草乌LD50值为4．03g·kg^-1,草乌叶LD50值为121．7g·kg^-1,草乌花LD50值为125．3g·kg^-1,草乌芽LD50值为136．2g·kg^-。结论：根据WHO急性毒性分级方法,初步认为生草乌煎煮后仍具有低毒,草乌芽、草乌花和草乌叶煎煮后均无明显毒性。     

草乌净制机制探析

目的: 探析草乌的净制机制。 方法: 采用HPLC测定3批带残茎草乌、去残茎草乌及草乌残茎中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱、苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱的含量。 结果: 带残茎草乌、去残茎草乌、草乌残茎中3种双酯型生物碱的总含量分别是0.59%~0.66%,0.61%~0.69%,0.39%~0.42%;3种单酯型生物碱的总含量分别是0.09%~0.10%,0.09%~0.12%,0.06%~0.08%。草乌不同部位的色谱图中除6种酯型生物碱峰外还存在共有峰4,残茎中峰4的峰面积是去残茎草乌的55%~80%。 结论: 草乌残茎和去残茎草乌中6种生物碱成分含量存在差异;残茎属于生物碱成分含量较低的非药用部位,需去除。     

草乌炮制的历史沿革及外治应用

草乌为常用中药,广泛应用于外治,并对类风湿性关节炎有一定的疗效。本文采用文献研究和调研的方法,查阅古代和现代文献并结合草乌外治方剂的应用情况,对草乌的炮制方法进行梳理,为草乌炮制工艺的规范化、标准化研究提供参考,以确保草乌临床使用过程中的安全性。     

草乌中毒及其防治

草乌是蒙医常用药材之一,近年来在临床上经常遇到草乌中毒情况.因此,现就草乌药理学、中毒症状、抢救治疗和预防等方面谈谈个人看法.     

黄草乌及其炮制品的毒性效应和镇痛作用研究

目的:比较黄草乌和其炮制品的毒性效应/镇痛效应。方法:采用HPLC法测定黄草乌和其炮制品滇乌碱、8-去乙酰滇乌碱的含量;采用Bliss法分别测定黄草乌及其炮制品对小鼠半数致死量(LD_(50))或测定其最大给药剂量;小鼠连续7 d灌胃黄草乌及其炮制品,末次给药1 h后观察小鼠Ⅱ导联心电图变化(心率失常发生率、心率变化);通过热板法和醋酸扭体法观察黄草乌及其炮制品镇痛作用。结果:黄草乌中滇乌碱的含量为264.19μg/g,制黄草乌中8-去乙酰滇乌碱的含量为574.25μg/g;黄草乌的LD_(50)为2.09 g生药/kg,黄草乌炮制品的最大给药量为18.0 g生药/kg。在1.0 g生药/kg相同剂量下灌胃给药,黄草乌的心律失常发生率为100%,制黄草乌的心律失常发生率为26.7%,与空白组比较,黄草乌及其炮制品心律失常发生率都具有显著性差异(P0.01或P0.05),黄草乌及其炮制品的平均心率也具有显著性差异(P0.05或P0.01)。黄草乌及其炮制品均具有镇痛作用(P0.05或P0.01),黄草乌及其炮制品之间镇痛作用无显著差异。结论:黄草乌毒性较大,炮制后的黄草乌毒性明显降低,炮制后的黄草乌镇痛效果并未降低,炮制对黄草乌具有减毒存效作用。     

不同比例甘草诃子配伍制草乌对其次乌头碱含量的影响

目的 建立制草乌中毒性成分次乌头碱的HPLC定量测定方法,研究和探讨不同配伍比例下甘草和诃子对制草乌药材中次乌头碱含量的影响.方法 采用Alltima C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-5％三乙胺水溶液(72:28,V/V)为流动相,流速1.0ml.min-1,柱温30℃,检测波长235 nm,测定追踪草乌单煎及草乌-甘草、草乌-诃子合煎液中次乌头碱含量的变化.结果 次乌头碱回归方程Y=15.669X +0.180 2(r =0.999 3),在0.2 ～8.0μg·ml-1范围内,呈良好的线性关系,平均加样回收率95.31％,RSD5.14％.草乌-甘草、草乌-诃子合煎后其次乌头碱含量均低于草乌单煎,且在相同配伍比例下,草乌-诃子合煎液中的次乌头碱含量低于草乌-甘草合煎液.结论 甘草、诃子与草乌共煎均有减轻草乌毒性的作用,两个配伍药对具有一定的合理性.     

草乌与生半夏、法半夏配伍UPLC/Q-TOF-MS离子流图,OPLS-DA/PCS及差异化合物对比研究

目的:分析草乌与生半夏、法半夏配伍反与不反及其化学成分。方法:Bliss法对法半夏和草乌合煎液、生半夏和草乌合煎液及草乌提取液的LD_(50)进行计算;采用UPLC-Q-TOF-MS对两合煎液成分进行分析,经OPLS-DA和PCA对两合煎液内中毒性成分间差异行统计分析。结果:法半夏和草乌提取液对于小鼠Dm是16.96g/kg,Dn是8.50g/kg;生半夏和草乌提取液对于小鼠Dm是13.97g/kg,Dn是1.85g/kg;草乌提取液对于小鼠Dm是14.98g/kg,Dn是2.30g/kg;法半夏和草乌合煎液LD_(50)为12.20g/kg,其置信区间是11.36～13.10g/kg;生半夏和草乌合煎液LD_(50)为4.39g/kg,其置信区间是3.69～5.28g/kg;草乌煎液LD_(50)为7.97g/kg,其置信区间是6.97至9.09g/kg。和单独使用草乌相比,法半夏配伍草乌的LD_(50)变大,生半夏配伍草乌的LD_(50)变小;2组间有13个化学成分存在差异,生半夏和草乌合煎液内,峰13(去氧乌头碱)、峰9(北草乌碱)、峰12(10-脱乙酰乌头碱)、峰11(次乌头碱)和峰10(新乌头碱)是双酯型生物碱;峰8(苯甲酰次乌头原碱)、峰6(苯甲酰新乌头原碱)、峰4(10-OH-苯甲酰新乌头原碱)是单酯型生物碱显著增大;峰3(阿克塔林)及峰1(醇胺型生物碱中乌头胺)增加不显著,峰2(尼奥林)显著降低,另2个未知成分增加不显著。结论:相比单用草乌,法半夏和草乌配伍后其毒性下降,生半夏和草乌配伍后其毒性升高;草乌和法半夏或者生半夏配伍后其毒性升高或者降低与酯型生物碱含量有联系。