KLH与SEA皮试法现场诊断日本血吸虫病效果的比较

应用KLH和SEA皮试法 (intraderminaltest,IDT)在血吸虫病疫区对加藤法粪检确诊的 32例阳性人群和31例阴性人群作平行检测。结果显示 :KLH 和SEA IDT二法与粪检阳性符合率分别为 90 %和 1 0 0 % ,差异无显著性(P >0 .0 5) ;KLH 和SEA IDT与粪检阴性符合率为 71 9%和 2 5 % ,差异有高度显著性 (P <0 .0 1 ) ;在 31例粪检阴性人群中 ,两IDT检出均为阳性者 9例 ,SEA IDT单一阳性者 1 5例 ,KLH IDT无 1例为单一阳性。在双皮试检出阳性者中经粪孵毛蚴法追踪 ,查出 2例阳性 ,而SEA IDT单阳者中无 1例阳性 ;2 7例治后 1年的人群中 ,KLH IDT检出 6例阳性 ,阴转率为 77 8% ,SEA IDT检出 2 1例阳性 ,阴转率为 2 2 2 %。提示 :KLH作为诊断抗原用于现场皮试不仅具有较高的敏感性而且有较好的考核疗效价值     

鄱阳湖区饭湖村日本血吸虫病血清学检测及分析

为确定汛期过后（１９９５年）饭湖村血吸虫病流行状况，本文应用间接血凝试验和单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验对该村居民进行了血清循环抗体和循环抗原检测，阳性检出率分别为７５．６％和５３．９％。两法均阳性人数占受检人数的４８．９％。用间接血凝试验检测不同年龄和性别人群，成人较儿童阳性率高，男性较女性阳性率高。指出了洪涝灾害致该村血吸虫感染率上升的危害性。此外，本文参照病原学检查，对以上两法本身进行了分析探讨。     

用日本血吸虫成虫抗原ELISA检测血吸虫病抗体的现场应用

用日本血吸虫成虫抗原(AAg)和虫卵抗原(EAg)ELISA检测血吸虫病疫区粪检阳性病人134例,其阳性率分别为99.25％和98.51％。134例中45例儿童和89例成人用AAg检测,其阳性率分别为100％和98.88％,而用EAg检测的阳性率分别为97.78％和98.88％。AAg和EAg检测26例正常人均为阴性。结果表明:AAg与EAg的检出率以及儿童与成人的检出率均相似。     

应用日本血吸虫病患者血清特异性抗体亚类考核疗效

用纯化的日本血吸虫成虫３１／３２ＫＤ抗原建立的ＢＡ－ＥＬＩＳＡ系统检测慢性血吸虫病患者治疗前、后血清中的ＩｇＧ１，ＩｇＧ３和ＩｇＧ４抗体水平；同时用常规ＥＬＩＳＡ检测ＩｇＧ和ＩｇＭ特异抗体。结果表明：各类抗体均未见假阳性，亦未与肝吸虫病和肺吸虫病患者血清出现交叉阳性。提示ＩｇＧ１和ＩｇＧ４抗体的敏感性和特异性高，具有诊断和疗效考核的价值。     

冠心病人血清中抗单纯疱疹病毒Ⅰ型IgG抗体检测

用 ELISA 和 RIA 技术检测冠心病人、老年非冠心病病人及正常献血员各30例的血清中抗 HSV-Ⅰ型 IgG 抗体水平。结果表明:正常献血员血清中抗HSV-Ⅰ型 IgG 抗体的水平高于老年病人组(P<0.01),但与冠心病人组无差异(P>0.05)。作者认为这一结果并不能完全否定病毒感染在动脉粥样硬化发病中起一定的作用,并进行了讨论。ELISA 和 RIA 均具有简便、灵敏、稳定可靠、微量等优点,其结果呈直线正相关(r=0.76)。     

重组日本血吸虫26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断

目的将日本血吸虫(中国大陆株)26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶(26 ku SjGST)基因克隆入pET28a(+)并诱导表达26 ku rSjGST蛋白,纯化并用于急性血吸虫病免疫诊断.方法构建重组质粒pET28a-SjGST,转化到E.coli BL21,经IPTG诱导表达并进行SDS变性蛋白质电泳,以小鼠抗GST单克隆抗体为一抗,进行Western-blot分析.用His·BandPurification Kit亲和层析纯化重组蛋白,以此重组蛋白作为抗原,用ELISA法检测急性血吸虫患者血清和非流行区正常人血清. 结果成功地构建了重组质粒pET28a-SjGST,SDS变性蛋白质电泳显示可见一与预期分子量大小相符的特异蛋白条带的表达.Western blot分析表明,该重组蛋白能被小鼠抗GST单克隆抗体识别.ELISA结果表明,rSj GST用于急性血吸虫患者血清中抗体检测的阳性率为92.3%.结论 rSj GST得到表达和纯化,该重组蛋白用于急性血吸虫患者血清中抗体的检测具有良好的免疫反应性,为进一步探讨其在血吸虫病诊断中的应用奠定了基础.     

人血清脂联素定量ELISA检测方法的建立及初步临床应用

目的:建立一种检测人血清中脂联素(APN)的酶联免疫吸附方法(ELISA),并初步探讨其在冠心病诊断中的应用。方法:构建表达质粒pET22b(+)/gAPN,在原核表达系统大肠杆菌中表达并纯化重组脂联素球状区(gAPN)蛋白。用抗APN单克隆抗体MAB10651包被微孔板,10%小牛血清作为封闭液,针对APN不同抗原表位的单克隆抗体MAB1065生物素化后作为标记抗体,联合生物素-亲和素信号放大系统,以gAPN重组蛋白为标准品绘制标准曲线,以准确性、特异性、重复性、回收率试验和方法对比试验评价ELISA方法。检测161例冠心病患者血清APN水平并结合冠状动脉造影结果和Gensini积分系统,探讨血清APN水平与冠心病的关系。结果:利用基因克隆技术成功构建了pET22b(+)/gAPN质粒,获得了相对分子质量约15 000的重组gAPN蛋白,产量较高(1.57 mg),纯度>90%,并以此为标准品初步建立了检测人血清APN的定量ELISA方法。该法具有良好的准确性和重复性,灵敏度达150 pg/ml,回收率为91.0%~108.0%,与深圳依诺金生物科技有限公司进口分装的ELISA试剂盒对照比较有良好的相关性(r=0.935,P<0.001)。临床检测表明冠心病组血清APN水平明显低于非冠心病组(P<0.01),且血清APN水平随冠状动脉狭窄程度的加重呈进行性下降趋势。结论:本实验成功建立了一种简便快速检测人血清APN的ELISA方法,对诊断冠心病有临床应用价值,为国内APN诊断试剂盒的研制和开发提供了科学实验依据。     

日本血吸虫成虫表皮膜蛋白的研究——Ⅲ.ELISA法在疗效考核中的价值

用吡喹酮(100mg/kg)治疗感染日本血吸虫42d后的家兔,1周后用相同剂量的吡喹酮重复治疗1次。用成虫表皮膜抗原-酶联免疫吸附试验(TA-ELISA)和虫卵可溶性抗原-酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA)分别检测治愈后的家兔血清中特异性IgG下降水平。结果发现家兔血清中抗TA的特异性IgG在治愈后5个月降至正常水平(OD 492nm<0.2),而抗SEA的特异性IgG仍维持在一个较高的水平(ODx=0.57),二者相比,差异有显著性意义,提示疗效考核时,TA-ELISA法优于SEA-ELISA法。     

日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3对日本血吸虫病的诊断价值

目的 探讨纯化的日本血吸虫(中国大陆株)重组信号蛋白14—3—3(rSjl4—3—3)诊断血吸虫病的价值。方法 利用纯化的rSjl4—3—3抗原与成虫抗原,间接EUSA法检测急、慢性日本血吸虫病患者血清。结果 急、慢性血吸虫患者血清rSjl4—3—3抗体检出率为100％和92．0％,与正常人血清未出现交叉反应;抗AWA抗体检出率为98．0％和94．0％,与正常人有7．3％的交叉反应。结论 rSjl4—3—3为抗原诊断日本血吸虫病显示出高度的敏感性和特异性,具有实用价值。     

Evaluation of therapeutic efficacy by detection of specific IgG and IgG4 against KLH in schistosomiasis japonica]

The specific IgG and IgG4 antibodies in the sera of patients with Schistosoma japonicum were determined by KLH-ELISA and SEA-ELISA. The results showed that KLH-ELISA was as sensitive and specific as SEA-ELISA. The negative conversion rates of IgG and IgG4 12 months after treatment detected by KLH-ELISA were significantly higher than those by SEA-ELISA. The negative conversion rate of IgG was 92.9%, and that of IgG4 was 97.6% 24 months after treatment. Therefore, it is regarded that detecting specific IgG and IgG4 by KLH has high value in both diagnosing schistosomiasis japonica and assessing its therapeutic efficacy. Particularly the specific IgG4 may be a short-duration antibody which can indicate successful chemotherapy of patients with chronic Schistosoma japonicum infection.     

妊娠时血清甲胎蛋白水平检测的临床评价

目的:探讨妊娠血清甲胎蛋白(AFP)含量在异常妊娠诊断中的临床应用价值.方法:应用磁性微粒分离的酶联免疫法(IEMA)检测AFP,同时和放射免疫法(RIA)相比较,并对4 748名孕妇血清AFP含量进行回顾性分析.结果:该方法检测AFP线性范围在0.20～250 IU/ml,批内CV为4.48%,日间CV为4.0%,高、中、低三个浓度平均重现率为98.5%,与RIA法相关性良好(r=0.980,P＜0.001).异常妊娠患者AFP含量明显高于同期正常妊娠孕妇血清AFP含量.结论:IEMA法适用于对孕妇AFP进行监测,在优生优育检查中可作为一项有价值的实验室筛查方法.     

SARS病房工作的医护人员血清中特异抗体测定分析

目的检测密切接触SARS患者的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平,对SARS病毒有无隐性感染作初步调查.方法分别用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence assay,ⅡFA)检测200例正常人,200例在SARS病房工作1个月的医护人员血清中SARS病毒IgM及IgG抗体的水平.结果正常人及医护人员血清中未检测到SARS病毒IgM及IgG抗体.结论不同于普通的流行性传染性疾病,SARS病毒可能不具有隐性感染性.     

双单抗夹心ELISA法检测脑囊尾蚴病血清特异性免疫复合物

目的 :建立双单抗夹心酶联免疫吸附试验法检测脑囊尾蚴病患者血清中特异性免疫复合物。方法 :用抗人IgG单抗包被 ,捕获血清中特异性IgG型免疫复合物 ,通过酶标抗囊尾蚴单抗结合物显色 ,测其OD值。结果 :用本方法测得患者特异性免疫复合物阳性率为 5 3.3 % ,明显高于正常对照组 (P <0 .0 0 5 ) ;循环抗原、抗体皆阴性患者 ,免疫复合物的阳性率为 5 0 % ,与各组相比差异有显著性 (P <0 .0 0 5 ) ;且免疫复合物的检出率明显高于循环抗原的检出率 (P <0 .0 0 5 )。结论 :本法对囊尾蚴病的诊断有重要的临床价值 ,尤其对抗原、抗体皆阴性患者意义更大     

斑点免疫金渗滤试验同步检测血清中抗登革病毒IgM和IgG抗体

建立用斑点免疫金渗滤试验同步检测血清中抗登革病毒IgM和IgG抗体的方法，与MacELISA比较抗登革病毒IgM抗体检测符合率为93.8％,与DIBA比较抗登革病毒IgG抗体检测符合率为94．7％。本法简便、快速，适于在各级实验室推广应用。     

血清中肺炎支原体抗体检测的临床应用评价

目的：评价血清中肺炎支原体抗体检测对诊断肺炎支原体感染的临床价值。方法：用ELISA和金免疫斑点法检测636例呼吸道感染者血清中抗肺炎支原体-IgM类抗体,同时培养检测呼吸道标本中肺炎支原体。结果：以培养出MP为诊断MP感染的金标准,ELISA和金免疫斑点法检测血清肺炎支原体-IgM诊断肺炎支原体感染的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为90．3％和87．1％、97．3％和97．8％、93．3％和94．2％、96．1和94．8％。结论：血清中抗肺炎支原体-IgM类抗体能较较好地诊断肺炎支原体感染,但存在一定的漏诊和误诊。     

斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体

目的：建立一种快速测定抗子宫内膜抗体（antiendometrial antibody,EMAb）的新方法。方法：采用经抗人血清抗体－Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原（endometrium antigen ,EMAg)，以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体，根据免疫渗滤原理，建立斑点金免疫渗滤法（Dot-immunogold filtration assay,DIGFA）检测人血清 EMAb。共检测586份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验（ELISA）作对比研究。结果：纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应，8min内即可直接观察结果。在586份血清的检测中，阳性率为36．8％，与ELISA的结果基本一致（x^2＝3．45，P＞0．05），符合率95．0％。特异性为94．7％，敏感性为95．6％。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论：DIGFA可测定EMAb，具有推广使用的价值。     

菌阴肺结核诊断方法研究

目的 :利用联合检测技术对菌阴肺结核作诊断价值的研究。方法 :痰标本采用聚合酶链反应 (PCR)TB DNA ,血清标本采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,皮肤试验采用PPD 0 1U皮试 ,同步检测。结果 :单项检测的敏感性、特异性依次为 :PCR 96 8%、96 2 % ;LAMIgG 6 9 2 %、98 1% ;PPDIgG 6 2 1%、98 1% ;SCIC 32 2 %、98 1% ;PPD 0 1U 5 3 8%、98 1%。单项检测对菌阴肺结核的检出率相应为 41 7% ,2 8 9% ,44 4% ,2 8 9% ,2 1 4%。联合检测对菌阴肺结核的检出率 2、3、4、5联分别为 6 6 9%、75 0 %、80 4%及 85 7% ,均高于单项检测。联合检测特异性随联合种类增高而轻微下降。若采用联合检测同时阳性方法 ,2、3、4、5联特异性均为 10 0 % ,初治菌阴组阳性检出率 2联方法可达 45 9% ,比任何单项方法检出率要高。结论 :由于原五种方法联合检测特异性有所轻度下降 ,因此联合检测同时阳性判定的方法更适用于初治菌阴肺结核的诊断 ,值得推广